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  • 简介:摘要目的探讨商品化免疫胶体金试剂检测临床碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacterales,CRE)产碳青霉烯酶的价值,以期及早预防和控制CRE的流行和暴发。方法收集2016年1月至2020年12月广东省2家三甲医院临床分离的88株非重复CRE,其中广东省中医院64株,中山大学附属第一医院24株。采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测5种常见的碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP-4、blaVIM和blaOXA-48),并用Sanger法测序验证。采用改良碳青霉烯灭活试验(modified carbapenem in activation method,mCIM)联合EDTA碳青霉烯灭活试验(EDTA-modified carbapenem in activation method,eCIM)筛选碳青霉烯酶。根据基因型,采用4种免疫胶体金试剂(KPC、NDM、IMP-4和VIM酶试剂)检测碳青霉烯酶,进一步对碳青霉烯酶表型试验和PCR进行统计学比较和分析。结果88株CRE中,30株携带blaKPC,24株携带blaNDM,9株携带blaIMP-4,5株携带blaVIM,20株未携带碳青霉烯酶基因。mCIM试验灵敏度和特异度分别为97.1%(66/68)和100.0%(20/20),2株分别携带blaNDM和blaIMP-4阴沟肠杆菌为假阴性。mCIM联合eCIM检出36株产金属β-内酰胺酶,与基因型相符。免疫胶体金试剂的总体灵敏度和特异度分别为98.5%(67/68)和100.0%(20/20)。KPC、NDM和VIM酶胶体金试剂的灵敏度和特异度均为100.0%。仅1株携带blaIMP-4的阴沟肠杆菌在IMP-4酶试剂检测中为假阴性,推测与IMP-4酶低表达量有关。Fisher精确检验显示,免疫胶体金试剂与mCIM联合eCIM差异无统计学意义(P<0.001)。结论免疫胶体金试剂(尤其是KPC和NDM酶试剂)在肠杆菌中灵敏度高、特异度强,简便、快速且经济有效,有望成为临床和实验室快速检测碳青霉烯酶的新方法。

  • 标签: 碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌 免疫胶体金试剂盒 mCIM联合eCIM
  • 简介:摘要目的探讨长链非编码RNA同源基因A11反义RNA(HOXA11-AS)在脑胶质瘤中的表达及生物学功能。方法首先分析HOXA11-AS在癌症基因组图谱(TCGA)计划数据库(689例)的低级别脑胶质瘤、胶质母细胞瘤以及GTEx数据库(255例)的正常脑组织样本中的表达情况。基于TCGA数据库,进一步分析HOXA11-AS在世界卫生组织(WHO)Ⅱ~Ⅳ级的脑胶质瘤样本中的表达情况。根据HOXA11-AS表达量的中位数分为高表达组和低表达组,并绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank检验比较HOXA11-AS低表达组与高表达组脑胶质瘤患者的生存差异。进一步的体外实验以人星形胶质细胞为对照组,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验验证HOXA11-AS在脑胶质瘤U251、U87及LN229细胞株中的表达。U87和LN229细胞株中分别使用携带HOXA11-AS cDNA序列的过表达慢病毒载体构建过表达HOXA11-AS的细胞株,使用空载慢病毒载体构建对照细胞株。U87和LN229细胞株中分别使用siRNA转染敲低HOXA11-AS的表达。进一步通过EdU增殖实验、细胞划痕实验和Transwell实验研究HOXA11-AS对胶质瘤细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果HOXA11-AS在正常脑组织、低级别脑胶质瘤及胶质母细胞瘤中表达量的差异具有统计学意义(P<0.001)。TCGA数据库中,WHO Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤的HOXA11-AS表达量均高于Ⅱ级脑胶质瘤(P<0.001)。全级别脑胶质瘤患者中,HOXA11-AS高表达组(n=344)的总生存期短于低表达组(n=345,P<0.001)。进一步的体外实验中,qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,U87组、LN229组及U251组HOXA11-AS的表达均升高(均P<0.001)。U87和LN229过表达组HOXA11-AS的表达均较其对照组上调(均P<0.001)。U87敲低组、LN229敲低组的HOXA11-AS表达均较其对照组下调(均P<0.001)。EdU增殖实验结果显示,U87和LN229过表达组的EdU阳性率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的EdU阳性率均下降(均P<0.001)。细胞划痕实验结果显示,U87和LN229过表达组的细胞迁移率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的细胞迁移率均下降(均P<0.001)。Transwell实验结果显示,U87和LN229过表达组的穿胶细胞数分别多于U87对照组和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的穿胶细胞数均低(均P<0.05)。结论HOXA11-AS在脑胶质瘤中呈高表达,并可促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

