简介：摘要目的通过生物信息学分析C型凝集素9家族A成员(CLEC9A)在肝癌中的作用。方法下载癌症基因组图谱 (TCGA)数据库的泛癌转录组数据及临床数据，明确CLEC9A在泛癌中的差异表达，继而Kaplan-Meier分析CLEC9A的表达与泛癌的总生存期和疾病特异生存期的关系，并分析CLEC9A的表达与肝癌临床病理特征的相关性。通过基因集变异分析(GSVA)和免疫组织化学方法分析验证CLEC9A在肝癌免疫微环境的作用。结果基于配对与非配对的泛癌及正常样本的差异基因分析结果，肝癌组织中CLEC9A表达水平[0.183(0.069~0.338)，0.187(0.076~0.405)]明显低于癌旁组织中CLEC9A表达水平[0.343(0.242~0.515)]，差异有统计学意义(P<0.05)，并且高表达CLEC9A的肝癌患者预后比低表达CLEC9A的肝癌患者较好，具有较低的临床分期，总体生存期[风险比(HR)＝0.61，P<0.05]和疾病特异生存期(HR＝0.54，P<0.05)均显著长于低表达CLEC9A的肝癌患者；CLEC9A的表达与免疫细胞浸润丰度正相关，高表达CLEC9A的肝癌患者CD8+T细胞(28.310±3.855比17.328±2.573)和Th1细胞(5.470±1.548比1.261±0.521)浸润较低表达CLEC9A的肝癌患者显著(t＝2.370、2.577，P<0.05)。结论CLEC9A可能通过调节肝癌的抗肿瘤免疫反应而参与肝癌的进展，有望成为肝癌诊治过程中预测患者预后的参考标准和新型治疗靶标。

简介：摘要目的研究重症肺炎患儿NADH脱氢酶1(ND1)、NADH脱氢酶3(ND3)和味觉受体2家族成员43(TAS2R43)基因表达情况及与儿童重症肺炎的关系。方法选取2016年5月至2018年5月驻马店市中心医院儿童重症监护病房住院的儿童重症肺炎患儿30例为重症肺炎组，选取同期在本院体检健康的儿童25例为健康对照组。重症肺炎组男17例，女13例，年龄(5.30±1.69)岁；健康对照组男13例，女12例，年龄(4.96±1.31)岁。使用real-time PCR方法检测ND1、ND3和TAS2R43基因表达量，2－ΔΔCt法计算ND1、ND3和TAS2R43基因相对表达量。结果重症肺炎组ND1、ND3及TAS2R43 mRNA的循环阈(Ct)值分别为20.49±0.45、21.32±0.61和32.20±0.46，健康对照组分别为26.69±0.62、27.50±0.35和26.69±0.49，2组比较差异均有统计学意义(t＝－14.02、－15.25、－14.19，均P<0.05)。2－ΔΔCt法计算重症肺炎组ND1、ND3和TAS2R43基因相对表达量是健康对照组的51.27、50.56和0.02倍。结论ND1、ND3和TAS2R43基因在重症肺炎患儿体内有异常表达，这3个基因可能与儿童重症肺炎关系密切。

简介：2016年8月9日7时40分,黄岛区疾病预防控制中心接到区卫计局电话通知,在我区琅琊度假区内,一来自济南的旅行团在王家台后村饭店用餐后,用餐者中有11人出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状,疑似食物中毒,现已送至琅琊镇卫生院就诊.我中心接到报告后,迅速出动应急队,组织9名流行病学调查员赶赴现场进行流行病学调查和现场卫生学调查,现将调查情况及结果报告如下.

简介：摘要交配型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)染色质重塑复合物成员基因在近20%的人类肿瘤中发生突变，大多作为抑癌基因发生失活突变，无法直接成为靶向药物治疗的靶点。针对这些突变基因，利用合成致死效应原理，找到并抑制缺陷基因的合成致死靶标，可实现以突变基因作为生物标志物的精准治疗。本文对基于SWI/SNF复合物成员失活突变的合成致死效应在肿瘤治疗中取得的研究进展及应用前景展开综述。目前针对AT丰富结合域1A(ARID1A)、多溴蛋白1(PBRM1)、Brahma相关基因1/Brahma(BRG1/BRM)、蔗糖不发酵蛋白5(SNF5)等亚基失活突变开展了一系列基于合成致死理论的临床前研究，并在多种恶性肿瘤治疗中取得了一定成果，显示出良好的应用前景。

