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  • 简介:摘要:目的:观察小儿哮喘缓解期采取人参五味子汤加减疗法的效果。方法:选择哮喘缓解期患儿(2021年2月~2022年2月)研究,总例数60例,依据随机数字表法平均分组,对照组所纳入病例予常规疗法,治疗组所纳入病例予人参五味子汤加减疗法,比较2组指标。结果:①治疗效果:治疗组治疗有效率,高于对照组(P<0.05);②临床指标:治疗组中医症候积分,低于对照组,T淋巴细胞种群改善效果高于对照组(P<0.05)。结论:小儿哮喘缓解期采取人参五味子汤加减疗法效果确切,可增强免疫力,纠正T淋巴细胞水平,降低疾病再发,值得借鉴。

  • 标签: 小儿哮喘 缓解期 人参五味子汤 免疫功能 效果
  • 简介:目的探讨自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)细胞治疗对老年非小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞上皮间质转化(EMT)的影响.方法应用免疫磁珠分选循环肿瘤细胞;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测EMT标记CK19、E-cadherin、Vimentin、SnaiI在CIK治疗前后的表达变化,分析其与临床病理特征的关系,比较CIK治疗前后患者卡氏行为状态(KPS)评分的变化.结果40例肺癌患者中,上皮细胞标志CK19、E-cadherin的mRNA阳性表达率分别是90%(36/40)和17.5%(7/40),间质细胞标记Vimentin、Snail的mRNA阳性表达率分别是60%(24/40)和62.5%(25/40).CK19、Vimentin、Snail的阳性表达率与性别无关(P>0.05),与肿瘤的大小、病理分型、分期、淋巴结转移、血行转移明显相关(P<0.05).E-cadherin的阳性表达率极低,与临床病理特征均无相关性.CIK治疗后CK19、E-cadher、Vimentin、Snail的mRNA阳性表达率均显著下降,分别为62.5%(25/40)、0%(0/40)、20%(8/40)、10%(4/40),而且CIK治疗后患者KPS评分显著提高(P<0.05).结论老年肺癌患者循环肿瘤细胞存在EMT,并与肿瘤进展正相关,自体CIK细胞治疗抑制了EMT,并提高了患者的生活质量.

  • 标签: 细胞因子诱导的杀伤细胞 老年非小细胞肺癌 循环肿瘤细胞 上皮间质转化
  • 简介:本研究观察人树突状细胞(dendriticcells,DC)来源的外泌体(DC—derivedexosome,DCex)对人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)成骨分化的影响。采用超速离心法从树突状细胞培养上清中获取DCex,应用电子显微镜观察DCex形态并通过流式细胞术检测和鉴定其细胞来源。取第3代MSC,设3组培养诱导体系:①对照组:d—MEM基础培养液组;②实验组:d—MEM基础培养液+DCex(10μg/m1)组;③α-MEM基础培养液+标准诱导剂组。采用荧光实时定量PCR、琼脂糖凝胶电泳检测各组成骨分化转录因子Runx2mRNA的表达情况,并进行碱性磷酸酶(ALP)活性检测。另外,荧光染料DiI标记DCex,应用共聚焦显微镜观察DCex进入MSC的过程。结果显示,在电子显微镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构,直径为40—100nm,并表达DC细胞的标志CD83,CD86,CD80和HLA—DR。在DCex处理MSC后6h时,可在共聚焦显微镜下观察到进入到MSC胞质内的DCex,随着作用时间延长,细胞荧光强度增加。按组培养第7天,DCex实验组Runx2表达较对照组增高,差异有统计学显著性(P〈0.05);MSC培养第14天,DCex组ALP含量OD值与对应蛋白比为2.22±0.27,显著高于阴性对照组(1.20±0.21)(P〈0.01),但低于标准诱导组(3.22±0.24)(P〈0.05)。结论:DCex可以促进MSC向成骨细胞分化,其且体机制仍需讲一步研穷证实.

