简介：摘要目的了解上海市结核病密切接触者中结核潜伏感染(latent tuberculosis infection, LTBI)者的结核病发病风险及其时间特征。方法采用前瞻性观察性研究方法，以2009至2010年上海市7个区户籍人口中确诊肺结核患者的密切接触者为研究对象，采用结核感染T淋巴细胞斑点试验(T-cell spot test of tuberculosis infection，T-SPOT.TB)判断结核分枝杆菌感染情况以识别LTBI，同时采用问卷调查的方法收集研究对象的基本信息和结核病密切接触史。通过结核病登记报告系统识别LTBI者在检测后连续9年内的发病情况，计算其结核病发病率和发病密度。采用χ2检验对不同性别和年龄分组的发病率进行分层分析。结果2009年至2010年，共纳入376例确诊肺结核患者的982名密切接触者，其中287名密切接触者经T-SPOT.TB检测为LTBI。接受基线调查时感染者中位年龄为54岁，36.6%(105/287)的LTBI者为男性。截至2019年12月287名LTBI者中共发现5例新发结核病患者，2年累积发病率为0.35%，5年累积发病率为1.05%，9年累积发病率为1.74%(95%可信区间0.57%～4.02%)，中位发病时间为3.67年；研究期间共观察了2 666.75人年，结核病发病密度为1.875/1 000人年。不同年龄(χ2＝0.600，P>0.05)和性别(χ2<0.001，P>0.05)的LTBI者的结核病9年累积发病率差异均无统计意义。结论结核病患者密切接触者中的LTBI者的结核病发病集中在接触后前5年左右。

简介：摘要目的评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（GeneXpert）联合结核感染T淋巴细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）诊断结核性脑膜炎（TBM）的价值。方法回顾性分析2017年3月至2019年12月沈阳市胸科医院70例TBM患者（TBM组）和30例非TBM患者（非TBM组）的临床资料。患者均行GeneXpert和T-SPOT.TB检测。以脑脊液MGIT960液体培养结果作为金标准，评估GeneXpert和T-SPOT.TB诊断TBM的情况。结果TBM组GeneXpert、T-SPOT.TB、两种方法并联及两种方法串联的阳性率均明显高于非TBM组[27.14%（19/70）比0、72.86% （51/70）比46.67%（14/30）、78.57%（55/70）比46.67%（14/30）和21.43%（15/70）比0]，差异有统计学意义（P<0.01或<0.05）。两种方法并联诊断TBM的灵敏度最高为78.57%，准确度达71.00%；而两种方法串联诊断TBM的特异度为100.00%，误诊率为0。结论GeneXpert和T-SPOT.TB两种方法并联诊断TBM的灵敏度最高，两种方法串联及GeneXpert单独检测的特异度均高达100.00%，两种方法串联可降低TBM的误诊率，并联可降低漏诊率。

简介：摘要目的评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（GeneXpert）联合结核感染T淋巴细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）诊断结核性脑膜炎（TBM）的价值。方法回顾性分析2017年3月至2019年12月沈阳市胸科医院70例TBM患者（TBM组）和30例非TBM患者（非TBM组）的临床资料。患者均行GeneXpert和T-SPOT.TB检测。以脑脊液MGIT960液体培养结果作为金标准，评估GeneXpert和T-SPOT.TB诊断TBM的情况。结果TBM组GeneXpert、T-SPOT.TB、两种方法并联及两种方法串联的阳性率均明显高于非TBM组[27.14%（19/70）比0、72.86% （51/70）比46.67%（14/30）、78.57%（55/70）比46.67%（14/30）和21.43%（15/70）比0]，差异有统计学意义（P<0.01或<0.05）。两种方法并联诊断TBM的灵敏度最高为78.57%，准确度达71.00%；而两种方法串联诊断TBM的特异度为100.00%，误诊率为0。结论GeneXpert和T-SPOT.TB两种方法并联诊断TBM的灵敏度最高，两种方法串联及GeneXpert单独检测的特异度均高达100.00%，两种方法串联可降低TBM的误诊率，并联可降低漏诊率。

