简介：摘要目的探讨注射Na99TcmO4后不同时间单光子发射计算机断层成像术(SPECT)显像测量甲状腺体积的差异。方法随机抽取2017年1月至2018年12月太原市中心医院收治的甲状腺功能亢进症患者132例，均行注射Na99TcmO4后SPECT显像，分析断层积分法与平面法不同时间甲状腺显像情况。结果不同时间断层积分法与平面法测量甲状腺体积比较，差异未见统计学意义(t＝1.889、1.968、1.928、1.720、1.712、1.511、1.893、1.802，P>0.05)。断层积分法、平面法20 min甲状腺显像与其他时间甲状腺显像呈正相关(P<0.05)。断层积分法显像评分为(3.40±1.57)分，高于平面法的(2.01±0.61)分，P<0.05；断层积分法体积CV值为低于平面法(t＝19.245，P<0.05)。结论注射Na99TcmO4后不同时间SPECT显像测量甲状腺体积的差异较小，且甲状腺患者在注射试剂后1 h内均可进行SPECT显像。

简介：摘要胃网膜左系膜的完整切除及第4sb组淋巴结彻底清扫是系膜理论指导下脾门淋巴结清扫的入口和重要步骤之一。4K腹腔镜具有更高清的手术视野及更细微的局部解剖辨识度。遵循膜解剖理念，借助4K腹腔镜的独特优势，可使胃网膜左区淋巴结清扫更加彻底，手术时间更短，微出血或者无出血，同时最大程度保护周围重要脏器及血管，提高手术根治性及安全性。笔者探讨4K腹腔镜胃癌根治术中间入路胃网膜左血管区淋巴结清扫。

简介：摘要目的寻找鉴别Graves病与亚急性甲状腺炎(SAT)甲状腺毒症期的临床指标。方法回顾性分析初发Graves病265例、初发甲状腺毒症期SAT患者76例、非毒性甲状腺结节100例、甲状腺功能正常的自身免疫性甲状腺疾病患者105例，以及甲状腺功能正常、无甲状腺疾病的门诊体检者151名的甲状腺功能。结果Graves病患者游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)/游离甲状腺素(FT4)的比值显著高于SAT甲状腺毒症期患者(0.65±0.29对0.32±0.75，P<0.05)。Graves病组和SAT组的FT3/FT4比值的受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析显示：FT3/FT4比值大于0.4对Graves病诊断的灵敏度为98.11%，特异度为83.81%。结论FT3/FT4比值大于0.4有助于鉴别Graves病和甲状腺毒症期SAT。

简介：摘要目的探讨孕前BMI、妊娠期糖尿病（GDM）与儿童4岁时肥胖相关指标的关联。方法基于已经建立的"马鞍山市优生优育队列"，对2013年10月至2015年4月出生的单胎活产儿，随访至4岁。在孕期首次填写问卷调查孕前身高、体重，在24~28周接受75 g口服糖耐量试验进行GDM诊断。在儿童4岁时测量身高、体重、腰围和体成分。组间比较采用χ2检验、方差分析或t检验，采用logistic回归模型与广义线性模型分析孕前超重/肥胖、孕前患有GDM与儿童肥胖相关特征的关系。结果儿童4岁时超重、肥胖率分别为13.08%、6.03%。控制孕期和儿童人口统计学变量后，孕前母亲超重/肥胖者儿童在4岁时发生肥胖、腰围超标、腰围身高比超标的风险要高，其OR值（95%CI）分别为3.27（2.15~4.98）、2.32（1.72~3.14）和2.29（1.73~3.02）；且与体成分指标（骨骼肌、体脂肪、体脂百分比）相关（P<0.05）。孕期母亲患有GDM者，儿童4岁时肥胖发生风险要比母亲未患有GDM者高1.78倍（OR=1.78，95%CI：1.14~2.79）；但是孕期母亲患有GDM对4岁儿童腰围超标、腰围身高比超标发生风险并无影响，与体成分指标（骨骼肌、体脂肪、体脂百分比）无统计学关联。结论孕前母亲超重/肥胖、孕期患有GDM是4岁儿童肥胖的独立危险因素，且孕前BMI与儿童体成分的各项指标相关。

