简介：摘要目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)在LPS致大鼠肺泡巨噬细胞凋亡中的内源性保护作用及其与内质网应激的关系。方法大鼠肺泡巨噬细胞NR8383，采用随机数字表法分为4组(n＝32)：对照组(C组)、LPS组(L组)、Con siRNA组和HO-1 siRNA组。C组常规培养，余3组向培养基加入10 μg/ml LPS。Con siRNA组和HO-1 siRNA组于LPS加入前48 h时分别行Con siRNA和HO-1 siRNA转染。LPS处理24 h时采用MTT法测定细胞活力，流式细胞术测定细胞凋亡率，Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激酶受体样内质网激酶(p-PERK)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、磷酸化的Ⅰ型内质网跨膜蛋白激酶(p-IRE-1)、磷酸化的应激活化蛋白激酶(p-JNK)和半胱氨酸天冬氨酸-12(caspase-12)表达。结果与C组比较，余3组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，HO-1、GRP78、CHOP、p-PERK、p-IRE-1、p-JNK和caspase-12表达上调(P<0.05)；与L组比较，HO-1 siRNA组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，HO-1表达下调，GRP78、CHOP、p-PERK、p-IRE-1、p-JNK和caspase-12表达上调(P<0.05)，Con siRNA组各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与Con siRNA组比较，HO-1 siRNA组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，HO-1表达下调，GRP78、CHOP、p-PERK、p-IRE-1、p-JNK和caspase-12表达上调(P<0.05)。结论HO-1产生内源性保护作用的机制与抑制内质网应激，减轻LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞凋亡有关。

简介：摘要目的探讨经阴道网片置入前盆重建术治疗合并下尿路症状的膀胱脱垂患者的疗效及安全性。方法回顾性分析2015年6月至2019年2月徐州医科大学附属医院行经阴道网片置入前盆重建术的32例患者的临床资料。平均年龄(67.8±7.6)(57～86)岁。体质指数(22.6±3.0)kg/m2。病程平均(2.9±2.3)年。平均产次(3.0±1.5)(1～7)次。术前美国泌尿外科学会症状评分(AUASS)(14.2±3.5)分。残余尿量(71.3±53.0)ml，最大尿流率(16.9±3.8)ml/s。盆底脏器脱垂困扰量表(POPDI-6)、膀胱症状及严重度量表(UDI-6)、盆底障碍影响简易问卷(PFIQ-7)分别为(48.0±7.3)分、(41.7±8.2)分和(62.5±16.4)分。所有患者均行经阴道网片置入前盆重建术，术中切开阴道前壁后钝、锐性分离盆底与膀胱间隙，精准体表定位后在穿刺针引导下放置网片。根据术前下尿路症状的主要临床表现分为储尿期症状组22例，术前AUASS储尿期症状评分(11.6±1.9)分；排尿期症状组10例，术前AUASS排尿期症状评分(13.9±1.2)分。记录手术时间、术中出血量、平均住院天数，术后随访患者AUASS、最大尿流率、残余尿量及POPDI-6、UDI-6、PFIQ-7，术中及术后并发症发生情况。结果本研究32例手术均顺利完成。平均手术时间(61.1±18.6)min。平均术中出血量(41.5±12.3)ml。平均住院天数(9.1±1.8)d。术中无膀胱、输尿管、髂血管等重要脏器损伤。术后27例获得随访，平均随访时间(24.7±10.8)(3～36)个月。术后残余尿量(23.4±11.0)ml，POPDI-6(3.1±5.4)分，UDI-6(3.2±5.1)分，PFIQ-7(12.4±1.7)分，最大尿流率(22.4±4.1)ml/s，与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05)。末次随访时，储尿期症状组(19例)AUASS储尿期症状评分(3.4±1.9)分，排尿期症状组(8例)AUASS排尿期症状评分(3.9±1.7)分，均较各组术前AUASS对应症状评分显著降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。所有患者均无膀胱脱垂复发。术后3个月，1例出现阴道前壁网片暴露，于门诊剪除暴露网片，予雌激素软膏涂抹后痊愈；1例出现尿频、尿急症状，予口服酒石酸托特罗定治愈。术后1年，1例新发轻度尿失禁，予盆底肌锻炼后症状改善。术后2年，1例新发Ⅰ度后壁脱垂，无排便症状，未予特殊治疗。结论经阴道网片置入前盆重建术治疗合并下尿路症状的膀胱脱垂患者疗效较好，手术创伤小、并发症少、复发率低，可有效改善尿频、尿急、排尿困难等下尿路症状，但远期新发压力性尿失禁和网片暴露等安全性问题仍需进一步长期随访。