简介：摘要目的观察活动性与非活动性肺结核患者血清新蝶呤(neopterin，NP)、抗脂阿拉伯甘露糖(lipoarabinomannan，LAM)抗体血清标志物和结核感染T细胞斑点试验(T-cell spot test of tuberculosis，T-SPOT.TB)方法在肺结核活动性鉴别中的价值。方法选取自2019年1月至12徐州市传染病医院收治的104例肺结核患者为研究对象，参考《肺结核活动性判断规范及临床应用专家共识》标准分为活动性组(48例)和非活动性组(56例)。另选取同期于我院进行体检的健康人作为对照组(50例)。采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)进行血清NP、抗LAM抗体检测，采用酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT)检测T-SPOT.TB。分析各组血清NP、抗LAM抗体、T-SPOT.TB的表达差异，并采用ROC曲线法分析血清NP、抗LAM抗体、T-SPOT.TB在肺结核活动性鉴别中的价值。结果活动组、非活动性组、对照组血清NP、抗LAM抗体、血清T-SPOT.TB表达水平均依次下降，组间差异有统计学意义[NP：(26.54±2.67)nmol/L比(20.69±2.19)nmol/L比(6.84±1.33)nmol/L，抗LAM抗体：(46.26±6.71) nmol/L比(30.17±5.38)nmol/L比(14.19±4.03)nmol/L，T-SPOT.TB：(109.73±10.80) nmol/L比(82.34±8.32)nmol/L比(57.44±6.49)nmol/L，F值分别为68.172，134.778和223.619，P值均<0.05)]。血清NP、抗LAM抗体、T-SPOT.TB联合鉴别肺结核活动性的敏感性，特异性和准确率分别为86.83%、84.79%和89.07%，均高于单独血清NP、抗LAM抗体、T-SPOT.TB鉴别检测肺结核活动性的敏感性(79.43%, 77.64%, 73.84%)、特异性(80.32%, 78.43%, 74.56%)和准确率(75.52%, 73.24%, 70.73%)。结论肺结核患者存在明显血清NP、抗LAM抗体、T-SPOT.TB水平异常，相比于血清NP、抗LAM抗体和T-SPOT.TB的单独指标检测，三项指标联合检测在肺结核活动性鉴别中的效能更佳。

简介：摘要目的通过体外试验探究慢性淋巴细胞白血病细胞损害CD8+T细胞的线粒体代谢功能影响嵌合抗原受体的T淋巴细胞(chimeric antigen receptors modified T cells，CAR-T)的效能。方法将培养得到的CAR-T细胞和CD8+T细胞作为正常组，感染组为加入慢性淋巴细胞白血病细胞进行侵染的CAR-T细胞和CD8+T细胞。采用FACScan流式细胞仪检测CAR-T细胞的凋亡情况；Western blot检测细胞凋亡相关的蛋白Bcl-2、cleaved-caspase-3和Bax的相对表达量；酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor-alpha，TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-6和IL-10的变化；使用Pierce BCA蛋白检测试剂盒测定蛋白质浓度；化学发光发检测细胞内三磷酸腺苷(adenosine triphosphate，ATP)水平，分光光度计检测线粒体丙二醛(malondialdehyde，MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)的含量；荧光探针法检测胞内钙离子浓度的变化，实时荧光定量PCR检测线粒体DNA表达水平的变化。结果正常组CAR-T细胞凋亡率显著低于感染组CAR-T细胞凋亡率，差异有统计学意义[(4.58±0.16)%比(7.06±0.74)%，χ2＝5.674，P<0.05]。感染组的Bax和cleaved-PARP表达量明显高于正常组，Bcl-2表达量明显低于正常组，差异具有统计学意义[(3.51±0.01)%比(1.07±0.01)%，(2.34±0.05)%比(1.36±0.04)%，(0.66±0.02)%比(1.17±0.02)%，χ2值分别为298.838，26.509和31.231，P值均<0.05]。感染组的IL-6、TNF-α表达量较正常组明显升高，IL-10表达量较正常组明显降低，组间差异具有统计学意义[(87.69±21.07)ng/L比(43.25±5.36)ng/L，(65.12±15.75)ng/L比(33.14±5.23)ng/L，(16.02±1.69)ng/L比(24.33±2.33)ng/L，t值分别为3.54，3.338和4.988，P值均<0.05]。感染组的ATP和总钙离子浓度低于正常组，差异具有统计学意义[(0.15±0.03)μmol/g比(0.32±0.06)μmol/g，(12.46±2.74)μmol/L比(25.97±3.49)μmol/L, t值分别为4.389和5.274，P值均<0.05]。感染组的MDA含量高于正常组，GSH含量低于正常组，差异具有统计学意义[(1.84±0.23)μmol/L比(1.34±0.21)μmol/L，1.07±0.17)pg/mg比(5.23±0.36)pg/mg，t值分别为2.781和18.098，P值均<0.05]。感染组CD8+T细胞线粒体基因蛋白的表达量明显低于正常组，差异具有统计学意义[(0.62±0.03)%比(1.01±0.06)%, χ2＝10.070，P<0.05]。结论离体状态下慢性淋巴细胞白血病细胞通过损害CD8+T细胞的线粒体代谢功能促进CAR-T细胞的凋亡。