  • 标签: 神经胶质瘤 生物学 长链非编码RNA 同源盒基因A11反义RNA
  • 简介:摘要目的评估三种商业化试剂对新型冠状病毒奥密克戎变异株核酸检测的效果。方法收集2021年12月北京市监测发现的经测序分析确定为新型冠状病毒奥密克戎变异株的咽拭子标本8份,同时收集北京市2021年11月监测发现的新型冠状病毒德尔塔变异株咽拭子标本5份,用三种针对新型冠状病毒奥密克戎变异株的商业化荧光定量RT-PCR试剂进行检测,对检测效果进行比较分析。取其中两份Ct值较低的样本10倍系列稀释5个梯度,用于比较检测试剂的灵敏性。结果三种试剂均能特异性地检出8份奥密克戎变异株和5份非奥密克戎株(德尔塔变异株)。试剂A和B的灵敏性高于试剂C一个稀释度。结论三种试剂均能特异性地检测奥密克戎变异株。试剂A核酸用量最少,虽然只检测一个变异位点(Q498R),但该位点是奥密克戎变异株特有的,从而使实验操作和结果判定都更简便。

  • 标签: 新型冠状病毒 奥密克戎 荧光定量RT-PCR 检测试剂盒 评估
  • 简介:摘要目的对目前最常用的金标快速免疫试剂(福建三明蓝波)检测支原体的结果进行临床评估。方法共检测临床标本300例,包括男性174例和女性126例,根据实际情况取患者的痰液、咽拭子、血液检测。结果以支原体培养基(中山天洋电子生物传感器)培养法的结果作对照,该方法与培养法的一致率可达90%。结论两种检测结果之间差异无显著性,但金标法敏感性欠佳。

  • 标签: 肺炎支原体 金标免疫法 培养法
  • 简介:摘要目的探讨长链非编码RNA同源基因A11反义RNA(HOXA11-AS)在脑胶质瘤中的表达及生物学功能。方法首先分析HOXA11-AS在癌症基因组图谱(TCGA)计划数据库(689例)的低级别脑胶质瘤、胶质母细胞瘤以及GTEx数据库(255例)的正常脑组织样本中的表达情况。基于TCGA数据库,进一步分析HOXA11-AS在世界卫生组织(WHO)Ⅱ~Ⅳ级的脑胶质瘤样本中的表达情况。根据HOXA11-AS表达量的中位数分为高表达组和低表达组,并绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank检验比较HOXA11-AS低表达组与高表达组脑胶质瘤患者的生存差异。进一步的体外实验以人星形胶质细胞为对照组,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验验证HOXA11-AS在脑胶质瘤U251、U87及LN229细胞株中的表达。U87和LN229细胞株中分别使用携带HOXA11-AS cDNA序列的过表达慢病毒载体构建过表达HOXA11-AS的细胞株,使用空载慢病毒载体构建对照细胞株。U87和LN229细胞株中分别使用siRNA转染敲低HOXA11-AS的表达。进一步通过EdU增殖实验、细胞划痕实验和Transwell实验研究HOXA11-AS对胶质瘤细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果HOXA11-AS在正常脑组织、低级别脑胶质瘤及胶质母细胞瘤中表达量的差异具有统计学意义(P<0.001)。TCGA数据库中,WHO Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤的HOXA11-AS表达量均高于Ⅱ级脑胶质瘤(P<0.001)。全级别脑胶质瘤患者中,HOXA11-AS高表达组(n=344)的总生存期短于低表达组(n=345,P<0.001)。进一步的体外实验中,qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,U87组、LN229组及U251组HOXA11-AS的表达均升高(均P<0.001)。U87和LN229过表达组HOXA11-AS的表达均较其对照组上调(均P<0.001)。U87敲低组、LN229敲低组的HOXA11-AS表达均较其对照组下调(均P<0.001)。EdU增殖实验结果显示,U87和LN229过表达组的EdU阳性率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的EdU阳性率均下降(均P<0.001)。细胞划痕实验结果显示,U87和LN229过表达组的细胞迁移率分别高于U87和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的细胞迁移率均下降(均P<0.001)。Transwell实验结果显示,U87和LN229过表达组的穿胶细胞数分别多于U87对照组和LN229对照组(均P<0.05);相反,U87敲低组较U87无义序列组、LN229敲低组较LN229无义序列组的穿胶细胞数均低(均P<0.05)。结论HOXA11-AS在脑胶质瘤中呈高表达,并可促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

