简介：本研究旨在探讨microRNA-17-92对K562细胞生物学特性的影响.以K562细胞系为模型,采用lipofectin2000转染miR-17-92mimic,应用Q-PCR方法鉴定基因表达水平,CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测K562细胞增殖活性,AnnexinV-FITC/PI标记检测K562细胞的凋亡;细胞经过乙醇固定后利用流式细胞仪检测K562细胞周期变化,Westernblotting检测相关蛋白Crk的表达.结果显示：K562细胞系转染miR-17-92mimic后miR-17-92表达增高;miR-17-92高表达后K562细胞的增殖能力增强、在细胞周期方面由G1期向S期细胞增加;同时,miR-17-92mimic能够抑制乏血清诱导的K562细胞凋亡;Westernblot检测显示miR-17-92mimic促进Crk蛋白的表达.结论：miR-17-92可以促进K562细胞增殖,抑制其凋亡并调控细胞周期变化.

简介：目的探讨周期性应力下大鼠髓核细胞中Sre蛋白的磷酸化水平及其意义。方法体外培养SI）大鼠髓核细胞，取第2代细胞按1x105／mL的密度接种于玻片上。将玻片随机分成4组（n=8）：对照组、加压0．5h组、加压1．0h组、加压2．0h组。加压0．5h组、加压1．0h组、加压2．0h组细胞以0—200kPa的压力、0．1Hz的频率分别加压0．5、1．0、2．0h，对照组在无压力环境下培养。应刖Westernblot检测各组磷酸化Src（pSrc）蛋白的表达。应用PP2[4-氨基-5-（4。氯苯）-7．（t-丁基）吡畔啉酮（3，4-d）嘧啶]抑制Src蛋白，另取细胞玻片，随机分为3组（n=8）：对照组、加压6h组、PP2＋加压6h组。使用荧光实时定量多聚酶链式反应（RT-PCR）检测3组细胞中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达。结果对照组、加压0．5h组、加压1．0h组及加压2．0h组pSrc／磷酸片油醛脱氧酶灰度比值平均分别为0．244±0．013、0．477±0．044、0．530±0．014、0．700±0．063，4组之问比较差异有统计学意义（P〈0．05），除加压0．5h组与加压1．0h组之问外，其余组别之间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。荧光RT．PCR检测3组Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达结果显示：对照组表达量最低（1．00l±0．039、1．004±0．104），加压6h组最高（5．404±0．219、2．127±0．028），PP2＋加压6h组居中（3．038±0．237、1．678±0．125），3组之间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论周期性压力能促进髓核细胞Ⅱ型胶原和蛋rI多糖的分泌，Src蛋白磷酸化在压力传导中起信号传递作用。

简介：目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）分型联合细胞学检测在子宫颈病变筛查中的意义。方法收集疑似宫颈病变患者408例，分别进行细胞学和HPV基因芯片分型检测，了解各亚型HPV感染率及其与细胞学结果的相关性，判断HPV感染与年龄的关系，进行统计学分析。结果在高危型感染中居于前3位的分别是HPV16、58、52。单一高危型HPV感染率随宫颈病变级别升高呈增加趋势，且差异有统计学意义（r＝0．879，P＜0．05）。高危型HPV感染率在年龄分布上呈两端高的趋势（＜25岁和＞50岁），但各年龄组间差异无统计学意义。结论HPV分型检测宜联合细胞学应用于宫颈病变的筛查及临床治疗和随访。

简介：目的探讨二甲双胍能否增强膀胱癌5637细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导细胞凋亡的敏感性及其机制。方法MTT法检测不同浓度TRAIL(0、10、20、40、60、100ng/mL)和二甲双胍(10mM)联合用药对膀胱癌5637细胞的增殖抑制作用。AnnexinV-FITC/PI双染检测二甲双胍对TRAIL诱导5637细胞凋亡的影响。Westernblot检测二甲双胍和/或TRAIL干预5637细胞24小时后对caspase-8、caspase-3、PARP、DR4、DR5和c-FLIPL表达的影响。结果二甲双胍可增强TRAIL对膀胱癌5637细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导作用,二甲双胍单独用药并未上调DR4和DR5表达,但显著下调c-FLIPL表达。结论二甲双胍显著增强膀胱癌5637细胞对TRAIL的敏感性,其机制可能与二甲双胍下调c-FLIPL表达有关。

