简介:摘要目的观察微小RNA(microRNA,miR)-195调控结直肠癌中Notch通路配体Delta样配体4(Dll4)表达,探讨其作用靶点,明确miR-195通过Notch通路抗结直肠癌的分子机制。方法收集北京大学人民医院胃肠外科2010年11月至2011年2月56例行结直肠癌根治术切除的标本,3、应用芯片技术筛选6例结直肠肿瘤组织和正常肠黏膜组织中micro-RNA的表达差异,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-195在组织中相对表达量,应用固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测56例结直肠癌组织及其邻近正常肠黏膜中Notch通路中Dll4蛋白表达;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-195与Dll4 3’端非编码区(3’UTR)区的相互作用及活性,采用基因过表达miR-195(40 pmol/L)处理结肠癌细胞系SW480,运用流式细胞仪观察其对细胞凋亡的影响,Western blot检测通路相关蛋白Dll4、锯齿状蛋白1(Jagged1)、Notch受体胞内段(NICD)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、转录因子发状分裂相关增强子1(HES1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、核因子-κB(NF-κB)的表达。组间比较采用方差分析(ANOVA),独立样本t检验比较蛋白表达量差异,统计学方法分别采用独立样本t检验、配对样本t检验及单因素方差分析。结果结直肠癌组织中miR-195表达水平明显低于正常肠黏膜,而Dll4蛋白表达水平高于正常肠黏膜,分别为正常肠黏膜的0.34倍(0.341±0.008)及1.92倍(1.922±0.003) (t=3.116、2.374,P<0.05),差异均有统计学意义,体外转入miR-195后,Dll4荧光素酶活性低于对照组(0.442±0.010、1.010±0.002,t=4.305,P<0.01),差异有统计学意义,miR-195和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)都可阻断Notch1通路,抑制SW480细胞的增殖(3.1%比17.3%,t=4.232,P<0.01),差异有统计学意义,诱导其凋亡(13.7%比48.3%,t=8.355,P<0.01),两者具有协同作用(t=7.474,P<0.01),差异有统计学意义。同时Notch通路相关蛋白NICD、Hes-1随作用时间延长而表达下降。结论结直肠癌中miR-195及Dll4呈拮抗性表达,与其病理学特征密切相关,Dll4为miR-195调控的下游靶基因,miR-195通过负性调控Dll4/Notch信号通路抗结直肠癌。
简介:摘要:目的:研究在丙型肝炎确诊患者中采用HCV-RND和抗-HCV联合检测的临床意义。方法:回顾性分析2018年4月~2020年4月在我院治疗的丙型肝炎确诊患者228例,对所有患者的血清标本进行检测,抗-HCV采用化学发光微粒子免疫法;HCV-RNA采用实施荧光定量聚合酶联反应法,分析检测结果。结果:HCV-RNA的总检出率为88.16%(201/228);抗-HCV总检测率为85.53%(195/228),两种联合检测结果为98.25%(224/228),HCR-RNA阳性与阴性患者的ALT阳性率相比较,P<0.05。结论:采用HCV-RNA联合抗-HCV检测,可尽早的确诊HCV感染。
简介:摘要目的分析三磷酸鸟苷环化水解酶1(GCH1)在体外调控小鼠小胶质细胞(BV2)中环状RNA的相关表达。方法将BV2培养传代后转染病毒,分为低表达GCH1病毒载体组(Ad-shGCH1,n=3)与对照病毒载体组(Ad-NC,n=3)两组样本。孵育48 h观察转染效率并利用TRIzol试剂提取总RNA。使用第二代环状RNA(circRNA)高通量测序分析Ad-shGCH1与Ad-NC两组样本,筛选差异表达的环状circRNA。circRNA测序数据使用R包edge R计算基于负二项分布模型的fisher精确检验来确定差异显著性。