简介：摘要程序性细胞死亡配体 1（PD-L1）的表达水平与免疫抑制密切相关，介导肿瘤浸润T细胞的活化与凋亡。组蛋白甲基化修饰作为表观遗传修饰的关键步骤，多项前瞻性研究表明其可直接或间接参与调控PD-L1的表达水平，达到增强或抑制抗肿瘤免疫反应的效果，为了解肿瘤免疫逃逸和对临床免疫治疗策略的开发提供了重要的信息。本文就组蛋白甲基化对PD-L1调控的结构和功能基础、组蛋白甲基化酶以及组蛋白去甲基化酶对PD-L1表达调控等方面作一综述。

简介：摘要目的探讨腓骨蛋白-1(Fibulin-1)在高磷诱导的大鼠平滑肌细胞衰老相关钙化过程中的作用及其机制。方法2020年9月至2021年9月自10只6~8周的雄性SD大鼠胸主动脉和腹主动脉提取大鼠原代血管平滑肌细胞。采用磷酸盐(2.5 mmol/L Pi)刺激大鼠平滑肌细胞钙化作为应激性衰老相关钙化模型。通过β-半乳糖苷酶染色评估细胞衰老。通过茜素红染色和细胞钙含量测定判断细胞钙化程度。蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测平滑肌细胞在衰老相关钙化过程中发生表型转化的指标和Fibulin-1表达水平。使用siRNA敲低原代大鼠平滑肌细胞中Fibulin-1表达，免疫荧光检测Psmad3的表达，Western Blot检测Fibulin-1对平滑肌细胞表型转化指标的影响。用重组Fibulin-1培养，并同时加入转化生长因子(TGF)-β抑制剂A83-01和Psmad3抑制剂SIS3，通过Western Blot检测平滑肌细胞衰老和钙化指标。结果在磷酸盐刺激大鼠平滑肌细胞钙化的应激性衰老模型中，Fibulin-1的表达上调(t＝11.20，P<0.01)，平滑肌细胞收缩表型标志物MHC、SM22α表达下调(t值分别为7.97、10.27，均P<0.01)，成骨表型标志物OPN、Bmp2和衰老标志物P53的表达上调(t值分别为4.80、9.56、14.07，均P<0.01)。Fibulin-1敲低后改善了细胞衰老程度和钙沉积(t＝12.90，P<0.05)、降低了平滑肌细胞表型转化蛋白OPN、Bmp2和衰老蛋白P53的表达(t值分别为5.92、10.15、8.28，P<0.05或P<0.01)，同时TGF-β/信号转导蛋白(Smad3)及Psmad3表达被抑制(t值分别为12.90、7.46，均P<0.01)。加入TGF-β/Smad3通路抑制剂后，重组Fibulin-1对平滑肌细胞表型转化蛋白OPN、SM22α和衰老标志蛋白表达P53的促进作用减弱(t值分别为4.52、9.82、3.85，P<0.01或P<0.05)。结论Fibulin-1可通过TGF-β/smad3信号通路促进血管平滑肌细胞发生衰老相关钙化。

