简介：摘要目的观察小青龙汤和清气化痰丸对白细胞介素-1β（IL-1β）诱导的人肺癌细胞H292黏液高分泌模型及核转录因子-κB/微小RNA-494（NF-κB/miR-494）信号通路相关分子的影响，探讨两者改善病理性气道黏液的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同浓度小青龙汤、清气化痰丸对IL-1β诱导的H292细胞活性的影响并选择合适浓度进行后续实验。将细胞随机分为空白组、模型组（5 μg/L IL-1β）、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵（PDTC）组（5 μg/L IL-1β+100 μmol/L PDTC）、小青龙汤组（5 μg/L IL-1β+1 000 mg/L小青龙汤）和清气化痰丸组（5 μg/L IL-1β+1 000 mg/L清气化痰丸）；采用5 μg/L IL-1β诱导H292细胞24 h建立气道上皮黏液高分泌细胞模型。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞分泌黏蛋白5AC（MUC5AC）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-8水平及细胞内MUC5AC和囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）蛋白含量；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测MUC5AC mRNA、CFTR mRNA和miR-494的表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测NF-κB信号通路关键蛋白p65和NF-κB抑制因子（IκB）的蛋白表达。结果选择浓度为1 000 mg/L的小青龙汤和清气化痰丸进行后续实验。与空白组比较，模型组细胞分泌MUC5AC、TNF-α和IL-8水平显著升高，细胞内MUC5AC蛋白含量和mRNA表达也显著升高，细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达均显著降低，且细胞内p65蛋白表达显著上调，IκB蛋白表达显著下调，miR-494表达显著升高。与模型组相比，PDTC组、小青龙汤组和清气化痰丸组细胞分泌MUC5AC、TNF-α、IL-8水平显著降低，细胞内MUC5AC蛋白含量和mRNA表达也显著降低，且细胞内p65蛋白表达均显著下调，IκB蛋白表达均显著上调，miR-494表达均显著降低；PDTC组和清气化痰丸组细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达均显著升高。与PDTC组相比，小青龙汤组细胞分泌TNF-α水平显著升高（ng/L：22.77±3.14比11.09±3.37，P<0.05），细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达、IκB蛋白表达均显著降低〔CFTR蛋白（ng/L）：97.38±6.62比227.04±19.48，CFTR mRNA（2-ΔΔCt）：0.99±0.08比1.21±0.08，IκB/β-actin：1.69±0.11比2.00±0.18，均P<0.05〕；清气化痰丸组细胞分泌TNF-α水平显著升高（ng/L：19.08±3.71比11.09±3.37，P<0.05）。与小青龙汤组相比，清气化痰丸组细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达、IκB蛋白表达均显著升高〔CFTR蛋白（ng/L）：235.01±22.71比97.38±6.62，CFTR mRNA（2-ΔΔCt）：1.32±0.15比0.99±0.08，IκB/β-actin：1.94±0.16比1.69±0.11，均P<0.05〕。结论小青龙汤改善气道上皮黏液高分泌炎症的机制可能与抑制NF-κB/miR-494炎症信号介导的MUC5AC高分泌有关，而清气化痰丸则可能与抑制NF-κB/miR-494炎症信号介导的MUC5AC高分泌及CFTR功能障碍有关，因此，二者治疗病理性气道黏液的机制差异主要在对CFTR基因和蛋白的调控上。

简介：摘要目的了解中国外阴阴道假丝酵母菌病致病菌对目前临床常用的抗真菌药物的敏感性。方法本研究纳入我国23家医院妇科和计划生育门诊就诊的1 200例外阴阴道假丝酵母菌病患者，采集患者的阴道分泌物进行假丝酵母菌菌株分离和菌株鉴定，参照美国临床实验室标准研究所（CLSI）M27-S3方案，测定1 200株菌株对克霉唑、氟康唑、咪康唑、伊曲康唑及制霉菌素5种常用抗真菌药物的敏感性和耐药性情况。结果（1）1 200株外阴阴道假丝酵母菌病致病菌对5种抗真菌药物的敏感性和耐药性不同，各药物比较有明显差异（χ2=3 513.201，P<0.01）。（2）所有菌株对制霉菌素敏感性更高［敏感率为99.92%（1 199/1 200）］，其次是咪康唑［敏感率为92.25%（1 107/1 200）］和克霉唑［敏感率87.17%（1 046/1 200）］，所有菌株对氟康唑的耐药性最高［耐药率为69.17%（830/1 200）］，而对伊曲康唑的耐药性次之［耐药率为50.83%（610/1 200）］。（3）白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对制霉菌素的敏感性均很高且无差异（P=0.425），对咪康唑的敏感性也较高且无差异（P=0.315）。（4）白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对克霉唑、氟康唑和伊曲康唑的敏感性均不同，相比于非白假丝酵母菌，白假丝酵母菌对克霉唑的敏感性更高［敏感率分别为73.01%（165/226）、90.45%（881/974），P<0.001］，对氟康唑的耐药性更高［耐药率分别为50.88%（115/226）、73.41%（715/974），P<0.001］。虽然对伊曲康唑的敏感性不高，但是白假丝酵母菌比非白假丝酵母菌对伊曲康唑的敏感率高［分别为37.68%（367/974）、23.89%（54/226），P<0.001］，耐药率低［分别为49.28%（480/974）、57.52%（130/226），P<0.001］。结论1 200株假丝酵母菌对5种常用抗真菌药物的敏感性具有明显差异，对制霉菌素、咪康唑和克霉唑的敏感性较高，而对氟康唑和伊曲康唑的耐药性较高。白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌对不同抗真菌药物的敏感性和耐药性存在很大差异，临床上应重视对假丝酵母菌的鉴定和药物敏感性试验，合理选用抗真菌药物。

