简介：摘要肾纤维化的主要特征为肾间质中成纤维细胞增生和细胞外基质的过量沉积，最终造成肾组织结构损伤及功能丧失。转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路是调节成纤维细胞和肌成纤维细胞胶原形成的典型途径。TGF-β1/Smad信号传导途径的持续激活导致成纤维细胞和肌成纤维细胞长期过度活化，对于肾纤维化的形成是必需的。本文对TGF-β1/Smad通路对肾纤维化的机制以及中药对其干预进行综述，为肾疾病的治疗提供新的靶点。

简介：摘要目的制备68Ga－成纤维细胞活化蛋白抑制剂(FAPI)－04，进行实验研究及健康志愿者PET/CT显像，探讨其临床转化价值。方法手工标记68Ga－FAPI－04，进行标记率、放化纯及体内外稳定性检测。取ICR小鼠16只，于注射68Ga－FAPI－04 1.11 MBq后5、30、60和120 min分别处死(每个时间点4只)，获得主要器官的放射性计数，计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。另取3只ICR小鼠，于注射68Ga－FAPI－04后行microPET动态显像，观察药物在正常小鼠体内的药代动力学特性。利用HepG2人肝细胞肝癌动物模型观察肿瘤对68Ga－FAPI－04摄取情况。予2名健康志愿者(男女各1名，年龄分别为64岁、56岁)注射68Ga－FAPI－04后行PET/CT摇篮床动态显像，观察体内68Ga－FAPI－04分布情况。结果68Ga－FAPI－04手工合成需时约20 min，放化产率为(68.7±4.0)%(经衰变校正)，放化纯>99%。室温放置180 min及血样中放置90 min，测定放化纯仍>99%。ICR小鼠体内生物学分布及microPET显像均提示68Ga－FAPI－04主要通过泌尿系统排泄，其余器官放射性摄取较低。荷HepG2瘤裸鼠microPET显像示肿瘤显像清晰，35 min时肿瘤与肝的靶本底比值(TBR)为2.14±0.01。健康志愿者PET/CT显像表明68Ga－FAPI－04在体内清除迅速。结论68Ga－FAPI－04合成工艺简单，质量控制合格，动物实验结果及健康志愿者显像良好，是一种非常有应用前景的成纤维细胞活化蛋白(FAP)显像剂。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-214-5p对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)(购自上海信裕生物技术有限公司)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法检测62例正常皮肤组织和62例皮肤瘢痕疙瘩患者miR-214-5p表达。将miR-NC(miR-NC组)、miR-214-5p(miR-214-5p组)、si-NC(si-NC组)、si-鼠双微体2基因(MDM2)(si-MDM2组)、anti-miR-NC(anti-miR-NC组)、anti-miR-214-5p(anti-miR-214-5p组)、miR-214-5p＋pcDNA3.1(miR-214-5p＋pcDNA3.1组)和miR-214-5p＋pcDNA3.1-MDM2(miR-214-5p＋pcDNA3.1-MDM2组)转染至KF细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-214-5p表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达；细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞凋亡；双荧光素酶报告基因检测细胞荧光活性。采用t检验或单因素方差分析比较两组或多组间均数差异。结果与miR-NC组比较，miR-214-5p组KF细胞细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、吸光度(A450)值和B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)显著降低(分别为0.23±0.02比0.80±0.08、0.52±0.05比0.97±0.09、0.16±0.02比0.68±0.06，t＝20.737、13.695、24.661，P<0.05)，miR-214-5p、p21、bcl-2相关X蛋白(bax)和凋亡率显著升高[分别为0.51±0.05比0.14±0.01、0.95±0.09比0.27±0.02、0.79±0.08比0.14±0.04、(23.57±2.23)%比(8.16±0.85)%，t＝21.769、22.127、21.802、19.371，P<0.05]。与si-NC组比较，si-MDM2组KF细胞MDM2、Cyclin D1、A450和bcl-2显著降低(分别为0.33±0.03比0.84±0.07、0.37±0.03比0.82±0.07、0.64±0.06比0.97±0.08、0.26±0.03比0.66±0.05，t＝14.621、12.328、7.926、6.112，P<0.05)，p21、bax和凋亡率显著升高[分别为0.73±0.07比0.26±0.03、0.61±0.06比0.13±0.05、(18.27±1.53)%比(8.23±0.95)%，t＝15.477、10.386、11.149，P<0.05]。与miR-214-5p＋pcDNA3.1组比较，miR-214-5p＋pcDNA3.1-MDM2组KF细胞MDM2、Cyclin D1、A450值和bcl-2显著升高(分别为0.57±0.06比0.23±0.02、0.50±0.05比0.22±0.03、0.73±0.07比0.51±0.05、0.48±0.05比0.17±0.02，t＝18.324、15.122、10.784、16.131，P<0.05)，p21、bax和凋亡率显著降低[分别为0.62±0.06比0.97±0.09、0.43±0.04比0.76±0.08、(12.37±1.24)%比(23.42±2.20)%，t＝9.123、13.244、18.024，P<0.05]。结论miR-214-5p可抑制KF细胞增殖并促进凋亡，其机制可能与靶向调控MDM2有关。

