简介:摘要目的探讨硫化氢(H2S)对小肠缺血/再灌注损伤(IRI)大鼠磷脂酰肌醇3 -激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路表达的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、IRI组、H2S供体硫氢化钠(NaHS)干预组(IRI+NaHS组),每组10只。采用无损伤血管夹夹闭肠系膜上动脉(SMA)60 min、再灌注120 min的方法建立大鼠肠IRI模型;Sham组仅分离SMA后关腹。恢复SMA血流前10 min,IRI+NaHS组经尾静脉注入100 μmol/kg NaHS后以1.07 mmol·kg-1·h-1的速度维持输注至再灌注120 min;Sham组和IRI组则给予等体积生理盐水。实验结束后取下腔静脉血,采用敏感硫电极法测定血浆H2S浓度。取血后处死大鼠取回肠组织,采用苏木素-伊红(HE)染色观察组织病理学改变并进行Chiu评分;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测磷酸化Akt(p-Akt)、Akt、PI3K、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达。结果与Sham组比较,IRI组肠黏膜组织结构紊乱、水肿,绒毛断裂、脱落,病理评分明显升高(分:4.21±0.15比0.15±0.03,P<0.01),血浆H2S水平明显降低(μmol/L:26.72±3.17比38.34±5.24,P<0.01),回肠组织p-Akt、PI3K、caspase-9、mTOR蛋白表达明显升高(p-Akt/GAPDH:2.67±0.12比0.24±0.05,PI3K/GAPDH:1.42±0.07比0.57±0.08,caspase-9/GAPDH:4.23±0.61比0.13±0.02,mTOR/GAPDH:2.17±0.23比0.23±0.02,均P<0.01)。与IRI组比较,IRI+NaHS组肠黏膜病理改变减轻,病理评分明显下降(分:1.56±0.02比4.21±0.15,P<0.01),血浆H2S水平明显升高(μmol/L:32.36±2.45比26.72±3.17,P<0.01),回肠组织p-Akt、PI3K蛋白表达进一步升高(p-Akt/GAPDH:5.12±0.08比2.67±0.12,PI3K/GAPDH:3.14±0.05比1.42±0.07,均P<0.01),而caspase-9、mTOR蛋白表达明显降低(caspase-9/GAPDH:2.12±0.24比4.23±0.61,mTOR/GAPDH:1.37±0.28比2.17±0.23,均P<0.01)。结论H2S通过上调PI3K/Akt信号通路表达,下调caspase-9、mTOR表达,从而减轻IRI大鼠肠损伤。
简介:摘要目的对尿激酶溶栓治疗2h内急性ST段抬高型心肌梗死疗效进行观察分析。方法抽取我院于2015年2月-2016年1月间收治的患有2h内急性ST段抬高型心肌梗死的59例患者作为实验对象,分成试验组和对照组两组。对试验组患者给予尿激酶溶栓的治疗方法,对照组则给予常规溶栓的治疗方法。对组间患者治疗后的情况进行比较。结果试验组与对照组相比,其再通率优于对照组,P<0.05;治疗后,试验组并发症发生的概率与对照组相比,明显降低,P<0.05。结论对2h内急性ST段抬高型心肌梗死的患者而言采取尿激酶溶栓治疗的方法,临床效果较为理想,并发症率低,安全度高,值得推广。
简介:目的研究血清Hcy、β2MG及hs-CRP检测对H型高血压冠心病患者的意义。方法观察90例H型高血压冠心病患者进行血清Hcy、β2MG及hs-CRP检测的结果,所有研究对象包括急性心肌梗死、非稳定性心绞痛、稳定性心绞痛患者各30例,观其血清相关指标检测结果,对比单支、双支、三支冠状动脉病程度与血清Hcy、β2MG及hs-CRP水平的关系,分析讨论。结果经检测,单支病变、双支、三支病变的血清Hcy、β2MG及hs-CRP水平不同,随着病变支数的增加,相应水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清Hcy、β2MG及hs-CRP检测在评估H型高血压冠心病患者病变程度方面具有重要意义。