简介：摘要目的探究LINC00662能否靶向微小RNA(miR)-186-5p/叉头框转录因子D1(FOXD1)轴调控乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭。方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测28例乳腺癌组织和癌旁组织中LINC00662、miR-186-5p和FOXD1 mRNA表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测FOXD1蛋白表达。分别转染LINC00662小干扰RNA(si-LINC00662)、共转染si-LINC00662与miR-186-5p抑制剂、si-LINC00662与FOXD1过表达载体至MCF-7细胞，细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移和侵袭，Western blot检测p21、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和FOXD1蛋白表达。双荧光素酶报告系统验证LINC00662与miR-186-5p、miR-186-5p与FOXD1的调控关系，两组间比较采用独立样本t检验。结果乳腺癌组织组中LINC00662(1.01±0.08比2.36±0.09，t＝59.324，P<0.01)、FOXD1水平(0.97±0.07比1.93±0.09，t＝44.553，P<0.01)高于癌旁组织，miR-186-5p水平(0.96±0.05比0.34±0.04，t＝51.236，P<0.01)低于癌旁组织。si-LINC00662组克隆形成数[(114.00±7.93)个比(62.00±5.81)个，t＝15.869，P<0.01]、迁移细胞数[(164±10.03)个比(75±7.14)个，t＝21.687，P<0.01]、侵袭细胞数[(103.00±7.83)个比(44.00±4.35)个，t＝19.761，P<0.01]少于si-NC组，存活率[(100.03±8.12)%比(52.29±5.34)%，t＝14.737，P<0.01]、MMP-2(0.71±0.05比0.24±0.03，t＝24.181，P<0.01)蛋白水平低于si-NC组，P21(0.15±0.02比0.58±0.04，t＝28.845，P<0.01)、E-cadherin(0.23±0.02比0.66±0.04，t＝28.845，P<0.01)蛋白水平高于si-NC组。LINC00662靶向负调控miR-186-5p；miR-186-5p靶向负调控FOXD1。si-LINC00662+抗miR-186-5p组克隆形成数[(60.00±±5.62)个比(102.00±7.23)个，t＝13.759，P<0.01]、迁移细胞数[(74.00±7.26)个比(131.00±9.91)个，t＝13.920，P<0.01]、侵袭细胞数[(45.00±4.41)个比(88.00±5.67)个，t＝17.959，P<0.01]多于si-LINC00662+抗miR-NC组，存活率[(52.31±5.35)%比(85.06±6.46)%，t＝11.714，P<0.01]、MMP-2(0.23±0.03比0.59±0.04，t＝21.600，P<0.01)蛋白水平低于si-LINC00662+抗miR-NC组，P21(0.57±0.04比0.26±0.03，t＝17.400，P<0.01)、E-cadherin(0.64±0.04比0.35±0.03，t＝12.969，P<0.01)蛋白水平高于si-LINC00662+抗miR-NC组。结论LINC00662通过发挥miR-186-5p分子海绵上调FOXD1促进乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的动态观测恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎病毒携带者的临床疗效及其外周血PD-1+CXCR5+CD4+T淋巴细胞、可溶性程序性死亡受体1（sPD-1）水平变化并探讨其临床意义。方法慢性乙型肝炎病毒携带者治疗（A）组31例，慢性乙型肝炎患者治疗（B）组32例，慢性乙型肝炎病毒携带者未治疗（C）组15例，收集并比较3组患者0周、24周、48周外周血标本和临床资料，流式细胞技术检测PD-1+CXCR5+CD4+T淋巴细胞，酶联免疫吸附法检测sPD-1水平。3组间计量资料行方差分析检验与Spearman相关性分析。结果0周时，A组、C组血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA水平均显著高于B组；外周血PD-1+CXCR5+CD4+T淋巴细胞，B组（4.70%±1.58%）显著高于A组（3.25%±1.01%）和C组（2.77%±0.67%）（F=16.65，P<0.05），A组与C组间差异不明显（P>0.05）；外周血sPD-1，B组［（1 866.62±1 472.70）pg/ml］显著高于A组［（824.86±538.66）pg/ml］和C组［（618.19±602.62）pg/ml］（F=10.95，P<0.05），A组与C组间差异不明显（P>0.05）。