简介：摘要目的探讨人脂肪间充质干细胞条件培养基(human adipose-derived mesenchymal stem cells conditioned media，hADSCs-CM)对病理性瘢痕成纤维细胞增殖、迁移能力的影响。方法分离培养hADSCs和病理性瘢痕成纤维细胞，取第3代细胞用于后续实验。于培养12、24、48 h收集hADSCs条件培养基作为实验组条件培养基(12 h-CM、24 h-CM、48 h-CM)，无hADSCs的空白无血清低糖DMEM培养基置于培养箱内12、24、48 h作为对照组条件培养基(12 h-CC、24 h-CC、48 h-CC)。选取增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)、瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)以及正常皮肤成纤维细胞(NFs)，分别以实验制备的培养基进行处理，每组培养基3个复孔，以CCK-8实验检测HSFs及KFs的增殖能力，以细胞划痕实验检测条件培养基处理后细胞迁移能力的变化，流式细胞仪分析细胞的周期分布、凋亡及乳酸脱氢酶(LDH)水平变化情况。实验数据以Graphpad 7.0软件进行分析，多组样本均数比较应用One-Way ANOVA，P<0.05为差异有统计学意义。结果CCK-8结果显示，24 h-CM、48 h-CM处理后24 h KFs、HSFs的增殖速度较对照组开始出现明显减慢，HSFs增殖趋势也出现了类似的变化趋势，NFs无明显的增殖趋势变化；实验组条件培养基对HSFs增殖的抑制作用在48 h达到峰值：24 h-CM KFs增殖活性为1.81±0.10，24 h-CC KFs为2.36±0.05(t＝4.24，P<0.001)；24 h-CM HSFs增殖活性为1.52±0.10，24 h-CC HSFs为1.96±0.15(t＝8.98，P＝0.001)；48 h-CM KFs增殖活性为1.65±0.10，48 h-CC KFs为2.57±0.10(t＝26.64，P<0.001)；48 h-CM HSFs增殖活性为1.29±0.20，48 h-CC HSFs为1.94±0.10(t＝11.14，P<0.001)；之后抑制作用渐弱。细胞划痕实验结果表明，与对照组相比，24、48 h收集的hADSCs-CM处理后HSFs和KFs的迁移能力下降。细胞周期检测结果显示，在KFs中，12 h-CM、24 h-CM、48 h-CM组细胞处于G0/G1期的细胞比例较对照组升高，而处于S期的细胞比例则较对照组下降，在HSFs中也观察到了类似的现象。细胞凋亡检测结果显示各组NFs、KFs、HSFs未见明显凋亡。LDH漏出检测结果显示各组间无明显差异。结论hADSCs条件培养基可能通过其中含有的分泌因子抑制病理性瘢痕成纤维细胞的增殖、迁移，但不诱导其凋亡。

