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  • 简介:摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) AURKAPS1对肝癌细胞增殖、运动迁移能力的影响。方法采用慢病毒包被质粒感染肝癌细胞构建AURKAPS1过表达细胞系,实时荧光定量PCR检测慢病毒感染后的AURKAPS1的表达量。将肝癌细胞系随机分为对照组,AURKAPS1组(对照组无任何干预,AURKAPS1组仅接受AURKAPS1干预);采用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖实验、克隆形成和流式细胞分选方法体外检测过表达AURKAPS1对肝癌细胞增殖能力的影响;采用皮下注射裸鼠荷瘤实验体内检测过表达AURKAPS1对肝癌细胞增殖能力的影响。划痕实验体外检测过表达AURKAPS1对肝癌细胞运动能力的影响。所得数据组间采用独立样本t检验及单因素方差分析,多组间采用重复测量方差分析、LSD检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果过表达AURKAPS1后,肝癌细胞HepG2与BEL-7402细胞增殖都有增强(FHepG2=205.593,P<0.001,η2=0.934,FBEL-7402=161.641,P<0.001,η2=0.976);过表达AURKAPS1后,肝癌细胞HepG2和BEL-7402的克隆数均高于对照组(tBEL7402=-9.806,P<0.01;tHepG2=-14.425,P<0.01),AURKAPS1组BEL-7402与HepG2的G2和S期细胞比例相较于对照组明显高于G1期(FBEL-7402=93.091,P<0.01,FHepG2=360.071,P<0.001);裸鼠荷瘤结果显示肝癌细胞AURKAPS1组重量高于对照组(t=-2.427,P<0.05);AURKAPS1组HepG2和BEL-7402细胞平均划痕距离低于对照组(FHepG2=125.472,P<0.001;FBEL-7402=4 465.901,P<0.001)。结论过表达AURKAPS1促进肝癌细胞生长增殖、促进肝癌细胞周期从G1期向G2和S期转变;增强肝癌细胞运动、迁移的能力。

  • 标签: 肝癌 假基因 AURKAPS1 增殖 迁移
  • 简介:摘要目的探讨AURKAPS1在肝癌细胞中的表达、功能和分子机制,为肝癌的防治提供新思路。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对肝癌细胞系和正常肝脏上皮细胞进行检测;将肝癌细胞系随机分为空白组,AURKAPS1组、RAC1组和AURKAPS1+RAC1组,其中空白组表示肝癌细胞不进行任何干预,AURKAPS1组中的肝癌细胞仅接受AURKAPS1干预,RAC1组为转染RAC1的肝癌细胞,AURKAPS1+RAC1组表示同时转染AURKAPS1和RAC1,采用实时荧光定量PCR技术检测4组细胞中RAC1的表达;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术和Transwell转移法检测肿瘤细胞的增殖、凋亡和迁移能力;蛋白质免疫印迹法测定各组细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)和RAC1蛋白表达;间接免疫荧光检测细胞中ERK的表达。组间独立样本采用t检验,多组间进行F检验、LSD检验。结果肝癌组织中RAC1 mRNA的表达量(0.98±0.08)显著高于正常人肝上皮细胞组织(0.72±0.03),差异有统计学意义(t=30.431,P<0.05);AURKAPS1组(1.03±0.10)、RAC1组(1.05±0.09)及AURKAPS1+RAC1组(1.16±0.07)的RAC1 mRNA的表达量均高于空白组(1.16±0.07),AURKAPS1+RAC1组的RAC1 mRNA表达量也显著高于分别转染AURKAPS1、RAC1的肝癌细胞组,差异有统计学意义(F=5.991,P<0.05);CCK-8法检测肝癌细胞的增殖,随着时间的增加,除空白组,其余3组的吸光度(A)450值均增加,96 h后AURKAPS1+RAC1组的A450值显著高于RAC1组及AURKAPS1组(F0 h=2.941,F24 h=26.454,F48 h=104.60,F72 h=319.555,F96 h=564.65)P<0.05;AURKAPS1组[(5.89±3.82)%]、RAC1组[(5.81±3.85)%]及AURKAPS1+RAC1组[(4.23±4.15)%]的总凋亡率均低于空白组[(6.75±3.36)%],且AURKAPS1+RAC1组的总凋亡率显著低于RAC1AURKAPS1组,F=77.369,P<0.05;AURKAPS1组(131.24±9.25)、RAC1组(129.87±9.41)及AURKAPS1+RAC1组(153.62±7.48)的穿膜细胞数均高于空白组(117.64±10.53),且AURKAPS1+RAC1组的穿膜细胞数显著高于RAC1组及AURKAPS1组(F=91.118,P<0.05);Western blot法检测4组肝癌细胞的ERK及RAC1蛋白表达,转染后3组的ERK及RAC1蛋白的相对表达量均高于空白组,且AURKAPS1+RAC1组的ERK及RAC1蛋白的相对表达量显著高于RAC1组及AURKAPS1组(Fβ-actin=0.000,FERK=68.342,FRAC1=52.868,P<0.05);AURKAPS1组[10(40.00)]、RAC1组[11(44.00)]及AURKAPS1+RAC1组[19(76.00)]的ERK阳性率均高于空白组[4(16.00)],且AURKAPS1+RAC1组的ERK阳性率显著高于RAC1组及AURKAPS1组(χ2=6.650,P<0.05)。结论长链非编码RNA AURKAPS1能够使RAC1蛋白的表达量增加,活化ERK信号通路,进一步影响肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移,促进肝癌细胞的生长和进展。

