简介：摘要目的探讨CD8+FoxP3+CD25+ T细胞亚群与程序性死亡受体1（PD-1）抑制剂帕博利珠单抗治疗子宫颈癌效果的关系。方法回顾性分析2018年1月至2020年1月于秦皇岛市第一医院收治的105例在化疗基础上给予帕博利珠单抗治疗的子宫颈癌患者资料。采用流式细胞术检测患者外周血CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例。分析疗效和安全性。根据疗效将患者分为缓解组（完全缓解+部分缓解）及未缓解组（疾病稳定+疾病进展），比较两组临床特征及CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例。采用多因素logistic回归模型分析疗效的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例预测患者疗效的效能。结果全组患者的客观缓解率为17.14%（18/105），不良反应发生率为39.05%（41/105）。缓解组中有子宫颈癌家族史患者比例低于未缓解组[5.56%（1/18）比34.48%（30/87）]，差异有统计学意义（χ2=6.00，P=0.014）。105例患者治疗前后CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例分别为（0.83±0.21）%、（0.77±0.10）%；其中，缓解组治疗前后CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例分别为（0.55±0.26）%、（0.31±0.12）%，未缓解组分别为（0.89±0.30）%、（0.87±0.28）%；缓解组治疗后CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例低于治疗前（P<0.05），未缓解组治疗前后差异无统计学意义（P>0.05），未缓解组治疗前后CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例均高于缓解组（均P<0.001）。治疗前CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例高于治疗前全组均值及治疗后CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例高于治疗后全组均值为疾病缓解的独立危险因素（OR=2.542，95% CI 1.649~3.918，P<0.001；OR=2.936，95% CI 2.154~4.002，P<0.001）。ROC曲线分析显示，治疗前CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例预测疾病缓解的曲线下面积为0.720，最佳临界值为0.77%，灵敏度和特异度分别为77.78%和70.11%。结论早期检测CD8+FoxP3+CD25+ T细胞比例有助于预测PD-1抑制剂帕博利珠单抗治疗子宫颈癌的效果。

简介：摘要目的探讨miRNA-5193（miR-5193）对子宫颈癌Caski细胞顺铂敏感性的影响和机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定子宫颈癌细胞株C33A、SiHa、Caski和正常子宫颈细胞株Ect1/E6E7中miR-5193的表达水平。将Caski细胞分成对照组（不转染，正常培养）、miR-5193阴性对照（miR-NC）组（转染miR-NC模拟物）、miR-5193组（转染miR-5193模拟物）、miR-NC+顺铂组（10 μg/ml顺铂处理转染miR-NC模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂组（10 μg/ml顺铂处理转染miR-5193模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂+NC组（10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3阴性对照载体、miR-5193模拟物的细胞）、miR-5193+顺铂+Foxp3组（10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3过表达载体和miR-5193模拟物的细胞）。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖情况；流式细胞术PI单染法检测细胞周期，Annexin V- FITC/PI双染法检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测细胞CDK2、p27、C-caspase-3蛋白表达。应用生物信息学软件预测miR-5193靶基因，采用荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。结果子宫颈癌C33A、SiHa、Caski细胞中miR-5193相对表达量均低于正常子宫颈Ect1/E6E7细胞（0.56±0.06、0.41±0.03、0.23±0.02比1.00±0.10，均P<0.05）。与对照组、miR-NC组比较，miR-5193组、miR-NC+顺铂组、miR-5193+顺铂组细胞增殖活性（吸光度值）降低（0.58±0.06、0.59±0.07比0.38±0.04、0.40±0.05、0.23±0.02，均P<0.05），细胞凋亡率升高[（2.5±0.2）%、（2.7±0.3）%比（12.6±1.2）%、（11.9±1.5）%、（18.9±1.7）%，均P<0.05]，G0/G1期细胞比例升高[（50.4±4.2）%、（51.3±6.3）%比（62.3±3.2）%、（61.9±5.8）%、（71.4±5.4）%，均P<0.05]，p27、C-caspase-3蛋白表达水平升高，CDK2蛋白表达水平下降。软件预测miR-5193靶基因为Foxp3，并由荧光素酶报告系统确认。与miR-5193+顺铂+NC组相比，miR-5193+顺铂+Foxp3组细胞增殖活性（吸光度值）升高（0.24±0.03比0.65±0.05，t＝21.094，P<0.01），G0/G1期细胞比例降低[（71.0±6.4）%比（60.3±4.1）%，t＝4.196，P<0.01]，细胞凋亡率降低[（19.6±1.6）%比（11.5±1.2）%，t＝11.880，P<0.01]，细胞中p27、C-caspase-3蛋白表达水平下降，CDK2、Foxp3蛋白表达水平升高。结论体外miR-5193可能通过靶向抑制Foxp3基因提高子宫颈癌Caski细胞对顺铂的敏感性。