简介：摘要目的观察心肌梗死(心梗)前、心梗后及心梗前后联合运动对大鼠心肌梗死后晚期微血管密度的影响，并检测不同运动方案对左室血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体mRNA和蛋白表达的调控效应。方法采用随机数字表法将96只雄性SD大鼠分为假手术不运动组(Sed-Sh组)、假手术前运动组(PreE-Sh组)、心梗不运动组(Sed-MI组)、心梗前运动组(PreE-MI组)、心梗后运动组(PostE-MI组)及心梗前后联合运动组(ComE-MI组)，每组16只。在正式实验前，各运动组大鼠先在跑台上进行适应性训练，然后给予跑台训练，每天60 min，每周训练5 d，共训练5周；而不运动组大鼠整个实验过程中均不进行运动训练。在第5周最后1次训练结束24 h后，所有大鼠均进行急性心肌梗死手术或假手术。经休息康复4周后，PostE-MI组及ComE-MI组进行5 d适应性训练，随后进行8周跑台运动，每天60 min，每周训练5 d。于实验结束时处死所有大鼠，应用Ⅷ-related Antigen染色进行左室梗死区和非梗死区毛细血管密度测定；采用实时PCR方法检测VEGF及其受体mRNA表达；采用免疫印迹法检测VEGF及其受体蛋白表达。结果与Sed-Sh组比较，PreE-Sh组微血管密度有增加趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)；与Sed-MI组比较，PostE-MI组和ComE-MI组微血管密度均明显增加(P<0.05)，PreE-MI组大鼠微血管密度有增加趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)。另外PostE-MI组微血管密度显著高于PreE-MI组(P<0.05)，而ComE-MI组微血管密度显著高于PostE-MI组(P<0.05)。与Sed-MI组比较，PostE-MI组和ComE-MI组大鼠心脏VEGF及其受体mRNA表达均明显增强(P<0.05)，但PostE-MI组与ComE-MI组大鼠组间差异无统计学意义(P>0.05)。与Sed-MI组比较，PostE-MI组和ComE-MI组大鼠心脏VEGF及其受体蛋白表达均明显增强(P<0.05)，但PostE-MI组与ComE-MI组大鼠组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论心梗前运动对于心梗晚期微血管密度无显著影响，而心梗后运动及联合运动能增加心脏微血管密度，改善心梗后左室功能。心梗后运动及联合运动能上调VEGF及其受体表达，激活VEGF信号通路，使微血管密度增加，这可能有益于心肌梗死后左室重构及左室功能改善。

简介：摘要目的探讨氧调控性神经生长因子（nerve growth factor，NGF）基因修饰神经干细胞（neural stem cells，NSCs）移植治疗急性脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）的可行性并观察脊髓损伤后的功能修复情况。方法以腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）为载体构建基因修饰神经干细胞，制备SCI动物模型3 d后将氧调控性神经生长因子基因修饰的神经干细胞移植到脊髓损伤部位作为AAV-5HRE-NGF-NSCs组（NGF组）；另设GFP修饰的神经干细胞组（AAV-5HRE-GFP-NSCs组，GFP组）；假手术组（空白组）；SCI组（对照组）。在移植后第1、3、7、10、14、21、28、35、42、60 d共10个时间点采用Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）运动功能评分，斜板试验和脚步印迹检测大鼠后肢运动功能的恢复情况。通过盒式磁带录像（video cassette recorder，VCR）图像及定量测定大鼠离地高度，错误脚步及后肢轮替动作检验大鼠的后肢支持力及灵活度。通过观察脊髓直观图粗测大鼠脊髓损伤程度。通过尼氏染色、HE染色和免疫荧光方法评价脊髓损伤区的神经元修复及形态学变化情况。通过CM-DiI追踪移植神经干细胞并用免疫荧光的方法分析干细胞的分化情况。结果基因修饰神经干细胞移植60 d后，NGF组大鼠的BBB，斜板测试和脚步印迹试验的功能评分均高于SCI组和GFP组，差异有统计学意义（P<0.05）；通过VCR图像分析，NGF组大鼠的后肢支持力与活动灵活度优于SCI组和GFP组，差异有统计学意义（P<0.05）；通过脊髓直观图分析，各组大鼠脊柱肉眼观对比图示NGF组脊柱未呈现明显萎缩和颜色加深，损伤程度低于SCI组和GFP组；通过尼氏染色、HE染色和免疫荧光方法检测，相比于SCI组与GFP组，NGF组在移植部位NeuN呈明显阳性，同时在形态学水平可见明显再生的神经结构，且SCI空洞面积减小，神经元和尼氏小体增多，差异具有统计学意义（P<0.05）。通过CM-DiI追踪神经干细胞，用NeuN标记神经元，用GFAP标记星形胶质细胞，发现神经干细胞可以有效分化为神经元和星形胶质细胞，GFP组神经干细胞更多向星形胶质细胞分化，NGF组神经干细胞更多向神经元分化。结论通通过腺相关病毒介导氧调控性NGF基因修饰神经干细胞移植治疗SCI，一方面神经干细胞分化为神经干细胞和星形胶质细胞可以填补损伤空洞；另一方面神经干细胞充当NGF基因治疗的载体，对邻近受损神经细胞发挥保护作用，减少神经元细胞的死亡，这有望为急性脊髓损伤的治疗提供新思路，同时给NGF蛋白药物的研发做出新尝试。