简介：摘要目的探讨解脲脲原体GrpE蛋白(Ureaplasma urealyticum GrpE，Uu-GrpE)对树突状细胞成熟的影响及其对T细胞极化的作用。方法表达纯化Uu-GrpE蛋白并利用Western blot鉴定。分离培养小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells，BMDCs)，利用LDH试剂盒分析Uu-GrpE的细胞毒性，流式细胞术检测Uu-GrpE对BMDCs表面共刺激分子CD80和CD86以及主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex Ⅱ，MHCⅡ)表达的影响，ELISA检测其刺激BMDCs后IL-12p70、TNF-α、IL-1β和IL-6等细胞因子的表达；磁珠分选同系异体小鼠的脾脏中初始CD4+T细胞(CD4+Naïve T细胞)，通过构建BMDCs与Naïve T细胞共培养体系分析Uu-GrpE刺激成熟的BMDCs(GrpE-BMDCs)对Naïve T细胞增殖及极化的影响。GrpE-BMDCs经尾静脉注射免疫小鼠并利用ELISA和流式细胞术观察其所诱导的特异性体液和细胞免疫应答。结果成功表达Uu-GrpE并分离出高纯度BMDCs，Uu-GrpE可刺激BMDCs分泌IL-12p70、TNF-α、IL-1β和IL-6等细胞因子且无细胞毒性；同时Uu-GrpE可显著增加BMDCs表面分子CD80[平均荧光强度(mean flourscence indensity，MFI)：(324.00±22.11) vs (91.03±10.95)，P<0.01]、CD86[MFI：(1 176.00±51.39) vs (217.00±14.93)，P<0.01]和MHCⅡ[MFI：(708.70±56.32) vs (185.70±16.77)，P<0.01]的表达；与单独GrpE-BMDCs组和GrpE(热变性)-BMDCs+T细胞组比较，GrpE-BMDCs不仅可刺激Naïve T细胞增殖[刺激指数(stimulation index)：(7.25±0.21), (6.55±0.23), (6.09±0.35)，P均<0.05]，并且还诱导Naïve T细胞分泌Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ [IL-2：(145.60±14.67) pg/ml，(55.92±3.12) pg/ml，(26.05±2.40) pg/ml，P<0.05和P<0.01；IFN-γ：(267.20±37.80) pg/ml, (146.70±20.65) pg/ml，(27.84±6.69) pg/ml，P均<0.05]，而Th2型细胞因子IL-4、IL-10和IL-5则无明显改变。与PBS组和PBS+BMDCs组比较，GrpE-BMDCs经过继转移后，可诱导机体产生Th1型免疫应答。结论Uu-GrpE蛋白明显促进BMDCs成熟及活化，且进一步证明其作为解脲脲原体候选蛋白疫苗可诱导Th1型免疫应答。

简介：摘要目的探讨环指蛋白187(RNF187)调节自噬水平产生对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法通过生物信息学手段分析RNF187在肝癌中的mRNA水平。分别使用小干扰RNA(siRNA)阴性对照和靶基因进行转染的Huh7细胞作为未经转染(NC)组和敲低RNF187组；以上两组细胞转染24 h后添加二甲基亚砜(DMSO)的细胞分别作为NC+DMSO组和敲低RNF187+DMSO组；行siRNA靶基因转染24 h后添加巴弗洛霉素A1(BFA)的细胞作为敲低RNF187+BFA组。通过CCK8细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell实验和蛋白质印迹法探究RNF187对肝癌细胞恶性生物学行为和自噬水平的调控。结果与正常肝脏组织样本比较，RNF187在肝癌样本中的mRNA水平升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组相比，敲低RNF187组细胞在48 h和72 h的吸光度以及12 h和24 h的划痕愈合率均降低，差异具有统计学意义(均P<0.001)。敲低RNF187组24 h后的穿膜细胞数(39.50±5.57)个低于NC组的(128.25±17.35)个，差异具有统计学意义(t＝9.74，P<0.001)。与NC组相比，敲低RNF187组总LC3和Beclin-1的相对表达量均增加，而磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的相对表达量降低，差异具有统计学意义(均P<0.05)。与敲低RNF187+DMSO组相比，敲低RNF187+BFA组的自噬流水平、48 h和72 h的吸光度以及24 h的划痕愈合率均增加，差异具有统计学意义(均P<0.001)。敲低RNF187+BFA组24 h的穿膜细胞数(119.00±2.65)个多于RNF187+DMSO组的(57.67±2.52)个，差异具有统计学意义(t＝29.09，P<0.001)。结论RNF187在肝癌细胞中高表达，敲低RNF187可通过升高细胞自噬水平来抑制肝癌细胞恶性生物学行为。