简介：摘要目的研究体检中发现的腔隙性脑梗死和动脉粥样硬化性脑梗死患者血清同型半胱氨酸（Hcy）、胱抑素C（Cys C）、视黄醇结合蛋白4（RBP4）的浓度变化和颈动脉内膜中层厚度（CIMT）的关系。方法65例患者与正常对照组行颈动脉超声测量CIMT，并检测血清Hcy、Cys C、RBP4水平，分析脑梗死患者类型与上述4种数值的相关性；同时根据CIMT的分组，分析Hcy、Cys C、RBP4水平与CIMT的相关性。结果1．脑梗死组和脑腔梗组血清Hcy、Cys C、RBP4水平及CIMT的数值明显高于对照组，差异均有统计学意义（均P<0.01）；2.与CIMT正常组比较，CIMT斑块组和CIMT增厚组血清Hcy、Cys C和RBP4水平明显增高，差异均有统计学意义（均P<0.01）；3. CIMT分别与血清Hcy、Cys C、RBP4水平呈显著正相关（r＝0.647，0.583，0.472，P<0.01）。结论1．血清Hcy、Cys C、RBP4、CIMT均是动脉粥样硬化性脑梗死及腔隙性脑梗死的危险因素，可作为脑梗死的早期预测指标。2.在健康体检过程中进行上述4项检查，联合检测对脑梗死的早期诊断及早期预防均有重要的临床意义。

简介：摘要目的研究Sprouty在寻常型银屑病患者皮损组织中的表达及其与病情严重度的相关性。方法2018年5 - 11月于南方医科大学皮肤病医院收集15例寻常型银屑病皮损及10例正常对照皮肤标本，采用免疫组化检测银屑病皮损与对照皮肤组织中Sprouty1、2和4蛋白的分布，Western印迹检测Sprouty1、2和4蛋白的表达，逆转录PCR（RT-PCR）检测Sprouty1、2和4 mRNA的表达。采用Pearson相关分析检验Sprouty蛋白表达量与银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）相关性。结果免疫组化显示，银屑病皮损和对照皮肤均有Sprouty1、2和4表达，Sprouty1在对照皮肤颗粒层细胞的细胞膜和细胞质呈强表达，在银屑病皮损颗粒层的细胞膜少量表达，Sprouty4在银屑病组中的表达强于对照组，Sprouty2在两组中均少量表达。RT-PCR和Western印迹显示，银屑病组和对照组皮肤中均有Sprouty1 mRNA和蛋白的表达，银屑病组Sprouty1 mRNA（0.844 ± 0.169）和蛋白（0.148 ± 0.141）的表达均明显低于对照组（分别为0.972 ± 0.105和0.413 ± 0.108），两组比较，均P < 0.05；且银屑病组Sprouty1蛋白表达量与PASI评分呈负相关（r = -0.628，P = 0.012）。银屑病组Sprouty4蛋白和mRNA表达量分别为1.306 ± 0.283、1.727 ± 1.017，均明显高于对照组（0.584 ± 0.304和0.714 ± 0.615），差异均有统计意义（t值分别为6.063和2.814，均P<0.05），且银屑病组Sprouty4蛋白表达量与PASI评分呈正相关（r = 0.812，P < 0.001）；两组均少量表达Sprouty2蛋白和mRNA，组间差异无统计学意义（均P>0.05），且蛋白表达量与PASI评分无显著相关性（r = 0.436，P = 0.104）。结论银屑病皮损中Sprouty1、4蛋白表达水平与PASI评分存在相关性，提示二者与银屑病的发病相关。