简介：摘要随着眼轴的进行性增长，高度近视患者的眼底会出现一系列退行性病变，如视盘表面及周围改变、后巩膜葡萄肿、后极部视网膜和脉络膜改变及周边部视网膜改变等。高度近视眼底病变可致永久性视力损害，甚至失明。目前近视的发病机制仍不明确，研究发现多种生长因子参与眼球的生长和重塑。其中，转化生长因子(TGF)、神经生长因子(NGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、结缔组织生长因子(CTGF)、胰岛素样生长因子(IGF)等在高度近视中的作用逐渐被研究者关注。本文就生长因子在高度近视中的作用研究进展进行综述。

简介：摘要鼓膜穿孔是耳科门诊常见疾病之一，根据其病程长短，可简单分为急性鼓膜穿孔和慢性鼓膜穿孔。因鼓膜具有较强的自愈能力，小的创伤性鼓膜穿孔大多能够自愈，然而大的鼓膜穿孔往往愈合较慢或者迁延不愈，可演变成为慢性鼓膜穿孔。目前手术仍是治疗慢性鼓膜穿孔的主要方式，患者往往需要承担相应的手术风险，并支付较高的手术医疗费用。因此，寻求一个高效、微创、经济的替代疗法显得尤其重要。近年来，随着组织工程学的发展，涌现出许多新的材料与技术用于治疗各种类型的鼓膜穿孔，其中表皮生长因子被认为是一种能够有效促进鼓膜愈合的生物活性分子而备受关注。本文将对近年来表皮生长因子应用于鼓膜穿孔的研究成果进行总结。

简介：摘要目的评估人类表皮生长因子受体2（HER2）阳性乳腺癌患者接受不同新辅助治疗（NAC）方案后腋窝淋巴结病理缓解情况及影响因素。方法纳入2010年11月至2015年12月中山市人民医院收治的100例HER2阳性、Ⅱa~Ⅲc期乳腺癌患者，在NAC前通过触诊和细针穿刺（FNA）评估腋窝淋巴结状态。所有患者接受4~6个周期的PCrb（紫杉醇175 mg/m2和卡铂AUC=6，每3周），部分患者接受联合曲妥珠单抗（6 mg/kg每3周，首剂8 mg/kg）。结果62例通过FNA确定为腋窝淋巴结阳性（A组），38例通过FNA或触诊确定为腋窝淋巴结阴性（B组）。其中A组总体腋窝淋巴结病理阴性率（pNNR）为53.2％，B组为71.1％。雌激素受体（ER）低表达/HER2阳性患者的pNNR最高，A组为81.0％，B组86.7％。多因素分析显示，联合曲妥珠单抗和ER状态是预测HER2阳性乳腺癌pNNR的独立因素。结论对于治疗前腋窝淋巴结阳性的乳腺癌患者，如果NAC联合靶向治疗后前哨淋巴结阴性，ER低表达/HER2阳性就不需要腋窝淋巴结清扫。

简介：摘要目的探讨组织因子（TF）、血管内皮生长因子（VEGF）在弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中的表达及其临床意义。方法收集2010年1月至2017年12月连云港市第二人民医院诊断的80例DLBCL患者的临床资料并将30例反应性淋巴结增生（RLN）作为对照，采用免疫组织化学法检测两组TF及VEGF的表达水平。结果DLBCL组TF、VEGF的阳性率较RLN组增高[TF：86.3%（69/80）比50.0%（15/30）；VEGF：90.0%（72/80）比53.3%（16/30）；均P<0.01]。TF与VEGF的表达呈正相关（r=0.704，P<0.05）。DLBCL组中不同性别、年龄、Hans亚型患者TF、VEGF阳性率比较，差异均无统计学意义（均P>0.05）。有B症状、乳酸脱氢酶（LDH）增高、体力状态分级≥2级、结外病灶数>1处DLBCL患者的TF阳性率较高，差异均有统计学意义（均P<0.05）。Ann Arbor Ⅲ~Ⅳ期、有B症状、LDH增高、结外病灶数>1处DLBCL患者的VEGF阳性率较高，差异均有统计学意义（均P<0.05）。国际预后指数（IPI）评分高危组TF阳性率高于低危组（P<0.01）；IPI高危组、高中危组VEGF阳性率均高于低危组（均P<0.01）；TF、VEGF表达均与IPI评分呈正相关（r=0.491，P<0.01；r=0.529，P<0.01）。TF、VEGF低表达组DLBCL患者的总生存率均高于TF、VEGF高表达组（均P<0.05）。结论TF和VEGF在DLBCL中高表达，且与IPI相关，对DLBCL的预后评估具有参考意义。