简介：摘要目的研究分析高三尖杉酯碱、阿糖胞苷与G-CSF联合治疗老年急性髓细胞白血病的临床效果。方法选择2010.02-2013.02期间在我院接受治疗78例急性髓细胞白血病患者，运用计算机将其平均分成2组，一组39例患者应用柔红霉素与阿糖胞苷联合治疗设为对照组；一组39例患者应用高三尖杉酯碱、阿糖胞苷联合G-CSF治疗设为研究组。结果研究组患者的总有效率约为87.18%（34/39）明显大于对照组的69.23%（27/39），差异P<0.05有统计学意义。并且研究组患者临床并发症的发生率、3年内复发率均显著小于对照组，差异P<0.05有统计学意义。结论高三尖杉酯碱、阿糖胞苷联合G-CSF治疗老年急性髓细胞白血病取得了显著成效，并且产生的毒副反应较少，远期复发率较低，更适用于临床治疗的推广、应用。

简介：目的探讨不同病程慢性乙肝（CHB）患者血清白细胞介素-32（IL-32）、总胆红素（TBIL）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及HBVDNA载量中的差异及其相关性。方法选取2011年1月至2013年5月收治的105例慢性cHB患者（轻度组32例、中度组42例、重度组31例）为研究对象，另选取100例健康体检者为对照组，两组血清IL-32采用酶联免疫法测定，TBIL、ALT、AST采用采用日立7600—020全自动生化分析仪测定，HBVDNA载量采用荧光定量PCR测定。结果与对照组相比，CHB组血清IL-32、TBIL、ALT、AST及HBVDNA栽量显著提高，差异有统计学差异（P〈0．05）。与轻、中度组相比，重度HCB组血清IL-32、TBIL、ALT、AST及HBVDNA载量显著提高，差异有统计学意义（P〈0．05）。HBVDNA高栽量组（〉10^5拷贝数／ml）血清IL-32、TBIL、ALT、AST水平显著高于HB．VDNA低载量组（〈10^5拷贝数／ml），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血清IL-32可能介导CHB炎症反应，参与CHB病情的发生及进展，血清IL-32及肝功能指标可作为CHB患者病情进展的预测指标。

简介：目的观察人脂肪来源干细胞（Humanadipose-derivedstemcells,hADSCs）在左旋聚乳酸/聚己内酯（Poly-L-lactide/Polycaprolactone,PLLMPCL）复合支架材料中的生长情况及其生物相容性.方法体外分离、培养和扩增hADSCs,制备PLLA/PCL复合支架.取PLLA/PCL浸提液培养hADSCs,CCK-8法检测细胞活力,评价支架的细胞毒性.hADSCs传代扩增后,接种到PLLA/PCL支架材料上.体外培养1周,裸鼠皮下分别培养1周、2周,HE染色观察细胞在支架上的生长情况.免疫荧光检测裸鼠体内复合支架材料内细胞平滑肌肌动蛋白（Smoothmuscleactin,SMA）表达情况.结果hADSCs在PLLA/PCL浸提液中可保持较高的增殖率,表明PLLA/PCL浸提液无细胞毒性.hADSCs接种于PLLA/PCL支架上,经体外、体内培养后,均能长入PLLA/PCL支架的孔隙内,且体内培养比体外培养有更多的细胞长入支架内部.经体内培养后,复合细胞的支架比单纯支架有更多的细胞渗入支架内部.细胞材料复合物体内培养2周后,免疫荧光检测发现,支架材料内部分细胞SMA表达阳性.结论PLLA/PCL复合支架材料,安全无毒,与hADSCs生物相容性好,可作为种子细胞的载体用于组织工程膀胱缺损修复的研究.