48周时血清HBsAg，A组、C组较基线无显著下降（P>0.05），均显著高于B组（P<0.05）；血清HBeAg，A组、B组较基线均显著下降（P<0.05），但A组显著高于B组（P<0.05），A组与C组间差异不明显（P>0.05）；血清HBV DNA水平，A组、B组较基线均显著下降（P<0.05），均显著低于C组（P<0.05），A组与B组差异不明显（P>0.05）；外周血PD-1+CXCR5+CD4+T淋巴细胞，A组（1.56%±0.73%）、B组（1.32%±0.43%）较基线均显著下降（P<0.05），均显著低于C组（2.64%±0.85%）（P<0.05），A组与B组无明显差异；外周血sPD-1，A组［（289.05±215.86）pg/ml］、B组［（236.01±173.92）pg/ml］较基线均显著下降（P<0.05），均显著低于C组［（650.34±598.46）pg/ml］（P<0.05），A组与B组无明显差异（P>0.05）。相关性分析结果：48周时A组，PD-1+CXCR5+CD4+T淋巴细胞比例下降水平与HBsAg、HBV DNA下降水平无相关性，与HBeAg下降水平呈正相关（r=0.376，P<0.05）；sPD-1下降水平与HBsAg变化无相关性，与HBeAg、HBV DNA下降水平均呈正相关（r值分别为0.598、0.384，P值均<0.05）。48周时B组，PD-1+CXCR5+CD4+T淋巴细胞、sPD-1下降水平与HBsAg、HBeAg、HBV DNA下降水平均呈正相关（P值均<0.05）。结论HBeAg阳性慢性乙型肝炎病毒携带者抗病毒治疗48周乙型肝炎病毒复制与表达均受到显著抑制，这不仅与恩替卡韦治疗有关，而且与sPD-1参与的免疫学机制有关；且HBeAg的表达抑制与PD-1+CXCR5+CD4+T淋巴细胞数量减少和/或活性降低有关。

简介：摘要目的观察自噬抑制剂氯喹(CQ)对5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗的结肠癌细胞株SW480的凋亡以及转移和侵袭能力的影响。方法培养结肠癌细胞株SW480，分成对照组、5-Fu组、氯喹(CQ)组和5-Fu+CQ组。应用蛋白质印迹法(Western blot)检测各组自噬及上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达。应用流式细胞技术检测各组细胞凋亡情况，应用划痕实验检测各组细胞的迁移能力，应用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。两个样本均数之间的比较采用独立样本t检验。结果5-Fu组LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin 1表达高于对照组(1.217±0.042、12.470±0.411、0.793±0.008比0.221±0.006、9.366±0.469、0.444±0.008，t＝23.300、4.978、30.140，P<0.01)，5-Fu+CQ组LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin 1表达低于5-Fu组(1.072±0.029、8.526±0.524、0.657±0.010比1.217±0.042、12.470±0.411、0.793±0.008，t＝2.844、5.924、10.260，P<0.05)。5-Fu组的细胞凋亡率高于对照组[(10.600±0.468)%比(5.808±0.432)%，t＝7.524，P<0.01]；5-Fu+CQ组的细胞凋亡率高于5-Fu组[(20.730±0.897)%比(10.600±0.468)%，t＝10.01，P<0.01]。5-Fu组细胞相对迁移率和细胞侵袭数高于对照组(0.660±0.010、245.400±8.491比0.448±0.011、147.300±5.793，t＝7.595、9.544，P<0.01)，5-Fu+CQ组的细胞相对迁移率和细胞侵袭数低于5-Fu组(0.515±0.019、189.700±4.833比0.660±0.010、245.400±8.491，t＝6.625、5.701，P<0.01)。5-Fu组的上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)表达低于对照组(0.014±0.000比0.057±0.001，t＝39.980，P<0.01)，而5-Fu+CQ组的E-cadherin表达高于5-Fu组(0.053±0.002比0.014±0.000，t＝22.910，P<0.01)。5-Fu组的神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、转录因子(Snail)蛋白和转化生长因子-β(TGF-β)的表达高于对照组(0.265±0.003、0.277±0.006、0.154±0.002比0.126±0.004、0.195±0.003、0.067±0.002，t＝27.790、12.050、30.950，P<0.01)，而5-Fu+CQ组的N-cadherin、Snail和TGF-β的表达低于5-Fu组(0.184±0.003、0.219±0.011、0.106±0.003比0.265±0.003、0.277±0.006、0.154±0.002，t＝18.610、4.743、12.520，P<0.01)。结论CQ可以降低5-Fu化疗引起的结肠癌细胞自噬，并促进其凋亡，同时可能通过EMT途径降低其侵袭迁移能力。