简介：摘要：T细胞对病毒具有重要的免疫作用，可以与CAR-T法相结合，增强对病毒的杀灭效果，实现治愈病症的目的。基于此，本文将采用实验的方法对T细胞对慢病毒的免疫效果进行分析，使其感染能力能够得到对比，使T细胞的研究更加地透彻，形成良好的病毒免疫效果。

简介：摘要：CPR核电机组大修期间，根据机组安全相关系统和设备定期试验监督大纲的要求，需要执行T RIS 001以及T EIE 001试验，以分别验证整个安全注入顺序和安全壳隔离阶段A顺序运行良好、整个安全壳喷淋顺序和安全壳隔离阶段B顺序的运行符合要求。本文对T RIS 001以及T EIE 001试验进行了简单介绍，探讨了试验优化的需求和优化方案。

简介：摘要过继性T细胞治疗(adoptive cell transfer therapy，ACT)是以肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte，TIL)、基因工程编辑的T细胞受体T细胞(T cell receptor engineered T cells，TCR-T)和嵌合抗原受体T细胞(chimeric antibody receptor engineered T cell，CAR-T)为主的特异性细胞免疫治疗手段。目前TIL和TCR-T疗法，尤其是TIL和TCR-T联合其他方案如白细胞介素(interleukin，IL )-2、程序性死亡受体1(programmed death-1，PD-1)抗体、放疗等在部分晚期实体肿瘤患者的临床试验中取得显著疗效，但相关研究尚处于临床前研究阶段，现就TIL和TCR-T疗法治疗实体肿瘤的临床疗效及常见不良反应的研究进展做一综述。

简介：【摘要】T细胞治疗成为癌症的重要疗法之一，过继T细胞转移治疗、嵌合抗原受体T细胞（CART）和T细胞受体嵌合型T细胞（TCRT）取得了一定的效果。过继T细胞转移治疗的适应症较广，有效率偏低，CART中效果较好的是CART-CD19，主要应用于B细胞白血病和淋巴瘤的治疗，TCRT可应用于实体瘤治疗，但一旦肿瘤抗原突变就会造成“脱靶”。本文概括了CART和TCRT的原理和作用特点，并对它们存在的不足之处进行了分析。