简介：摘要目的研究川芎嗪对人胚肺成纤维细胞株MRC-5增殖及胶原蛋白的影响。方法培养MRC-5细胞株，按随机数字表法分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。对照组用不含药物的无血清DMEM处理，低、中、高剂量组分别用含有5、10、20 mg/L川芎嗪的无血清DMEM处理。干预24、36、48 h后，采用MTS法检测细胞增殖抑制率；干预48 h后，采用流式细胞术检测细胞周期比例，采用TUNEL染色观察细胞凋亡情况，Western blot法检测Bcl-2、Bax、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、周期素依赖性蛋白激酶抑制因子P27(p27)蛋白水平，ELISA检测培养基中TGF-β1、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ, Col-Ⅰ)、Col-Ⅲ水平。结果干预24、36、48 h时，低、中、高剂量组细胞增殖抑制率较对照组升高(P<0.05)。干预48 h后，与对照组比较，低、中、高剂量组细胞周期G0/G1期比例增加，S期比例明显减少(P<0.05)；凋亡率[(6.59±0.95)%、(10.92±2.25)%、(16.58±3.25)%比(1.38±0.34)%]明显增加(P<0.05)；Bcl-2[(0.79±0.13)、(0.52±0.06)、(0.31±0.05)比(0.91±0.15)]、CyclinD1[(0.62±0.08)、(0.50±0.06)、(0.27±0.04)比(0.83±0.14)]蛋白表达明显降低，Bax[(0.45±0.07)、(0.50±0.06)、(0.79±0.13)比(0.32±0.06)]、p27[(0.39±0.07)、(0.75±0.13)、(0.96±0.16)比(0.20±0.05)]蛋白表达增加(P<0.05)；培养基中TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ水平降低(P<0.05)。结论川芎嗪可抑制MRC-5细胞增殖及胶原蛋白产生，其机制可能与诱导细胞周期阻滞、调节增殖及细胞周期相关蛋白表达有关。

简介：摘要目的研究人增生性瘢痕与正常皮肤组织成纤维细胞中氧化应激程度及相关通路的表达是否存在差异。方法选取并收集2019年6月至2020年7月期间就诊于解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部接受手术切除治疗的8例增生性瘢痕患者的瘢痕组织及供皮区正常全层皮肤组织，其中男5例，女3例，年龄(35.0±11.7)岁。组织块法提取培养原代成纤维细胞，并传代培养，待细胞传代至第3代进行以下实验：(1)CCK-8法检测增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)和正常皮肤成纤维细胞(NSF)的增殖能力；(2)流式细胞术检测HSF和NSF中活性氧含量；(3)比色法检测2种细胞内总超氧化物歧化酶(SOD)相对活力值；(4)RT-PCR检测2种细胞中NQO1基因表达量；(5)RT-PCR检测2种细胞中Nrf2基因表达量；(6)蛋白质印迹法检测2种细胞中Nrf2和Bcl2蛋白含量；(7)细胞免疫组织化学染色检测Nrf2在2种细胞中的表达分布情况。结果采用SPSS 25.0统计软件分析，行独立样本t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。结果(1)与NSF比较，HSF的生长速度更快，2种细胞的细胞数量从第3天起差异有统计学意义(统计结果从3～7 d依次为t＝2.631，P＝0.039；t＝7.025，P<0.001；t＝5.031, P<0.001；t＝4.241, P＝0.002；t＝6.525, P＝0.003)；(2)HSF组中活性氧含量为75.39%±3.06%，明显高于NSF组的45.36%±3.66%，两者比较差异有统计学意义(t＝-17.804, P<0.001)；(3)HSF组SOD活力值为(50.76±0.52) U/ml，比NSF组的(42.76±1.35) U/ml升高，两者比较差异有统计学意义(t＝15.674，P<0.001)；(4)HSF组中NQO1 mRNA相对表达量为0.859±0.076，比NSF组的1.595±0.181降低，两者比较差异有统计学意义(t＝3.763，P＝0.020)；(5)HSF组中Nrf2 mRNA相对表达量为0.590±0.055，相较于NSF组的1.595±0.146降低，两者比较差异有统计学意义(t＝6.445，P＝0.003)；(6)HSF组的Nrf2蛋白相对含量为0.314±0.035，相较于NSF组的0.912±0.039明显降低，两者比较差异有统计学意义(t＝22.554，P<0.001)；HSF组的Bcl2蛋白相对含量为0.466±0.020，相较于NSF组的0.734±0.066明显降低，两者比较差异有统计学意义(t＝7.780，P<0.001)；(7)NSF和HSF细胞中均发现有Nrf2蛋白表达，且细胞核与细胞质中均有蛋白分布。结论HSF的氧化应激程度较高，可能是某些原因导致Nrf2含量降低，造成各种抗氧化酶表达降低，最终使活性氧蓄积导致。HSF的增殖和凋亡能力均强于NSF，而活性氧可以导致细胞凋亡，说明氧化应激增强可能是增生性瘢痕的发病机制之一。

