简介:目的建立人皮肤细胞蛋白质组学研究所需的质谱分析方法,并获得皮肤细胞蛋白质肽质量指纹图谱。方法体外培养人皮肤成纤维细胞与角质形成细胞,采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离其总蛋白质,凝胶经染色后,在图谱上选取2个角质形成细胞蛋白点与1个成纤维细胞蛋白点,进行胶内酶切、基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱分析鉴定。结果获得3个点的肽质量指纹图谱,经Mascot软件搜索人非冗余蛋白质数据库后,鉴定为细胞骨架Actingamma1、tubulinα2及热休克蛋白HSP70。结论皮肤细胞基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱分析技术的建立为皮肤蛋白质组学的进一步研究提供手段。
简介:目的选择离体实验中对黑色素合成的关键酶-酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)有激活作用的墨旱莲(旱莲草),研究其动物致色素作用和对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成及相关基因[TYR、TYR相关蛋白(TRP-1/2)mRNA]表达的影响。方法以棕色豚鼠为动物模型,用Schmorl法染色,计数含黑素的细胞;用多巴(DOPA)-氧化酶染色,计算每100个基底细胞中DOPA阳性细胞数。培养的小鼠B16黑素瘤细胞以四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、氢氧化钠(NaOH)法和体外氧化DOPA反应方法分别测定细胞的增殖活性、黑素生成量及TYR活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TYR及其TRP-1/2基因的表达。结果墨旱莲乙醇提取物可使豚鼠表皮基底层中含黑素颗粒细胞增多,使豚鼠表皮内DOPA阳性细胞增多(P〈0.05);具有促进小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及TYR活性作用(P〈0.05),对细胞TYR基因有上调作用,而对TRP-1/2mRNA的表达无明显作用。结论墨旱莲乙醇提取物具有促进黑素合成及上调酪氨酸酶基因表达的作用,对白癜风色素恢复有较好应用和开发的前景。
简介:背景:在不同种族人群中白癜风相关的人类白细胞抗原(HLA)中,其血清型有差异。目的:旨在评估可能导致中国汉族白癜风患者遗传易感性的HLA在Ⅰ和Ⅱ组位点的分布。方法:在中国汉族187例白癜风患者和273例对照组中应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法分析HLA之Ⅰ和Ⅱ组等位基因频率。2×2列联表计算连锁不平衡。结果:2个位点的单倍型包括HLA-A25-B13、HLA-A25-B27、HLA-A25-Cw30602、HLA-A25-DQA130302、HLA-A25-DQA130601、HLA-A25-DQB130303、HLA-B13-Cw30602、HLA-B13-DQA130302、HLA-B13-DQA130601、HLA-B27-Cw30602、HLA-B27-DQA130302、HLA-B27-DQA130601、HLA-B27-DQB130303、HLA-B27-DQB130503、HLACw30602-DQA130302、HLA-Cw30602-DQA130601、HLA-Cw30602-DQB130303、HLA-Cw30602-...