简介：目的探讨软骨形态发生蛋白1（CDMP1）诱导的瘢痕成纤维细胞在体内环境下的软骨构建能力。方法取瘢痕切除术后丢弃的增生性瘢痕组织,提取瘢痕成纤维细胞。将瘢痕成纤维细胞与PGA/PLA支架复合,CDMP1软骨诱导液（CDMP1终浓度为100ng/mL）进行诱导培养2周,设为诱导组（n=10）;将常规培养液培养的瘢痕成纤维细胞-材料复合物植入裸鼠体内作为阴性对照,设为非诱导组（n=4）;将软骨细胞-材料复合物植入裸鼠体内作为阳性对照,设为软骨组（n=4）。分别于4周和8周后取材,进行各组湿重、糖胺聚糖（GAG）含量测定,HE染色、Safranine-O染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果体内培养4周、8周后各组湿重、GAG含量测定显示,诱导组均高于非诱导组（P〈0.05）。体内培养4周后,诱导组HE染色结果显示,瘢痕成纤维细胞诱导后出现软骨细胞陷窝结构;Safranine-O染色结果示,GAG均匀分布于基质;免疫组织化学染色示部分瘢痕成纤维细胞基质中COLⅡ阳性表达。8周时,诱导组的类软骨结果相对4周时更加成熟,更加符合软骨结构分布。结论在CDMP1诱导下,瘢痕成纤维细胞与PGA/PLA材料复合,在体内可以形成类软骨组织,具备一定的成软骨能力。

简介：目的探讨地黄低聚糖（RGOs）对过氧化氢-血清饥饿诱导的脂肪组织来源干细胞（ASCs）凋亡的影响。方法过氧化氢（200μM）联合血清饥饿（H2O2/SD,6h）建立小型猪ASCs凋亡模型。RGOs（0.01g/L、0.1g/L、1g/L、10g/L）预处理12h并继续干预6h。AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡率,CCK-8法测定细胞活性,酶标仪比色法测定细胞caspase-3的活性。结果RGOs在一定浓度范围（0.1-10g/L）可以减轻H2O2/SD引起的ASCs损伤,表现在细胞凋亡率下降,细胞活性增加,caspase-3活性降低。结论地黄低聚糖对过氧化氢-血清饥饿诱导的脂肪组织来源干细胞的凋亡具有保护作用。

简介：目的研究新型NRG1依赖性HER3单克隆抗体对HER2过表达N87胃癌细胞Lapatinib耐药的逆转作用。方法HER2过度表达N87细胞接受不同浓度Lapatinib和/或NRG1依赖HER3单克隆抗体（3D4B3）处理后,利用CellTiter96Aqueous单溶液细胞增殖检测试剂盒检测细胞活力,利用BrdU掺入法检测细胞的增殖与凋亡。结果无NRG1刺激,Lapatinib对HER2过表达N87细胞增殖有显著抑制作用,而3D4B3几乎无抑制作用,联合应用无叠加效应。随着NRG1刺激和HER3的激活,Lapatinib的增殖抑制效应明显减弱或消失,Lapatinib联合3D4B3再次有效抑制N87细胞的增殖。结论3D4B3可能通过抑制HER2过表达N87胃癌细胞增殖部分逆转Lapatinib的耐药。