简介：摘要目的探讨高血压脑出血患者去骨瓣减压术后不同时期行三维钛网修补术对脑灌注、颅内压及神经功能的影响。方法选择济南市第五人民医院2015年10月至2018年10月收治的行去骨瓣减压术的高血压脑出血患者132例，采用双盲随机法分为观察组、对照组各66例，观察组去骨瓣减压术后24～42 d行三维钛网修补术，对照组术后90～150 d(3～5个月)行三维钛网修补术。比较两组患者手术情况、脑灌注、颅内压及神经功能。结果观察组手术时间、失血量及皮瓣游离时间分别为(92.5±12.4)min、(354.3±17.5)mL、(13.2±3.1)min，均短于、少于对照组的(142.8±15.3)min、(518.3±22.3)mL、(38.3±4.3)min，两组差异均有统计学意义(t＝4.745、6.831、4.963，均P<0.05)；观察组颅内压异常指数、脑灌注异常指数分别为(0.1±0.0)、(0.2±0.1)，对照组分别为(0.2±0.1)、(0.3±0.1)，观察组均低于对照组(t＝3.657、2.579，均P<0.05)；两组不同时间点神经功能缺损评分差异均有统计学意义(均P<0.05)；观察组并发症发生率为10.9%(7/64)，显著低于对照组的38.7%(24/62)(χ2＝14.094，P<0.05)。结论高血压脑出血患者去骨瓣减压术后超早期行三维钛网修补术，有助于缩短手术时间，恢复患侧颅内压，改善患者脑灌注，减轻神经功能损害程度，其疗效较晚期行三维钛网修补术更佳。

简介：摘要目的探讨内质网应激通过抑制JNK-c-Jun通路诱导人乳腺癌细胞自噬和凋亡的机制。方法将不同浓度衣霉素不同时间作用于人乳腺癌细胞，确定最佳作用浓度。细胞分组为内质网激活组、内质网激活＋SP600125(JNK抑制剂)组、对照组(未做任何处理的常规培养细胞)。使用四甲基偶氮唑蓝法、单丹磺酰尸胺法和流式细胞术分别检测细胞存活、自噬、凋亡；用Western blot分析内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP，JNK-c-Jun信号通路相关蛋白JNK、c-Jun，自噬相关蛋白Beclin1，及凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-12的表达水平。结果衣霉素对人乳腺癌细胞的最佳作用浓度为100 ng/ml，作用时间为72 h。在此作用条件下，内质网激活相关因子GRP78和CHOP的表达水平较处理前增加(P均<0.05)。与内质网激活＋SP600125组和对照组比较，内质网激活组JNK和c-Jun表达水平均上升(P均<0.05)。对照组与内质网激活＋SP600125组比较，内质网激活组细胞生长活性明显受到抑制，MDC荧光强度值及细胞凋亡率均增加(P均<0.05)。同时，与内质网激活＋SP600125组和对照组比较，内质网激活组中凋亡关键因子Bax、Caspase-3、Caspase-12被激活表达水平均升高(P均<0.05)。结论内质网应激可能通过激活JNK-c-Jun信号通路，降低乳腺癌细胞存活率，进而诱导乳腺癌细胞自噬并促进细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨长期低剂量电离辐射对核电工业放射工作人员外周血细胞的影响。方法于2019年3月，选取2018年在广州市职业病防治院进行在岗期间放射职业健康检查且工龄≥1年的核电工业的放射作业人员为放射组（共530名）。同时选取核电工业岗前放射职业健康检查的工人为对照组（共545名）。依据GBZ 235-2011《放射工作人员职业健康监护技术规范》和GBZ 98-2017《放射工作人员健康要求》的方法和要求进行采样，收集职业健康监护资料，分析两组外周血细胞的变化规律。结果与对照组比较，放射组白细胞（WBC）总数、中性粒细胞（NEUT）数量、淋巴细胞（LYMP）数量、血红蛋白（Hb）含量、平均红细胞体积（MCV）和平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）均较低，差异均有统计学意义（P<0.05）；单核细胞（MONO）数量、血小板（PLT）总数和平均血小板体积（MPV）均升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较，放射组WBC异常率和Hb异常率升高，差异有统计学意义（P<0.01），RBC异常率和PLT异常率差异无统计学意义（P>0.05）。结论低剂量电离辐射对核电工业放射工作人员的外周血细胞产生影响，具有一定的累积损害效应，不同细胞亚型的变化规律不同，WBC和PLT的改变出现较早。