简介：摘要目的构建跨膜蛋白超家族6成员2（Tm6sf2） E167K基因敲入小鼠模型。方法构建同时表达针对小鼠Tm6sf2基因特定位点的单链向导RNA Cas9的质粒和携带Tm6sf2 E167K片段的Donor质粒，将上述2质粒一起注射入小鼠受精卵，通过PCR检测和测序验证得到F0代阳性小鼠。统计F2代中野生（Wt）、杂合和敲入（KI）3种基因型小鼠的存活数量。选取F2代同窝Wt和KI雄性小鼠（8只/组）给予普通饮食8周，每周记录小鼠的体质量，检测两种小鼠葡萄糖代谢和脂质代谢等指标。组间比较采用独立样本t检验。结果基因型检测和测序结果表明Tm6sf2 E167K基因敲入小鼠模型建立成功。KI小鼠不存在胚胎纯合致死的表型。哺乳期内KI小鼠较Wt小鼠的体质量升高，两组差异有统计学意义（P < 0.05）。KI小鼠的空腹血糖（9.50±0.33）mmol/L较Wt小鼠的空腹血糖（7.80±0.30）mmol/L升高，两组差异有统计学意义（P < 0.05）；KI小鼠的口服葡萄糖耐量试验2 h血糖（9.20±0.51）mmol/L较Wt小鼠的口服葡萄糖耐量试验2 h血糖（7.60±0.18）mmol/L升高，两组差异有统计学意义（P < 0.05）。KI小鼠的肝脏甘油三酯含量（8.40±0.55）mg/g较Wt小鼠的肝脏甘油三酯含量（7.30±0.63）mg/g升高，但差异无统计学意义（P < 0.05）；两种小鼠的血浆甘油三酯水平差异无统计学意义（P > 0.05）；肝脏油红O染色结果显示KI小鼠较Wt小鼠的肝小叶中央区有更多的脂质累积。结论Tm6sf2 E167K基因敲入小鼠构建成功。Tm6sf2 E167K基因敲入可引起小鼠葡萄糖代谢的异常，促进肝脏脂肪变性的发生。

简介：

简介：摘要目的探讨Ⅺ型胶原蛋白α1链(COL11A1)基因是否为基本螺旋-环-螺旋家族成员a15(MIST1)调控胰腺癌细胞增殖、侵袭与转移的关键靶基因。方法采用Chip-seq(染色质免疫沉淀-测序)筛选MIST1在胰腺癌中的候选靶基因得到COL11A1基因；采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)对过表达MIST1的胰腺癌细胞进行验证MIST1对COL11A1基因的调控作用；采用染色质免疫共沉淀技术(ChIP)和双荧光素酶报告基因实验明确MIST1和COL11A1的结合域；Transwell实验(侵袭实验)、细胞划痕实验、四唑盐比色法(MTT)、细胞集落形成实验和动物实验研究COL11A1的表达对胰腺癌细胞生物学行为的影响；收集胰腺癌和癌旁组织样本，通过RT-qPCR和Western blot研究其COL11A1的mRNA和蛋白表达水平；用癌症基因组图谱(TCGA)来评估COL11A1的表达对胰腺癌患者预后的影响。组间比较采用t检验或方差分析。结果对TCGA胰腺癌数据根据COL11A1表达水平分组后生存分析显示高COL11A1表达与胰腺癌预后不良呈正相关[风险比(HR)＝2.30，P<0.05]；MIST1的-N端与COL11A1启动子相互作用并抑制其转录，MIST1-N端突变后诱发的荧光酶活性(1.08±0.22)与对照组(1.00±0.00)比较，差异无统计学意义(t＝0.608，P>0.05)；Transwell实验显示COL11A1敲低组在PANC-1、BxPC-3和SW1990细胞系中细胞穿膜数为(98.33±9.56)、(95.00±8.67)、(104.00±11.73)个/视野，均低于对照组[(562.00±37.33)、(793.67±67.29)、(504.00±37.39)个/视野，t＝20.841、17.836、17.680，P<0.01]；细胞划痕实验显示COL11A1敲低组划痕愈合率为(63.39±5.71)%、(49.66±4.22)%、(53.33±8.92)%，低于对照组[(89.42±4.25)%、(78.39±7.73)%、(82.98±7.09)%，t＝6.334、5.847、4.507，P<0.01]；MTT测定和集落形成实验结果显示COL11A1敲低组集落形成个数为(19.00±4.55)、(41.00±7.33)、(21.33±4.07)/个，低于对照组[(43.33±9.27)、(87.67±10.39)、(69.00±9.85)/个，t＝4.080、6.357、7.747，P<0.05]。结论MIST1通过COL11A1基因调控胰腺癌细胞增殖、侵袭与转移。