简介:摘要目的分析淮南市2016年2—4月外环境标本中H9N2亚型禽流感病毒基因组特征。方法选取H9N2亚型荧光PCR检测核酸阳性标本(Ct值≤30),经鸡胚分离培养提取RNA,扩增8个基因节段进行全基因序列测定,分析淮南株各基因节段分子特征,构建进化树进化分析。结果淮南市外环境2株H9N2禽流感毒株血凝素(hemagglutinin, HA)基因和神经氨酸酶(neuraminidase, NA)基因与A/Anhui-Lujiang/39/2018/H9N2人源株核苷酸同源性分别为98.2%~98.3%/97.2%~94.9%,氨基酸序列同源性为98.9%~98.8%/99.2%~98.6%,其余6个内源基因与A/Anhui/1/2013/H7N9、A/Anhui/33163/2016/H5N6高度同源;基因进化分析显示,2016年淮南市2株H9N2亚型禽流感毒株为G57基因型,淮南市2株H7N9分离株、安徽人感染A/Anhui/1/2013/H7N9和A/Anhui/33163/2016/H5N6内源基因均为G57-like基因型;HA蛋白受体结合域氨基酸S132D、K138T、T189D、V/A190T、Q226L变异,NA茎区缺失了"TEI"序列,H274Y、R292K、N294S耐药位点未发生变异,PA基因I550L,PB1基因I368V,PB2基因I504V,NS1基因P42S,M1基因N30D、T215A,M2基因耐药S31N位点均发生突变。结论淮南市活禽市场H9N2病毒与人感染H9N2安徽株A/Anhui-Lujiang/39/2018/H9N2高度同源,处于同一进化分支,均为G57基因型,可提供内源基因与人感染H7N9、H5N6亚型禽流感病毒重组;HA受体结合域氨基酸位点、NA茎区缺失序列、聚合酶活性增加,均加强病毒感染人类的能力,M2离子通道抑制剂(金刚烷烃类)耐药,NA抑制剂(磷酸奥司他韦)仍为敏感药物。
简介:摘要目的分析牛磺酸对高糖诱导的H9c2心肌细胞产生的保护作用以及机制。方法将心肌细胞H9c2分为3组,①正常对照组葡萄糖浓度为5.5mmol/L;②高糖组葡萄糖浓度为25.5mmol/L;③牛磺酸干预组在高糖组基础上加用40mmol/L的牛磺酸进行干预。药物干预48h后,收集细胞,检测心肌细胞凋亡发生率、丝裂原活化蛋白激酶p38MAPK的蛋白含量、TNF-α表达量、MDA及SOD水平。结果H9c2心肌细胞的凋亡率增加,细胞TNF-α、MDA水平升高,与对照组比较(P<0.05);加入牛磺酸干预后,细胞凋亡率减小,SOD水平升高,与高糖组比较(P<0.05)。结论牛磺酸能够减轻高糖对H9c2心肌细胞的增殖抑制,对高糖诱导的H9c2细胞损伤起保护作用。
简介:ToconstructandexpressthefusionproteinStx2B-IntiminC300ofEHEC0157:H7,andtofurtherinvestigateitsimmunoprophyiacticpotential,thegeneofStx2B(stx2b)fromEHEC0157:H7chromosomewasclonedintopMD18-Tvector.Thereafter,theamplifiedgenewasclonedintoprokaryoticexpressionplasmidpET-28a(+)-eaeC300,whichwasconstructedpreviously.TherecombinantpasmidpET-28a(+)-stx2b-eaeC300wastransformedintoE.coliBL21(DE3).Afterinducement,theproteinStx2B-IntiminC300wassuccessfullyexpressedandanalyzedwithsodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis(SDS-PAGE),WesternblottingandN-terminalaminoacidresidualsequencing.Toevaluateitsimmunoprophyiacticpotential,itwasprimarilypurifiedbyion-exchangechromatographyandinjectedinto30BALB/cmicewithAl(OH)3inthesubscapularregion.Tendaysafterthelastboostervaccination,20micewereattackedwithEHEC0157:H7lysateandtheprotectiveefficacywasobserved.Inthepresentstudy,thegeneofStx2B-IntiminC300wassuccessfullyclonedintopET-28a(+)vector.TheresultsofSDS-PAGEandWesternblottingassayshowedthatthefusionproteinwassuccessfullyexpressedintheinclusionbodyform,accountingfor25%oftotalexpressionproducts,anditsmolecularweightwasabout43kDa.TheresultoftheN-terminalaminoacidresidualsequencingshowedthatitwasidenticaltothatofthemoleculardesigned.Thepuritywasabout75%afterprimarypurification.AnimaltestsrevealedthatthefusionproteinStx2B-IntiminC300haselicitedhightiterofprotectiveantibodyrelatively.TheseresultsdemonstratethatthefusionproteinStx2B-IntiminC300issuccessfullyexpressedinprokaryoticexpressionsystemandshowscertainimmunoprophyiacticpotential.
简介:目的本研究旨在观察钙敏感受体(calcium-sensingreceptor,CaSR)在高糖诱导H9C2心肌细胞中的表达以及其对氧化应激的作用.方法将H9C2细胞在不同条件下干预24h,包括正常糖浓度组(NG组)、高糖组(HG组)、高糖+CaSR激动剂组(HG+GdCl3组)、高糖+CaSR抑制剂组(HG+NPS2390组).用CCK8试剂盒检测细胞存活率;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧簇(ROS)含量;用比色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量.用Westernblot检测细胞CaSR蛋白表达水平.结果细胞存活率呈糖浓度依赖性降低[(89.00±1.54)%比(98.83±0.47)%,P<0.01],CaSR蛋白表达量呈糖浓度依赖性增加2.14±0.09比1.06±0.05,P<0.01).高糖诱导可使细胞发生氧化应激,SOD(14.14±0.57比22.86±0.58,P<0.01)与GSH-Px(2.62±0.59比3.04±0.89,P<0.01)活性降低,ROS(0.040±0.002比0.020±0.001,P<0.01)与MDA(0.83±0.05比0.54±0.02,P<0.01)生成增多.与HG组相比,HG+GdCl3组细胞氧化损伤加重(P<0.05).而HG+NPS2390组细胞氧化损伤减轻(P<0.05).结论高糖能上调CaSR蛋白表达进而促进氧化应激的发生.
简介:摘要目的探讨骨膜蛋白(POSTN)对高糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用,并初步探索其调控机制。 方法将POSTN siRNAs或pcDNA3.1-POSTN质粒转染到高糖诱导的H9c2细胞中,从而抑制POSTN的表达或使其过表达;采用RT-PCR检测POSTN mRNA或let-7c水平;Western blot检测蛋白水平;CCK-8检测细胞活性;流式细胞仪和TUNEL方法检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测POSTN和let-7c的靶向关系。 结果高糖处理的H9c2细胞诱导POSTN的表达上调(P<0.05)。抑制POSTN表达,能够提高H9c2细胞活性,降低高糖诱导的细胞凋亡,同时上调Bcl-2表达并下调Bax和cleaved Caspase-3的表达(均为P<0.05)。而过表达POSTN能够提高高糖诱导的细胞凋亡。并且发现POSTN是let-7c的一个靶基因,在高糖处理的H9c2细胞中let-7c表达下调(P<0.05),并通过靶向POSTN负向调控其表达。 结论POSTN在高糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡中发挥重要作用。抑制POSTN表达能够提高H9c2细胞活性并降低细胞凋亡,且POSTN的表达和功能与let-7c的调控有关。