  • 标签: 神经胶质瘤 生物学 长链非编码RNA 同源盒基因A11反义RNA
  • 简介:目的检测配对家族基因1(PAX1)在不同宫颈病变宫颈脱落细胞中的甲基化水平,评估其作为宫颈上皮细胞癌变分子标志物的价值。方法采用焦磷酸测序法检测PAX1基因的甲基化情况。比较正常组织与低级别宫颈鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别宫颈鳞状上皮内病变(HSIL)和宫颈癌组织(各组20例)甲基化水平的差异。并采用受试者工作特性曲线(ROC)确定癌变组与非癌变组之间的判别临界值。结果①正常宫颈组PAX1基因甲基化水平为(4.57±2.43)%,LSIL组为(3.383±2.364)%,HSIL组为(13.64±13.35)%,宫颈癌组为(26.39±18.53)%,其中正常宫颈组与LSIL组PAX1基因甲基化水平比较,差异无统计学意义(P〉0.05),其他各组间比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。②ROC曲线下面积(AUC)为0.893,提示有较高的诊断价值。取PAX1甲基化水平27%作为临界值,检测灵敏度为97.1%,特异度为85.2%。结论焦磷酸测序法PAX1基因甲基化水平定量检测对于宫颈癌早期临床诊断具有潜在的诊断价值。

  • 标签: 配对盒家族基因1 DNA甲基化 宫颈癌 焦磷酸测序法
  • 简介:摘要:本文主要以20ng·mL-1,以及100ng·mL-1这两个浓度的NSE检测试剂样品为例。运用时间分辨免疫荧光法、化学发光以及电化学发光免疫法、酶联免疫法等方法,测定5种NSE试剂的最低检出限、并对线性批间以及批内精密度,以此来进行准确的分析和评价。经过相关实验之后可以发现,5种试剂存在着较大的低浓度准确性指标差异,试剂不同,其检测结果也存在差异。但是像最低检出限以及精密度等,都能够有效符合检测要求。因此总的来说,国家需要建立关于NSE检测试剂的质量检测标准,这样既能够严格控制试剂的准确性,同时也能够更好的比较不同试剂的检测结果。

  • 标签: 神经元特异性烯醇化酶 试剂盒性能分析 准确性 小细胞肺癌
  • 简介:摘要:目的探究有关针刺加温灸灸法治疗肾虚痰湿型多囊卵巢综合征疗效。方法以肾虚痰湿型多囊卵巢综合征患者40例为对象,研究时间为2017年3月-2021年12月,由两组组成,一组患者是参照组,一组患者是研究组,各20例,参照组患者应用西药治疗,研究组应用针刺加温灸灸法治疗,对比治疗效果。结果研究组治疗有效率高于参照组,P