简介：摘要急性髓细胞白血病(AML)患者以老年患者居多，其疗效影响因素众多。血清铁蛋白(SF)作为一种铁结合蛋白，同时亦为一种非特异性的炎症标志物，可在AML患者的肿瘤细胞增殖、免疫抑制、血管生成、化疗耐药和铁死亡等方面发挥重要作用。目前研究发现，初诊时SF水平升高与AML患者的总体生存(OS)率、无病生存(DFS)率和无事件生存(EFS)率下降，以及复发风险升高显著相关，并且AML患者接受造血干细胞移植(HSCT)前SF水平已被认为是预测患者预后的生物标志物之一。笔者拟就铁蛋白的分子基础及其在AML中的作用机制，SF水平对AML患者的影响，以及铁稳态相关的AML治疗新策略等方面的研究进展进行综述，以总结SF水平与AML的相关性，从而为AML患者的临床诊治决策提供参考。

简介：摘要目的探究高迁移率族蛋白(HMGB)1在子痫前期(PE)母胎界面的表达及其对巨噬细胞的作用。方法选择2020年6月至2021年12月，在四川大学华西第二医院确诊为PE的24例单胎孕妇为研究对象。按照孕妇PE严重程度，将其分别纳入PE组(n＝13)和重度PE(sPE)组(n＝11)。按照随机数字表法，选择同期在本院剖宫产术分娩的正常妊娠孕妇纳入对照组(n＝13)。采用免疫组织化学(IHC)法、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)、实时荧光定量PCR(qPCR)检测3组患者胎盘蜕膜组织HMGB1相对表达水平。采用免疫磁珠富集法分离对照组原代蜕膜巨噬细胞，以不同剂量人重组HMGB1(rHMGB1)对其进行处理48 h，采用流式细胞术检测巨噬细胞表型变化。研究组与对照组PE孕妇年龄、产次等一般临床资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院伦理委员会规定，通过该伦理委员会审查，并获得批准[审批文号：2021(181)]。所有受试者均签署临床研究知情同意书。结果①HMGB1定位于细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞和蜕膜基质细胞的细胞质及细胞核中。②经Western blotting检测sPE组、PE组和对照组HMGB1蛋白相对表达水平分别为3.10(1.50~5.14)、0.63(0.45~2.41)、0.72(0.07~1.49)，3组总体比较，差异有统计学意义(χ2＝9.222，P＝0.010)。③IHC检测结果发现，sPE组、PE组和对照组HMGB1强阳性比例分别为54.6%(6/11)、30.8%(4/13)、0，3组总体比较，差异有统计学意义(χ2＝15.024，P＝0.001)。④sPE组、PE组和对照组HMGB1 mRNA相对表达水平分别为4.49±1.38、3.01±2.08、1.67±1.48，3组总体比较，差异有统计学意义(F＝8.291，P＝0.001)，其中sPE组相对表达水平分别高于PE组及对照组，并且差异亦有统计学意义(P＝0.039、P<0.001)。⑤原代胎盘蜕膜巨噬细胞纯度为97.39%，经rHMGB1处理后，M1型巨噬细胞百分比增加， M1型巨噬细胞标记CD86平均荧光强度(MFI)与rHMGB1含量与呈正相关关系(r＝0.808，P<0.001)。结论PE母胎界面HMGB1表达增加，促进蜕膜巨噬细胞M1型极化，可能导致母胎界面炎性微环境。