简介：摘要血清免疫球蛋白G4(IgG4)水平升高的部分患者存在肝功能异常。本研究收集83例血清IgG4水平升高患者的临床资料，发现其中64例(77.1%)伴有肝损伤。64例伴有血清IgG4水平升高的肝损伤患者疾病谱多种多样，以免疫球蛋白G4相关性疾病(IgG4-RD)为主(22例)，其次为自身免疫性肝病(11例)、恶性肿瘤(6例)、病毒性肝炎(3例)、酒精性肝损伤(2例)，该类肝损伤患者实验室检查结果多以GGT、DBil升高为主，其中IgG4-RD患者对糖皮质激素治疗敏感。血清IgG4水平升高者和自身免疫性肝炎患者的血清IL-4和IL-5水平均升高。

简介：无

简介：摘要目的观察还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(NOX4)抑制剂对缺氧诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将APRE-19细胞分为Avastin干预组和VAS2870干预组，并按照药物剂量不同将Avastin干预组亚分为常氧对照组、缺氧对照组及0.25 mg/ml、0.50 mg/ml和0.75 mg/ml Avastin干预组，将VAS2870干预组亚分为1 μmol/ml、3 μmol/ml和5 μmol/ml VAS2870干预组，缺氧对照组采用终浓度为300 μmol/L CoCl2处理ARPE-19细胞以建立细胞化学缺氧模型。采用细胞免疫荧光染色技术对不同干预组细胞中NOX4和VEGF表达进行测定和定位，采用Western blot法对不同干预组细胞中NOX4和VEGF蛋白相对表达量进行测定和比较。结果Western blot法检测显示，常氧对照组、缺氧对照组及0.25 mg/ml、0.50 mg/ml和0.75 mg/ml Avastin干预组NOX4蛋白相对表达量分别为0.657±0.153、1.000±0.200、1.206±0.300、1.260±0.200和1.413±0.273，VEGF-A蛋白相对表达量分别为0.821±0.110、1.210±0.100、0.672±0.100、0.340±0.120和0.300±0.130，组间总体比较差异均有统计学意义(F＝17.631，P<0.001；F＝4.777，P＝0.020)，其中0.75 mg/ml Avastin干预组细胞中NOX4蛋白表达量明显高于常氧对照组，差异有统计学意义(P<0.001)，0.25、0.50和0.75 mg/ml Avastin干预组VEGF-A表达量均明显低于缺氧对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。常氧对照组、缺氧对照组及1 μmol/ml、3 μmol/ml和5 μmol/ml VAS2870干预组细胞中NOX4的蛋白相对表达量分别为0.970＋0.120、1.060＋0.130、0.880＋0.130、0.567＋0.135和0.450＋0.120，VEGF-A蛋白相对表达量分别为0.387＋0.135、0.627＋0.125、0.370＋0.140、0.363＋0.140和0.160＋0.100，组间总体比较差异均有统计学意义(F＝12.933，P<0.001；F＝4.948，P<0.05)，其中3 μmol/ml和5 μmol/ml VAS2870干预组细胞中NOX4蛋白相对表达量明显低于缺氧对照组，差异均有统计学意义(均P<0.001)；1 μmol/ml、3 μmol/ml和5 μmol/ml VAS2870干预组细胞中VEGF-A蛋白相对表达量明显低于缺氧对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论NOX4抑制剂可抑制人RPE细胞中VEGF-A表达。