简介：摘要目的研究miR-539-5p对雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2B阿帕鲁胺（ARN-509）敏感性及恶性表型的影响及相关机制。方法获取去势抵抗性前列腺癌、去势敏感性前列腺癌及良性前列腺组织，并选取处于对数生长期C4-2B前列腺癌细胞，传代扩增后，采用miR-539-5p质粒对C4-2B细胞系进行转染，共分为空白组，转染组（miR-539-5p质粒）及对照组（对照质粒）。qPCR检测组织及3组细胞中miR-539-5p、AR及热休克因子结合蛋白1（heat shock factor binding protein 1，HSBP1）基因的表达含量；Western blot检测3组细胞雄激素受体AR及HSBP1的蛋白表达含量；Transwell实验检测3组细胞的侵袭迁移能力；CCK-8法检测3组细胞的增殖能力及雄激素受体拮抗剂ARN-509的半抑制浓度（IC50）；平板克隆实验检测3组细胞的克隆形成能力。结果组织qPCR提示：良性前列腺组织、前列腺癌去势敏感患者肿瘤组织及前列腺癌去势抵抗患者肿瘤组织miR-539-5p的表达分别为0.29±0.04、0.17±0.02、0.07±0.01，AR的表达分别为0.13±0.02、0.28±0.04、0.79±0.11，HSBP1的表达分别为0.20±0.03、0.38±0.04、0.72±0.11。相比良性前列腺组织和前列腺癌组织，前列腺癌去势抵抗患者的组织中AR及HSBP1基因的表达含量较高，miR-539-5p表达较低（P<0.001）。细胞qPCR提示：空白组、对照组及转染组miR-539-5p表达分别为1.00±0.09、1.07±0.11、7.19±0.51，AR的表达分别为1.00±0.10、1.03±0.14、0.51±0.08，HSBP1的表达分别为1.00±0.10、0.96±0.12、0.97±0.11。转染组细胞的miR-539-5p表达显著高于对照组及空白组，AR基因表达含量明显低于对照组及空白组，HSBP1基因表达水平无显著差异。Western blot显示：空白组、对照组及转染组AR的蛋白表达分别为1.00±0.10、1.12±0.22、0.72±0.16，HSBP1的蛋白表达分别为1.00±0.10、0.94±0.18、0.48±0.11，转染组细胞的AR及HSBP1的蛋白表达明显少于对照组及空白组。Transwell实验显示：转染组侵袭及迁移细胞明显少于对照组及空白组。CCK-8法及平板克隆实验结果显示：转染组细胞的增殖能力及克隆形成数明显少于对照组及空白组。与空白组及对照组细胞相比，转染组细胞ARN-509的IC50值显著降低。结论miR-539-5p可能通过干扰HSBP1的翻译水平，抑制细胞的恶性表型及去势抵抗。

简介：摘要目的通过网状Meta分析确定内皮素受体拮抗剂联合5型磷酸二酯酶抑制剂治疗动脉性肺动脉高压（PAH）的有效性和安全性。方法使用标准检索式［（“Pulmonary Arterial Hypertension”OR“PAH”）AND（“Bosentan”OR“Ambrisentan”OR“Macitentan”OR“Sildenafil”OR“Tadalafil”）］检索PubMed和Cochrane Library数据库；使用检索词“肺动脉高压”“波生坦”“安立生坦”“马西腾坦”“西地那非”“他达拉非”检索中国知网（CNKI）、万方数据和维普等中文数据库。检索时间截至2021年2月12日。阅读所有文献筛选纳入比较3种内皮素受体拮抗剂和2种5型磷酸二酯酶抑制剂以及联合治疗方案治疗动脉性肺动脉高压的随机对照临床试验（RCT）。以随访12~16周6 min步行距离作为主要结果指标，病死率、临床恶化率、WHO心功能提升、不良事件（AE）和严重不良事件（SAE）作为关键的次要结果指标。使用STATA 16.0软件进行网状Meta分析，合并估计结果的优势比（OR）或加权平均差（WMD）和95%置信区间（CI）。使用累积排名曲线下面积（SUCRA）来计算各干预项的概率，帮助解释OR或WMD。结果共纳入29篇文献，包含5 949例PAH患者。网状Meta分析结果显示，在改善6 min步行距离方面，与安慰剂比较，波生坦+西地那非提升最大（WMD=53.93，95%CI：6.19~101.66），其次为波生坦+他达拉非（WMD=50.84，95%CI：7.05~94.62），安立生坦+他达拉非（WMD=46.67，95%CI：15.88~77.45），波生坦（WMD=29.44，95%CI：5.86~53.02），安立生坦（WMD=23.90，95%CI：0.31~47.48），马西腾坦（WMD=21.57，95%CI：2.45~40.69）。不同干预措施对提高动脉性肺动脉高压患者6 min步行距离的效果，根据SUCRA排序依次为：波生坦+西地那非（82.9%）>波生坦+他达拉非（78.4%）>安立生坦+他达拉非（77.1%）>波生坦（49.2%）>西地那非（48.5%）>安立生坦（40.3%）>马西腾坦（37.3%）>他达拉非（33.0%）>安慰剂（3.3%）。在提高WHO心功能分级方面，与安慰剂相比，西地那非最优（OR=2.90，95%CI：1.04~8.08），其次为波生坦（OR=2.15，95%CI：1.15-4.04），其余差异均无统计学意义。在降低临床恶化率方面，相较于安慰剂，波生坦+他达拉非最优（OR=0.08，95%CI：0.01~0.49），其次依次为波生坦（OR=0.20，95%CI：0.11~0.38），波生坦+西地那非（OR=0.21，95%CI：0.09~0.46），安立生坦+他达拉非（OR=0.27，95%CI：0.15~0.50），西地那非（OR=0.33，95%CI：0.17~0.66），他达拉非（OR=0.44，95%CI：0.21~0.90）。在不良事件发生率与严重不良事件发生率方面，所有干预措施与安慰剂相比差异均无统计学意义。在病死率方面，安立生坦（OR=0.28，95%CI：0.11~0.74）在统计学上优于安慰剂，其余差异均无统计学意义。结论内皮素受体拮抗剂与5型磷酸二酯酶抑制剂联合治疗方案在短期改善运动功能方面均表现较好。并且在安全性方面，与单药治疗并无明显差异。然而，未来在选择治疗方案时，应该根据患者的个体化情况以及患者的需求进行选择。