简介：摘要目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)在防治大鼠激素性骨质疏松(GIOP)方面的疗效及其潜在的分子生物学机制。方法采用光学显微镜、流式细胞技术对HUC-MSCs进行表征和鉴定。成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、地塞米松(DEX)组、DEX+不同比例HUC-MSCs组。对照组加入正常培养基，DEX组加入10 μmol/L DEX处理，DEX+不同比例HUC-MSCs组加入10 μmol/L DEX处理细胞，然后将HUC-MSCs按照1∶1、10∶1、100∶1的比例在共培养小室中与MC3T3-E1非接触式共培养48 h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力。24只SD大鼠随机分成3组(n＝8)：对照组、模型组、治疗组(HUC-MSCs组)。模型组使用DEX构建GIOP模型，对照组给予等量磷酸盐缓冲液(PBS)，治疗组在构建GIOP模型的同时通过尾静脉注射约106个HUC-MSCs进行治疗。8周后取股骨组织样本，采用苏木精-伊红(HE)染色观察空骨陷窝率，脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色评价细胞凋亡。进行Micro CT扫描，测量骨密度(BMD)、单位组织体积的骨量(Bv/Tv)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)、骨小梁数量(Tb.N)等骨质疏松相关指标。提取组织蛋白后，用蛋白印迹法(Western blot)检测通路蛋白表达。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果流式细胞鉴定结果显示，HUC-MSCs高表达CD44(99.9%)、CD73(98.0%)、CD90(100.0%)、CD105(99.6%)、CD166(99.9%)，低表达CD14(0.43%)、CD19(1.11%)、CD34(0.89%)、CD45(1.06%)、HLA-DR(0.38%)，符合HUC-MSCs表面特异性抗原表达规律。CCK-8显示，模型组较对照组细胞活力明显下降，与HUC-MSCs共培养后可部分恢复MC3T3-E1活力。HE染色对照组、模型组、HUC-MSCs组空骨陷窝率分别为(2.546±1.049)%、(28.720±1.546)%、(13.600±1.012)%。TUNEL染色结果对照组、模型组、HUC-MSCs组TUNEL阳性细胞的比例分别为(2.334±0.789)%、(24.140±4.646)%、(11.610±2.974)%。Micro CT显示模型组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均降低，Tb.Sp增加，HUC-MSCs治疗可以一定程度上逆转上述改变。Western blot结果表明，与对照组比较，模型组β-连环蛋白(β-catenin)、Runt相关基因2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)蛋白表达均明显下降，硬化素(SOST)蛋白表达增加，HUC-MSCs治疗组β-catenin、Runx2、BMP-2表达较模型组增加，SOST表达相应减少。结论HUC-MSCs能够通过Wnt/β-catenin信号通路改善地塞米松所致的骨丢失。

简介：摘要目的研究黄芩素对Aβ25-35损伤PC12细胞中谷氨酸受体相关蛋白表达的影响。方法将PC12细胞按随机数字表法分为对照组、模型组、雌二醇组及不同浓度的黄芩素组，采用噻唑蓝（MTT）法检测各组PC12细胞存活情况。将PC12细胞按随机数字表法分为对照组、模型组、雌二醇组、黄芩素组。对照组、模型组加入DMEM培养液培养，雌二醇组加入1×10-3 μmol/L雌二醇DMEM培养液，黄芩素组加入1 μmol/L的黄芩素的DMEM培养液，干预2 h后，模型组、雌二醇组、黄芩素组加入20 μmol/L Aβ25-35诱导PC12细胞损伤。干预22 h后，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western blot检测雌激素受体β（ERβ）、磷酸化的c-jun氨基末端激酶（p-JNK/JNK）和谷氨酸受体中离子型受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1（NMDAR1）、谷氨酸受体2（GluR2）和钙/钙调素依赖蛋白激酶-Ⅱ（CaMKⅡ）表达。结果与模型组比较，1 μmol/L黄芩素组细胞增殖率［（95.80±2.47）%比（64.34±3.84）%］提高（P<0.01），黄芩素组细胞凋亡率［（7.83±0.67）%比（12.84±0.91）%］明显降低（P<0.01），NMDAR1蛋白［（0.582±0.012）比（0.352±0.012）］、GluR2蛋白［（0.538±0.017）比（0.355±0.006）］、ERβ蛋白［（0.362±0.015）比（0.262±0.018）］表达明显升高（P<0.01），p-JNK/JNK蛋白［（0.476±0.013）比（0.752±0.014）］、CaMKⅡ蛋白［（0.499±0.019）比（0.670±0.016）］表达显著降低（P<0.01）。结论黄芩素对Aβ25-35损伤PC12细胞具有保护作用，其作用机制可能与激活ERβ、抑制p-JNK/JNK活性、调节谷氨酸受体相关蛋白表达有关。