简介：摘要目的探讨经二代测序确诊的5例吡哆醇依赖性癫痫（PDE）的临床表型、治疗及乙醛脱氢酶7家族成员A1（ALDH7A1）基因突变的遗传学特点。方法回顾性分析2018年2月至2019年11月郑州大学附属儿童医院神经内科确诊的5例以早期癫痫起病的吡哆醇依赖性癫痫患儿的临床资料，采用二代测序方法对先证者进行ALDH7A1基因测序，并对其家系成员进行一代Sanger验证，对其基因突变特点进行分析。结果在5例确诊为吡哆醇依赖性癫痫的患儿中，男女比例为4∶1，就诊年龄为出生2~10个月。临床表型中5例患儿均为新生儿期起病，有反复癫痫发作，表现为肌阵挛发作、痉挛发作或局灶性发作；应用抗癫痫药物控制发作较差，长期大剂量口服吡哆醇疗效较好；5例患儿均来自其父亲和（或）母亲的复合杂合突变；例1为剪切纯合突变c.247-2（IVS2）A>T，例2为错义突变c.584A>G（p.N195S）及无义突变c.1003C>T（p.R335*），例3为错义突变c.1553G>C（p.R518T）及c.1547A>G（p.Y516C），例4为错义突变c.1547A>G（p.Y516C）及移码突变c.1566_1568delTAC（p.522_523delCTinsC），例5为错义突变c.1061A>G（p.Y354C）及无义突变c.841C>T（p.Q281X， 259）。其中c.247-2（IVS2）A>T为未报道过的新生剪切位点突变。结论吡哆醇依赖性癫痫由ALDH7A1基因突变引起，早期临床表现多以新生儿期难治性癫痫起病；抗癫痫药物治疗疗效差，经吡哆醇有效控制，对该类患者应尽早行基因分析以早期确诊。

简介：摘要目的探讨肽/组氨酸转运蛋白溶质载体家族15成员4（SLC15A）在SLE患者的PBMCs中的表达及其临床意义。方法选取55例SLE患者，根据SLEDAI评分标准，分为活动期SLE组和稳定期SLE组，以13例健康志愿者作为健康对照组，采用蛋白质印迹法检测各组外周血PBMCs中SLC15A4的表达情况，并记录SLE患者的临床资料及实验室指标。3组间SLC15A4的表达量的比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA），SLC15A4表达水平与临床指标的相关性分析采用Pearson相关分析。结果活动期SLE组、稳定期SLE组、健康对照组中SLC15A4的表达水平分别为（0.96±0.19）、（0.88±0.14）、（0.78±0.24），活动期SLE组中SLC15A4的表达水平高于健康对照组（F=4.47，P=0.015）；SLE患者PBMCs中SLC15A4表达水平与抗dsDNA抗体定量（r=0.29，P=0.031）、ESR（r=0.36，P=0.007）、SLEDAI评分（r=0.32，P=0.017）呈正相关，与尿蛋白定量（24 h）（r=0.45，P=0.127）和C3（r=0.20，P=0.133）无相关性。结论SLC15A4参与了SLE的发病，其在SLE患者PBMCs中的表达情况可作为临床评估SLE患者疾病活动程度的指标。