简介：摘要目的评价miR-20a-5p在M1型小胶质细胞加重氧糖剥夺-复糖复氧(OGD/R)后神经元损伤中的作用及其与线粒体融合蛋白2(MFN2)的关系。方法将生长良好的BV2小胶质细胞(M0型)用脂多糖(100 ng/ml)和干扰素-γ(20 ng/ml)诱导小胶质细胞极化为M1表型，并通过qRT-PCR和免疫荧光法进行鉴定。将生长良好的N2a细胞采用随机数字表法分为6组(n＝6)：对照组(C组)、OGD/R组(OGD/R组)、M0型小胶质细胞共培养组(M0组)、M1型小胶质细胞共培养组(M1组)、转染miR-20a-5p抑制剂组(I组)和阴性对照组(NC组)。C组细胞常规培养；OGD/R组氧糖剥夺3 h，复糖复氧24 h制备N2a细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤模型；M0组氧糖剥夺3 h，复糖复氧时与M0型小胶质细胞共培养24 h；M1组氧糖剥夺3 h后复糖复氧时与M1型小胶质细胞共培养24 h；I组和NC组分别将转染试剂miR-20a-5p抑制剂和阴性对照miRNA转染至M1型小胶质细胞后，将N2a细胞氧糖剥夺3 h，复糖复氧时与转染后的M1型小胶质细胞共培养24 h。采用CCK-8法测定细胞活力，测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量，采用qRT-PCR法检测miR-20a-5p和MFN2 mRNA的表达，采用Western blot法检测MFN2表达。结果与C组比较，其余5组细胞活力降低，LDH漏出量增加，MFN2及其mRNA表达下调，OGD/R组、M0组和M1组miR-20a-5p表达上调，I组miR-20a-5p表达下调(P<0.05)；OGD/R组与M0组细胞活力、LDH漏出量、miR-20a-5p、MFN2及其mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。与OGD/R组和M0组比较，M1组细胞活力下降，LDH漏出量增加，MFN2及其mRNA表达下调，miR-20a-5p表达上调(P<0.05)；与M1组比较，I组细胞活力增加，LDH漏出量下降，MFN2及其mRNA表达上调，miR-20a-5p表达下调(P<0.05)。结论M1型小胶质细胞加重N2a细胞OGD/R损伤的机制可能与M1型小胶质细胞miR-20a-5p表达上调抑制N2a细胞MFN2表达有关。

简介：摘要目的探讨早产儿微创法给予表面活性物质(LISA)替代气管导管给药，是否存在5~9岁时第1秒用力呼气容积(FEV1)低于正常值。方法这是一项多中心、随机对照研究，选取2009年4月至2012年3月在13个三级新生儿重症监护室胎龄23~26周出生的早产儿，共计211例早产儿纳入研究，LISA给药组(n＝107)和常规气管插管表面活性剂治疗组(n＝104)。将FEV1<预测值的80%作为主要检测指标，后续评估由双盲小组进行。结果121例中有102例肺活量测定成功，其余患儿因死亡或走失无法追踪。LISA组FEV1中位数为预测值的93%(四分位数范围：80%~113%)，对照组为86%(四分位数范围77%~102%)(P＝0.685)，FEV1<80%的发生率分别为11/57(19%)和15/45(33%)，绝对风险降低14%(95%可信区间：－3.1%至31.2%，P＝0.235)。结论两组间5~9岁儿童FEV1低于正常值的比例不存在显著差异。

简介：摘要目的检测IL-2/Janus激酶3（JAK3）/信号转导和转录激活因子（STAT）5信号通路在AS患者外周血中的表达并探讨其在AS发生发展中的作用机制。方法收集30例AS活动期患者（ASA）、30例AS稳定期患者（ASS）和50名健康体检者（HC）的临床资料、外周血标本及实验室检查指标。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测JAK3、STAT5a及STAT5b mRNA表达水平；采用蛋白质印迹法检测JAK3、STAT5a和STAT5b蛋白及磷酸化蛋白表达水平；采用ELISA检测血浆中IL-2浓度。计量资料符合正态分布采用两独立样本t检验或单因素方差分析，3组间两两比较采用LSD-t检验，非正态分布用Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis H检验，分类变量关联性分析采用χ2检验，变量间相关分析采用Spearman相关分析，采用受试者工作特征（ROC）曲线评估JAK3、STAT5a和STAT5b mRNA表达水平监测AS活动性的价值。结果①JAK3、STAT5a和STAT5b的mRNA表达水平在3组间的差异均有统计学意义（F=65.98，P<0.001；F=21.15，P<0.001；F=13.67，P<0.001），ASA组JAK3 mRNA表达水平（2.5±0.9）明显高于ASS组（1.1±0.4）和健康体检者组（1.0±0.5），差异有统计学意义（P均<0.001），ASA组STAT5a mRNA表达水平（1.4±0.3）明显高于ASS组（0.9±0.3）和健康体检者组（1.0±0.3），差异均有统计学意义（P<0.001），ASA组STAT5b mRNA表达水平（1.5±0.6）明显高于ASS组（1.0±0.4）和健康体检者组（1.0±0.4），差异均有统计学意义（P<0.001），AS患者中HLA-B27阳性组JAK3 mRNA表达水平（1.92±1.01）高于HLA-B27阴性组（1.44±0.60），差异有统计学意义（t=-2.22，P=0.032）。JAK3、STAT5a和STAT5b蛋白磷酸化水平在3组间的差异均有统计学意义（F=91.56，P<0.001；F=25.15，P<0.001；F=178.59，P<0.001），ASA组JAK3蛋白磷酸化水平（1.035±0.076）明显高于ASS组（0.568±0.019）和健康体检者组（0.536±0.064），差异均有统计学意义（P<0.001），ASA组STAT5a蛋白磷酸化水平（1.166±0.096）明显高于ASS组（0.923±0.018）和健康体检者组（0.911±0.017），差异均有统计学意义（P<0.001），ASA组STAT5b蛋白磷酸化水平（0.81±0.05）明显高于ASS组（0.21±0.03）和健康体检者组（0.24±0.07），差异均有统计学意义（P<0.001）。