简介：摘要目的研究小檗碱对白血病耐药细胞株K562/A02阿霉素耐药性及蛋白激酶C-α（PRKCA）的影响，探讨其作用机制。方法体外培养人慢性粒细胞白血病K562细胞、阿霉素耐药株K562/A02，使用2.5~50.0 μmol/L的阿霉素处理，检测K562、K562/A02对阿霉素的耐药性，计算药物半抑制浓度（IC50）；采用终浓度5 μmol/L的阿霉素溶液处理K562/A02细胞，并将K562/A02细胞分为对照组、抑制剂组（50 μmol/L PRKCA抑制剂）及小檗碱低、中、高剂量组，采用细胞计数（CCK-8）法检测各组细胞增殖抑制率，通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况，实时荧光定量PCR法检测PRKCA、多药耐药相关基因（MDR1）水平，Western blot法检测PRKCA、多药耐药相关蛋白（MRP）、P-糖蛋白（P-gp）表达情况。结果与K562比较，K562/A02对阿霉素的IC50升高（P<0.05）；与对照组比较，抑制剂组及小檗碱低、中、高剂量组细胞增殖抑制率、凋亡率升高（P<0.05），PRKCA mRNA［（0.45±0.08）、（0.92±0.10）、（0.57±0.05）、（0.35±0.04）比（1.00±0.12）］、MDR1 mRNA［（0.73±0.08）、（0.87±0.09）、（0.65±0.07）、（0.41±0.05）比（1.00±0.11）］及PRKCA蛋白［（0.59±0.09）、（0.78±0.12）、（0.61±0.11）、（0.42±0.07）比（0.96±0.14）］、MRP蛋白［（0.62±0.08）、（0.79±0.13）、（0.62±0.10）、（0.41±0.06）比（0.98±0.14）］、P-gp［（0.55±0.08）、（0.75±0.12）、（0.59±0.09）、（0.35±0.06）比（0.92±0.15）］表达降低（P<0.05），且小檗碱呈药物剂量依赖性（P<0.05）；过表达PRKCA可显著抑制小檗碱逆转K562/A02细胞耐药的作用。结论小檗碱可能通过下调PRKCA逆转人白血病耐药株K562/A02对阿霉素的耐药性。

简介：摘要目的基于RIPK1/RIPK3/MLKL介导的程序性坏死途径，探讨细胞FLICE样抑制蛋白（cellular FLICE-like inhibitory protein, cFLIP）对心肌缺血再灌注损伤的调节作用。方法通过缺氧4 h/复氧12 h构建心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)模型，通过结扎左前降支30 min/再灌注3 h构建大鼠心肌缺血-再灌注（ischemia reperfusion, I/R）模型，使用CCK-8检测各组心肌细胞活力，使用DAPI/PI双染色检测各组心肌细胞坏死率变化，使用STRING数据库预测cFLIP的蛋白互相作用网络，使用TTC染色检测各组大鼠心肌梗死面积，使用Western Blot检测cFLIPL、cFLIPS、p-RIPK1、p-RIPK3以及p-MLKL的蛋白表达或活化水平。结果在心肌细胞H/R损伤和心肌组织I/R损伤过程中，cFLIPL和cFLIPS的蛋白表达均被显著下调，而程序性坏死的相关蛋白RIPK1、RIPK3以及MLKL的磷酸化水平均显著上升。上调cFLIP的蛋白表达可明显地减轻心肌细胞H/R损伤、降低H/R诱导的细胞坏死率并缩小I/R导致的心肌梗死面积。STRING数据库结果显示cFLIP与RIPK1和RIPK3存在直接蛋白相互作用，在心肌细胞H/R损伤模型和心肌组织I/R模型中过表达cFLIP均可显著抑制了RIPK1、RIPK3以及MLKL的磷酸化水平。结论过表达cFLIP可显著抑制RIPK1/RIPK3/MLKL介导程序性坏死发生，从而减轻心肌细胞损伤并缩小心肌梗死面积。