简介：目的以Ⅱ型胶原水凝胶为支架、兔骨髓恭质干细胞（BMSCs）为种子细胞构建iJI注射割组织l：程软骨，探讨其在膝关肖腔内成软骨的情况。方法以免BMSCs为种子细胞．4oCF按105／mL．的浓度接种列Ⅱ型胶原水凝胶，倒嚣相差显微镜下观察接种的细胞形态，并计算细胞存活率。选取2个月龄新两鼍大白兔12只，随机分为2组（n=6）：A组在兔左膝关节腔内植入装载Ⅱ掣胶原水凝胶-BMSCs复合物的扩散盒，B纰在兔左膝关节腔内植入装载单纯Ⅱ型胶原水凝胶的扩散盒。术后4周行左膝关节MRI检查；术后8周处死动物，通过组织学观察扩散盒中复合物作膝关节腔内的转归情况。结果Ⅱ型胶原水凝胶一兔BMSCs复合物体外培养1h后细胞呈规则圆形，分布均匀，胞浆染成株黑色；细胞存活率在95％以上。术后4周A绀与B绀MRI检查均可见游离的扩散盒影像位-3：外侧间室后方，形状完整无破损。术后8周A组HE染色见细胞数量较多，分布均匀，大部分让圆形或椭圆形，胞核深染，基质呈均一的粉红色；蕃红O染色和甲苯胺蓝染色可见大量圆形、椭圆形细胞分布．周围基质呈中到强阳性、术后8周B组HE染色呈弱阳性粉红色云雾状，其中无清晰可辨的细胞结构；蕃红O染色及甲苯胺蓝染色均呈阴性。结论Ⅱ型胶原水凝胶-BMSCs复合物能够在体生成透明软骨样组织，为其下一步往体修复大动物关节软骨缺损奠定了实验基础。

简介：背景：研究表明，干细胞治疗比药物治疗更接近于恢复患者的生理模式，细胞移植治疗已逐渐成为一种趋势。目的：观察酪氨酸羟化酶修饰的脐血间充质干细胞移植后帕金森病大鼠纹状体内多巴胺含量的变化。方法：将酶切鉴定后的新构建质粒pEGFP-C2-TH经电穿孔法转染第3代脐血间充质干细胞，注射到帕金森病大鼠右侧脑室，对照组注入PBS。观察移植细胞在大鼠脑组织内的迁移情况，高效液相色谱仪检测大鼠纹状体内多巴胺的含量。结果与结论：质粒pEGFP-C2-TH转染的脐血间充质干细胞移植后8周，细胞逐渐向脑室转移，12周时迁移至皮质，可表达酪氨酸羟化酶抗原，且实验组多巴胺含量明显高于对照组（P＜0.05）。结果表明酪氨酸羟化酶修饰的脐血间充质干细胞经脑室移植对帕金森病大鼠具有明显的治疗作用。

简介：目的：总结经后腹腔镜保留肾单住手术治疗双肾多发嫌色细胞癌的手术体会，并结合文献进行分析。方法：患者取完全健侧卧位，患侧向上，升高腰桥。分别于腋后线12肋下缘、腋前线肋弓下、腋中线髂棘上2cm穿刺10mm、5mm、10mmTrocar，气腹压力维持在13～15mmHg，建立后腹腔，完成后腹腔镜右肾部分切除、肿瘤剜除术。1个月后完成后腹腔镜左肾部分切除、肿瘤剜除术。结果：手术顺利完成，手术时间90min，术中出血量约为30ml，血管阻断时间23min。患者右侧手术后第2天肛门通气并进饮食，第2天拔除腹膜后引流管。左侧手术后第2天拔除腹膜后引流管，第3天肛门通气并进饮食。住院6d。术后随访1年，无复发、转移。结论：双肾同时性、多发嫌色细胞癌非常罕见，行后腹腔镜保留肾单位手术是安全、可行、有效的。