简介：摘要目的探讨Toll样受体4(TLR4)在原发性肾病综合征(INS)患儿肾组织及外周血中的表达及意义。方法采集2015年10月至2018年6月在新乡医学院第一附属医院确诊为INS的78例患儿肾活检组织及21例儿童正常肾组织(对照组1)，应用免疫组织化学方法检测标本中TLR4表达水平，比较INS不同肾脏病理类型、不同临床分型中TLR4表达水平的差异，分析其与24 h尿蛋白、血清清蛋白的相关性；应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测INS患儿治疗前(活动期)及治疗后(缓解期)和23例健康儿童(对照组2)外周血中TLR4表达水平，比较INS不同肾脏病理类型、不同临床分型患儿血清中TLR4表达水平的差异，分析其与24 h尿蛋白、血清清蛋白的相关性；对INS患儿肾小管中TLR4的表达水平与血清TLR4的表达水平进行相关性分析。结果1．与正常肾组织TLR4水平[(0.93±0.26)%]比较，TLR4在各型INS患儿肾小球及肾间质的表达[系膜增生性肾小球肾炎(MsPNG)型：(0.93±0.21)%、局灶节段性肾小球硬化(FSGS)型：(1.02 ± 0.25)%、膜性肾病(MN)型(1.03±0.09)%、微小病变(MCD)型(1.02±0.27)%]差异无统计学意义(F＝0.741，P＝0.562)；而肾小管TLR4的表达水平明显增高[MCD型：(82.94±4.62)%、MN型：(63.54±1.98)%、MsPGN型：(42.32±2.97)%、FSGS型：(22.60±2.07)%]，差异有统计学意义(F＝1 929.842，P<0.01)，其中MCD型INS患儿肾小管TLR4表达水平较MN型、MsPGN型、FSGS型明显增高，差异均有统计学意义(均P<0.01)；肾小管TLR4在临床分型为激素敏感型肾病综合征(SSNS型)肾脏组织中表达最高，在激素耐药型肾病综合征(SRNS)型表达最低，差异有统计学意义(F＝220.951，P<0.01)。2.活动期INS患儿血清TLR4表达[MsPNG型：(143.36±12.99) ng/L、FSGS型(75.94±7.29) ng/L、MN型( 210.22±14.66) ng/L、MCD型(283.93±21.58) ng/L]显著高于缓解期患儿[MsPNG型：(29.51±4.93) ng/L、FSGS型(15.66±3.78) ng/L、MN型(45.40±5.73) ng/L、MCD型(62.29±7.90) ng/L]及对照组2儿童[(0.69±0.33) ng/L]，差异均有统计学意义(均P<0.01)；且缓解期INS患儿血清TLR4的表达水平高于对照组2儿童，差异有统计学意义(F＝286.287，P<0.01)。活动期及缓解期INS患儿血清TLR4的表达水平均以MCD型最高，其次为MN型，而FSGS型最低；血清TLR4在临床分型为SSNS型表达最高，SRNS型表达最低，差异有统计学意义(F＝147.438，P<0.01)。3.INS患儿肾小管中TLR4的表达水平[(62.82±20.94)%]与其活动期血清中TLR4的表达水平[(213.26±73.33) ng/L]呈正相关(r＝0.852，P<0.05)；INS患儿肾小管及活动期血清TLR4的表达水平均与24 h尿蛋白水平[(123.05±33.55) mg/kg]均呈正相关(r＝0.401、0.427，均P<0.05)，与血清清蛋白水平[(19.54±3.55) g/L]均呈负相关(r＝－0.602、－0.617，均P<0.05)。结论TLR4在INS患儿肾小管及血清中表达增高，且表达水平可能与不同肾脏病理类型及临床分型有关，与疾病活动具有相关性。