简介：【摘要】目的：社区获得性肺炎是近些年来儿童的高发疾病，存在着较难检测的弊端，本文将根据降钙素原，白细胞，c反应蛋白指标在对于儿童社区获得性肺炎检验的效果进行实验分析。方法：回顾性分析2021年1月到2021年12月在我院确诊的肺炎患儿，肺炎类型可为病毒性、细菌性、支原体性（下文统称为CPA），共计120名。同时寻找120名身体情况健康的儿童。按照对比的基本原理对比两组人员的降钙素原，白细胞，c反应蛋白指标情况，根据数据差异，分析可否根据此种方法对儿童社区获得性肺炎进行检验。结果：肺炎组的降钙素原含量均大于对照组，肺炎组的三种类型当中，此值最小的是病毒性（1.97±2.08），仍高于对照组（0.03±3.41）。肺炎组的c反应蛋白指标均大于对照组，肺炎组的三种类型当中，此值最小的是病毒性（13.10±6.77），仍高于对照组（1.83±4.56）。肺炎组白细胞含量均大于对照组，肺炎组的三种类型当中，此值最小的是病毒性（6.43±1.01），仍高于对照组（4.99±0.99）。三组数据均符合P

简介：摘要：目的：本文主要研究妊娠期的孕妇血清铁蛋白与血红细胞参数，RBC红细胞相关参数：红细胞计数，HB血红蛋白，MCV红细胞平均体积之间的相关性，分析他们之间存在的相关性；方法：选取2021年1月-2022年6月在我院接受妊娠期检查的孕妇2539例，其中妊娠期的孕妇基本怀孕在6-12周之间，测定2539例孕妇血清铁蛋白水平与血红细胞相关参数（RBC红细胞相关参数红细胞计数，HB血红蛋白，MCV红细胞平均体积），并对检测后的数据进行整理和分析。结果：通过对实验数据的整理和分析，说明血清铁蛋白水平与妊娠期的孕妇红细胞参数均有统计学意义（P

简介：摘要 目的  探讨晚期肿瘤患者在输注红细胞前后IgG、IgM、IgA及C3、C4含量的变化。方法 选取2020年1月至2022年1月间我院肿瘤科收治的已确诊的晚期肿瘤患者50例作为此次的观察对象，非肿瘤患者进行过输血的50例作为对照组，分别检测输血前、后血清IgG、IgM、IgA及C3、C4含量。结果 晚期肿瘤患者输血前的IgG、IgM、IgA水平与对照组的相比偏低，差异有统计学意义（p

简介：摘要：目的：探究在儿童呼吸道感染中联合检测C反应蛋白,白细胞与降钙素原的价值。方法：选择2022年1月至2022年12月收治的儿童呼吸道感染患儿80例，按实验室痰培养结果等分为细菌感染组（n=36）与病毒感染组（n=44），再选择同期我院健康体检的儿童40例设为健康对照组，所有入组儿童均进行C反应蛋白,白细胞与降钙素原的检测，对各组儿童的检测结果进行分析比较。结果：细菌感染组患儿CRP、WBC、PCT水平各为（17.57±1.89）mg/L、（13.67±2.47）x109/L、（0.98±0.36）ng/mL，分别较病毒感染组与健康对照组水平高（P0.05）。细菌感染组和病毒感染组患儿CRP、WBC与PCT联合检测阳性率，分别高于单一CRP检测、WBC检测与PCT检测阳性率（P＜0.05）；且细菌感染组患儿各项检测阳性率分别高于病毒感染组（P