  • 标签: 长链非编码RNA AURKAPS1 Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物1 细胞外信号调节激酶信号通路 肝癌细胞 实时荧光定量聚合酶链反应
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  • 简介:摘 要

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  • 简介:摘要  本文结合运营隧道衬砌病害整治工程,详细介绍了“钢拱架+锁脚锚杆”实用临时加固施工工艺,该工艺可有效防止隧道衬砌结构受力持续恶化,切实提高衬砌病害处所的承载力,杜绝病害发展导致的行车事故,为永久加固提供时间保障,是一种有效的隧道应急加固手段。

  • 标签: ①铁路隧道 ②临时加固 ③现场试验 ④衬砌 ⑤应急。
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  • 简介:摘要:燃油作为我国重要的能源之一,与人们的日常生产、生活息息相关,尤其是近期随着油价的不断攀升,燃油的价格、质量、计量更是成为了关注的焦点问题,其中燃油加油机计量就是主要关注问题之一。这就需要计量监督部门严格执行燃油加油机计量检定规程,以此来确保检定工作的准确性、及时性,从而更好的维护市场经济秩序。本文主要分析计量器具管理、校准检定、温度计操作、参数取值、油枪温度检定等,以及计量检定环节中容易出现的问题,并提出了有效预防措施,以此来确保燃油市场经济秩序。

  • 标签: 燃油加油 计量检定 问题分析 解决措施
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  • 简介:摘要:近日,经市人民政府同意,东莞市自然资源局印发了《关于加强和改进控制性详细规划编制和审批工作的通知》,该通知从践行规划新理念、改进编制方法、提高编审效率、加强控规维护等四个方面提出了十五条措施及要求,对我市的控制性详细规划(后简称“控规”)编制、审批、动态维护等工作提出了新要求、新方法和新标准,为我市做好过渡期的控规编制及审批工作提供了根本遵循。本文详细介绍了控规在我国和东莞诞生、发展、演变过程、剖析控规运行存在问题,东莞是结合国土空间规划体系重构时期,提出控规改革思路,并践行规划新理念、改进编制方法、提高编审效率、加强控规维护等四个方面去实施控规改革与创新,保证东莞项目建设顺利实施,保证自然资源部门行政许可的合法性。

  • 标签: 践行规划新理念 改进编制方法 提高编审效率 加强控规维护
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  • 简介:摘要:音乐课程标准中提到,在音乐教学过程中应通过各种有效的方法、途径引导学生走进音乐,在亲身参与音乐活动的过程中喜爱音乐。小学阶段学生理性思维尚未成熟,多以感性思维为主,在这一重要因素的影响下,学生大多是通过体验参与音乐音乐活动。借助”体验式教学法”对标题性音乐作品可以更加有趣、有效、有深度地开展教学。

  • 标签: 体验式 标题性 小学音乐
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  • 简介:摘要:本文研究了一种基于生物启发的在线自主避障四维航迹规划算法以满足无人机智能化、协同化的发展需求。本文首先建立了无人机的三自由度运动模型。其次,基于改进tau-G理论和改进粒子群优化(Improved Particle Swarm Optimization,IPSO)算法提出了无人机四维航迹规划算法。最后,为了提高无人机在战场的生存能力并满足无人机在线轨迹规划需求,设计了基于生物启发的在线自主避障四维航迹规划算法,仿真结果表明,基于生物启发的在线自主避障四维航迹规划算法优化时间较短,生成轨迹满足实际飞行需求,证明了算法的有效性和可靠性。

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  • 简介:摘要:双绞线广泛应用于轨道车辆网络系统中,因此双绞线的性能对车辆网络系统的性能有着至关重要的影响。本文从阐述双绞线的标准和测试指标出发,从电缆选型,线序定义,布线规范,制作要求等方面简述双绞线在轨道车辆网络应用中遇到的实际问题。

  • 标签: 双绞线 测试指标 网络系统 应用
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  • 简介:摘要老年男性右肺上叶3.5 cm×2.5 cm大小肿块,显微镜下示肿瘤由2种成分构成,主要以小到中等、蓝圆细胞片巢状分布为主,胞质较少,核呈泡状,核仁明显,另一部分肿瘤细胞透亮,2部分可见过渡,均异型性显著,核分裂象易见。免疫组织化学显示INI1(SMARCB1)缺失,BRG1(SMARCA4)未缺失,广谱细胞角蛋白(CKpan)、p40、细胞角蛋白(CK)5/6、p63、突触素均阳性,甲状腺转录因子1灶区阳性,CK7少量阳性,生长抑素受体2个别细胞阳性,CD56个别细胞阳性,Ki-67阳性指数50%。基因检测示INI1(SMARCB1)拷贝数异常以及EGFR、DIS3、BRIP1、HMCN1、PLCG2、RAD21、TSC2基因突变,病理诊断为INI1(SMARCB1)缺失低分化癌伴有鳞、腺及神经内分泌免疫表型。INI1(SMARCB1)蛋白是染色体重塑相关多聚体蛋白SWI/SNF的一个亚单位,SWI/SNF复合体缺失的未分化癌对传统化疗药物不敏感、预后差,但组蛋白甲基转移酶抑制剂治疗可能有效,而本例极易与低分化鳞癌、腺鳞癌混淆,故将INI1(SMARCB1)缺失的肿瘤识别出来十分必要。

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