简介:摘要目的探讨缺氧复氧(hypoxia reoxygenation, HR)对H9C2心肌细胞凋亡、自噬和焦亡3种细胞死亡方式的影响。方法将培养的H9C2心肌细胞按随机数字表法分为正常对照组(Ctrl组)和HR组,其中HR组H9C2心肌细胞在缺氧培养箱中进行氧糖剥夺8h,然后复氧12 h。通过检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)含量及四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide, MTT]比色法检测细胞活力来评估细胞损伤情况(每组6孔),Western blot检测(每组9孔)细胞凋亡相关蛋白[天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate-specific proteinase, caspase)-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia 2, Bcl-2)、Bcl相关蛋白(bcl-associate x protein, Bax)]、自噬相关蛋白[(轻链蛋白3(light chain 3, LC3)Ⅱ/Ⅰ、p62、Beclin-1、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of ra-pamycin, p-mTOR)]、焦亡相关蛋白[Nod样受体蛋白-3(nod-like receptor pyrin domain3, NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apopto-sis associated speck-like protein, ASC)、caspase-1p20、IL-1β、IL-18]。通过免疫荧光染色进一步评估细胞凋亡、自噬及焦亡情况(每组6孔)。结果与Ctrl组比较,HR组H9C2心肌细胞HR后细胞活力降低(P<0.05),LDH释放增加(P<0.05),活化的cas-pase-3及Bax的表达上调(P<0.05),Bcl-2表达下降(P<0.05),TUNEL染色显示HR后细胞凋亡显著增加(P<0.05),提示HR后细胞凋亡及损伤增加;而p-mTOR、p62均表达增加(P<0.05),但LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1蛋白降低(P<0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ免疫荧光染色显示HR后细胞内的自噬小体增加(P<0.05),表明HR后H9C2心肌细胞自噬受到明显抑制;同时炎性小体NLRP3、ASC、cas-pase-1p20蛋白均显著上调(P<0.05),活化的炎症细胞因子IL-1β、IL-18表达增加(P<0.05),提示HR后NLRP3炎性小体活化,细胞焦亡增加。结论H9C2心肌细胞在HR损伤过程中自噬被抑制,细胞焦亡及凋亡增加。
简介:摘要目的了解贵州省H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的流行与遗传变异情况,为AIV的防控提供依据。方法统计2018年10月—2019年3月贵州省活禽市场外环境AIV检出情况,对选取的H9N2亚型AIV进行基因组的提取、血凝素(hemagglutinin, HA)基因的RT-PCR扩增与测序,并对获得的HA基因序列进行同源性、遗传进化和关键位点变异分析。结果贵州省活禽市场外环境AIV检出率为52.2%,H9N2占阳性的83.7%。H9N2亚型AIV HA基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为91.6%~100.0%和91.0%~100.0%,均属于Y280亚系,G57基因型;与致病性相关的裂解位点序列均为PSRSSRGLF和LSRSSRGLF,符合低致病性AIV的分子特征;与宿主特异性相关的受体结合关键位点存在H191N、E198T/A和Q234L三个位点的突变,具有人样受体结合特征;与毒力相关的糖基化位点均具有7个,其中因突变218位点均存在一个糖基化位点缺失,313位点均存在一个增加。与人感染毒株相比关键位点未发生重要突变。结论贵州省活禽市场外环境AIV检出率较高,污染较严重,且以H9N2为优势流行亚型;H9N2亚型AIV均属于Y280亚系,G57基因型,为低致病性AIV,毒株遗传差异在增大,关键氨基酸位点存在变异,具有感染人的风险,故应加强监测该病毒的分子遗传变异情况。
