简介:摘要目的探讨以慢病毒(Lentivirus,LV)为载体,转染绿色荧光蛋白(Greenfluorescenceprotein,GFP)基因至神经干细胞(Neuralstemcells,NSCs)的方法,观察其转染效率。方法应用包装细胞293T将三种质粒载体pGC-E1-GFP、pHelper1.0和pHelper2.0经脂质体转染重组,构建成表达GFP的慢病毒载体(Lentiviralvector-GFP,LV-GFP)。并从孕14天大鼠胚胎的脑组织分离出神经干细胞,采用无血清培养法,进行体外培养、扩增。取经过5次传代神经干细胞,以1×105个细胞/500μl/孔接种于24孔板,分别按复感染指数(Multiplicitiesofinfection,MOIs值)为0、1、5、10、15、20加入LV-GFP稀释液100μl,每一滴度加六孔,共六组。48~72小时后于倒置荧光显微镜下观察各组GFP的表达效率,并在72小时后进行神经干细胞球进行计数,以观LV-GFP对NSCs增殖的影响。并行流式细胞仪检测,得出各组NSCs的GFP阳性转染率。结果除MOI值为0的对照组外,48~72小时后各孔均有GFP表达。MOI值从0增至10,细胞的阳性表达率逐渐提高(P<0.05),MOI值为10的组能获得>90%的转染率。但MOI值从10增至20,形成的神经干细胞球数目却逐渐减少(P<0.05)。结论LV是将目的基因转入NSCs的理想载体。以MOI为10的滴度,LV可将GFP基因高效转入神经干细胞内并表达。
简介:摘要目的针对神经内科在日常护理过程中常见的各种护理安全隐患(包括跌倒、烫伤、坠床、非计划性拔管以及走失在内的多种意外受伤问题)展开相应的防范措施,并对以上防范措施的临床护理效果进行分析与评估。方法选取我院自2011年1月~2011年12月所收治的神经内科患者共计180名为研究对象,按照随机抽取的防治将其划分为观察组与对照组两组,每组患者各计90名。观察组患者在接受常规护理的同时接受有关护理安全隐患的相应防范治疗,对照组患者接受常规护理。对两组患者出现跌倒、烫伤、坠床、非计划性拔管以及走失问题的例数进行临床分析与比较。结果观察组患者在接受有关护理安全隐患相关防范治疗的作用之下,出现跌倒、烫伤、坠床、非计划性拔管以及走失等护理安全隐患问题的比率明显低于对照组。观察组与对照组之间比较差异显著(p<0.05)。结论针对神经内科病患常见的各种护理安全隐患问题制定相应的防范措施能够消除或抑制相应的不安全因素,控制各类型护理不良事件的发生频率,从而最大限度的确保神经内科临床护理工作的有序开展,值得临床推广。