血浆中IL-2浓度在3组间的差异有统计学意义（F=3.32，P=0.040），ASA组患者IL-2浓度[（110±40）pg/ml]明显高于ASS组[（89±40）pg/ml]和健康体检者组[（88±39）pg/ml]，差异有统计学意义（P=0.044，P=0.016）。②Spearman相关分析显示：在AS患者中STAT5a mRNA表达水平与血小板呈正相关（r=0.353，P=0.006）；ASA组JAK3 mRNA表达水平与IL-2浓度呈正相关（r=0.766，P<0.001），与肾小球滤过率估计值呈负相关（r=-0.485，P=0.007），STAT5a mRNA表达水平与ESR呈正相关（r=0.680，P<0.001），STAT5b mRNA表达水平与hs-CRP呈正相关（r=0.823，P<0.001）。③ROC曲线显示：JAK3 mRNA表达水平预测ASA的ROC曲线下面积（AUC）95%CI为0.920（0.853，0.987），灵敏度和特异度分别是86.7%和90.0%；STAT5a mRNA表达水平预测ASA的AUC 95%CI为0.874（0.787，0.961），灵敏度和特异度分别是96.7%和66.7%；STAT5b mRNA表达水平预测ASA的AUC 95%CI为0.749（0.617，0.881），灵敏度和特异度分别是73.3%和80.0%。结论IL-2/JAK3/STAT5可能参与了AS的发病，并且JAK3 mRNA可作为监测AS疾病活动性的生物学指标。

简介：

简介：摘要目的探讨肿瘤最大径≥4 cm的局部进展期Siewert Ⅱ、Ⅲ型食管胃结合部腺癌（AEG）行脾门淋巴结清扫的远期疗效。方法回顾性分析2010年1月至2016年4月489例在福建医科大学附属协和医院胃外科接受根治性切除的肿瘤最大径≥4 cm的局部进展期Siewert Ⅱ、Ⅲ型AEG患者的资料。男性383例，女性106例，年龄≥65岁者225例，<65岁者264例。接受脾门淋巴结清扫270例（清扫组），未接受脾门淋巴结清扫219例（未清扫组）。组间资料比较采用Wilcoxon秩和检验或χ2检验，采用Cox比例风险模型分析脾门清扫与术后总体生存的关系，Kaplan-Meier法绘制生存曲线，Log-rank检验分析组间总体生存率的差异。结果随访截至2021年4月，中位随访时间为78.0个月（范围：74.0~85.0个月），随访率为95.5%（467/489）。清扫组患者脾门淋巴结转移率为12.6%（34/270）。与未清扫组相比，清扫组年龄<65岁比例更高、术前合并症更少，术后接受辅助化疗的比例更高（χ2∶5.644~6.744，P值均˂0.05）。多因素分析结果显示，脾门淋巴结清扫是此类型AEG患者总体生存的预后因素（HR=0.68，95%CI：0.52~0.88，P=0.004），术前CA19-9、病理T分期、病理N分期、辅助化疗和术后并发症亦是该类患者总体生存的预后因素（P值均˂0.05）。亚组分析结果显示，Siewert Ⅱ型患者中，清扫组与未清扫组的5年总体生存率相当（57.3%比53.7%，χ2=3.031，P=0.805）；Siewert Ⅲ型患者中，清扫组优于未清扫组（62.4%比39.2%，χ2=17.983，P=0.006）。结论在腹腔镜手术经验成熟的中心，对肿瘤最大径≥4 cm的局部进展期Siewert Ⅲ型AEG行脾门淋巴结清扫能改善患者的远期预后。

简介：摘要目的观察尿道上皮细胞中BTB-CNC异体同源体1(BACH1)对转化生长因子-β(TGF-β)信号通路的影响，从而参与微小RNA(miR)-155-5p诱导的炎症和纤维化的调节。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测BACH1敲低或过表达后SV-HUC-1细胞中的TGF-β信号通路TGF-β、信号转导分子7(Smad7)和信号转导分子3(Smad3)的信使RNA(mRNA)和蛋白水平。我们在转染了miR-155-5p的细胞中过表达了BACH1，酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-1β和IL-6水平，RT-qPCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、TGF-β、Smad3和Smad7的表达水平。采用单因素方差分析比较两组间差异。结果TGF-β和Smad3的mRNA表达水平(2.14±0.11比0.99±0.07，F＝238.581；1.78±0.06比0.96±0.08，F＝201.720，P<0.01)，和蛋白表达水平(1.36±0.08比1.0±0.08，F＝32.911；1.34±0.04比1.01±0.08，F＝39.361，P<0.05)在BACH1敲低后升高，在BACH1过表达后下降(mRNA水平分别为0.39±0.06比1.09±0.04，F＝246.369；0.56±0.09比1.04±0.11，F＝36.668；蛋白水平分别为0.31±0.12比1.00±0.07，F＝81.323；0.63±0.05比0.98±0.14，F＝16.026，P<0.01)，而Smad7的mRNA水平(0.50±0.07比1.01±0.06，F＝105.446)和蛋白水平(0.40±0.08比1.00±0.11，F＝58.835)被BACH1小干扰RNA(siRNA)下调，P<0.01，在BACH1过表达后上调(mRNA水平为1.67±0.11比1.05±0.09，F＝55.960；蛋白水平为1.80±0.16比0.99±0.10，F＝52.571，P<0.01)。由miR-155-5p mimics引起的IL-1β、IL-6和TNF-α水平的增加因BACH1过表达而减弱(497.60±16.85比287.83±14.89比310.30±13.77，F＝171.691；795.17±34.84比396.53±24.59比425.67±21.39，F＝195.307；764.43±27.05比401.67±23.06比454.9±24.76，F＝184.088，P<0.01)。