简介：摘要目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中乙醛脱氢酶1（ALDH1）和ATP结合膜转运蛋白超家族G成员2（ABCG2）的表达水平及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取山东省泰山医院2016年1月至2018年11月行手术治疗的82例NSCLC患者的组织标本，采用免疫组织化学法检测术后新鲜癌组织及癌旁组织中ALDH1、ABCG2的表达水平。采用χ2检验分析ALDH1、ABCG2表达与患者临床病理特征的关系，使用Pearson法分析ALDH1和ABCG2的相关性，应用Kaplan-Meier和log-rank检验分析ALDH1、ABCG2表达与患者总生存（OS）的关系，采用Cox比例风险模型分析OS的影响因素。结果NSCLC组织中ALDH1、ABCG2阳性表达率高于癌旁组织，差异均有统计学意义[60.98%（50/82）比12.19%（10/82），51.22%（42/82）比3.66%（3/82），χ2值分别为42.051、46.582，均P<0.01]。NSCLC组织中ALDH1与ABCG2表达呈正相关（r=0.451，P=0.014）。TNM分期Ⅱ~Ⅲ期患者ALDH1、ABCG2阳性表达率均高于Ⅰ期患者[70.00%（35/50）比46.88%（15/32），60.00%（30/50）比37.50%（12/32），均P<0.05]，淋巴结转移患者ALDH1、ABCG2阳性表达率均高于未转移患者[75.00%（27/36）比50.00%（23/46），66.67%（24/36）比39.13%（18/46），P<0.05]。中位随访时间22.5个月，共2例患者失访，中位OS时间25.4个月，ALDH1阳性患者OS较阴性患者差（χ2=5.124，P=0.031），ABCG2阳性患者OS较阴性患者差（χ2=6.969，P=0.008）。多因素Cox分析显示，年龄（OR=1.241，95% CI 1.021~2.535，P=0.045）、淋巴结转移（OR=1.521，95% CI 1.102~4.281，P=0.012）、TNM分期（OR=2.104，95% CI 1.289~6.150，P=0.018）、ALDH1（OR=2.435，95% CI 1.214~8.654，P=0.001）、ABCG2（OR=1.503，95% CI 1.148~5.696，P=0.021）是NSCLC患者OS的独立影响因素。结论NSCLC组织中ALDH1、ABCG2表达水平增高，且与淋巴结转移、TNM分期相关，ALDH1、ABCG2阳性者OS率较低，二者可能成为NSCLC的预后标志物。

简介：从卫生部获悉，近日在瑞士日内瓦举行的世界卫生组织（WHO）执行委员会第124届会议通过了关于传统医学的决议，呼吁成员国将传统医学纳入国家卫生系统。

简介：摘要目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者颈动脉内膜中层厚度（CIMT）与血清无翅型MMTV整合位点家族成员5a（Wnt5a）及相关因素的关系。方法选取2020年9月至2021年12月于河南省人民医院内分泌科住院的T2DM患者为研究对象。检测其血清Wnt5a、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及转化生长因子（TGF）-β1水平，测定其CIMT。依据CIMT将患者分为无增厚组（CIMT<1.0 mm）、增厚组（1.0 mm≤CIMT<1.5 mm）和斑块组（CIMT≥1.5 mm）3组。采用单因素方差分析、Kruskal-Wallis H检验或χ2检验对患者的一般临床资料进行组间比较；采用Spearman相关分析法对CIMT与Wnt5a、IL-6、TNF-α、TGF-β1，以及血清Wnt5a与IL-6、TNF-α、TGF-β1的相关性进行分析；采用多重线性回归分析法分析患者CIMT、血清Wnt5a的影响因素。结果共纳入163例患者。其中，无增厚组60例，增厚组48例，斑块组55例。与无增厚组和增厚组相比，斑块组的CIMT、Wnt5a、IL-6、TNF-α、TGF-β1均更高（均P<0.001）。相关性分析结果显示，CTMI与Wnt5a（r=0.717）、IL-6（r=0.544）、TNF-α（r=0.524）、TGF-β1（r=0.803）均呈正相关（均P<0.001），血清Wnt5a与IL-6（r=0.465）、TNF-α（r=0.453）、TGF-β1（r=0.631）均呈正相关（均P<0.001）。多重线性回归分析结果显示，Wnt5a、IL-6、TGF-β1均是CIMT的影响因素（均P<0.05），IL-6、TGF-β1均是血清Wnt5a的影响因素（均P<0.05）。结论T2DM患者的CIMT与Wnt5a及IL-6、TGF-β1等密切相关。