  • 标签: 针刺 温灸盒灸法 肾虚痰湿型 多囊卵巢综合征
  • 简介:【摘要】目的:艾灸联合小茴香盐包烫熨法治疗腹腔镜术后腹胀的临床观察。方法:选取130例患者均在2022年2月至2024年1月期间,根据随机数字表法分为2组。对照组65例采用艾灸中医理疗方法,观察组65例采用艾灸联合小茴香盐包烫熨法。结果:观察组总有效率93.85%高于对照组(P<0.05),观察组术后首次排气时间(25.32±2.2)h短于对照组,腹胀率7.69%低于对照组(P<0.05),观察组中医证候治疗后嗳气(1.30±0.60)分、腹痛(1.34±0.62)分、腹胀(1.62±0.81)分、总积分(4.33±1.61)分低于对照组(P<0.05)。结论:艾灸联合小茴香盐包烫熨法治疗腹腔镜术后腹胀效果显著。

  • 标签: 艾盒灸 小茴香 腹腔镜 腹胀
  • 简介:目的对食源性致病菌分离株的耐药情况进行调查,掌握我国食源性致病菌的耐药趋势和耐药谱,为指导抗生素在人类临床和动物饲养中的合理应用,控制耐药菌株的传播提供重要的参考性数据。方法根据CLSI推荐的微量肉汤稀释法进行药敏检验,定量测定致病菌的最低抑菌浓度(minimalinhibitoryconcentration,MIC)。结果66株单增李斯特菌对亚胺培南、红霉素、环丙沙星、青霉素、左氧氟沙星、四环素、氯霉素、利福平、庆大霉素、氨苄西林、强力霉素耐药;耐药率分别是:9.1%、6.1%、4.5%、4.5%、3.0%、3.0%、3.0%、3.0%、1.5%、1.5%、1.5%。MIC值4~〉128不等。对头孢噻吩、万古霉素、复方新诺明完全敏感。结论吉林省市售食品中检出的单增李斯特存在多种抗生素耐药。有1株6重耐药;1株4重耐药;2株2重耐药。但66株中耐药谱没有一致的菌株。应高度重视和加强食源性单增李斯特菌的耐药性监测,以保证食品安全和人类健康。

  • 标签: 肉汤稀释法 MIC 单增李斯特菌 结果分析
  • 简介:摘要目的通过与直接荧光抗体染色法和流感病毒核酸检测方法——逆转录酶-聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)比较,探讨免疫荧光法流感病毒抗原检测试剂的临床应用价值。方法采用流感病毒抗原检测(免疫荧光法)试剂(简称Sofia FIA)、直接荧光抗体染色法(DFA)和RT-PCR方法,对2017年7月至12月,350例发热门诊就诊患者进行病原学检测。结果Sofia FIA方法共检出甲型/乙型流感186例,总阳性检出率53.1%,其中检出甲型流感病毒35.4%,乙型流感病毒17.7%。Sofia FIA与RT-PCR比较,针对甲乙型流感联合检测,敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、一致率、kappa值分别为89.4%、100.0%、100.0%、86.6%、93.7%、0.873;针对甲型流感分别为87.9%、100.0%、100.0%、92.5%、95.1%、0.897;针对乙型流感分别为92.5%、100.0%、100.0%、98.3%、98.6%、0.952。DFA与RT-PCR比较,针对甲乙型流感联合检测,敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、一致率、kappa值分别为83.2%、100.0%、100.0%、80.2%、90.0%、0.800;针对甲型流感分别为82.3%、100.0%、100.0%、89.3%、92.9%、0.847;针对乙型流感分别为85.1%、100.0%、100.0%、96.6%、97.1%、0.902。结论Sofia FIA与DFA方法的敏感性、特异性高,与RT-PCR的一致性高,用于流感的筛查有一定临床意义。