简介：摘要目的探讨免疫抑制受体T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制性基序结构域(T cell immunoglobulin and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif domain，TIGIT)在硅沉着病合并结核分枝杆菌感染人群外周血单个核细胞上的表达及临床意义。方法2018年8月，纳入78例硅沉着病患者，均为浙江省三门县采石矿工人，分为硅沉着病合并活动性肺结核(active pulmonary tuberculosis，APTB)组(以下简称APTB组)、硅沉着病合并结核潜伏感染(latent tuberculosis infection，LTBI)组(以下简称LTBI组)和单纯硅沉着病无结核感染(non-tuberculosis infection，non-TB)组(以下简称non-TB组)。应用流式细胞术检测患者外周血单个核细胞中TIGIT、程序性死亡蛋白-1(programmed death-1，PD-1)和转录因子T-bet的表达水平。统计学分析采用曼-惠特尼U检验、皮尔逊相关性分析。结果78例患者中，APTB组8例，LTBI组24例，non-TB组46例。APTB组患者外周血CD8+T细胞上PD-1和TIGIT[29.45%(16.78%)和65.40%(12.12%)]的表达水平分别高于LTBI组[17.40%(11.17%)和48.30%(28.75%)，U＝23.500、43.500，P＝0.000 8、0.020 5]和non-TB组[15.95%(12.46%)和45.30%(19.75%)，U＝64.000、69.000，P＝0.002 3、0.003 8]，差异均有统计学意义；硅沉着病患者外周血CD8+T细胞上PD-1与TIGIT的表达呈正相关(r＝0.434 3，P<0.01)。APTB组患者外周血CD8+T细胞上PD-1+TIGIT+细胞亚群的表达[19.90%(22.67%)]高于non-TB组[11.55%(11.29%)]和LTBI组[11.55%(10.53%)]，PD-1-TIGIT-细胞亚群[30.60%(12.90%)]的表达低于non-TB组[48.90%(18.98%)]和LTBI组[47.20%(24.95%)]，差异均有统计学意义(U＝76.500、41.000、58.000、41.000，P＝0.007 1、0.015 4、0.001 3、0.015 4)。APTB组患者外周血CD8+T细胞上T-bet[29.45%(16.78%)]的表达高于non-TB组[15.95%(12.46%)]和LTBI组[17.40%(11.17%)]，差异均有统计学意义(U＝46.500、46.000，P＝0.000 3、0.028 3)。T-bet的表达与TIGIT的表达呈正相关(r＝0.456 7，P<0.01)。APTB组患者外周血PD-1+TIGIT+CD8+T细胞亚群上T-bet[65.40%(12.12%)]的表达水平分别高于LTBI组[48.30%(28.75%)]和non-TB组[45.30%(19.75%)]，差异均有统计学意义(U＝23.500、65.000，P＝0.000 8、0.002 6)。结论硅沉着病合并APTB患者外周血CD8+T细胞上高表达免疫抑制受体PD-1和TIGIT，提示患者外周血CD8+T细胞存在免疫耗竭现象，但T-bet的高表达又提示此耗竭细胞亚群具有一定的可逆转潜力。

简介：摘要细胞凋亡对于机体抑制或清除胞内结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)尤为重要，Mtb感染巨噬细胞后，往往会诱导机体启动一系列机制调控巨噬细胞凋亡。在Mtb感染的巨噬细胞内存在差异表达的microRNAs (miRNAs)，miRNA可直接结合凋亡基因的3′ UTR (3′ -untranslated region)非翻译区结合位点，通过调控凋亡基因表达参与线粒体或死亡受体途径调控巨噬细胞凋亡。本文综述了现阶段与Mtb感染巨噬细胞凋亡的相关miRNAs及其调控巨噬细胞凋亡的主要机制。

简介：摘要γδT细胞是表达γ链和δ链的一群特殊T细胞，是参与天然免疫的重要成分，兼有天然免疫和获得性免疫特性。其在人外周血中数量较少，但功能强大，在机体的免疫调节、免疫保护、免疫监视、抗感染、细胞毒等生理功能方面具有重要作用。本文对γδΤ细胞的起源、发育与分布、生物学与免疫学功能及其与HIV-1感染的相互作用机制进行综述。

简介：摘要：目的：探讨外周血记忆T细胞和调节性T细胞检测对胃癌的临床价值，同时分析两种T细胞对胃癌临床病理的关系。方法：本次研究将通过对照实验的形式实施，将纳入32例胃癌患者参与实验，将其命名为患者组，于同期再次选取32例健康者进行对照实验，命名为对照组。实验开始后抽取2组研究对象外周血样本，通过荧光标记对两组研究对象的抗CD4、抗CD8、抗CD45RO、抗CD62L进行染色，随后分别检测记忆T细胞和调节性T细胞，并探析记忆T细胞和调节T细胞与胃癌病理之间的关系。结果：对两组患者的外周血记忆性T细胞分布情况进行了分析，从数据显示可见，患者组与对照组的CD8+T、CD8+TCM、CD8+TCM/CD8+T、CD8+TEM/CD8+T存在明显差异（P＜0.05），其余指标差异不大（P＞0.05）。其次，针对患者组的CD4+T细胞、CD4+TCM、CD4+TEM与临床病理特征关系进行了分析，在CD4+T细胞方面，患者组性别、TNM分期差异明显（P＜0.05），CD4+TEM方面性别方面男性高于女性，（P＜0.05），其余指标差异均不大（P＞0.05）。结论：胃癌患者外周血记忆性T细胞、调节性T细胞与健康者之间存在较大差异，有利于提升为胃癌病理情况的检测，有助于提高对胃癌的预后治疗。