简介：目的：探讨在猪腹壁切口疝模型中应用菌液污染的方式制备感染型腹壁切口疝模型的可行性和聚丙烯复合脱细胞基质的新型复合补片在污染环境下耐受感染的能力。方法入组60只实验猪，随机分为3组（20例），采用切除部分腹壁肌肉的方式制备腹壁切口疝模型，后用大肠埃希菌肠液局部污染诱导产生感染病灶，形成感染窦道后，行清创手术后分别以聚丙烯-脱细胞基质材料复合补片（实验组）、单纯聚丙烯补片（对照组Ⅰ）和聚丙烯-膨化聚四氟乙烯复合补片（对照组Ⅱ）进行置入操作，术后1-12个月观察补片感染情况并取补片及周围组织，进行病理检查，以χ2检验方法对结果进行统计学分析，证实各组在污染环境下耐受感染能力的差异。结果术后观察期内实验组有1只猪出现补片感染，而对照组Ⅰ有8只猪出现补片感染，对照组Ⅱ有11只猪出现补片感染，组间存在统计学差异（P＝0．003），实验组与对照组Ⅰ之间存在统计学差异（P＝0．008），实验组与对照组Ⅱ之间存在统计学差异（P＝0．001），对照组Ⅰ与对照组Ⅱ之间无统计学差异（P＝0．342），病理检查示聚丙烯复合脱细胞基质材料的补片易于成纤维细胞的长入及新生血管的生成，感染补片细菌培养结果证实为大肠埃希菌。结论在细菌感染的环境下，相较于单纯聚丙烯补片和聚丙烯-膨化聚四氟乙烯复合补片，聚丙烯复合脱细胞基质材料的补片耐受感染能力更强，单纯聚丙烯补片和聚丙烯-膨化聚四氟乙烯复合补片耐受感染能力无明显差别，其内在的机制可能与组织易于长入及新生血管生成有关。

简介：目的探讨壳聚糖（CS）/硫酸葡聚糖（DS）/重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）微球对大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）增殖与分化的作用.方法采用离子交联法制备CS/DS/rhBMP-2微球.取SD大鼠体外培养传至第3代的BMSCs-C57.实验分为4组（n=4）：CS/DS/rhBMP-2微球组加入CS/DS/rhBMP-2微球,rhBMP-2组加入rhBMP-2,CS/DS组加入CS/DS微球,空白对照组.分别于培养2、4、6d应用四甲基偶氮唑盐比色法测定各组细胞的增殖情况;于成骨诱导培养1、3、5、7、9、11、14d采用碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒测定细胞ALP活性;于成骨诱导培养7、14d应用茜素红染色法检测各组细胞钙结节的生长情况.结果培养2、4、6d,各组之间BMSCs-C57的OD值比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.成骨诱导培养3d时,CS/DS/rhBMP-2微球组BMSCs-C57的ALP活性低于rhBMP-2组,差异有统计学意义（P＜0.05）,但是培养5d后,CS/DS/rhBMP-2微球组BMSCs-C57的ALP活性明显高于rhBMP-2组、CS/DS组和空白对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.成骨诱导培养7d,CS/DS/rhBMP-2微球组和rhBMP-2组有钙结节形成,而CS/DS组和空白对照组无钙结节形成;培养14d,CS/DS/rhBMP-2微球组和rhBMP-2组钙结节形成明显,而CS/DS组和空白对照组虽然出现了钙结节,但不明显.结论CS/DS/rhBMP-2微球对BMSCs-C57的增殖无明显作用,但具备良好的BMSCs-C57成骨诱导及分化作用.

简介：目的复制中子和叫线致肠道损伤的体外模型，探讨P13K／Akt通路的变化规律及IL-11对其调控作用，为阐明中子和γ线致伤差异的分子机制并寻找有效的防治措施提供依据。方法采用4Gy中子和10Gy1射线照射IEC-6大鼠肠上皮细胞，并于照射前12h或照射后即刻给予100ng／mt的rhIL-11，采用Westernblot和图像分析技术检测IEC-6细胞P13K、PDKl、PTEN和Akt表达及活化的变化。结果^y射线照射后6h，IEC-6细胞P13K表达和Akt活化减弱，Akt表达、PDKl及PTEN活化增加；IL-11处理组P13K表达和Akt活化增加，Akt表达、PDKl及PTEN活化减弱。中子照后6h，IEC-6细胞P13K表达减少，24h恢复；照后6-24h，PDKl及trFEN活化增加，Akt活化减弱，程度较γ线更重；IL-11处理组照后6-24h，P13K表达和Akt活化增强，PDKl和ＰＴEN活化减弱，但效果不如在．γ线时显著。结论中子射线对肠上皮细胞P13K／Akt通路活化作用较γ射线更重，且IL-11对抗P13K／Akt通路抑制效果不如γ线时显著。这可能是中子和γ线致伤差异的分子机制，也是中子辐射防护更难的原因。