  • 标签: 流行性感冒 流感病毒快速检测 免疫荧光法 诊断
  • 简介:摘要目的探讨同源基因D3(HOXD3)在胶质瘤中的表达及其生物学功能。方法回顾性收集中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)和癌症基因组图谱(TCGA)中1001例胶质瘤患者的临床资料及转录组数据,采用单因素方差分析比较不同病理分级胶质瘤间HOXD3表达水平的差异;并根据HOXD3表达水平的均值,分别将CGGA和TCGA数据库中的患者分为HOXD3低表达组与HOXD3高表达组,采用Kaplan-Meier生存分析比较HOXD3高表达组与HOXD3低表达组间生存期的差异,采用单因素回归分析及多因素Cox回归分析明确HOXD3对胶质瘤患者预后的影响;最后通过基因本体(GO)分析、京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析以及基因富集分析(GSEA)探究HOXD3可能参与的信号通路,并采用Pearson相关分析法分析HOXD3与其他基因表达的相关性。结果(1)HOXD3的表达水平随着胶质瘤病理分级的升高逐渐升高(CGGA数据中Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤的表达水平分别为0.737±0.085、1.323±0.125、1.652±0.083;TCGA数据中Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤的表达水平分别为0.082±0.008、0.177±0.014、0.259±0.016),不同病理分级间HOXD3表达水平差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)与HOXD3低表达组相比,HOXD3高表达组患者的生存期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。CGGA数据显示HOXD3表达水平(HR=1.348,95%CI:1.171~1.552,P=0.000)、肿瘤病理分级和异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变状态为胶质瘤患者预后的独立影响因素;TCGA数据显示HOXD3表达水平(HR=2.147,95%CI:1.252~3.681,P=0.005)、年龄、肿瘤病理分级和IDH1突变状态为胶质瘤患者预后的独立影响因素。(3)GO分析、KEGG分析和GSEA结果均提示HOXD3参与细胞周期的调控;Pearson相关分析发现HOXD3的表达水平与多种细胞周期调控基因的表达水平呈明显正相关关系(P<0.05)。结论HOXD3为胶质瘤预后的独立影响因素,其生物学功能与胶质瘤细胞的周期调控相关。

  • 标签: 神经胶质瘤 同源盒基因D3 预后 细胞周期
  • 简介:目的观察六孔灸灸法对肺气肿患者呼吸困难程度和血氧饱和度的影响。方法以六孔灸灸法对20例患者进行治疗,观察治疗前后呼吸困难程度及血氧饱和度的变化。结果治疗后患者呼吸困难程度改善,血氧饱和度提高,差异具有统计学意义。结论六孔灸灸法可以改善肺气肿患者的呼吸困难程度,提高血氧饱和度。

  • 标签: 肺气肿 呼吸困难程度 血氧饱和度 灸法 中医药治疗
  • 简介:摘要目的探讨叉头蛋白P3(FOXP3)基因沉默后对人结肠癌细胞增殖、凋亡和侵袭等生物学行为的影响及其机制。方法人结肠癌细胞(SW480细胞)购自美国典型培养物保藏中心。将SW480细胞分为FOXP3-小发夹核糖核酸(shRNA)组(转染FOXP3-shRNA)、NC-shRNA组(转染shRNA空载的慢病毒)及Control组(仅加入培养基处理)。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测FOXP3基因信使核糖核酸(mRNA)表达;蛋白质印迹法检测Wingless及int-1家族成员3A(Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)基因蛋白表达。两组间对比行t检验,多组间比较采用单因素方差分析(组间比较采用SNK检验)。结果FOXP3-shRNA组人结肠癌细胞中FOXP3基因mRNA表达、24、48、72、96 h后吸光度值、侵袭率、Wnt3a和β-catenin蛋白表达显著低于NC-shRNA组和Control组细胞[FOXP3基因mRNA表达分别为0.11±0.04比0.98±0.05、1.05±0.07,24 h吸光度值分别为0.59±0.04比0.65±0.05、0.73±0.06,48 h吸光度值分别为0.67±0.05比0.86±0.06、0.95±0.07,72 h吸光度值分别为0.76±0.06比1.15±0.07、1.26±0.08,96 h吸光度值分别为0.87±0.06比1.34±0.08、1.45±0.09,侵袭率分别为(23.49±1.99)%比(10.38±2.56)%、(10.38±2.56)%,Wnt3a分别为0.22±0.04比0.76±0.05、0.78±0.06,β-catenin分别为0.31±0.03、0.84±0.06、0.87±0.07],凋亡率显著高于NC-shRNA组和Control组细胞[分别为(23.49±1.99)%比(10.38±2.56)%、(10.38±2.56)%],差异有统计学意义(F=20.042、17.233、11.145、13.427、16.538、16.135、54.182、19.341、26.177、16.135,P<0.05)。结论FOXP3基因沉默后可显著抑制人结肠癌细胞增殖和侵袭并促进细胞凋亡,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路基因表达有关。