简介：摘要胰腺导管腺癌(PDAC)是较为致命的癌症之一，总体5年存活率不到5%。该病通常诊断为晚期，治疗手段有限。随着分子生物学的发展，肿瘤的靶向治疗针对性强，精准度高，效果显著。因此，挖掘理想的靶点是PDAC靶向治疗的关键，有助于进一步提高对本病的诊断和治疗水平。与其他肿瘤相比，PDAC促纤维结缔组织增生的改变更为明显，对传统治疗表现出明显的耐药性，并具有高度免疫抑制的肿瘤微环境。本研究讨论了在PDAC中成纤维细胞活化蛋白(FAP)与miR-30a-5p的一些新发现，即FAP、miR-30a-5p对PDAC主要生物学功能的影响及两者之间的相互关系，并指出未来研究的发展方向，为PDAC的靶向治疗提供新的思路。

简介：摘要目的探讨长波紫外线（UVA）诱导人成纤维细胞（HSF）光老化中miRNA-1246的表达及上调miR-1246表达对靶基因MAPK14及细胞老化的影响。方法HSF分离自苏州大学附属儿童医院收集的健康儿童包皮环切术后皮肤标本，每日以10 J/cm2 UVA照射HSF，在初次照射及照射3、7、14 d采用实时定量PCR检测miR-1246的表达。将HSF细胞分为空白对照组、UVA组、miR-1246组、UVA + miR-1246组，通过慢病毒转染上调miR-1246的表达和照射UVA 14 d后，收集各组细胞，采用MTT检测细胞增殖活性，β半乳糖苷酶染色检测细胞老化，RT-PCR和Western印迹检测MAPK14、基质金属蛋白酶1（MMP-1）的表达。多组间均数的比较用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果在照射7 d、14 d时，UVA组HSF的miR-1246相对表达水平（4.69 ± 0.85、3.59 ± 0.45）均低于空白对照组（8.42 ± 0.75、7.61 ± 0.49），差异均有统计学意义（t = 29.84、31.93，均P < 0.01）。上调miR-1246的表达和照射UVA后，MTT结果显示，空白对照组、UVA组、miR-1246组、UVA + miR-1246组细胞增殖活性（0.82 ± 0.03、0.23 ± 0.02、0.81 ± 0.02、0.61 ± 0.02）差异有统计学意义（F = 34.90，P < 0.05），UVA组低于空白对照组（t = 28.14，P < 0.01），UVA + miR-1246组低于miR-1246组（t = 10.61，P < 0.01），高于UVA组（t = 20.30，P < 0.01）。β半乳糖苷酶染色检测显示，4组老化细胞阳性率（3.93% ± 1.11%、81.29% ± 2.53%、5.50% ± 1.15%、54.13% ± 2.09%）差异有统计学意义（F = 16.14，P < 0.05），其中UVA组高于空白对照组（t = 48.46，P < 0.01），而UVA + miR-1246组高于miR-1246组（t = 35.31，P < 0.01），低于UVA组（t = 14.32，P < 0.01）。RT-PCR和Western印迹均显示，4组细胞MAPK14、MMP-1的mRNA、蛋白相对水平差异均有统计学意义（均P < 0.05），其中UVA组高于空白对照组（P < 0.05），UVA + miR-1246组高于miR-1246组（P < 0.05），低于UVA组（P < 0.05）。结论UVA照射诱导的HSF光老化中，miR-1246的表达受到抑制，上调miR-1246的表达可抑制其靶基因MAPK14及老化相关蛋白MMP-1的表达，起到抗细胞光老化的作用。