简介：摘要目的观察Ⅱ型多磷酸肌醇4-磷酸酶(INPP4B)在人甲状腺乳头状癌组织及其癌旁正常组织的表达，观察INPP4B表达对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响，探讨其调节机制。方法采用定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测2019年1月至2019年12月期间30例甲状腺乳头状癌患者癌组织及其癌旁正常组织中INPP4B的表达水平。在甲状腺乳头状癌细胞系IHH4细胞中敲减INPP4B表达，采用系列体外试验检查INPP4B表达水平改变对IHH4细胞功能的影响。计量资料用两独立性t检验，并进行Mann-Whitney U检验非参数分析。结果RT-PCR结果显示，在30例甲状腺乳头状癌组织中，有22例INPP4B mRNA水平明显升高，癌组织中INPP4B的高表达率为73.3%(22/30)，显著高于癌旁正常组织(3.3%，1/30)(P<0.01)。Western blot结果显示，在30例甲状腺乳头状癌组织中21例INPP4B蛋白呈上调表达，与RT-PCR检测结果符合率为95.5%。在IHH4细胞中敲减INPP4B表达可上调上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达3.61倍(χ2＝33.800，P<0.05)；下调磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)表达0.24倍(χ2＝14.300，P<0.05)、下调血清/糖皮质激素调节激酶3(SGK3)表达0.18倍(χ2＝19.400，P<0.05)、下调卷曲蛋白(Twist)表达0.31倍(χ2＝8.700，P<0.05)和下调波形蛋白(Vimentin)表达0.25倍(χ2＝15.800，P<0.05)；但敲减INPP4B表达对磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达影响很小，仅下调0.96倍(χ2＝0.000，P>0.05)。噻唑蓝(MTT)增殖试验表明，敲减INPP4B表达可显著抑制IHH4细胞的增殖能力。细胞克隆形成试验结果显示，与对照组[(138±11)个]比较，敲减INPP4B表达组[(76±9)个]的体外集落数量显著减少，差异有统计学意义(t＝9.692，P<0.05)。刮痕愈合试验结果表明，敲减INPP4B表达组和对照组的IHH4细胞刮痕愈合率分别为(33.48±0.05)%和(93.29±0.07)%，差异有统计学意义(t＝68.582，P<0.01)。Transwell试验结果显示，敲减INPP4B表达组和对照组的IHH4细胞迁移细胞数分别为8(4，16)个和129(94，186)个，差异有统计学意义(U＝0，P<0.01)。结论INPP4B在甲状腺乳头状癌组织中呈高表达，提示其可能对甲状腺癌的发生发展有重要作用；体外细胞水平敲减INPP4B表达能够抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭能力，提示INPP4B在甲状腺乳头状癌中起促癌作用。

简介：摘要目的探讨1个遗传性血尿肾病耳聋综合征(Alport综合征)家系的致病原因。方法应用高通量测序和Sanger测序法检测先证者COL4A5基因的变异，并在家系其他成员及100名正常对照中进行Sanger测序验证。结果测序结果显示该家系中的4例女性患者COL4A5基因均存在c.3293G>T(p.Gly1098Val)的杂合变异，2例男性患者为COL4A5基因c.3293G>T(p.Gly1098Val)变异半合子，而正常家系成员以及100名正常对照中均未检测到此变异。按照美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南，COL4A5基因c.3293G>T变异位点判读为致病性变异(PM1＋PM2＋PP1-S＋PP3＋PP4)。结论COL4A5基因的c.3293G>T(p.Gly1098Val)变异会导致Gly-X-Y三联结构发生变化，可能是该家系的发病原因，新变异的检出丰富了COL4A5基因的变异谱。

简介：【摘要】目的：分析多囊卵巢综合征患者的血清 RBP4与内分泌激素水平的相关性。方法：选取自 2019年 1月至 2020年 3月我院收治的 80例多囊卵巢综合征患者为研究对象，并将其纳入观察组，另外，选取同期在我院进行体检的 80例未患多囊卵巢综合征的女性，将其纳入对照组，应用酶联免疫吸附法测试两组患者的血清 RBP4，采用免疫化学发光法测试两组患者的内分泌激素水平。结果：观察组患者内分泌激素中的 T、 PRL、 LH、 LH/FSH以及 DHEAS水平明显高于对照组，而 E2、 FSH、 SHBG水平则低于对照组，组间对比，差异具有统计学意义（ p＜ 0.05）。患者血清 RBP4与内分泌激素 LH、 LH/FSH水平呈正相关，与内分泌激素 E2、 FSH水平呈负相关，且差异具有统计学意义（ p＜ 0.05）。结论：多囊卵巢综合征患者患有 RBP4血症与患者的内分泌激素水平有着密切联系。