简介：摘要目的观察巨噬细胞耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis, MDR-Mtb)感染模型的吞噬和杀菌功能特点，探讨其在吞噬杀菌过程中免疫应答和代谢功能的变化，为完善巨噬细胞在耐多药结核病(multidrug-resistant tuberculosis, MDR-TB)发生和发展中的作用机制提供依据。方法分别建立巨噬细胞MDR-Mtb和H37Rv株感染模型，采用菌落形成单位(colony-forming unit，CFU)计数、液相芯片技术和Cholesterol Assay试剂盒分别观察MDR-Mtb对巨噬细胞吞噬和杀菌功能、分泌细胞因子[Th1因子(IL-12/23 p40、IL-27和TNF-α)、Th2因子(IL-6和IL-10)]和胆固醇代谢的影响。采用SPSS25.0软件进行统计学分析，应用均值±标准差(Mean±SD)表示，比较采用t检验或F检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)MDR-Mtb感染巨噬细胞后，胞内CFU计数逐渐增高，至感染后24 h达峰值；胞外CFU计数逐渐降低，至感染后24 h达低值。感染后48 h，胞内CFU计数较感染后24 h降低，胞外CFU计数则较感染后24 h增高(P<0.05)，均与感染后4 h相接近(P>0.05)。感染后8~48 h，MDR-TB组胞内CFU计数均低于H37Rv组，而胞外CFU计数则高于H37Rv组(P<0.05)。(2)MDR-TB组巨噬细胞上清液IL-12/23 p40、IL-27、TNF-α、IL-6和IL-10表达量均高于空白对照组(P<0.05)。与感染后4 h相比较，仅感染后24 h、48 h的TNF-α和IL-6表达量增高(P<0.05)。与H37Rv组相比较，MDR-TB组感染后48 h的IL-12/23 p40和TNF-α及感染后24 h的IL-6表达量降低，而其感染后48 h的IL-27表达量则增高(P<0.05)。(3)MDR-TB组感染后24 h、48 h胆固醇的表达量较感染后4 h降低，且低于空白对照组(P<0.05)，但与H37Rv组各时间点胆固醇表达量相接近(P>0.05)。(4)当感染后24 h MDR-TB组胞内CFU计数达峰值时，仅TNF-α表达量达峰值；当感染后48 h MDR-TB组胞内CFU计数降低时仅IL-6表达量达峰值。当感染后MDR-TB组胞内CFU计数呈现先增高后降低的趋势时，胆固醇表达量呈现降低趋势。结论MDR-Mtb感染巨噬细胞后可诱导其吞噬和杀菌功能，刺激相关Th1和Th2因子高表达，利用和消耗胆固醇。但此作用弱于H37Rv标准株。

简介：摘要目的了解γδT细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在HIV感染者/AIDS患者外周血中的表达水平，探讨γδT细胞、CD4+CD25+ Treg在HIV感染/AIDS病情进展中的相关性以及可能的作用机制。方法采用免疫荧光单克隆抗体标记技术、流式细胞术检测AIDS患者12例、HIV中期感染者19例、HIV早期感染者15例、健康体检者30例外周血中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、γδT细胞、CD4+CD25+ Treg的表达水平；采用Pearson分析γδT细胞与CD4+CD25+Treg相关性。结果γδT细胞在AIDS组、HIV感染中期组、HIV感染早期组、健康对照组外周血中的表达(Mean±SD, %)分别为：4.46±1.37、3.59±0.67、3.12±0.33、1.73±0.36，组间比较差异有统计学意义(F＝6.091，P＝0.018)。CD4+CD25+Treg在AIDS组、HIV感染中期组、HIV感染早期组、健康对照组外周血中的表达(Mean±SD, %)分别为：10.28±1.94、7.37±1.03、6.68±0.58、4.03±0.82，差异有统计学意义(F＝13.568，P＝0.020)。γδT、CD4+CD25+Treg在4组中的比较，有明显统计学意义，AIDS组>HIV感染中期组>HIV感染早期组>对照组。相关性方面，γδT、CD4+CD25+Treg与CD4+T细胞呈负相关(r分别为-0.982、-0.712, P值分别为0.001、0.002)，与CD8+T细胞计数呈正相关(r分别为0.873、0.809, P值分别为0.000、0.000)；γδT细胞与CD4+CD25+Treg呈正相关性(r＝0.911, P＝0.000)。结论HIV感染诱导了γδT细胞、CD4+CD25+Treg的增殖，两者可能参与了机体感染HIV后引起的免疫应答。γδT细胞与CD4+CD25+Treg成正相关，两者可能具有协同作用。