  • 标签: 树突状细胞 外泌体 间充质干细胞 成骨分化
  • 简介:目的探索流式细胞术单种CD分子(CD146)标记法和三种CD分子(CD45CD31CD146)标记法对非小细胞肺癌外周血循环内皮细胞(circulatingendothelialcells,CECs)检测效果的影响。方法采用流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法检测60例非小细胞肺癌患者及20例健康人外周血CECs。结果流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法对非小细胞肺癌患者和健康人外周血循环内皮细胞检测成功,两种方法显示肺癌患者外周血CECs均高于健康对照,差异有统计学意义(P〈0.05)。两种方法测定CECs的结果呈正相关,有统计学意义(r=0.834,P〈0.01)。精密度试验显示三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。结论单种CD146和三种CD分子标记非小细胞肺癌患者和健康人外周血细胞均可经流式细胞术用于测定CECs,三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。

  • 标签: 非小细胞肺癌 循环内皮细胞 流式细胞术
  • 简介:摘要目的通过低黏附培养培养法建立人膀胱癌T24细胞三维培养模型,为膀胱癌治疗药物早期开发提供灵敏度高的体外筛选模型。方法采用1000个/孔-8000个/孔的密度将T24细胞接种至低黏附培养板中培养5天,或5000个/孔接种量培养12天,观察细胞球形态并考察不同细胞接种数量和不同培养时间对细胞球体积的影响。采用Westernblot比较二维培养及三维培养的T24细胞中缺氧诱导因子-1α(Hif-1α)的表达变化。采用不同浓度的顺铂及丝裂霉素处理细胞,比较二维及三维培养的T24细胞对药物敏感性差异。结果采用低黏附培养法T24细胞能形成形状较为规则的三维细胞球,且细胞球体积随着细胞接密度及培养时间的增加而增大;三维培养的T24细胞中Hif-1α的表达高于二维培养的T24细胞,且随着三维培养时间的增加而增加。三维培养方式下,丝裂霉素及顺铂的IC50值分为1.39μg/mL及18.29μg/mL,远高于二维培养条件下的0.10μg/mL及2.42μg/mL。结论采用低黏附培养培养法建立的T24细胞三维培养模型具有操作简便、快速,预测准确率高的优点,是理想的膀胱癌治疗药物早期开发体外活性筛选模型。

  • 标签: 低黏附培养法 三维培养 膀胱癌 T24细胞
  • 简介:【摘要】本实验选择不同浓度高糖、不同浓度高糖加上缺氧及在不同的作用时间下用半定量RT-PCR测定人视网膜上皮细胞中上皮细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)与色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor, PEDF)的表达变化情况,并用ELISA法检测培养液上清中VEGF与PEDF蛋白水平,从而为氧疗在治疗糖尿病视网膜病变及其他糖尿病微血管病变寻找新的理论依据。

  • 标签: 缺氧 高糖培养 人视网膜上皮细胞 VEGF PEDF
  • 简介:目的探讨调控体外培养大鼠血管平滑肌中微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)的表达水平对该类细胞迁移和侵袭能力的影响。方法0.1%Ⅱ型胶原酶消化分离血管平滑肌细胞并进行培养,用免疫组化染色法检测细胞胞浆内α-肌动蛋白的表达。试验分为6组:空白对照组(加DEPC水)、单纯转染试剂组(仅加lipofectamineTM2000)、阴性对照组(转染阴性对照序列)、上调miRNA-21组(转染miRNA-21拟似)、下调miRNA-21组(转染miRNA-21阻遏)、无关序列组(转染无关序列)。利用lipofectamineTM2000将miRNA-21转染到培养的血管平滑肌细胞中,采用real-timePCR分别检测各组细胞miRNA-21的表达水平。采用细胞划痕实验分别检测各组细胞体外迁移能力的变化和transwell侵袭小室模型分别检测各组细胞侵袭能力的变化。结果原代血管平滑肌细胞在相差显微镜下呈现‘谷和峰’的生长特点,胞浆内α-肌动蛋白染色阳性的细胞数占总细胞数的98%以上。与对照组相比,上调miRNA-21组的血管平滑肌细胞体外迁移和侵袭能力明显增强(P<0.05),下调miRNA-21组的血管平滑肌细胞体外迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论miRNA-21可以促进血管平滑肌细胞迁移和侵袭。