  • 标签: 结肠癌 β-连环蛋白 机制
  • 简介:摘要目的评价Luminex NxTAGTM RPP对17种呼吸道病原体的检测性能。方法通过比较Luminex NxTAGTM RPP试剂与一代测序检测临床标本的结果,以评价Luminex NxTAGTM RPP试剂的检测性能。结果与一代测序相比,Luminex NxTAGTM RPP试剂对流感病毒A型(FluA)、2009甲型H1N1流感病毒(H1N1pdm09)、H3N2亚型流感病毒(H3N2)、流感病毒B型(FluB)、副流感病毒2型(PIV 2)、副流感病毒3型(PIV 3)、副流感病毒4型(PIV 4)、肺炎衣原体(CP)和冠状病毒HKU1(CoV HKU1)检测具有高度一致性;对腺病毒(ADV)、冠状病毒229E(CoV 229E)、冠状病毒OC43(CoV OC43)、呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(RV)、博卡病毒(BoV)的检测结果具有中度一致性。然而对于副流感病毒1型(PIV 1)、偏肺病毒(MPV)两种方法检测一致性较差。结论Luminex NxTAGTM RPP试剂本身具有检测准确、高通量与操作时间短等特点,对大多数呼吸道病原体的检测表现出良好的性能。

  • 标签: 呼吸道感染 病原体检测 Luminex NxTAGTM RPP
  • 简介:摘要目的比较四种商品化诺如病毒实时荧光RT-PCR检测试剂的效果。方法将美国疾控中心诺如病毒检测方法作为标准方法,使用4种商品化试剂对30份已知诺如病毒基因型阳性样本(5种GI和8种GII基因型)和50份腹泻患者粪便样本进行检测,对检测结果进行比较。同时对轮状病毒、星状病毒、肠道腺病毒和札如病毒进行特异性检测。结果30份已知基因型样本四种商品化试剂与标准方法均检测阳性。轮状病毒、星状病毒、肠道腺病毒和札如病毒检测阴性。试剂A、B、C、D和标准方法分别检测50份腹泻样本,检出率分别为52.0%(26/50)、46.0%(23/50)、50.0%(25/50)、48.0%(24/50)、54.0%(27/50);试剂A、B、C、D与标准方法的一致性分别为96.3%、85.2%、92.6%和88.9%。试剂C的GI检测范围为104~108 copies/μL,GII检测范围为102~108 copies/μL。结论四种试剂均能检测本研究出现的诺如病毒基因型,试剂A和C检测效果优于试剂B和D。