由miR-155-5p mimics诱导的VEGF、FN和Collagen Ⅳ的上调也被BACH1过表达阻断(1.90±0.10比0.95±0.05比1.21±0.05，F＝111.524；2.03±0.11比0.98±0.09比1.11±0.07，F＝121.346；1.91±0.11比1.11±0.06比0.94±0.04，F＝151.621，P<0.01)。TGF-β/smad信号通路相关因子TGF-β、Smad3和Smad7被过表达miR-155-5p激活，但BACH1共表达后，TGF-β/smad信号通路活性受到抑制(2.18±0.06比0.97±0.06比0.92±0.11，F＝240.091；1.64±0.11比1.01±0.08比0.92±0.03，F＝67.813；0.41±0.06比1.00±0.06比0.89±0.08，F＝65.57，P<0.01)。结论BACH1抑制尿道上皮细胞中TGF-β信号通路的激活从而阻断miR-155-5p诱导的炎性反应。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA 钾电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录物1（Kcnq1ot1）通过调节miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞胰岛素分泌的作用机制。方法自2020年6至12月在中山大学附属第三医院招募初诊2型糖尿病（T2DM）患者25例，同时招募年龄匹配且无糖尿病的受试者21例作为对照组。收集受试者的年龄、体重指数（BMI），检测空腹血糖（FPG）和糖化血红蛋白（HbA1c），采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测血清中Kcnq1ot1表达量，并分析其与FPG和HbA1c的相关性。12只5周龄雄性C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为高脂饮食（HFD）组（n=6）和正常饮食（CD）组（n=6），喂养20周后，提取原代胰岛细胞RNA。将体外培养的Min6细胞分为牛血清白蛋白（BSA）组和棕榈酸（PA，400 μmol/L）组；按照是否转染Kcnq1ot1 siRNA分为si-NC组和si-Kcnq1ot1组；按照是否转染miR-92a-1-5p的模拟物或抑制剂分为：模拟物对照组、模拟物组、抑制剂对照组和抑制剂组；按照转染Kcnq1ot1/NC siRNA后是否加入抑制剂分为si-NC+抑制剂对照组、si-Kcnq1ot1+抑制剂对照组、si-NC+抑制剂组和si-Kcnq1ot1+抑制剂组。采用qRT-PCR检测Kcnq1ot1、miR-92a-1-5p和胰岛素转录本1（Ins1）、胰岛素转录本2（Ins2）、胰岛素受体（Insr）、NK6同源盒蛋白1（Nkx6.1）、胰岛素受体底物1（Irs1）和神经生成素3（Ngn3）mRNA水平；Western blotting检测胰岛素和Insr蛋白表达水平；葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测胰岛素分泌水平；双荧光素酶报告基因实验验证Kcnq1ot1与miR-92a-1-5p之间的直接作用关系。各组间指标的差异比较采用独立样本t检验、方差分析，采用Pearson相关分析法分析受试者Kcnq1ot1表达量与FPG和HbA1c的相关性。结果T2DM患者血清中Kcnq1ot1的表达量较对照组显著下调（P<0.01），且Kcnq1ot1的表达量与FPG和HbA1c呈负相关关系（r=-0.52、-0.49，均P<0.05）。与CD组相比，HFD组小鼠胰岛中Kcnq1ot1表达量下调（P<0.001）。在Min6细胞中，与BSA组相比，PA组细胞中Kcnq1ot1表达量下调（P<0.01）；与si-NC组相比，si-Kcnq1ot1组葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低（P<0.05），且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均降低（P<0.05）；与模拟物对照组相比，模拟物组葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低（P<0.05），且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均降低（P<0.05）；与抑制剂对照组相比，抑制剂组葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平升高（P<0.05），且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均升高（P<0.05）。双荧光素酶报告实验显示，模拟物和Kcnq1ot1-WT质粒共转染细胞后，Kcnq1ot1-WT荧光素酶活性降低（P<0.05）；抑制剂和Kcnq1ot1-WT质粒共转染细胞后，Kcnq1ot1-WT的荧光素酶活性显著升高（P<0.05）。与si-NC组相比，si-Kcnq1ot1组miR-92a-1-5p表达升高（P<0.05）；与si-Kcnq1ot1+抑制剂对照组相比，si-Kcnq1ot1+抑制剂组Min6细胞中的Ins1、Ins2、Insr、Irs1和Ngn3转录水平及胰岛素和Insr的蛋白水平升高（P<0.05）。结论长链非编码RNA Kcnq1ot1可能通过靶向调控miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞功能。