  • 标签: 血管平滑肌细胞 微小RNA-21 迁移 侵袭
  • 简介:目的探索物理混合及化学交联两种方法制备的细菌纤维素(BC)/明胶支架材料用于成骨细胞体外培养的可行性。方法采取物理混合和化学交联两种方法将BC和明胶两者结合制备出海绵状复合体,接种成骨细胞培养观察细胞形态,考察ALP活性表达,HE染色和共聚焦观察材料表面细胞情况和粘附。结果物理混合法制备的BC/明胶细胞增殖和粘附性能,ALP表达量优于单纯BC和化学交联制备的BC/明胶。结论物理混合法制备BC/明胶复合支架材料可以作为成骨细胞体外培养的良好载体。

  • 标签: 成骨细胞 BC/明胶 生物相容性 复合支架
  • 简介:目的建立犬骨髓单个核细胞(Bonemarrowmononuclearcells,BMNCs)的分离培养、体外扩增和成骨诱导方法,为骨缺损的修复提供理想的骨组织工程种子细胞。方法用1.063g/mlpercoll液分离2.5mlBeagle犬骨髓,利用细胞贴壁筛选法进行分离、培养、扩增和成骨诱导。结果采用1.063g/mlpercoll液可获得纯度较高的BMNCs,接种细胞生长良好,平均倍增周期为1d,经成骨诱导培养后可定向分化为成骨细胞。结论采用1.063g/mlpercoll液能够较好的进行Beagle犬BMNCs的分离培养和体外扩增,分离得到的细胞具备骨髓基质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)的特性。

  • 标签: 单个核细胞 骨髓 细胞培养
  • 简介:为了研究二烯丙基二硫化(diallyldisulfide,DADS)对白血病HL-60细胞株VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白分泌的作用,并从影响VEGF生成的角度探讨DADS的抗白血病机制,应用ELISA法检测药物作用前后白血病HL-60细胞培养上清液中VEGF蛋白的含量;RT-PCR法检测药物作用前后白血病HL-60细胞VEGFmRNA的相对含量。结果表明:HL-60细胞中均有VEGFmRNA的表达和VEGF蛋白的分泌;与空白对照相比,DADS3个浓度组(0,625,1,25,2,5μg/ml)作用HL-60细胞48小时和72小时均能下调HL-60细胞VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌(P〈0.01)。3个浓度组间差异显著(P〈0.01),其下调HL-60细胞VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌效果与浓度相关(r〉0.9,P〈0.01)。结论:DADS可能通过抑制VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌发挥抗白血病效应。

  • 标签: 二烯丙基二硫化物 HL-60细胞 白血病 血管内皮细胞生长因子
  • 简介:【摘要】目的:分析治疗宫颈癌患者时,采取解毒化瘀汤联合新辅助化疗的价值。方法:择60例患者,分对照组(行新辅助化疗)、观察组(行解毒化瘀汤联合新辅助化疗),比较效果。结果:观察组T细胞亚群高于对照组,P<0.05;观察组血清肿瘤标志低于对照组,P<0.05。结论:宫颈癌患者采取解毒化瘀汤联合新辅助化疗,具有高临床价值,能够提高治疗

  • 标签:
  • 简介:摘要目的探讨自体活力细胞对改善皮肤细胞活性的研究;方法利用随机数字表法将上述研究对象分为试验组和对照组,其中试验组给予自体活力细胞技术配合高浓度生长因子,对照组给予电针透刺法。结果(1)试验组、对照组治疗后与治疗前相比有差异,且差异有统计学意义(P<0.05);(2)治疗后试验组与对照组在各部位皱纹评分比较有差异,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论自体活力细胞术作为一种新型的皮肤手术治疗方式具有很大的应用空间。