简介：摘要目的探讨内质网应激（ERS）在二氧化硅（SiO2）诱导的RAW264.7细胞自噬中的作用及对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分泌的影响。方法以200 μg/ml SiO2刺激的RAW264.7细胞为体外细胞模型，以SiO2不同处理时间分组，包括0 h组（对照组）、6、12、24和48 h组，通过吖啶橙及单丹（磺）酰戊二胺荧光（MDC）染色检测细胞自噬小体的形成。应用实时聚合酶链反应（实时PCR）检测自噬相关分子Beclin1 mRNA表达，蛋白免疫印迹（western blotting）检测自噬相关蛋白LC3Ⅰ、LC3Ⅱ与Beclin1的表达；应用实时PCR和western blotting检测ERS特异标记分子BiP的表达；酶联免疫吸附法（ELISA）检测RAW 264.7细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）和TNF-α的分泌。以ERS抑制剂4-PBA进行干预试验，包括空白对照组、SiO2组、1 μmol/L 4-PBA+SiO2组、10 μmol/L 4-PBA+SiO2组、20 μmol/L 4-PBA+SiO2组，检测各组LC3Ⅰ、LC3Ⅱ与Beclin1蛋白的表达及TGF-β1、TNF-α的分泌变化。结果与对照组比较，SiO2诱导RAW264.7细胞各时间组荧光强度均明显增强，差异均有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，SiO2诱导RAW264.7细胞各时间组的Beclin1 mRNA表达均明显增加，LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达均明显增加，差异均有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，SiO2诱导RAW264.7细胞6、12、24 h组BiP mRNA和蛋白表达均明显增加，6 h达高峰，差异均有统计学意义（P<0.05）；与SiO2组比较，随着4-PBA浓度增加，RAW264.7细胞的LC3-II和Beclin 1蛋白水平逐渐下调，差异均有统计学意义（P<0.05）；与SiO2组比较，1、10、20 μmol/L 4-PBA+SiO2组RAW264.7细胞TNF-α分泌水平明显下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论SiO2诱导的ERS可能参与了RAW264.7细胞自噬以及TNF-α的分泌过程。

简介：摘要目的观察小檗碱(BBR)对2型糖尿病大鼠局部脑缺血再灌注损伤半影区内质网应激相关炎症通路的影响。方法72只健康雄性Sprague-Dawley大鼠，采用高脂饮食和链尿佐菌素注射建立2型糖尿病大鼠模型，数字抽签随机将糖尿病大鼠分为假手术组(Sham组)、糖尿病大鼠＋BBR治疗组(BBR组)、糖尿病大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型组(MCAO组)、糖尿病大鼠MCAO＋BBR治疗组(MCAO＋BBR组)，纳入研究每组6只。治疗组在术前48 h、24 h和术后6 h经胃灌注给予相应剂量药物。采用线拴法制备大鼠MCAO模型，进行神经缺损评分，酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达；实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测内质网应激标志蛋白葡萄糖调控蛋白78(GRP78)的mRNA表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测内质网应激相关炎症通路蛋白GRP78、胰腺内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、核因子(NF)-κB p65表达情况。结果在脑缺血半影区，缺血2 h再灌注24 h后，MCAO组大鼠神经功能缺损评分(2.83±0.41)分，高于MCAO＋BBR组大鼠(1.67±0.52)分(P<0.05)，促炎因子TNF-α和IL-1β和内质网应激相关炎症通路蛋白GRP78、PERK和NF-κB p65的表达水平亦增高(P<0.05)。BBR治疗亦可降低脑缺血再灌注半影区促炎因子(TNF-α和IL-1β)和内质网应激相关炎症通路蛋白(GRP78、PERK和NF-κB p65)的表达水平。结论BBR可通过抑制内质网应激相关炎症通路降低2型糖尿病大鼠局部脑缺血再灌注损伤的炎症反应，发挥神经保护作用。