应用编码-非编码基因共表达(CNC)网络分析对表达差异显著的circRNAs进行生物信息学分析,最后通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证。结果与对照组比较,Ad-shGCH1中mmu_circ_0001322(实验组CPM值:10.40,对照组CPM值:7.63,P<0.05)、mmu_circ_0000454(实验组CPM值:10.84,对照组CPM值:8.20,P<0.05)、mmu_circ_0001383(实验组CPM值:10.76,对照组CPM值:8.53,P<0.05)、mmu_circ_0000898(实验组CPM值:11.22,对照组CPM值:9.32,P<0.05)发生高于对照组,差异有统计学意义,mmu_circ_0000652低于对照组(实验组CPM值:7.94,对照组CPM值:10.83,P<0.05)(倍数变化>1.2倍),差异有统计学意义。CNC分析表明mmu_circ_0000652可能通过参与特定的网络或生物学过程参与调控丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)而发挥作用。结论GCH1调控的circRNA可能参与体外小胶质细胞的炎症过程。
简介:摘要目的探讨7q11.23拷贝数变异(copy number variants,CNVs)胎儿的产前超声表现和诊断方法。方法对2016年1月至2020年6月在我院产前诊断中心接受介入性产前诊断,且经单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP芯片)检测诊断为7q11.23微缺失/微重复者的产前诊断指征、胎儿超声检查情况、染色体核型、变异溯源、妊娠结局、出生后的生长发育情况等进行分析和文献回顾。结果5例胎儿存在7q11.23 CNVs,包括3例7q11.23微缺失和2例7q11.23微重复。产前超声指标异常4例,未发现异常1例。所有病例的染色体核型分析均未发现异常。3例7q11.23微缺失中,2例为新发变异,1例未做溯源;2例7q11.23微重复中,1例为新发变异,另1例遗传自表型正常的父亲。3例7q11.23微缺失和1例新发的7q11.23微重复胎儿被终止妊娠。1例携带父源7q11.23微重复的胎儿足月分娩,随访8个月未见异常。结论7q11.23微缺失/微重复的临床表型具有异质性,SNP芯片可准确检测7q11.23 CNVs,为其产前诊断和遗传咨询提供依据。
简介:摘要:写作对人的一生极其重要,在生活中人们会通过写作来记录生活的点点滴滴,在工作中通过写作来记录重要事件,在游玩中通过写作来记录美丽风景。总而言之,写作对人们而言有益无害,通过阅读一个人的写作,可以快速客观了解他的一切,从而也能使自己从中获取一定的知识。在国家层面上,国民文化写作水平的提升也能有助于我国文化素质修养在我世界地位上显著提升。对此,可以得知语文作文对人们十分重要,要想使国民普遍写作水平有效提升应抓住根部从源头解决问题,所以在小学阶段语文作文就要重视起来,这意味着教师应对学生加强语文作文水平技能,使学生在面对学习更高技巧的写作技能时有一个好的基础接收升华学习。因此,针对有效提升小学语文写作水平,教师在教学时应善用微课进行教学老师可以从中得出应变学生能力的解决方案,以学生为主体围绕学生需求设计微课内容,保障微课教学的质量从实践中得出微课的教学方式能够极大改善语文课堂质量,还能够有效提升小学生语文作文水平。对此,本文章将围绕微课教学中小学语文写作教学中的运用展开话题研究讨论,使老师在应对此类问题时也能够有效解决,从而达到有效提升我国文化素养,提升国际竞争力国际地位。
简介:【摘要】为了让班会更加契合教育理念与发展需求,本文从“微时代”的宏观视角下,对“立本微班会”的内涵意义进行了简要但生动的阐述,从故事润德心、礼仪修德性、砺行成德行三个角度分别介绍了德育课程校本实践的微班会开发主题,并结合故事式、情景式、活动式分析了微班会的实施策略,以期给相关研究提供一些借鉴。
简介:【摘要】目的 ERAS理念指导下对比25G笔尖型腰椎穿刺针微创腰麻(A组)和传统“针内针”腰麻(B组),两种法麻醉穿刺方法在肛肠微创手术中的应用效果。方法 随机选取择期肛肠手术100例,ASA I~Ⅱ级,随机分为A(n=50)、B(n=50)两组。A组采用25G笔尖型腰椎穿刺针微创腰麻,B组采用传统“针内针”技术腰麻 ,比较两组患者的一次性穿刺成功率、穿刺所需时间、穿刺时出血量、穿刺并发症、病人满意度。结果:A组和B组的一次性穿刺成功率分别为 98%(49/50)和88%(44/50),A组穿刺所需时间显著少于B组,A组穿刺时出血量明显少于B组,A组穿刺并发症发生率显著低于B组,A组病人满意度高于B组,差异均有统计学意义 (P