简介：摘要目的下调食管癌ECA-109细胞的血管内皮生长因子A(VEGFA)表达，观察其辐射敏感性的改变并初步探讨其发生机制。方法将食管癌ECA-109细胞分成VEGFA转染组、空载组、X射线组和VEGFA转染组联合X射线组。运用qPCR法检测VEGFA基因的表达；Western blot法检测VEGFA蛋白的表达；细胞增殖实验(CCK8法)测定细胞的增殖变化；克隆形成法分析不同照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)细胞的辐射敏感性；流式细胞术分析细胞凋亡变化；免疫荧光法检测γ-H2AX焦点的数量。结果ECA-109细胞VEGFA转染组与空载组比较，VEGFA基因表达明显减少(t＝11.98，P<0.05)、VEGFA蛋白表达显著下调(t＝12.38，P<0.05)；ECA-109转染组细胞相较于空载组细胞，其增殖(A450值)明显受到抑制(t＝2.78、7.25、21.93、13.21，P<0.05)；与空载组比较，VEGFA转染组ECA-109细胞的D0、Dq、SF2值下降(t＝5.83、8.56、7.68，P<0.05)，放射增敏比SERD0、SERDq分别为1.41、2.09，凋亡比例明显增加、且联合X射线后ECA-109细胞的凋亡比例进一步增加(t＝17.63、22.48、33.87，P<0.05)；ECA-109细胞VEGFA转染组和空载组在X射线照射后2 h内细胞核形成的γ-H2AX焦点数量均明显增加，24 h后空载组细胞核的γ-H2AX焦点数量恢复照射前水平，而转染组中的γ-H2AX焦点数量仍高于照射前水平(t＝7.00，P<0.05)。结论下调VEGFA能抑制食管癌细胞的增殖，减少细胞集落形成并促进其凋亡，增加食管癌ECA-109细胞的辐射敏感性，其机制与DNA损伤修复密切相关。

简介：摘要目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清中血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）水平在诊断和治疗监测中的临床意义。方法收集2014年10月至2017年12月在江苏省徐州市肿瘤医院接受治疗的111例NSCLC患者和同期在南京易安门诊部体检的105名健康对照者血液样本，采用Luminex法测定NSCLC患者和健康人血清中PDGF-BB水平以及采用铂类药物化疗后患者血清PDGF-BB的水平。应用受试者工作特征曲线（ROC）评估患者血清PDGF-BB水平对NSCLC的诊断价值，分析血清PDGF-BB水平与NSCLC患者临床病理特征及铂类药物化疗之间的关系。结果与健康对照者相比，NSCLC患者血清PDGF-BB水平降低[（54±24）ng/ml比（125±61）ng/ml，t=11.09，P<0.01]。血清PDGF-BB水平对NSCLC诊断的ROC下面积为0.890。不同性别、年龄及是否淋巴结转移NSCLC患者间，血清PDGF-BB水平差异均无统计学意义（均P>0.05）；TNM分期高者血清PDGF-BB水平低于分期低者，分化程度低者血清PDGF-BB水平低于分化高者，差异均有统计学意义（均P<0.05）。在以铂类药物为基础的治疗后，NSCLC患者血清PDGF-BB水平持续降低。结论NSCLC患者血清PDGF-BB水平降低，其在NSCLC早期诊断方面具有一定的临床意义。

简介：摘要抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)融合蛋白是由VEGF受体与免疫球蛋白G的Fc段结合形成，可与VEGF受体竞争性结合VEGF，进而阻止VEGF受体激活。抗VEGF融合蛋白对VEGF的结合力远高于单克隆类抗VEGF药物，作为高亲和力的抗VEGF药物广泛应用于治疗VEGF生成、释放、激活异常增多的疾病。目前眼科主要用于减少VEGF生成以消退或预防各类新生血管以及血管病变相关性黄斑水肿的治疗。抗VEGF融合蛋白类药物出现晚于单克隆类，可用于治疗单克隆类抗VEGF药物治疗不佳的病例。同时抗VEGF类药物间更换应用治疗效果优于单一药物应用。抗肿瘤治疗也是抗VEGF融合蛋白药物的潜在应用领域。根据对抗VEGF融合蛋白类药物作用因子及近视形成相关因子表达的研究发现，抗VEGF融合蛋白类药物可能对近视形成产生抑制作用。(国际眼科纵览，2020, 44: 126-132)