简介：摘要目的通过观察脂多糖(LPS)诱导的Toll样受体4(TLR4)对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块内质网应激通路蛋白表达水平的影响，探讨内质网应激对小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法2015年10月至2016年2月选择ApoE-/-小鼠24只，高脂喂养10周后数字抽签随机分为对照组、LPS组、TLR4的特异性抑制剂TAK(TAK组)，各8只。干预10周后取眼球血检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。处死小鼠留取颈动脉和主动脉标本。免疫组化法检测颈动脉斑块巨噬细胞(MOMA-2)、平滑肌肌动蛋白(α-actin)、TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNFα)及κ基因结合核因子(NFκB)的表达。免疫印迹法检测PKR样真核起始因子2α激酶(PERK)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)的水平。结果LPS组小鼠与对照组和TAK组小鼠比较，TC(25.0±2.3)mmol/L比(20.2±1.6)mmol/L、(20.8±2.6)mmol/L、TG(1.3±0.1)mmol/L比(1.3±0.1)mmol/L、(1.0±0.1)mmol/L、ox-LDL(17.4±1.3)mmol/L比(15.8±1.6)mmol/L、(12.1±1.1)mmol/L水平升高(P<0.05)；斑块形态学及病理学比较，LPS组小鼠动脉粥样硬化斑块范围大，巨噬细胞含量增多(P<0.05)，平滑肌细胞含量减少(P<0.05)，斑块TLR4、IL-1β、IL-6、TNFα及NFκB的表达水平较其他两组增加(P<0.05)；PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加(P<0.05)。与对照组比较，TAK组PERK、CHOP、GRP78的表达水平减少(P<0.05)。LPS组TLR4，质网应激通路蛋白PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加。结论LPS诱导的TLR4可上调内质网应激通路蛋白的表达，且引起内质网应激下游炎性细胞因子分泌增加，加重脂质代谢紊乱，增加动脉硬化斑块的不稳定性。

简介：摘要目的以diquat诱导的小鼠氧化应激为模型，研究微生物源性抗氧化剂（MA）对小鼠肝脏氧化应激、内质网应激、细胞凋亡和功能的影响。方法选择体质量16～18 g的C57BL/6雌性小鼠18只，随机分为3组，每组6只。抗氧化剂组小鼠灌胃MA，对照组和模型组小鼠灌胃等量等渗盐水，饲养22 d后，模型组和抗氧化剂组腹腔注射diquat溶液，对照组小鼠注射等量等渗盐水，处理3h后处死小鼠采集肝组织。肝脏组织制成10%匀浆后，依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）活性，用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。肝脏组织制成10%匀浆后，依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）活性，用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果过氧化氢在对照组、模型组、抗氧化剂组分别为（8.74±1.38）、（11.44±1.01）、（9.81±0.98）mmol/g，组间比较差异有统计学意义（F = 7.640，P < 0.05）。对照组、模型组和抗氧化剂组MDA的含量分别为（0.65±0.07）、（0.86±0.18）、（0.70±0.05）nmol/mg，组间比较差异有统计学意义（F = 5.406，P < 0.05）。模型组AST活性为（146.68±4.29）U/g，显著高于对照组的（125.64±15.69）U/g与抗氧化剂组的（126.57±1.82）U/g，F = 6.192，P < 0.05。实时定量PCR结果显示，与对照组相比，模型组蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）和活化转录因子6（ATF6）基因相对表达量显著升高，分别为1.880±0.442和1.800±0.380（F值分别为7.702、10.815，P值均< 0.05）；与模型组相比，抗氧化剂组PERK和ATF6基因相对表达量显著降低，分别为1.310±0.333、1.180±0.204（P值均< 0.05）。细胞凋亡相关基因表达结果显示，抗氧化剂组caspase3和caspase8基因相对表达量分别为1.136±0.381、1.593±0.407，与模型组的1.572±0.127和2.843±0.973相比，显著降低（F值分别为12.800、7.657，P值均< 0.05）。结论微生物源性抗氧化剂减弱diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和肝细胞凋亡，改善肝脏功能。

简介：【摘要】 目 的 探讨基于百度网盘信息化结合备忘录教学管理模式在手术室规培护士培养中的应用效果。 方法 选取 2017年 07月— 2018年 07月进入手术室的 15名新护士作为对照组， 2018年 07月— 2019年 07进入手术室的 15名新护士作为观察组。对照组采用传统的教学模式，观察组采用百度网盘信息化结合备忘录教学模式进行培训。结果 培训后两组手术室新护士各专科理论考核成绩、手术医生对其专科配合满意度、规范化操作、应急反应满意度、物品准备齐全满意度、年度综合能力考评合格率进行比较，差异有统计学意义 ( P ＜ 0. 05)。结论 百度网盘信息化结合备忘录教学应用于手术室护士规范化培训，可有效提高护士学习的灵活性和机动性，提高了教学质量，减少带教老师反复的说教，也便于护士在工作之余充分利用零散时间完成术前预习，术后复习、巩固专科理论知识，并促进其尽快掌握专业技术技能，值得在临床上推广应用。