简介：摘要目的了解高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy，HAART)后HIV/AIDS患者T淋巴细胞免疫活化及CD4＋CD45RA＋ T细胞的亚群变化，探讨抗病毒治疗对HIV感染者免疫恢复的影响。方法前瞻性分析105例接受HARRT治疗的HIV/AIDS患者，流式细胞仪检测治疗前和治疗后1、3、6及12个月T淋巴细胞活化水平(CD38、HLA-DR的表达)及CD4＋CD45RA＋ T淋巴细胞；同时选取未暴露且HIV-1抗体检测阴性者35名作为健康对照。结果HAART治疗前HIV/AIDS患者T淋巴细胞活化水平显著高于健康对照(P<0.01)，HAART治疗后随治疗时间延长活化水平明显下降，治疗1个月时CD4＋CD38＋ HLA-DR＋及CD8＋CD38＋ 、CD8＋ HLA-DR＋ T淋巴细胞首先出现降低，治疗6个月时包含CD8＋CD38＋HLA-DR＋ T在内的4项活化指标均明显下降，差异有统计学意义(P<0.01)；治疗12个月与6个月相比，CD8＋CD38＋HLA-DR＋ T表达水平继续降低(P<0.01)，而其余3项活化指标差异无统计学意义。但HAART治疗12个月后，4项活化指标仍全部高于健康对照组(P<0.01)。CD4＋CD45RA＋ T淋巴细胞百分比在治疗前及治疗后12个月均明显低于健康对照组。结论HIV/AIDS患者在HAART治疗后6个月免疫活化水平降低，但HAART并不能使免疫活化逆转；HAART治疗也不能恢复HIV感染后降低的CD4＋CD45RA＋ T淋巴细胞的水平。

简介：摘要目的探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对脉络膜微血管内皮细胞增生和凋亡的影响及其调控机制。方法体外培养人脉络膜微血管内皮细胞，将培养的细胞分为血管内皮生长因子(VEGF)组和正常对照组，正常对照组细胞常规培养，VEGF组细胞应用VEGF处理24 h；将VEGF组培养的细胞分为4个亚组，分别将阴性对照(miR-NC)、miR-338-3p拟似物、miR-338-3p拟似物＋pcDNA、miR-338-3p拟似物＋pcDNA-TCF4转染至脉络膜微血管内皮细胞后用VEGF处理24 h。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测细胞中miR-338-3p和TCF4相对表达量；采用MTT法检测细胞增生率以评估细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡率；行双荧光素酶报告实验验证miR-338-3p与TCF4的靶向关系；采用Western blot法检测细胞中增生标记蛋白细胞增生核抗原-67(Ki-67)、增生细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(bax)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)蛋白相对表达量。结果与正常对照组比较，VEGF组细胞中miR-338-3p mRNA表达水平显著降低，TCF4 mRNA表达水平显著升高，细胞增生率显著升高，细胞凋亡率显著降低，细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著升高，bax蛋白水平显著降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)；与VEGF＋miR-NC组比较，VEGF＋miR-338-3p组细胞增生率显著降低，细胞凋亡率显著升高，细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著降低，bax蛋白表达水平显著升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)；双荧光素酶报告实验证实miR-338-3p可靶向结合TCF4；与VEGF＋miR-338-3p＋pcDNA组比较，VEGF＋miR-338-3p＋pcDNA-TCF4组细胞增生率显著升高[(56.48±13.20)% vs.(96.24±16.24)%]，细胞凋亡率显著降低[(30.59±3.57)% vs.(12.36±1.29)%]，细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著升高(0.41±0.11 vs. 0.96±0.19；0.44±0.10 vs. 0.97±0.20；0.55±0.12 vs. 0.98±0.15)，bax蛋白表达水平显著降低(0.87±0.13 vs. 0.42±0.11)，差异均有统计学意义(t＝5.700、14.408、7.516、7.111、6.715、7.927，均P<0.01)。结论miR-338-3p过表达可负向调控TCF4在细胞中的表达量，从而抑制脉络膜微血管内皮细胞的增生及诱导细胞凋亡。