简介：摘要目的探讨5次跨膜蛋白(CD133)及POU3同源盒基因3相关长链非编码RNA(PANTR1)在乳腺癌中的表达特征及其与细胞体外增殖和侵袭能力的关系。方法将首都医科大学附属北京妇产医院乳腺科从2019年2月~2021年2月收治的50例乳腺癌患者纳入研究，分别采集乳腺癌组织以及癌旁正常组织，采用反转录聚合酶链反应(PCR)检测不同组织中CD133及PANTR1表达情况。此外，取MCF-7细胞分作对照组、CD133过表达组、PANTR1过表达组、CD133抑制组、PANTR1抑制组。分别予以Lipofectamine 2000转染，CD133过表达组予以Lipofectamine 2000以及CD133序列，PANTR1过表达组予以Lipofectamine 2000以及PANTR1序列，CD133抑制组予以Lipofectamine 2000以及si-CD133序列，PANTR1抑制组予以Lipofectamine 2000以及si-PANTR1序列。分析各组细胞增殖和侵袭能力的差异，Pum1及E2F3蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果乳腺癌组织CD133及PANTR1 mRNA相对表达量高于癌旁正常组织(0.021±0.001比0.006±0.001、0.016±0.002比0.005±0.001，t＝75.000、74.785，P<0.01)。转染24、48、72 h时CD133过表达组细胞增殖倍数高于对照组(3.05±0.26、5.40±0.48、10.74±1.27比2.17±0.25、4.38±0.42、6.97±0.84，t＝4.226、2.783、4.298，P<0.05)，且转染24 h侵袭细胞数高于对照组(75.29±7.19比54.01±6.27，t＝3.865，P<0.05)；转染24、48、72 h时PANTR1过表达组细胞增殖倍数高于对照组(3.11±0.28、5.45±0.51、10.05±1.24比2.17±0.25、4.38±0.42、6.97±0.84，t＝4.372、3.003、3.570，P<0.05)，且转染24 h侵袭细胞数高于对照组(76.03±7.26比54.01±6.27，t＝3.977，P<0.01)。CD133过表达组细胞中Pum1及E2F3蛋白表达量均高于对照组(4.52±0.75、3.38±0.56比1.00±0.04、1.00±0.03，t＝8.118、7.351，P<0.05)；PANTR1过表达组细胞中Pum1及E2F3蛋白表达量均高于对照组(4.55±0.76、3.41±0.59比1.00±0.04、1.00±0.03，t＝8.079、7.066，P<0.01)；而CD133抑制组细胞中Pum1及E2F3蛋白表达量均低于对照组(0.45±0.02、0.37±0.03比1.00±0.04、1.00±0.03，t＝21.301、25.720，P<0.01)；PANTR1抑制组细胞中Pum1及E2F3蛋白表达量均低于对照组(0.47±0.03、0.38±0.02比1.00±0.04、1.00±0.03，t＝18.360、29.784，P<0.01)。结论CD133及PANTR1在乳腺癌中均存在明显高表达，且可增强细胞体外增殖和侵袭能力，值得临床重点关注。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1靶向微小RNA(miR)-149-5p对于脑胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其分子机制。方法采用Lipofectamine 2000进行细胞转染构建si-NEAT1组、过表达miR-149-5p组和miR-149-5p抑制组，细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖抑制率，双荧光素酶报告基因分析Lnc NEAT1靶向调控miR-149-5p，Transwell小室法检测迁移和侵袭细胞数，蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达，组间比较采用t检验。结果人胶质瘤细胞U251中NEAT1水平(1.03±0.05)明显增加(t＝13.613，P<0.01)，而miR-149-5p(0.41±0.07)则是明显降低(t＝12.111，P<0.01)。抑制NEAT1表达，si-NEAT1组细胞增殖抑制率明显增加[(29.48±2.67)%，t＝13.809，P<0.01]，而细胞迁移数[(35.33±7.57)个]和侵袭数[(27.33±6.81)个]则明显降低(t＝4.395、4.962，P<0.05)，磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)水平明显降低(t＝6.959、8.661，P<0.05)。过表达miR-149-5p，细胞增殖抑制率[(29.32±6.41)%]同样明显增加(t＝6.922，P<0.05)，细胞迁移数(35.67±6.51)和侵袭数(28.00±8.89)同样明显降低(t＝4.392、4.471，P<0.05)，p-Akt和p-mTOR水平明显降低(t＝4.337、9.981，P<0.05)。NEAT1-WT活性受到miR-149-5p的抑制(t＝15.251，P<0.01)，转染pc-DNA-NEAT1能显著降低miR-149-5p(t＝8.178，P<0.01)，而转染si-NEAT1则明显上调miR-149-5p(t＝5.988，P<0.05)。与si-NEAT1+抗NC组比较，si-NEAT1+抗miR-149-5p组细胞增殖抑制率表达明显降低(t＝7.955、13.261，P<0.05)，而迁移细胞数、侵袭细胞数、p-Akt和p-mTOR水平明显增加(t＝4.841、3.784、5.589、4.572，P<0.05)。结论Lnc NEAT1靶向miR-149-5p调控Akt/mTOR信号通路可促进脑胶质瘤细胞增殖和转移，抑制miR-149-5p表达可逆转抑制Lnc NEAT1表达后对于脑胶质瘤细胞增殖和转移的影响。