简介：摘要目的探讨沉默非肌肉肌球蛋白Ⅱ（NMⅡ）基因的骨髓间充质干细胞（BMMSC）对内毒素/脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠肺细胞外基质（ECM）和肺纤维化的影响。方法采用实验研究方法。取4只1周龄雄性SD大鼠股骨和胫骨骨髓腔细胞并经流式细胞术鉴定为BMMSC。取第3代BMMSC用于后续实验。取细胞，分为用含NMⅡ基因的小干扰RNA序列的pHBLV-U6-ZsGreen-Puro质粒转染的沉默NMⅡ组，转染空载质粒的空载组及未进行任何处理的空白对照组，采用蛋白质印迹法检测干预后72 h的NMⅡ的蛋白表达（样本数为3）。取细胞，于倒置相差显微镜下观察形态；另取细胞，用氯甲基苯甲酰胺（CM-DiⅠ）标记，于倒置荧光显微镜下观察体外细胞标记情况。取20只4周龄雄性SD大鼠，按随机数字表法分为空白对照组、单纯ALI组、ALI+BMMSC组及ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组，每组5只大鼠。对空白对照组不进行任何处理，其余3组大鼠均给予LPS诱导ALI。造模后即刻，单纯ALI组大鼠经尾静脉注射1 mL生理盐水，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠分别经尾静脉注入1 mL 1×107个/mL CM-DiⅠ标记的BMMSC、NMⅡ基因沉默的BMMSC，空白对照组大鼠于相同时间点通过尾静脉注射1 mL生理盐水。干预后24 h，取肺组织于倒置荧光显微镜下观察BMMSC肺内归巢情况。干预后24 h、1周、2周，取肺组织行苏木精-伊红染色观察肺部炎症情况，行Masson染色观察肺纤维化程度并采用改良Ashcroft评分法对干预后2周肺纤维化程度进行评分（样本数为5）。采用免疫组织化学法检测干预后2周α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9的含量（样本数均为3），采用酶联免疫吸附测定法检测干预后24 h超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛、髓过氧化物酶（MPO）活性（样本数均为3），采用免疫荧光染色法检测干预后1周CD11b和含表皮生长因子样模块黏蛋白样激素受体1（EMR1）蛋白表达（样本数均为3）。对数据行单因素方差分析、Bonferroni法及Kruskal-Wallis H检验。结果干预后72 h，沉默NMⅡ组细胞NMⅡ蛋白表达水平显著低于空白对照组和空载组（P值均<0.01）。BMMSC呈长梭形，簇状生长形如旋涡；CM-DiⅠ体外成功标记BMMSC。干预后24 h，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺内细胞归巢现象较ALI+BMMSC组更明显，而空白对照组和单纯ALI组大鼠肺内未见CM-DiⅠ标记的细胞。空白对照组大鼠干预后各时间点肺组织中均未见明显炎症细胞浸润，ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠干预后24 h肺组织炎症细胞浸润较单纯ALI组明显减少，且2组大鼠干预后1、2周肺泡壁变薄，局部肺组织有少量淤血。干预后1、2周，单纯ALI组、ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织胶原纤维沉积均较空白对照组明显加重，但ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织胶原纤维沉积均较单纯ALI组显著改善。干预后2周，单纯ALI组、ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺纤维化改良Ashcroft评分分别为（2.36±0.22）、（1.62±0.16）、（1.06±0.26）分，均明显高于空白对照组的（0.30±0.21）分（P<0.01），ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺纤维化改良Ashcroft评分均明显低于单纯ALI组（P<0.01），ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺纤维化改良Ashcroft评分明显低于ALI+BMMSC组（P<0.01）。干预后2周，与单纯ALI组比较，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织α-SMA含量均显著下降（P<0.05或P<0.01）。4组大鼠肺组织MMP-2含量均相近（P>0.05）。与空白对照组比较，单纯ALI组大鼠肺组织MMP-9含量显著升高（P<0.01）；与单纯ALI组比较，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织MMP-9含量均显著降低（P<0.01）。干预后24 h，与空白对照组比较，单纯ALI组、ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织丙二醛、SOD、MPO活性均显著升高（P<0.01）；与单纯ALI组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织丙二醛活性显著升高（P<0.05），ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织SOD活性均显著升高（P<0.01）；与ALI+BMMSC组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织SOD活性显著降低（P<0.01）。与单纯ALI组比较，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织MPO活性均显著降低（P<0.01）；与ALI+BMMSC组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织MPO活性显著降低（P<0.01）。干预后1周，与其他3组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织CD11b蛋白表达显著增加（P<0.05或P<0.01）；4组大鼠肺组织EMR1蛋白表达均相近（P>0.05）。结论移植沉默NMⅡ基因的BMMSC能更明显改善LPS所致ALI大鼠肺组织ECM成分的活性，重塑其完整性，增强其抗氧化能力，减轻肺损伤和肺纤维化。