简介：摘要目的探讨基于智能手机应用的健康教育能否降低学龄儿童及其家庭成员的盐摄入量。设计平行、整群随机对照试验，将学校随机分配到干预组或对照组（1∶1）。背景从2018年9月15日至2019年12月27日，在中国北部、中部和南部3个省份纳入54所小学。参与者592名小学3年级儿童[每所学校约11名儿童，其中308名（52.0%）男孩；平均年龄8.58岁（标准差0.41）]，以及1 184名成年家庭成员[其中551名（46.5%）男性；平均年龄45.80岁（12.87）]。干预在手机应用程序的支持下，对干预组中的儿童进行关于减盐的健康教育，并布置家庭作业，以带动全家参与减盐的相关活动。主要结局测量干预组和对照组在第12个月随访时盐摄入量（通过24小时尿钠排泄量测量）改变值的差值。结果基线调查后，来自27所学校的297名儿童和594名成年家庭成员被分配到干预组，另外27所学校的295名儿童和590名成年家庭成员被分配到对照组。在试验期间，由于儿童转到另一所学校或成年家庭成员无法参加随访评估，27名（4.6%）儿童和112名（9.5%）成年人失去随访。干预组其余287名儿童和546名成人，以及对照组的278名儿童和526名成人完成了12个月的随访评估。干预组儿童基线时的平均盐摄入量为5.5[标准差（SD）1.9]g/天，干预组成人10.0（SD 3.5）g/天，对照组儿童5.6（SD 2.1）g/天，成人10.0（SD 3.6）g/天。在研究期间，干预组和对照组儿童的盐摄入量均有所增加，但干预组增加的幅度较小[调整混杂偏倚变量后平均干预效果为-0.25 g/天，95%可信区间（CI）：-0.61~0.12；P=0.18]。干预组和对照组成人的盐摄入量均有所下降，但干预组的盐摄入量变化更大（平均效果-0.82 g/天，-1.24~-0.40；P<0.001）。对儿童收缩压的平均效果为-0.76 mmHg（-2.37~0.86；P=0.36），成人为-1.64 mmHg（-3.01~-0.27；P=0.02）。结论采用儿童带动家长的方式，基于手机应用程序的健康教育可有效降低成人的盐摄入量和收缩压，但对儿童的效果并不显著。这种新颖的方法有可能被更大规模地推广，但在此之前方案需要进一步加强，才能减少包括学童在内的人群盐摄入量。试验注册中国临床试验注册ChiCTR1800017553。

简介：同志们：全国卫生检疫监管工作会议,经过3天紧张的工作,今天就要结束了.这次会议在总局党组的领导下,在总局有关厅、司、认监委、直属单位的支持和全体与会同志的共同努力下,顺利完成了各项会议议程.下面,我就这次会议的情况和需要强调的问题,谈几点意见：……

简介：摘要目的醛酮还原酶家族1成员B10（AKR1B10）与肝癌的发病机制、早期诊断和预后密切相关，故探讨AKR1B10在肝癌细胞中对细胞周期的影响及其作用机制。方法采用慢病毒LV-AKR1B10-shRNA感染HepG2细胞，或AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞，蛋白质印迹法（Western blot）及实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）检测AKR1B10的表达水平；通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸在340 nm处吸光度值的下降检测AKR1B10的活性；CCK-8法及流式细胞术检测AKR1B10低表达及不同浓度依帕司他处理HepG2细胞后对细胞增殖和细胞周期的影响；Western blot检测HepG2细胞中p-Rb，细胞周期蛋白D1、E1，p27的蛋白表达水平；两样本均数采用独立样本t检验。结果AKR1B10在肝癌细胞中表达显著升高，与正常肝细胞相比，HepG2细胞中AKR1B10蛋白相对表达水平为6.71±1.11（P = 0.012）。依帕司他对AKR1B10的酶活性有明显抑制作用，呈剂量依赖性特点。HepG2细胞中AKR1B10基因被有效沉默，不同浓度AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞24、48、72 h后均可抑制细胞增殖，促进G0/G1细胞周期阻滞，使p-Rb、周期蛋白D1、E1表达降低，周期素依赖性激酶抑制蛋白p27表达升高。结论抑制AKR1B10表达和活性可通过p27/p-Rb通路，促进HepG2细胞G0/G1细胞周期阻滞。