  • 标签: 诺如病毒 基因型 实时荧光RT-PCR 评估
  • 作者: 王慧娟 杨燕 黄保英 邓瑶 赵莉 王文玲 谭文杰
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华微生物学和免疫学杂志》 2022年第07期
  • 机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,国家卫生健康委员会生物安全重点实验室,北京 102206,温州医科大学检验医学院、生命科学学院,浙江省医学遗传学重点实验室,温州 325035,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,国家卫生健康委员会生物安全重点实验室,北京 102206 温州医科大学检验医学院、生命科学学院,浙江省医学遗传学重点实验室,温州 325035
  • 简介:摘要目的评价两种商品化新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)中和抗体检测EIA试剂的应用性能。方法使用两种商品化SARS-CoV-2中和抗体ELISA检测试剂(A和B),以疫苗免疫前血清44例、免疫后1个月血清120例、COVID-19患者愈后6个月的恢复期血清64例作为样本盘,进行中和抗体检测,同时通过活病毒微量中和试验(micro-neutralization test,micro-NT)检测上述血清样本的50%中和抗体滴度(50% neutralization titer,NT50)。分析两种商品化试剂与活病毒中和试验在定性及定量结果上的一致性。结果定性结果分析发现,以micro-NT检测结果作为标准,A和B试剂的阳性符合率分别为97.40%和100.00%;阴性符合率分别为97.30%和95.95%;约登指数分别为0.95和0.96。定量结果分析发现,对于疫苗免疫后样本,A、B试剂与micro-NT检测结果的相关系数分别为0.24(P<0.05)和0.52(P<0.000 1);对于恢复期血清样本,A、B试剂与micro-NT检测结果相关系数分别为0.81(P<0.000 1)和0.89(P<0.000 1)。结论A和B两种商品化中和抗体检测试剂与micro-NT定性结果具有良好一致性,两种试剂对恢复期血清样本的中和抗体滴度检测与micro-NT结果表现出了更强的相关性。

  • 标签: 新型冠状病毒 中和抗体 酶联免疫吸附试验 活病毒微量中和试验 约登指数
  • 简介:摘要目的探讨ATP结合转运子E1(ABCE1)在胶质瘤组织的表达及其与细胞增殖、周期和转移的关系。方法选取安阳市人民医院和河南省肿瘤医院2018年12月到2020年12月手术收集的71例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析ABCE1蛋白表达水平。将神经胶质瘤细胞U251分为对照组和ABCE1 KD组,分别采用对照短发卡RNA(shRNA)和ABCE1 shRNA慢病毒感染建立稳定细胞系,采用细胞计数试剂(CCK-8)和克隆形成实验分析两组细胞增殖;采用流式细胞术分析两组细胞凋亡变化;采用划痕实验和Transwell分析两组细胞迁移能力;采用Western blot分析两组细胞凋亡和迁移相关蛋白表达水平。计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织ABCE1蛋白表达水平(0.87±0.12)明显低于神经胶质瘤组织(2.09±0.22),差异有统计学意义(t=3.109,P<0.05)。对照组细胞吸光度值(1.88±0.22)明显高于ABCE1 KD组(1.30±0.18),差异有统计学意义(t=2.019,P<0.05)。克隆形成实验结果显示,对照组细胞克隆形成率[(59.32±6.09)%]明显高于ABCE1 KD组[(30.12±4.99)%],差异有统计学意义(t=5.891,P<0.05)。对照组细胞凋亡率[(3.01±0.34)%]明显低于ABCE1 KD组[(19.43±3.09)%],差异有统计学意义(t=3.011,P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(97.43±5.89)个]明显高于ABCE1 KD组[(57.91±4.32)个],差异有统计学意义(t=4.009,P<0.05)。对照组细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达水平(1.38±0.31)明显低于ABCE1 KD组(2.01±0.23),差异有统计学意义(t=3.118,P<0.05)。对照组细胞黏着斑激酶(FAK)蛋白表达水平(1.19±0.15)明显高于ABCE1 KD组(0.55±0.19),差异有统计学意义(t=2.791,P<0.05)。结论ABCE1蛋白神经胶质瘤组织中表达水平显著增加,并参与胶质瘤细胞的增殖、凋亡和迁移等恶性细胞生物学过程。

  • 标签: 胶质瘤 ATP结合盒转运子E1 增殖 凋亡 转移