简介:【摘要】目的 ERAS理念指导下对比25G笔尖型腰椎穿刺针微创腰麻(A组)和传统“针内针”腰麻(B组),两种法麻醉穿刺方法在肛肠微创手术中的应用效果。方法 随机选取择期肛肠手术100例,ASA I~Ⅱ级,随机分为A(n=50)、B(n=50)两组。A组采用25G笔尖型腰椎穿刺针微创腰麻,B组采用传统“针内针”技术腰麻 ,比较两组患者的一次性穿刺成功率、穿刺所需时间、穿刺时出血量、穿刺并发症、病人满意度。结果:A组和B组的一次性穿刺成功率分别为 98%(49/50)和88%(44/50),A组穿刺所需时间显著少于B组,A组穿刺时出血量明显少于B组,A组穿刺并发症发生率显著低于B组,A组病人满意度高于B组,差异均有统计学意义 (P
简介:摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) SNHG12在鼻腔鼻窦肿瘤中的表达水平即与临床病理特征的关系。方法选取2017年1月到2019年1月我院收治的117例鼻腔鼻窦肿瘤患者的肿瘤组织及癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织lncRNA SNHG12相对表达水平;采用免疫组织化学分析细胞核增殖抗原(Ki-67)表达阳性率;分析lncRNA SNHG12表达水平与临床病理特征、预后和Ki-67阳性率的关系。组间比较采用t检验。结果鼻腔鼻窦肿瘤组织lncRNA SNHG12表达水平(2.56±0.26)明显高于癌旁组织(0.92±0.17),差异有统计学意义(t=4.732,P<0.05)。鼻腔鼻窦肿瘤组织Ki-67表达阳性率[(75.29±8.20)%]明显高于癌旁组织[(20.43±4.09)%],差异有统计学意义(t=3.972,P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ期鼻腔鼻窦肿瘤患者lncRNA SNHG12表达水平(2.11±0.31)低于Ⅲ~Ⅳ期患者(3.06±0.29),差异有统计学意义(t=4.019,P<0.05)。中高分化鼻腔鼻窦肿瘤患者lncRNA SNHG12表达水平(1.97±0.29)低于低分化患者(3.26±0.40),差异有统计学意义(t=4.119,P<0.05)。有淋巴结转移患者lncRNA SNHG12表达水平(2.95±0.26)明显高于无淋巴结转移患者(2.28±0.36),差异有统计学意义(t=3.811,P<0.05)。lncRNA SNHG12高表达患者术后5年无复发生存率(35.21%)低于低表达组患者术后5年无复发生存率(58.70%),差异有统计学意义(Log-Rank=3.190,P<0.05)。鼻腔鼻窦肿瘤组织lncRNA SNHG12表达水平与肿瘤增殖标志物Ki-67表达阳性率呈正相关(r=0.998,P<0.05)。结论lncRNA SNHG12在鼻腔鼻窦肿瘤中呈高表达,与患者临床病理学特征、预后和肿瘤增殖明显相关。
简介:摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) TUC338在前列腺癌中表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取河南大学淮河医院2017年6月到2019年6月收集的65例前列腺癌和癌旁组织作为研究对象,采用转录组学分析差异表达lncRNA,采用荧光定量聚合酶链式反应分析差异表达lncRNA表达水平;并分析肿瘤组织和分析差异表达lncRNA与高危前列腺癌患者临床病理参数、预后、增殖和迁移之间的关系。计量数据比较采用t检验,采用Kaplan-Meier法进行患者生存率分析。结果前列腺癌组织中lncRNA TUC338表达水平(5.19±0.72)明显高于癌旁组织(1.49±0.61),差异有统计学意义(t=6.091,P<0.05)。癌旁组织lncRNA TUC338表达水平(1.10±0.43)明显低于前列腺癌组织(3.78±0.99),差异有统计学意义(t=4.117,P<0.05)。