简介：摘要目的基于在线数据库分析阐明E2F转录因子家族成员mRNA在胰腺癌组织中的表达水平及其在胰腺癌患者中的预后意义。方法利用基因表达谱交互式分析(GEPIA)在线分析数据库，采用Mann-Whitney U检验及Kaplan-Meier生存分析的统计学方法分别分析E2F转录因子家族成员mRNA在179例胰腺癌与171例癌旁组织的差异性表达，分析其每百万转录本(TPM)表达差异，并分析E2F转录因子家族成员mRNA表达与胰腺癌病理分期之间的关系。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析E2F转录因子家族成员mRNA表达水平与胰腺癌患者预后的关系，及其在胰腺癌患者亚组中的预后价值。采用Mann-Whitney U检验比较胰腺癌与癌旁组织E2F转录因子家族成员的表达水平；并采用Log-rank检验及Kaplan-Meier法对数据库中的纳入患者进行预后分析。结果GEPIA数据库分析结果表明，胰腺癌组织中E2F转录因子家族成员mRNA表达均高于癌旁组织。其中，胰腺癌组织中E2F1、E2F3和E2F8 mRNA表达水平均显著高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.01)。此外，TPM表达分析结果也提示胰腺癌组织中较高的E2F1、E2F3和E2F8 TPM水平，差异有统计学意义(P<0.05)。GEPIA数据库分析结果还提示E2F2、E2F3、E2F6以及E2F8 mRNA表达与胰腺癌患者肿瘤病理分期显著相关，差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析结果提示，高表达的E2F1、E2F2、E2F3、E2F7以及E2F8 mRNA与胰腺癌患者较低的总体生存率显著相关(P<0.05)，而高表达的E2F6则与胰腺癌患者较好的总体生存率显著相关(P<0.05)。此外，高表达的E2F1、E2F2、E2F3、E2F7以及E2F8 mRNA与胰腺癌患者较差的无复发生存率显著相关(P<0.05)，而E2F4高表达则与胰腺癌患者无复发生存率较好显著相关(P<0.05)。亚组分析结果则表明E2F1、E2F2、E2F3、E2F7及E2F8在不同肿瘤阶段、不同性别以及不同突变负荷的胰腺癌患者中均具有一定的预后价值。结论E2F转录因子家族成员在胰腺癌中高表达且与胰腺癌患者预后较差显著相关，尤其在早期胰腺癌中，提示其可能成为早期胰腺癌预后预测及治疗的新靶点。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA 钾电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录物1（Kcnq1ot1）通过调节miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞胰岛素分泌的作用机制。方法自2020年6至12月在中山大学附属第三医院招募初诊2型糖尿病（T2DM）患者25例，同时招募年龄匹配且无糖尿病的受试者21例作为对照组。收集受试者的年龄、体重指数（BMI），检测空腹血糖（FPG）和糖化血红蛋白（HbA1c），采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测血清中Kcnq1ot1表达量，并分析其与FPG和HbA1c的相关性。12只5周龄雄性C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为高脂饮食（HFD）组（n=6）和正常饮食（CD）组（n=6），喂养20周后，提取原代胰岛细胞RNA。将体外培养的Min6细胞分为牛血清白蛋白（BSA）组和棕榈酸（PA，400 μmol/L）组；按照是否转染Kcnq1ot1 siRNA分为si-NC组和si-Kcnq1ot1组；按照是否转染miR-92a-1-5p的模拟物或抑制剂分为：模拟物对照组、模拟物组、抑制剂对照组和抑制剂组；按照转染Kcnq1ot1/NC siRNA后是否加入抑制剂分为si-NC+抑制剂对照组、si-Kcnq1ot1+抑制剂对照组、si-NC+抑制剂组和si-Kcnq1ot1+抑制剂组。采用qRT-PCR检测Kcnq1ot1、miR-92a-1-5p和胰岛素转录本1（Ins1）、胰岛素转录本2（Ins2）、胰岛素受体（Insr）、NK6同源盒蛋白1（Nkx6.1）、胰岛素受体底物1（Irs1）和神经生成素3（Ngn3）mRNA水平；Western blotting检测胰岛素和Insr蛋白表达水平；葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测胰岛素分泌水平；双荧光素酶报告基因实验验证Kcnq1ot1与miR-92a-1-5p之间的直接作用关系。各组间指标的差异比较采用独立样本t检验、方差分析，采用Pearson相关分析法分析受试者Kcnq1ot1表达量与FPG和HbA1c的相关性。