简介：摘要目的观察缺氧对软骨细胞体外培养时的失分化过程的影响，探讨胶原蛋白脯氨酰4-羟化酶（collagen prolyl 4-hydroxylases，C-P4Hs）在其中的作用。方法对软骨细胞进行不同浓度的COCl2处理，筛选用于缺氧诱导的最佳COCl2浓度为100 μmol/L后，将小鼠肋软骨细胞分为：常氧组、缺氧组，分别检测第3代0.5-72 h及1、3、5、7代于72 h的各项指标。使用CCK8法及细胞计数测定增殖率，RT-qPCR、免疫荧光染色、Western blot检测各组HIF-1α、P4Hα1、P4Hα2和Col-II的动态变化。结果肋软骨细胞在不同浓度COCl2条件下培养48 h，100 μmol/L的COCl2组增殖率最高，呈典型的铺路石状；当COCl2浓度>150 μmol/L时，增殖率（P<0.05）降低。常氧与缺氧下诱导肋软骨细胞0-72 h，RT-qPCR显示缺氧组P4Hα2、ColⅡmRNA表达升高（P>0.05）。免疫荧光显示缺氧下HIF-1α与P4Hα2累积于胞核内，P4Hα2逐渐由胞核进入胞浆中。Western-blot显示缺氧组HIF-1α、P4Hα2蛋白表达（P<0.05）增高。缺氧组ColⅡ蛋白表达（P<0.05）在诱导后期增高。常氧与缺氧下培养肋软骨细胞1-7代，CCK8与细胞计数结果显示缺氧组各代细胞增值率及细胞数均增高（P<0.05），且传至6-7代时仍有增殖的潜力。RT-qPCR显示缺氧组各代细胞中P4Hα2、ColⅡ的mRNΑ均增高（P<0.05）。Western-blot显示，缺氧组各代HIF-1α、P4Hα2、ColⅡ蛋白表达（P<0.05）均增高。结论通过缺氧诱导高表达HIF-1α，从而使P4Hα2表达增高，可加速ColⅡ在软骨细胞内翻译后修饰过程，增加ColⅡ的合成和累积。缺氧条件下体外培养软骨细胞增殖率增高、失分化过程延缓可能与P4Hα2有关。

简介：摘要：目的 本研究试图将人源 A群轮状病毒（ HRV）的 VP7和 VP4基因片段串联克隆到表面表达载体 pLA上，构建出重组质粒 pLA-VP7-VP4-LTB，并将其电转化到乳酸菌中，制备出表达融合蛋白 pLA-VP7-VP4-LTB的重组干酪乳杆菌，并证明其具有良好的免疫原性。方法 采用分子克隆相关技术、间接免疫荧光试验、流式细胞术、间接 ELISA试验等。结论 成功制备出能表达融合蛋白的重组乳酸菌 pLA-VP7-VP4-LTB/L.casei，并证明该重组菌既可以刺激机体产生体液免疫，也可以刺激机体产生局部免疫，为进一步筛选制备适用于口服的轮状病毒基因工程乳酸菌疫苗的研究奠定实验基础。

简介：摘要目的评价雷帕霉素对大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)时NOD样受体C4(NLRC4)炎症小体活性的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠36只，6～8周龄，体重200～250 g，采用随机数字表法分为3组(n＝12)：对照组(C组)、VILI组和雷帕霉素组(RAPA组)。RAPA组造模前连续3 d腹腔注射雷帕霉素4 mg·kg-1·d-1，C组和VILI组给予等容量生理盐水。VILI组和RAPA组行机械通气4 h，通气参数设置：RR 80次/min，FiO2 21%，PEEP 0 cmH2O，I∶E 1∶1，VT 20 ml/kg。机械通气结束后采集股动脉血样行血气分析，记录PaO2；采用ELISA法检测血清IL-1β和IL-18浓度。收集左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)，采用ELISA法测定中性粒细胞计数及IL-1β、IL-18浓度。取肺组织，HE染色后光镜下观察病理学结果，并进行肺损伤评分，测定湿重/干重(W/D)比值，采用Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、NLRC4和caspase-1的表达，采用RT-PCR法检测NLRC4 mRNA表达。结果与C组比较，VILI组和RAPA组肺组织W/D比值、肺损伤评分、BALF中性粒细胞计数及血清、BALF IL-1β、IL-18浓度均升高，PaO2下降，肺组织mTOR、NLRC4、caspase-1及NLRC4 mRNA表达上调(P<0.01)；与VILI组比较，RAPA组肺组织W/D比值、肺损伤评分、BALF中性粒细胞计数及血清、BALF IL-1β、IL-18浓度均降低，PaO2升高，肺组织mTOR、NLRC4、caspase-1及NLRC4 mRNA表达下调(P<0.05)。结论雷帕霉素减轻大鼠VILI的机制可能与抑制mTOR信号通路激活，进而抑制NLRC4炎症小体活性有关。