  • 标签: 无创焕颜术 皮肤 应用
  • 简介:目的:检测人表皮细胞中是否存在侧群(sidepopulation,SP)细胞,并研究该表型细胞是否表达通用干细胞标志ABCG2和表皮干细胞的标志整合素α6和β1。方法:运用中性蛋白酶和胰蛋白酶两步消化法从手术切除的人包皮组织中分离获得表皮细胞。经Hoechst33342荧光染料和PI染色,流式细胞仪分析并分选SP细胞。采用流式细胞仪分析SP细胞ABCG2、整合素α6和β1的表达情况。结果:人表皮细胞中存在SP细胞,其比例为0.2%~0.3%。用流式细胞仪可检测到在SP细胞以及总表皮细胞中均有少量细胞表达通用干细胞标志ABCG2以及表皮干细胞的标志整合素α6和β1,但二者阳性细胞百分比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:表皮细胞中的SP细胞是否是富集的表皮干细胞仍存在疑问,还需要进一步的动物体内移植实验、克隆形成能力和增殖能力的研究证实。

  • 标签: 侧群细胞 表皮干细胞 ABCG2 整合素Α6 整合素Β1
  • 简介:根据世界卫生组织统计,全球约有2.78亿人患有耳聋疾病。永久性听力损失是由于耳蜗内的毛细胞丧失了再生能力。目前恢复因耳蜗毛细胞丢失而引起的中重度听力损失的唯一方法是使用人工耳蜗或助听器直接刺激听神经。但其使用受限于复杂的听力损伤机制和组织损伤程度。理想的解决方案是用干细胞、基因、药物治疗阻止耳蜗毛细胞的丢失或再生耳蜗毛细胞和螺旋神经节神经元。本文对干细胞再生耳蜗毛细胞和螺旋神经节神经元作如下综述。

  • 标签: 内耳毛细胞再生 干细胞再生 螺旋神经节神经元 重度听力损失 世界卫生组织 耳蜗毛细胞
  • 简介:流式细胞术是对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行高参数的定量分析和分选技术。在基础医学研究领域,流式细胞术测定凋亡过程中细胞所发生的变化,已广泛用于细胞凋亡的定性与定量分析。本文介绍了流式细胞分析检测细胞凋亡的基本原理及最新进展。

  • 标签: 流式细胞仪 细胞凋亡 病理学 生理学
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  • 简介:摘要目的探究把传统中药方剂人参五味子汤加减治疗的方法运用于处于缓解期的小儿哮患者治疗之中的临床效果。方法选择从2016年3月至2017年7月在我院进行治疗的处于缓解期的小儿哮喘患者一共72例进行这次研究。严格按照随机的原则分成两组,对照组采用经典的西医药物糖皮质激素进行疾病的治疗,实验组选择传统中药方剂人参五味子汤加减治疗的方法进行治疗。分析经过不同治疗后不同组患者治疗效果的差异以及不良反应的发生情况。结果实验组患者经过治疗以后,疾病的治疗效果更优秀,而且该组患者不良反应的发生情况明显优于另一组患者,以上指标比较,P<0.05,差异都有统计学上的意义。结论把传统中药方剂人参五味子汤加减治疗的方法运用于处于缓解期的小儿哮患者的治疗之中,而且安全性更高,值得在临床进行大范围的普及和推广。

  • 标签: 人参五味子汤加减 小儿哮喘缓解期 效果
  • 简介:摘要:目的:分析2型糖尿病临床治疗中,白虎人参汤对患者血脂水平的影响及整体治疗成效。方法:研究对象(2019.04-2020.05的2型糖尿病就诊者)随机取样94例,随机数表法分组,行西药治疗(对照组,n=47)和白虎人参汤治疗(研究组,n=47),观察病人血脂水平变化趋势,对比两组临床疗效。结果:两组总有效率依次为95.74%(45/47,研究组)、82.98%(39/47,对照组),研究组疗效更理想。同时,患者血脂水平在用药前差异不大,用药后研究组LDL-C、TG、TC指标比对照组低,HDL-C指标比对照组高,P<0.05。结论:2型糖尿病患者合理服用白虎人参汤后血脂水平明显改善,治疗效果显著,值得推广。

  • 标签: 血脂水平 临床效果 2型糖尿病 白虎人参汤