结果T2DM患者血清中Kcnq1ot1的表达量较对照组显著下调（P<0.01），且Kcnq1ot1的表达量与FPG和HbA1c呈负相关关系（r=-0.52、-0.49，均P<0.05）。与CD组相比，HFD组小鼠胰岛中Kcnq1ot1表达量下调（P<0.001）。在Min6细胞中，与BSA组相比，PA组细胞中Kcnq1ot1表达量下调（P<0.01）；与si-NC组相比，si-Kcnq1ot1组葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低（P<0.05），且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均降低（P<0.05）；与模拟物对照组相比，模拟物组葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低（P<0.05），且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均降低（P<0.05）；与抑制剂对照组相比，抑制剂组葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平升高（P<0.05），且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均升高（P<0.05）。双荧光素酶报告实验显示，模拟物和Kcnq1ot1-WT质粒共转染细胞后，Kcnq1ot1-WT荧光素酶活性降低（P<0.05）；抑制剂和Kcnq1ot1-WT质粒共转染细胞后，Kcnq1ot1-WT的荧光素酶活性显著升高（P<0.05）。与si-NC组相比，si-Kcnq1ot1组miR-92a-1-5p表达升高（P<0.05）；与si-Kcnq1ot1+抑制剂对照组相比，si-Kcnq1ot1+抑制剂组Min6细胞中的Ins1、Ins2、Insr、Irs1和Ngn3转录水平及胰岛素和Insr的蛋白水平升高（P<0.05）。结论长链非编码RNA Kcnq1ot1可能通过靶向调控miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞功能。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-643调控细胞色素P450家族成员11B1(CYP11B1)对小儿骨肉瘤增殖的临床与机制研究。方法收集2017年6月至2018年3月天津市天津医院收治的18例小儿骨肉瘤患者，年龄(12.04±2.68)岁，男12例，女6例，同期收集18例性别和年龄配对的健康儿童。应用Lipofectamine 2000介导转染细胞株，共分为五组：空载组，正常生长组，miR-643模拟物组，miR-643抑制剂组，CYP11B1抑制剂组，每组重复3次。实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-643相对表达量，蛋白质印迹法(Western blot)检测CYP11B1蛋白表达水平，细胞增殖与毒性(CCK-8)法检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞凋亡能力，小鼠体内实验探究miR-643对肿瘤体积的影响。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用t检验。结果与健康者(0.53±0.06)比较，骨肉瘤患者(3.24±0.81)血清miR-643表达水平显著增高(P<0.05)。在24、48、72 h时，与空载组[吸光度(A)值0.36±0.04、0.44±0.03、0.56±0.05]和正常生长组(0.35±0.06、0.45±0.04、0.58±0.07)比较，miR-643模拟物组(0.51±0.05、0.75±0.07、0.93±0.06)MG-63细胞的增殖能力显著增强(P<0.05)，miR-643抑制剂组(0.24±0.05、0.28±0.06、0.33±0.06)增殖能力明显受到抑制(P<0.05)。与空载组[(7.65±0.47)%]和正常生长组[(7.80±0.51)%]比较，miR-643模拟物组[(3.12±0.22)%]MG-63细胞的凋亡能力显著下降(P<0.05)，miR-643抑制剂组[(24.32±2.25)%]凋亡能力显著增高(P<0.05)。与空载组(1.04±0.06)和正常生长组(0.98±0.05)MG-63细胞CYP11B1蛋白水平比较，miR-643模拟物组(0.41±0.04)和CYP11B1抑制剂组(0.45±0.05)均显著下降(P<0.05)，miR-643抑制剂组(1.64±0.13)显著增高(P<0.05)。皮下注射稳定转染sh-miR-643的MG-63细胞小鼠的肿瘤平均体积为[(621.74±38.63) mm3]，显著低于对照组[(1104.36±57.01) mm3，t＝4.017，P<0.01]。结论miR-643可促进骨肉瘤MG-63细胞增殖并抑制其凋亡，其机制与调控靶基因CYP11B1密切相关。

