简介:本研究获取主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子的轻链部分,即β2-微球蛋白(β2m)以制备MHCⅠ类分子-肽四聚体.根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从人白细胞中克隆β2m的基因,并构建β2m的原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达.结果显示:构建的编码成熟β2m的pET-β2m可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达β2m,表达量占菌体总蛋白的32%,β2m以包涵体的形式表达,经洗涤、变性后,以SephacrylS-200HR(S-200)柱层析纯化,纯度可达95%以上,纯化产物采用稀释法复性.Westernblot分析表明,该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性.结论:获得了高效表达人β2m的大肠杆菌工程菌株,建立了简便有效的β2m包涵体纯化、复性方法,为制备MHCⅠ类分子-肽四聚体奠定了基础.
简介:时间如白驹过隙,转眼之间,本刊已经满6岁了。回想与《中华整形外科杂志》分刊伊始,初入此行的我们,在满腔热情中惶惶然捧出第1本《中华烧伤杂志》,盼望着紫罗兰能从此绽放,成为她永久的标志色。
简介:目的比较HBVS基因与HCVC基因真核表达质粒融合基因免疫与联合基因免疫的效果,为HBV和HCV融合基因疫苗研究奠定基础。方法将同时含HBVS基因与HCVC基因的真核表达质粒SCpcDNA3.1、含HBVS基因真核表达质粒SpcDNA3.1、含HCVC基因真核表达质粒CpcDNA3.1分别免疫小鼠;将SpcDNA3.1+CpcDNA3.1联合免疫小鼠。ELISA法检测血清抗HBs和抗HCV。结果无论是抗HBs和抗HCV阳转出现的时间、阳转率和体液免疫应答强度,融合基因免疫都优于联合基因免疫:融合基因免疫的抗HBs的应答强度低于SpcDNA3.1质粒的免疫,抗HBc的应答强度高于CpcDNA3.1质粒的免疫。结论HCVC基因或其表达产物对HBVS基因或抗原的表达和提呈有抑制作用;HCVC基因与HBVS基因相融合,更有利于HCV核心蛋白的提呈。
简介:目的:分析抑癌基因PTEN突变高发区外显子5(exon5)和外显子8(exon8)在胃癌组织中的突变频率,探讨其突变与胃癌临床分期的相关性.方法:应用聚合酶链反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)方法检测胃癌组织和相应癌旁正常组织中PTEN基因的突变,对突变样本的PCR产物进行测序分析.结果:42例胃癌组织中检测到PTEN基因突变3例,突变率为7.14%(3/42);42例胃癌临床病理分期,Ⅰ、Ⅱ期突变率为5.88%(1/17),Ⅲ、Ⅳ期突变率为8.00%(2/25),二者差异无统计学意义(P<0.05).42例相应癌旁正常组织未检测到突变.42例胃癌进行组织学分级,低分化腺癌突变率为12.00%(3/25),中、高分化腺癌突变率为0(0/17),二者差异无统计学意义(P>0.05).结论:胃癌组织中存在PTEN基因突变,主要发生在低分化腺癌中,而PTEN基因突变与胃癌病理组织学分级和临床病理分期之间无明显相关性.
简介:目的观察比较硬膜外与静脉两种PCA方式对于妇产科手术后患者的镇痛效果及副作用,为妇产科手术术后镇痛方式的舍理应用提供理论依据。方法妇产科手术病人50例,随机分为两组,分别给予PCEA及PCIA术后镇痛。PCEA;0.125%布比卡固200nd+0.1mg芬太尼+2.5mg氟哌啶;PCIA:0.6mg芬太尼+2.5mg氟哌啶+0.9%生理盐水配至200ml。镇痛泵采用博创公司生产的电子采+一次性专用药袋,设定连续背最榆注量为2ml/h.单次给药量1.5ml/次,锁定时间为15min,使用48h后停用。分别于术后6、12、24、36和48h进行随访记录。并将各指标进行统计学处理。结果两组各指标均无显著性差异。结论本试验考察的两种配方的效果和副作用发生率及患者满意度之间均无显著性差异。
简介:目的观察硬膜外与静脉镇痛在肺叶切除术后镇痛效果。方法60例择期行肺叶切除术病人(ASAⅠ~Ⅱ)随机分为2组,硬膜外组(n=30):0.125%布比卡因+0.01%吗啡;静脉组(n=30):曲马多1000mg+芬太尼0.15mg。采用10cm视觉模拟评分尺评估术后1、2d静息和咳嗽疼痛评分,记录副作用、肺部并发症和术后住院日。结果(1)镇痛效果术后1、2d硬膜外组静息和咳嗽VAS评分低于静脉组,但无统计学意义(P〉0.05);(2)硬膜外组副作用发生率显著高于静脉组(P〈0.05);(3)均无肺部并发症发生,术后住院日无显著差异。结论静脉镇痛应用于开胸手术镇痛效果可行,与硬膜外比较副作用少,操作简单。