简介：摘要目的研究腹腔镜经腹腹膜前疝修补术（TAPP）式与网塞修补术式对腹股沟斜疝患者性功能的影响。方法选取2018年1月至2019年10月在解放军联勤保障部队第922医院就诊的腹股沟斜疝患者104例，按照随机数字表法分为常规组和TAPP组，每组52例。常规组采用网塞修补术治疗，TAPP组采用腹腔镜TAPP治疗，术后6个月采用国际勃起功能指数-5（IIEF-5）评估患者性功能，术后1个月采用疼痛视觉模拟量表（VAS）评估患者疼痛情况，统计两组手术相关指标、手术并发症发生情况，并进行比较。结果术后6个月两组IIEF-5评分高于术前，睾丸体积、睾丸动脉最大血流速度低于术前，差异有统计学意义（P<0.05）。术后6个月TAPP组IIEF-5评分高于常规组[（23.86 ± 1.5）分比（21.45 ± 3.85）分]，睾丸体积、睾丸动脉最大血流速度高于常规组[（9.65 ± 0.08） cm3比（9.39 ± 0.09） cm3、（3.83 ± 1.05） cm/s比（2.88 ± 0.36） cm/s]，差异有统计学意义（P<0.05）。术后1个月，两组VAS评分均低于术前，并且TAPP组VAS评分低于常规组[（1.65 ± 0.35）分比（2.78 ± 0.39）分]，差异均有统计学意义（P<0.05）。TAPP组手术时间长于常规组[（44.35 ± 6.26） min比（41.80 ± 5.95） min]，术中出血量、下床活动时间、住院时间低于常规组[（54.66 ± 8.98）ml比（73.25 ± 15.25） ml、（12.75 ± 2.42） h比（23.55 ± 3.66） h、（3.25 ± 1.01） d比（7.85 ± 1.44） d]，差异均有统计学意义（P<0.05）。TAPP组并发症发生率低于常规组[3.85% （2/52）比21.15%（11/52）]，差异有统计学意义（χ2=7.121，P<0.05）。结论TAPP术式治疗腹股沟斜疝患者与网塞修补术式相比，能改善患者性功能，缓解患者疼痛，提高治疗效果，减少并发症发生。

简介：摘要目的探讨肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)在抗β2GP1/β2GP1复合物诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成中的作用。方法分离健康人外周血中性粒细胞与抗β2GP1/β2GP1复合物(100 μg/ml)共孵育一定时间，Western blot检测细胞PAD4表达；进一步采用PAD4抑制剂Cl-amidine(10 μmol/L)预处理中性粒细胞，Western blot检测细胞瓜氨酸化组蛋白3(CitH3)蛋白质表达，ELISA检测细胞培养上清中髓过氧化物酶(MPO)-DNA相对含量。下腔静脉狭窄法建立APS小鼠血栓模型，并通过腹腔注射Cl-amidine(50 mg/kg)进行干预，Western blot检测血浆中CitH3蛋白质表达，荧光染色法检测血浆中循环游离DNA(cf-DNA)浓度，取下腔静脉血栓称其重量，观察Cl-amidine能否抑制APS-IgG诱导的NETs和血栓形成。组间差异采用t检验或单因素方差分析。结果抗β2GP1/β2GP1复合物能够显著下调细胞质中PAD4蛋白质表达水平[(3.67±0.32) vs (1.47±0.19)，t＝10.22，P<0.05]，并使细胞核内PAD4蛋白质含量升高[(0.57±0.19) vs (2.97±0.31)，t＝11.49，P<0.05]；Cl-amidine能显著抑制抗β2GP1/β2GP1复合物诱导的中性粒细胞CitH3蛋白质表达[(2.46±0.47) vs (0.46±0.13)，t＝12.24，P<0.01]，明显减少培养上清中MPO-DNA含量[(4.09±0.94) vs (2.80±0.57)，t＝4.23，P<0.05]。在体内试验中，Cl-amidine能显著抑制APS小鼠血浆中CitH3蛋白质表达[(3.97±0.56) vs (1.09±0.45)，t＝11.83，P<0.01]，明显降低APS小鼠血浆中cf-DNA浓度[(2 685.0±735.8) vs (1 784.0±577.0)，t＝3.93，P<0.05]；与对照组EAPS小鼠相比，经Cl-amidine预处理的APS小鼠血栓形成明显减小[(8.22±3.06) vs (4.89±1.90)，t＝2.27，P<0.05]。结论PAD4参与了抗β2GP1/β2GP1复合物诱导的NETs形成，其可能在APS血栓形成中发挥重要作用。