简介：摘要炎症免疫反应贯穿缺血性卒中病程的始终。不同亚群CD4+ T细胞在缺血性卒中病程中起着复杂而重要的作用。其中，辅助性T细胞17(T helper cell 17, Th17)与调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)的促炎与抑炎作用的平衡与卒中转归密切相关。文章就Th17/Treg平衡在缺血性卒中中的作用进行了综述，旨在加深对缺血性卒中后免疫炎症机制的认识，同时探究缺血性卒中病程中可能的治疗靶点。

简介：摘要目的研究结核分枝杆菌Rv0446c的抗原表位及其免疫原性，为结核病的免疫诊断技术及疫苗研发提供候选抗原及表位。方法利用生物信息学软件TE-predict和IEDB的T细胞表位预测软件对结核分枝杆菌抗原Rv0446c进行T细胞表位预测，用ELISPOT实验检测表位在2019年1月到2020年12月期间来自佛山市第四人民医院和福州肺科医院的结核病患者（50例）、肺部疾病患者（39例）及健康志愿者（55例）中的免疫反应性。将60只6周龄BALB/c小鼠随机分成10组，每组6只，分别采用PBS、血蓝蛋白（KLH）、高剂量结核分枝杆菌抗原Ag85B（50 μg/只）、低剂量Ag85B（20 μg/只）、高计量P120、低剂量P120、高计量P121、低剂量P121、高剂量P123、低剂量P123（P120、P121、P123高剂量为100 μg/只、低剂量为50 μg/只）多肽对其皮下免疫，每只小鼠免疫3次，每次间隔2周，末次免疫后4周，应用ELISA方法检测各组小鼠脾细胞产生的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10细胞因子水平。结果预测的7条表位多肽中，ELISPOT试验筛选出4条阳性T细胞表位多肽P120、P121、P122、P123，在结核病患者中检测灵敏度和特异度分别为30.0%、18.0%、6.0%、22.0%和96.8%、98.9%、100%、96.8%。与对照PBS组和KLH组比较，P120多肽能刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4、IL-10，P121多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ和IL-4（均P<0.05），P123多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ（均P<0.05）。P120、P121、P123多肽刺激小鼠产生的IL-2的水平高于PBS组低于Ag85B-L组和Ag85B-H组（均P<0.05），但与KLH组差异无统计学意义（均P>0.05）。结论Rv0446c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性，能刺激机体产生强烈的细胞免疫应答，可用于结核病的临床诊断技术研究和新型结核亚单位疫苗的构建。

简介：摘要目的利用Lewis肺癌动物模型(Lewis模型)探讨T细胞和肿瘤浸润树突状细胞的分布和浸润情况在肿瘤的生长和转移中的作用。方法实验性研究。采用42只C57BL/6小鼠建立Lewis模型，并随机分为T细胞组、肿瘤浸润树突状细胞组和对照组，每组14只。各组分别回输CD4+CD8+Treg细胞、肿瘤浸润树突状细胞和等量PBS，于1、5、9、13、17、21 d，用游标卡尺测量瘤体最长直径和最短直径，计算瘤体积，并记录小鼠的生存状态；流式细胞技术检测肿瘤微环境中CD4+、CD8+T细胞和肿瘤浸润树突状细胞的水平；HE组织染色技术判明肺部转移性肿瘤结节。结果3组小鼠肿瘤体积均有增长，且T细胞组>TIDC细胞组>对照组，差异有统计学意义(P值均<0.05)；流式结果显示，Lewis模型的效应和记忆效应CD4+ CD8+T细胞和肿瘤浸润树突状细胞在总淋巴细胞中的比例，T细胞组高于对照组和肿瘤浸润树突状细胞组，肿瘤浸润树突状细胞组高于对照组，差异均有统计学意义(P值均<0.05)；回输CD4+CD8+Treg细胞及TIDC细胞后，小鼠肺部转移性肿瘤结节数量显著增多，T细胞组>肿瘤浸润树突状细胞组>对照组。分别为T细胞组(4.47±0.68)个，TIDC组(2.43±0.46)个，对照组(1.72±0.32)个，差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论Lewis肺癌生长速度可能与CD4+CD8+Treg细胞和肿瘤浸润树突状细胞的分布情况有关，其分布程度越高，肿瘤生长越快。