简介：背景：类风湿性关节炎是自身免疫性疾病，传统治疗方法很难有效解决患者免疫耐受机制缺失的问题。随着干细胞再生医学的发展，应用干细胞治疗免疫性疾病成为热点。目前国内外对于细胞移植治疗类风湿性关节炎少有报道。目的：探讨脐带间充质干细胞对类风湿性关节炎患者Th1/Th2、Treg变化的影响，为类风湿性关节炎寻找新的治疗方法。〈br〉方法：180例类风湿性关节炎患者，其中27例为对照组，给予非类固醇抗炎药和抗风湿药，153例为治疗组，静脉输注细胞数为4×10^7的脐带间充质干细胞40mL，用药方案与对照组相同，76例患者在第1次细胞治疗的三四个月后接受了2次脐带间充质干细胞治疗。随访治疗后3，6个月进行临床有效性评估（DAS28、HAQ、ACR20）、类风湿因子、抗CCP抗体、T细胞亚群、Th细胞因子检测。部分2次细胞治疗患者随访至8个月检测Treg、T细胞亚群。结果与结论：①随访3个月时，细胞治疗组DAS28评分、HAQ评分、ACR20较对照组下降明显，差异有非常显著性意义（P＜0.01）。②脐带间充质干细胞治疗3，6个月的DAS28评分、HAQ评分较治疗前明显下降（＜0.01），2次治疗较1次治疗继续下降（P＜0.01）。③治疗后3，6个月γ-干扰素水平较治疗前变化不明显，治疗后6个月白细胞介素4水平较治疗前逐渐上升（P＜0.05）。④治疗后3，6个月Treg较治疗前明显上升（P＜0.01），同时治疗后Treg升高与ACR明显相关，尤其是ACR70百分率（P＜0.05）；治疗后3个月CD4＋Treg比率明显升高（P＜0.05），6，8个月时与治疗前相比也是升高趋势，但差异无显著性意义（P＞0.05）。⑤治疗后6个月B细胞水平明显下降（P＜0.05）；治疗后3，6个月类风湿因子较治疗前均明显下降（P＜0.05）。⑥治疗后3，6个月抗CCP抗体和白细胞介素17水平变化不大。结果表明类风湿�

简介：目的观察母孕期及哺乳期不同含量n-3多不饱和脂肪酸（PUFAs）饲料对成年期仔鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法使用6～8W龄清洁级C57BL／6J雌性小鼠，随机分为5组，每组10只，分别给予n-3PUFAs缺乏和3种不同比例n-6／n-3PUFAs（n-6／n-3PUFAs比值分别为15：1、5：1、1：1）饲料及1种高含量鱼油n一3PUFAs饲料（n-6／n-3PUFAs比值为1：5）喂养。小鼠12～14W龄时雌雄合笼交配繁殖，仔鼠断乳后继续行母鼠相同饲料喂养，选取生后3m成年仔鼠用于实验。取脑进行组织固定，采用免疫组织化学技术对脑组织海马区Bcl-2和BaX表达进行定量分析。结果与n-3PUFAs缺乏组相比，n-3PUFAs饲料喂养组，尤其是13—6／n-3PUFAs比值（5：1）和（1：1）组小鼠海马CA3区神经细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加（P〈0．05），而致凋亡蛋白Bax表达则显著降低（P〈0．05）。但高含量鱼油n一3PUFAs喂养组（即n-6／n-3PUFAs1：5组）与n一3PUFAs缺乏组相比未表现出显著性差异。结论孕期及哺乳期添加13—3PUFAs，尤其是n～6／n-3PUFAs比值在5～1：1之间时有助于减少成年仔鼠脑组织神经细胞凋亡的发生，而过高含量n-3PUFAs摄入则未对脑凋亡发生起到积极作用。