简介：摘要目的探究呼吸康复训练联合百令胶囊通过人RAS同源基因家族成员A（RhoA）/Rho-kinase信号通路对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者的疗效及肺功能的影响。方法选择2016年2月至2017年9月陆军第八十一集团军医院100例COPD患者，按照随机数字表法分为对照组和联用组，每组50例，同期挑选50例健康人群作为空白组。对照组患者给予百令胶囊进行治疗，百令胶囊+呼吸康复训练联用组采用呼吸康复训练联合百令胶囊进行治疗。分别分析各组患者肺功能[最大深吸气后第1秒用力呼出气体容积（FEV1）、用力肺活量（FVC）、FEV1/FVC]情况和临床疗效，通过免疫印迹、实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测RhoA、RockⅠ/Ⅱ蛋白和mRNA的表达。结果经治疗，联用组的肺功能各项指标FEV1、FVC、FEV1/FVC显著高于对照组[（2.34 ± 0.91）L比（1.91 ± 0.83）L、（2.98 ± 0.83）L比（2.34 ± 0.86）L、（79.63 ± 9.95）%比（76.13 ± 6.97）%]（P<0.05）；与空白组相比，其余各组RhoA mRNA、RockⅠ/Ⅱ mRNA显著增高（P<0.05），与对照组相比，联用组RhoA mRNA、RockⅠ/Ⅱ mRNA显著降低（2.46 ± 0.18比4.38 ± 0.21、1.72 ± 0.11比2.36 ± 0.24、1.79 ± 0.24比3.34 ± 0.21）（P<0.05）；经治疗后，联用组6 min步行实验（6MWD）和临床总有效率[92.00%（46/50）比78.00%（39/50）]显著优于对照组（P<0.05）。结论呼吸康复训练与百令胶囊联用能够显著改善COPD患者肺功能，提高临床疗效，并且可以通过RhoA/Rho-kinase信号通路下调RhoA、RockⅠ/Ⅱ蛋白和mRNA的表达。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA核受体亚家族2 F组成员2反义RNA 1(lncRNA NR2F2-AS1)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖、迁移侵袭的影响及分子机制。方法选取郑州大学第一附属医院35例RA患者滑膜组织及正常滑膜组织，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NR2F2-AS1和微小RNA(miR)-588的表达水平；将RASF分为si-NR2F2-AS1组、si-NC组、miR-588组、miR-NC组、si-NR2F2-AS1+anti-miR-588组、si-NR2F2-AS1+anti-miR-NC组；细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性；克隆形成实验检测细胞克隆形成数；划痕实验检测细胞划痕愈合率；Transwell检测细胞侵袭数；蛋白质印迹法检测蛋白表达；双荧光素酶报告实验检测NR2F2-AS1和miR-588的靶向关系。用SPSS 20.0软件进行统计学分析。结果RA患者滑膜组织中NR2F2-AS1表达水平高于正常滑膜组织(3.50±0.23比1.00±0.06，t＝62.223，P<0.05)，而miR-588表达水平低于正常滑膜组织(0.29±0.04比1.00±0.09，t＝42.649，P<0.05)。si-NR2F2-AS1组细胞活性低于si-NC组(0.55±0.04比1.03±0.08，t＝16.100，P<0.05)，细胞克隆形成数低于si-NC组[(47.58±5.03)个比(103.93±10.24)个，t＝14.818，P<0.05]、侵袭细胞数[(55.31±5.28)个比(123.37±10.09)个，t＝17.929，P<0.05]低于si-NC组，划痕愈合率低于si-NC组[(23.21±2.47)%比(64.19±5.55)%，t＝20.238，P<0.05]，E钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平高于si-NC组，N钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平低于si-NC组(P<0.05)。过表达miR-588与其作用相同。NR2F2-AS1靶向调控miR-588；下调miR-588表达逆转抑制NR2F2-AS1表达对RASF增殖、迁移侵袭的作用。结论抑制lncRNA NR2F2-AS1表达可通过靶向调控miR-588抑制RA滑膜成纤维细胞的增殖、迁移侵袭。