简介：摘要组织工程气管是气管替代治疗的重要组成部分，主要通过生长因子、种子细胞和气管支架来实现气管组织功能的修复和重建。其中生长因子在组织工程气管的构建起重要作用，可促进组织工程气管软骨细胞增殖、血管和上皮结构重建。本文对常见的生长因子在组织工程气管替代治疗中的应用进行综述。

简介：摘要目的探讨微滴式数字聚合酶链反应（ddPCR）在检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血循环肿瘤DNA（ctDNA）中表皮生长因子受体（EGFR）突变的应用价值。方法收集山西省肿瘤医院2018年8月至2019年3月就诊的63例NSCLC患者外周血标本，采用ddPCR检测患者外周血EGFR敏感突变，并与对应组织扩增阻滞突变系统PCR（ARMS-PCR）检测结果比较。采用Kappa检验对两种检测方法一致性进行分析。结果63例患者中，ddPCR共检测到EGFR敏感突变31例（49.2%），包括第18号外显子G719X突变1例（1.6%）、第19号外显子缺失（E19-Del）12例（19.0%）、第20号外显子T790M突变（T790M）11例（17.5%）、第21号外显子L858R突变（L858R）7例（11.1%）；31例突变患者中7例（22.6%）为双突变。ARMS-PCR检出上述4种突变26例（41.3%），依次有0例、12例（19.0%）、6例（9.5%）、8例（12.7%）；26例突变患者中双突变5例（19.2%）。1例患者ARMS-PCR检测L858R阳性而ddPCR检测L858R阴性。两种检测方法一致率为90.3%（κ=0.8，P<0.05）。31例ddPCR检测突变患者外周血ctDNA EGFR突变中位丰度1.7%（0.04%~23.60%），其中E19-Del中位丰度为2.5%（0.35%~22.70%），T790M突变中位丰度为0.6%（0.04%~14.00%），L858R突变中位丰度为2.3%（0.20%~23.60%）；ddPCR检测EGFR基因突变丰度<1%者10例，占所有突变者的32.6%（10/31），ARMS-PCR仅检出其中5例。接受酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗且发生获得性耐药的19例患者中，ddPCR检出T790M突变11例（57.9%），而无TKI用药史患者均未检测出此突变。11例T790M突变患者中，突变丰度<0.1%者1例，0.1%~2.0%者7例，>2.0%者3例。结论ddPCR检测NSCLC患者外周血ctDNA中EGFR基因突变无创、快捷、灵敏度高且可绝对定量，为取样困难或因获得性耐药需重复取样肺癌患者进行EGFR-TKI靶向治疗提供了一个新的检测途径，个体化靶向治疗提供重要依据。

简介：摘要目的探讨转化生长因子(TGF)-β1、缺氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)在结直肠癌根治术后复发转移中的预测价值。方法选取2018年1月至2019年1月在绍兴第二医院就诊的79例结直肠癌患者，依据根治术后是否复发或转移分为复发转移组和未复发转移组。比较两组患者化疗结束后3周时血清TGF-β1、HIF-1α、VEGF、CEA、CA199水平的差异，绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估五项指标的预测价值，并比较各时间点之间两组患者血清TGF-β1、HIF-1α、VEGF、CEA和CA199水平的变化。结果化疗结束后3周时，复发转移组血清TGF-β1、HIF-1α、VEGF、CEA和CA199水平均显著高于未复发转移组(P<0.01)。ROC曲线结果显示，单项指标预测直肠癌根治术后复发转移的曲线下面积(AUC)由大到小排序为：CEA>HIF-1α>CA199>VEGF>TGF-β1，五项联合检测预测术后复发转移的AUC、特异度和约登指数均高于单项检测，灵敏度亦较高。与化疗结束后3周时比较，复发转移组患者复发转移时血清TGF-β1、HIF-1α、VEGF、CEA和CA199水平均显著升高(P<0.01)；未复发转移组患者各时间点之间五项指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清TGF-β1、HIF-1α、VEGF、CEA和CA199对结直肠癌术后患者的复发或转移均有一定的预测价值，五项指标联合检测有利于提高灵敏度和特异度。