简介：摘要目的探讨低氧诱导因子1α（HIF-1α）、溴结构域蛋白4（BRD4）及自噬相关蛋白Beclin1、LC3B、p62在乳腺癌组织的表达及其临床病理意义，并研究低氧调控下乳腺癌细胞HIF-1α、BRD4及自噬水平的表达变化。方法采用免疫组织化学EnVision法检测125例乳腺癌组织和50例癌旁正常乳腺组织HIF-1α、BRD4、Beclin1、LC3B、p62蛋白的表达，分析其与乳腺癌临床病理特征的关系，并分析蛋白表达水平的相关性。低氧（1%O2）刺激MCF-10A、MCF-7及MDA-MB-231细胞，24 h后检测低氧对细胞HIF-1α、BRD4、Beclin1、LC3B、p62蛋白表达的影响。结果HIF-1α、BRD4、Beclin1、LC3B蛋白在乳腺癌组织中的阳性率及高表达比率显著高于癌旁正常乳腺组织，而p62蛋白的高表达比率（42.4%， 53/125）低于癌旁正常乳腺组织（70.0%， 35/50），差异均具有统计学意义（P<0.05）。乳腺癌组织中组织学分级越高，HIF-1α、BRD4、Beclin1、LC3B高表达率越高（P<0.05）。淋巴结转移、存在脉管瘤栓者常伴有HIF-1α、Beclin1高表达（P<0.05）。雌激素受体（ER）/孕激素受体（PR）阴性组的HIF-1α、BRD4、Beclin1、LC3B高表达比率较ER/PR阳性组增高（P<0.05）。HIF-1α高表达与HER2阳性有关（P<0.05）。HIF-1α、BRD4、Beclin1、LC3B两两之间在乳腺癌组织中的表达均存在正相关关系，差异具有统计学意义（P<0.01）。低氧刺激24 h后乳腺癌细胞的HIF-1α、BRD4、Beclin1、LC3B蛋白表达上调，p62表达下调。结论乳腺癌组织中存在低氧现象并诱导自噬。HIF-1α与BRD4表达存在正相关，提示BRD4参与了乳腺癌低氧微环境对自噬的调控。乳腺癌HIF-1α、BRD4及自噬的高表达可能在乳腺癌的发生发展过程中发挥重要作用。

简介：摘要目的分析T4期乳腺癌患者改良根治术后胸壁放疗加量的疗效。方法回顾分析2000－2016年收治的148例T4期、改良根治术后放疗的乳腺癌患者资料，胸壁放疗加量组57例，不加量组91例。放疗采用常规＋胸壁电子线、三维适形＋胸壁电子线、调强放疗＋胸壁电子线照射，加量组EQD2>50Gy。全组患者均接受新辅助化疗。Kaplan-Meier法生存分析并Logrank检验差异，Cox模型多因素预后分析。结果中位随访时间67.2个月，5年胸壁复发(CWR)、局部区域复发(LRR)、无瘤生存(DFS)、总生存(OS)率分别为9.9%、16.2%、58.0%、71.4%。胸壁放疗加量和不加量的5年CWR、LRR、DFS、OS率分别为14%和7%、18%和15%、57%和58%、82%和65%(P>0.05)。多因素分析显示胸壁加量与否对预后无显著影响(P>0.05)。45例复发高危组患者中放疗加量组似乎有较高的OS率(P＝0.058)、DFS率(P＝0.084)和较低的LRR率(P＝0.059)。结论T4期乳腺癌患者异质性较强，胸壁放疗加量对全组患者无明显获益。对于有脉管瘤栓阳性、pN2－N3、激素受体阴性中2～3个高危因素患者胸壁放疗加量有改善疗效趋势。