简介:[摘要]目的 探讨空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)及糖化血红蛋白(HbA1c)的检测对糖尿病诊断的参考价值。方法 选取2023年3月—2023年12月期间于本院接受检查的62例2型糖尿病患者、57例空腹血糖受损患者及60名健康体检人员作为研究对象,分为A组、B组和C组,通过对FPG、2 hPG以及HbA1c的检测,分析各组的检测结果。结果 A组患者的FPG、2 hPG以及HbA1c检测结果高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05),B组、C组患者在FPG、HbA1c检测结果上差异有统计学意义(P<0.05)。在A组确诊为2型糖尿病的患者中,以FPG≥7.0 mmol/L、2 hPG≥11.1 mmol/L、HbA1c≥6.5%为诊断标准,对糖尿病的确诊率分别为53.23%、85.48%和87.10%。而在FPG、2hPG以及HbA1c的联合检测中,检测结果糖尿病的确诊率为98.39%,与其他3项诊断标准对比,差异有统计学意义。结论 在糖尿病的临床诊断中,通过对受检者FPG、2 hPG以及HbA1c等指标的检测,可以有效提高糖尿病诊断的准确性,其对糖尿病的防治有着重要的参考价值。
简介:【摘要】目的:药物联合308nm(SS-16L)紫外线治疗白癜风疗效观察。 方法:选取200例患者均为我院门诊确诊的白癜风患者,临床符合白癜风的诊断标准,资料完整。所有患者均口服中药并(或)配合针剂治疗。治疗6个月后进行评价及统计学分析。 结果:治疗6个月后,各种类型皮损的治疗中又以节段型,局限型及散发型效果较好,总有效率达到100%,97.5%及96.8%,肢端型次之,总有效率达到88.2%,泛发型有效率为62.5%。 结论:药物联合308nm(SS-16L)准分子激光治疗白癜风可以达到协同促进作用,加快黑素细胞的生长,促进白斑复色,缩短病程,提高临床疗效。
简介:目的探讨老年高血压伴有血同型半胱氨酸增高(H型高血压)患者肾功能受损情况。方法将60岁以上原发性高血压263例患者,按血同型半胱氨酸的检验值分为:非H型高血压组、H型高血压1组、H型高血压2组,测定3组病例的24h尿微量蛋白,将3组病例的24h尿微量蛋白进行比较。结果H型高血压2组患者血同型半胱氨酸(24.83±4.00)μmol/L虷型高血压1组患者血同型半胱氨酸(15.73±3.84)μmol/L较非H型高血压组(6.14±3.58)μmol/L显著增高(P〈0.01);H型高血压2组患者24h尿微量蛋白(24.83±4.00)mg/L较H型高血压1组患者24h尿微量蛋白(15.73±3.84)mg/L亦显著增高(P〈0.01)。结论老年H型高血压患者更易发生肾脏损害。
简介:【摘要】目的:探讨2型糖尿病患者血尿酸水平与HbA1c、空腹c肽、餐后2h c肽的关系。方法:回顾性研究,纳入411例2型糖尿病患者,收集其临床资料及生化指标,分别以HbA1c及血尿酸分组,观察血糖、血尿酸及c肽之间的关系,并探索其可能的原因。结果:与平均血糖控制良好组(HbA1c<7%)相比,平均血糖控制不佳组(HbA1c≧7%)的病程、TC、TG、LDL明显升高(p<0.05),而空腹c肽、餐后2小时c肽、血尿酸明显降低(p<0.05)。非高尿酸血症组(非HUA组,血尿酸≦420 umol/L)的HbA1c高于高尿酸血症组(HUA组,血尿酸>420 umol/L),但差异无统计学意义。非HUA组的空腹c肽及餐后2h c肽均明显低于HUA组(p<0.05)。以病程、体质指数(BMI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)为控制变量的偏相关分析显示,血尿酸与HbA1c呈负相关,与空腹c肽及餐后2hC肽正相关,相关系数分别为-0.209、0.249、0.197。结论:2型糖尿病患者的血尿酸和HbA1c呈负相关关系,与空腹c肽及餐后2hC肽呈正相关关系,而较高的血尿酸水平常伴随胰岛素抵抗。