简介：摘要目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase, p38MAPK）-肌质网Ca2+-ATP酶2α（sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca2+ ATPase 2α, SERCA2α）信号通路在大鼠心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury, I/RI）中的作用。方法采用随机数字表法将45只雄性SD大鼠（体重250~300 g）分为A组、B组和C组（每组15只），其中A组用于测定心肌梗死面积，B组用于检测心肌组织p38MAPK和SERCA2α蛋白量，C组用于检测心肌组织SERCA2α mRNA。分别将A组、B组和C组组内大鼠按随机数字表法分为3组（每组5只）：假手术组（Sham组）、缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）组（I/R组）、I/R+SB203580组（I/R+S组）。I/R+S组于术前1 h腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580（2 mg/kg），其余两组于术前1 h仅注射等体积生理盐水。采用结扎冠状动脉左前降支（left anterior descending, LAD）30 min后再灌注10 min的方法建立大鼠心肌I/RI动物模型。再灌注结束后，动脉血气分析法监测大鼠内环境状态，Western blot法检测心肌组织磷酸化p38MAPK（phospho-p38MAPK, p-p38MAPK）、SERCA2α蛋白水平，实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）法检测心肌组织SERCA2α mRNA水平，伊文蓝及2，3，5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC）双染色法测定心肌缺血和心肌梗死面积。结果各组大鼠血气分析结果差异无统计学意义（P>0.05）。与Sham组比较，I/R组与I/R+S组心肌梗死面积与心肌组织中p-p38MAPK蛋白水平明显增加（P<0.05）、SERCA2α蛋白及mRNA水平明显降低（P<0.05）。与I/R组比较，I/R+S组心肌梗死面积明显减少、p-p38MAPK蛋白水平明显降低（P<0.05），SERCA2α蛋白和mRNA水平明显升高（P<0.05）。结论p38MAPK可能通过介导SERCA2α参与大鼠心肌I/RI。

简介：摘要目的探讨抗磷脂综合征(APS)血栓形成的炎症环境中自噬是否参与多型核中性粒细胞(PMNs)释放中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)，以及IFN-λ1(IL-29)是否具有抑制NETs相关凝血酶生成的作用。方法体外研究活动期APS患者血清刺激健康志愿者外周血分离的PMNs，IL-29和3-甲基腺嘌呤(3-MA)作为NETs释放和自噬的调节因子，通过免疫荧光技术(IFT)和流式细胞术(FCM)评估NETs的表达，Western blot检测自噬相关蛋白的表达，酶联免疫吸附试验(ELISA)测定凝血酶-抗凝血酶(TAT)复合物水平。结果将APS患者血清刺激健康人PMNs释放的NETs作为对照组，其免疫荧光技术检测表达水平为(22.8±3.1)%，流式细胞术分析表达水平为(10.1±2.7)%。IL-29和3-MA抑制了APS患者血清刺激的健康人PMNs上NETs的释放，免疫荧光技术检测表达水平分别为(5.3±2.2)%和(4.9±2.4)%，流式细胞术分析的表达水平分别为(2.1±1.3)%和(2.7±1.4)%，与对照组相比差异均有统计学意义(q＝9.89、10.67、11.74、9.61，P均<0.01)。IL-29抑制了APS患者血清刺激的健康人PMNs上LC3B的表达，促进了p62的表达，与APS患者血清刺激的健康人PMNs中自噬相关蛋白的表达水平相比，差异均有统计学意义[LC3B/GAPDH：(0.28±0.03)% vs(0.77±0.06)%，q＝8.65；p62/GAPDH：(0.63±0.05)% vs(0.33±0.03)%，q＝4.78；P均<0.01]。IL-29和3-MA降低了NETs相关TAT复合物的水平，与APS患者血清刺激健康人PMNs释放的NETs相关TAT复合物水平比较，差异均有统计学意义[(3.1±0.5)ng/ml和(4.7±0.4) ng/ml vs(7.6±0.6) ng/ml，q＝6.34和5.15，P均<0.01]。结论自噬机制参与了APS血栓形成患者血清刺激的健康人PMNs中NETs的释放以及随后的凝血级联激活，IL-29通过抑制自噬减少NETs的生成以及其相关凝血酶的产生。