3 ng/ml≤前列腺特异性抗原(PSA)≤20 ng/ml患者前列腺癌lncRNA TUC338表达水平(1.99±0.45)明显低于PSA>20 ng/ml患者前列腺癌组织lncRNA TUC338表达水平(4.21±0.85),差异有统计学意义(t=6.185,P<0.05)。Gleason评分≥8分患者前列腺癌lncRNA TUC338表达水平(4.10±0.68)明显高于Gleason评分<8分患者(2.51±0.40),差异有统计学意义(t=5.194,P<0.05)。PT1~T2期患者前列腺癌lncRNA TUC338表达水平(2.58±0.64)明显低于PT3~T4期患者(4.11±0.78),差异有统计学意义(t=4.901,P<0.05)。无淋巴结转移患者前列腺癌lncRNA TUC338表达水平(2.28±0.48)明显低于有淋巴结转移患者(4.59±0.95),差异有统计学意义(t=3.917,P<0.05)。lncRNA TUC338高表达患者术后3年无复发生存率[21.74%(5/23)]低于低表达组[59.23%(25/42)],差异有统计学意义(Log-Rank=3.189,P<0.05)。前列腺癌组织lncRNA TUC338表达水平与肿瘤增殖标志物细胞核增殖抗原(Ki-67)和迁移相关蛋白黏着斑激酶(FAK)表达水平呈正相关(r=0.781、0.901,P<0.05)。结论lncRNA TUC338在前列腺癌组织中高表达,与患者临床病理特征和预后密切相关。
简介:摘要目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中微小RNA(miR)-25表达水平与病灶内癌基因表达变化的相关性。方法选择海南省人民医院2018年3月至2020年12月期间NSCLC患者为NSCLC组,以同期健康志愿者作为对照组,测定外周血中miR-25的表达水平以及肺癌组织、癌旁组织中miR-25、抑癌基因、增殖侵袭基因的表达水平,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺癌细胞株和正常肺上皮细胞BEAS-2B中的miR-25表达水平。不同组间计量资料的分析采用独立样本t检验。相关分析采用Pearson检验。结果NSCLC组患者外周血中miR-25的表达水平高于对照组(1.88±0.24比1.03±0.14,t=22.432,P<0.05),肺癌病灶内miR-25的表达水平高于癌旁病灶(2.19±0.32比1.05±0.17,t=21.797,P<0.05)且NSCLC组患者外周血中miR-25的表达水平与肺癌病灶内miR-25的表达水平呈正相关(r=0.641、P<0.01)。miR-25在NSCLC细胞株中的表达量高于正常人肺上皮细胞(2.05±0.35比1.01±0.15,t=15.237,P<0.05);肺癌病灶内Krüppel样因子4(KLF4)、B细胞易位基因2(BTG2)、含F-框及WD重复域蛋白7(FBXW7)、Kazal基序逆向诱导半胱氨酸丰富蛋白(RECK)的mRNA表达量水平均低于癌旁病灶(分别0.44±0.08比1.04±0.17、0.64±0.07比1.01±0.15、0.59±0.08比0.98±0.13、0.48±0.06比1.02±0.14,t=22.407、15.681、18.053、24.827,P<0.05)且与外周血中miR-25的表达水平呈负相关(r=-0.574、-0.625、-0.512、-0.663,P<0.05)。肺癌病灶内细胞周期蛋白(Cyclin) D1、c-Myc、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA表达量水平均高于癌旁病灶(分别2.33±0.32比0.97±0.14、1.93±0.24比1.04±0.18、2.08±0.28比0.99±0.11、2.27±0.31比1.02±0.15、2.55±0.38比1.03±0.17,t=28.771、21.567、26.832、26.756、26.966,P<0.05)且与外周血中miR-25的表达水平呈正相关(r=0.564、0.692、0.503、0.672、0.485,P<0.05)。结论NSCLC患者外周血中miR-25的高表达与抑癌基因表达下调、增殖侵袭基因表达上调密切相关,NSCLC细胞株中的miR-25的表达也高于正常肺上皮细胞。