简介：摘要目的探究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者T淋巴细胞及自然杀伤(NK)细胞T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)表达及其在评估肝纤维化程度中的潜在价值。方法选取2016年6月1日至2018年6月1日于中山大学附属第三医院感染性疾病科门诊就诊的320例慢性HBV感染者，将其分成免疫耐受期组(31例)，免疫活动期组(184例)，非活动期组(48例)和灰色区组(57例)；同时纳入17例健康志愿者作为健康对照组。分离每例研究对象外周血单个核细胞并采用流式细胞仪分别检测CD3+ T淋巴细胞及其亚群(CD4+和CD8+ T淋巴细胞)以及NK细胞及其亚群(NK-bright和NK-dim细胞)Tim-3表达频率和平均荧光强度(MFI)。收集患者临床资料并计算天冬氨酸转氨酶与血小板计数比值指数(APRI)。采用Kruskal-Wallis H检验进行多组间非正态分布计量资料比较，组间两两比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料采用例(百分数)表示，采用卡方检验进行比较。相关性分析采用Spearman秩相关。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析CD3+ T淋巴细胞与NK细胞Tim-3表达比值在评估慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝纤维化进展中的预测价值。P<0.05为差异具有统计学意义。结果免疫耐受期、免疫活动期、非活动期、灰色区和健康对照组年龄、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、白蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)和肝脏硬度差异均有统计学差异(H＝12.40、169.70、210.70、25.17、24.21和86.50，P值均<0.05)。免疫耐受期、免疫活动期、非活动期和灰色区组APRI评分、乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性患者比例、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBV-DNA差异均有统计学差异(H＝89.45、118.00和14.81，χ2＝148.20，P值均<0.05)。免疫耐受期、免疫活动期、非活动期、灰色区及健康对照组CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞以及NK细胞、NK-bright和NK-dim细胞Tim-3表达频率及MFI差异均有统计学意义(H＝13.57、51.55、8.58、44.25、20.32、47.96和12.45、33.69、4.96、32.47、10.63、30.46，P值均<0.05)。慢性HBV感染者CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI与ALT和AST水平均呈正相关(r＝0.2134、0.4733、0.2090、0.4333、0.1771、0.4417、0.1780、0.3956、0.2618、0.4671、0.2614和0.4326，P值均<0.05)；CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI以及CD3+和CD4+ T淋巴细胞Tim-3 MFI与TBil水平均呈正相关(r＝0.1342、0.2635、0.2739和0.2526，P值均<0.05)。慢性HBV感染者NK及NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI与ALT、AST和TBil水平均呈负相关(r＝-0.2671、-0.4093、-0.2451、-0.4099、-0.1807、-0.1823、-0.2733、-0.4224、-0.2576、-0.4206、-0.1798和-0.1946，P均<0.05); NK-bright细胞Tim-3 MFI与ALT、AST和TBil水平均呈负相关(r＝-0.3775、-0.3562和-0.1633，P值均<0.05)；CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI与肝脏硬度值均呈正相关(r＝0.1789、0.3896、0.1518、0.3521、0.2117和0.3579，P值均<0.05)；CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI以及CD3+ T淋巴细胞MFI与APRI评分均呈正相关(r＝0.1487、0.2604、0.2296、0.4858和0.2853，P值均<0.05)；NK和NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI以及NK-bright Tim-3 MFI与肝脏硬度值均呈负相关(r＝-0.2686、-0.3975、-0.2852、-0.3991和-0.3531，P值均<0.05)。NK和NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI以及NK-bright细胞Tim-3 MFI与APRI评分均呈负相关(r＝-0.3589、-0.4158、-0.3591、-0.4108和-0.3966，P值均<0.05)。CD3+ T淋巴细胞与NK细胞Tim-3表达比值预测慢性HBV感染者肝脏纤维化ROC曲线下面积为0.783(95%CI：0.723～0.843，P<0.05)。当截断值＝0.612，敏感度为61.9%，特异度为99.3%。结论慢性HBV感染者T淋巴细胞和NK细胞Tim-3表达与肝脏炎症及纤维化的相关性表现为相反的特征性，Tim-3分子在T淋巴细胞和NK细胞上表达比值对评估慢性HBV感染肝纤维化具有一定价值。