简介：摘要：新课程改革正在如火如荼地进行之中，新时期的课程标准已经明确规定了学生是课堂的主体，教师是学生发展的引导者。教师以片段作文训练为载体指导学生进行细节描写这不仅符合新课程改革的要求，也遵循学生身心发展的特点和规律，基于此，本文分析了以片段作文训练为载体指导学生进行细节描写的意义和策略，希望可以为教师的教学以及学生的全面发展提供推动力。

简介：摘要：为了解决学生写作上的畏难情绪、学生作文水平提高不快、没有可写的内容、确定内容又不会找角度、没有逻辑思路等诸多问题，初中语文教师在开展写作教学的过程中，通过结合传统文化内容，来提高学生的语文核心素养以及人文素养，同时在教学过程中主要采用模块化的写作训练方式，帮助学生从素材积累、写作结构、语言建构、情感表达等几个维度入手，引导学生认真观察、深入思考，逐个突破写作困难，而且教师还适当融入了活动式教学，也极大程度提高了学生的写作兴趣。

简介：摘要 目的：探讨血清球蛋白异常患者的免疫球蛋白的IgG、IgM、IgA的变化及电泳分析情况。方法：血清免疫球蛋白的检测方法是免疫比浊法。结果：19例异常患者中；免疫球IgG升高的15例，占78.95%，其均值为43.32±26.1g/L；IgA升高的3例,占15.79%，其均值为20.47±50.12g/L；IgM升高的1例,占5.26%，其均值为1.38±2.48g/L。蛋白电泳结果15例IgG-k型、4例IgA-λ型。结论：免疫球蛋白分型及其蛋白电泳分析对多发性骨髓瘤的临床辅助诊断具有重要意义。

简介：AbstractCOVID-19 has been a global health concern since 2019 until date. Global concerted efforts to combat this pandemic has resulted in a number of vaccines distributed across the globe. Although the presence of these vaccines produced quick interventions, dynamic mutation in the causal virus and the continuous evolution of new stains that defy available vaccines has given rise to pertinent questions. The most recent emergence of a new COVID-19 virus variant (omicron), the rapid spread and overwhelming rate of morbidity and mortality has reopened these questions for debate. This commentary summarizes major view on these questions and concludes that multiple approach including social behavioural measures, vaccination and antiviral drug would speed up elimination process.

简介：AbstractObjective:Otolaryngologists are at increased occupational risk of Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) infection due to exposure from respiratory droplets and aerosols generated during otologic, nasal, and oropharyngeal examinations and procedures. There have been a variety of guidelines and precautions developed to help mitigate this risk. While many reviews have focused on the personal protective equipment (PPE) and preparation guidelines for surgery in the COVID-19 era, none have focused on the more creative and unusual solutions designed to limit viral transmission. This review aims to fill that need.Data Sources:PubMed, Ovid/Medline, and ScopusMethods:A comprehensive review of literature was performed on September 28, 2020 using PubMed, Ovid/Medline, and Scopus databases. All English-language studies were included if they proposed or assessed novel interventions developed for Otolaryngology practice during the COVID-19 pandemic. The Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses (PRISMA) guidelines were followed.Results:A total of 41 papers met inclusion criteria and were organized into 5 categories ('General Recommendations for Otolaryngologic Surgery’, 'Equipment Shortage Solutions’, 'Airway Procedures’, 'Nasal Endoscopy and Skull Base Procedures’, and 'Otologic Procedures’). Articles were summarized, highlighting the innovations created and evaluated during the COVID-19 pandemic. Creative solutions such as application of topical viricidal agents, make-shift mask filters, three-dimensional (3-D) printable adapters for headlights, aerosol containing separation boxes, and a variety of new draping techniques have been developed to limit the risk of COVID-19 transmission.Conclusions:Persistent risk of COVID-19 exposure remains high. Thus, there is an increased need for solutions that mitigate the risk of viral transmission during office procedures and surgeries, especially given that most COVID-19 positive patients present asymptomatically. This review examines and organizes creative solutions that have been proposed and utilized in the otolaryngology. These solutions have a potential to minimize the risk of viral transmission in the current clinical environment and to create safer outpatient and operating room conditions for patients and healthcare staff.