简介：摘要目的探究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者T淋巴细胞及自然杀伤(NK)细胞T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)表达及其在评估肝纤维化程度中的潜在价值。方法选取2016年6月1日至2018年6月1日于中山大学附属第三医院感染性疾病科门诊就诊的320例慢性HBV感染者，将其分成免疫耐受期组(31例)，免疫活动期组(184例)，非活动期组(48例)和灰色区组(57例)；同时纳入17例健康志愿者作为健康对照组。分离每例研究对象外周血单个核细胞并采用流式细胞仪分别检测CD3+ T淋巴细胞及其亚群(CD4+和CD8+ T淋巴细胞)以及NK细胞及其亚群(NK-bright和NK-dim细胞)Tim-3表达频率和平均荧光强度(MFI)。收集患者临床资料并计算天冬氨酸转氨酶与血小板计数比值指数(APRI)。采用Kruskal-Wallis H检验进行多组间非正态分布计量资料比较，组间两两比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料采用例(百分数)表示，采用卡方检验进行比较。相关性分析采用Spearman秩相关。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析CD3+ T淋巴细胞与NK细胞Tim-3表达比值在评估慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝纤维化进展中的预测价值。P<0.05为差异具有统计学意义。结果免疫耐受期、免疫活动期、非活动期、灰色区和健康对照组年龄、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、白蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)和肝脏硬度差异均有统计学差异(H＝12.40、169.70、210.70、25.17、24.21和86.50，P值均<0.05)。免疫耐受期、免疫活动期、非活动期和灰色区组APRI评分、乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性患者比例、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBV-DNA差异均有统计学差异(H＝89.45、118.00和14.81，χ2＝148.20，P值均<0.05)。免疫耐受期、免疫活动期、非活动期、灰色区及健康对照组CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞以及NK细胞、NK-bright和NK-dim细胞Tim-3表达频率及MFI差异均有统计学意义(H＝13.57、51.55、8.58、44.25、20.32、47.96和12.45、33.69、4.96、32.47、10.63、30.46，P值均<0.05)。慢性HBV感染者CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI与ALT和AST水平均呈正相关(r＝0.2134、0.4733、0.2090、0.4333、0.1771、0.4417、0.1780、0.3956、0.2618、0.4671、0.2614和0.4326，P值均<0.05)；CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI以及CD3+和CD4+ T淋巴细胞Tim-3 MFI与TBil水平均呈正相关(r＝0.1342、0.2635、0.2739和0.2526，P值均<0.05)。慢性HBV感染者NK及NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI与ALT、AST和TBil水平均呈负相关(r＝-0.2671、-0.4093、-0.2451、-0.4099、-0.1807、-0.1823、-0.2733、-0.4224、-0.2576、-0.4206、-0.1798和-0.1946，P均<0.05); NK-bright细胞Tim-3 MFI与ALT、AST和TBil水平均呈负相关(r＝-0.3775、-0.3562和-0.1633，P值均<0.05)；CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI与肝脏硬度值均呈正相关(r＝0.1789、0.3896、0.1518、0.3521、0.2117和0.3579，P值均<0.05)；CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI以及CD3+ T淋巴细胞MFI与APRI评分均呈正相关(r＝0.1487、0.2604、0.2296、0.4858和0.2853，P值均<0.05)；NK和NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI以及NK-bright Tim-3 MFI与肝脏硬度值均呈负相关(r＝-0.2686、-0.3975、-0.2852、-0.3991和-0.3531，P值均<0.05)。NK和NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI以及NK-bright细胞Tim-3 MFI与APRI评分均呈负相关(r＝-0.3589、-0.4158、-0.3591、-0.4108和-0.3966，P值均<0.05)。CD3+ T淋巴细胞与NK细胞Tim-3表达比值预测慢性HBV感染者肝脏纤维化ROC曲线下面积为0.783(95%CI：0.723～0.843，P<0.05)。当截断值＝0.612，敏感度为61.9%，特异度为99.3%。结论慢性HBV感染者T淋巴细胞和NK细胞Tim-3表达与肝脏炎症及纤维化的相关性表现为相反的特征性，Tim-3分子在T淋巴细胞和NK细胞上表达比值对评估慢性HBV感染肝纤维化具有一定价值。