简介:摘要目的探讨孵育时间在ELX808酶免分析仪(美国宝特BIO-TEK)进行酶联免疫吸附实验(ELISA)过程中,对实验结果的影响,了解ELISA方法对HBsAg和抗-HCV检测结果的准确性,从而提高实验室的工作效率和质量,减少因人为操作不当引起的误差。方法由于在进行酶联免疫吸附实验过程中,酶免分析仪短时间处理数张酶标反应板时,会有发生“堵车”现象,本实验分别选择不同参数的标本作为实验对照,延长ELISA方法的孵育时间,让ELISA酶标反应板在孵育室(孵育箱)中滞留相应的时间后才进入读板状态。结果孵育时间延长对阴性样本无影响,对阳性、弱阳性和质控血清都有影响,从而会影响临界值得计算和血清样本结果的判断。结论酶标反应板孵育时间最好不要超过标准时间15分钟,否则HBsAg和抗-HCV的实验结果都将会失控。
简介:目的:了解电阻抗法检测全血血小板聚集(ADP为诱导荆)试验的影响因素。方法:用Chrono-log560型血小板聚集仪的电阻抗通道检测10例健康体检者全血血小板的聚集(ADP为诱导剂)。每人抽血11.4ml,分别用肝素、构橼酸钠抗凝,平均分为6管(各2m1),在不同的孵育温度(室温、37℃、4℃)与不同的放置时间(0min、30min、60min、120min)下检测血小板聚集情况(电阻值表示)。结果:肝素与构橼酸钠两种抗凝剂结果分别为10.35±5.98Ω,7.30±3.41Ω,二者有显著性差异(P〈0.01);肝素抗凝血在室温、37℃时,血小板的聚集随时间的变化先升高后降低,但没有显著性差异(P〉0.05),在4℃时,血小板的聚集随时间的变化而降低(P〈0.05);枸橼酸钠抗凝血在不同的孵育温度及时间下,血小板聚集的变化不明显(P〉0.05)。结论:构橼酸钠抗凝血适合于临床全血血小板聚集的检测,但需考虑红细胞压积对其的影响。
简介:一、良种引进和选优蝈蝈良种主要有北京铁皮蝈蝈和天津的刘园绿蝈蝈。前者可到北京平谷、房山、河北易县地区购买。后者可到天津市北辰区刘园、王秦庄等地购买,也可到产地田间去捕捉。一般6月下旬至7月中旬,野生蝈蝈开始鸣叫,此时须准备好盛蝈蝈的竹笼,竹笼口用布袋缝好,带上网罩,接上一根长竹竿。蝈蝈在中午12点至下午3点时鸣叫得最欢,间歇很少,因此便于发现扑捉。下罩时手要轻,罩住后用手捏住蝈蝈脖项慢慢放入竹笼。扎好布袋,捕捉时要防止蝈蝈肢体受伤。选种要保证蝈蝈六足健全,仔细查看每只足是否有伤残、畸形,爪花是否齐全,观察其两后足是否紧贴体侧,六足是否运动灵活。另外还要选头须尾须长而全的,俗称“全须全尾”。蝈蝈的头须约为体长的两倍,选翅宽厚而完整的,翅是蝈蝈的发音器官,是品种优劣的关键。翅残者无法发音,影响产配,翅短小者、单者,音色不美。另外选体大健壮的个体,体小瘦弱常常是营养不足或发育不良。还要考虑鸣虫的老嫩,初蜕皮的皮虫往往较小,蓄养一段时间体型就会发大。总之,蝈蝈选优主要是选头大、背宽、翅宽、腹相称的。从观赏价值角度选择,首先选翅宽而长者,若翅不太宽而长的,为“筒子膀”,但亦为优者。翅要厚,翅上的脉要粗,翅膀近项处的沟要深,两翅交搭处要严,不严的为“喝风”,不可取。蝈蝈两翅要高耸,“耷拉膀”的不可取。头要大,头大身体必大,尤其是初蜕皮后肚子收缩未下的,观其头大必知其后身亦大。从体色上选择,将同一体色的品种选出放在一起蓄养,如铁皮蝈蝈,选出体形较大,膀宽翅厚,鸣声宽厚响亮的放在一起蓄养;绿蝈蝈选出体形大而匀称,体色翠绿,鸣声响亮的放在一起蓄养。
简介:摘要目的探讨氨基酮戊酸(ALA)孵育不同时间对ALA光动力疗法(ALA-PDT)抑制痤疮丙酸杆菌生物膜效应的影响。方法在预先放置细胞爬片的24孔和96孔细胞培养板中构建痤疮丙酸杆菌生物膜,使用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察生物膜的形成情况,用甲基四氮盐(XTT)法观察生物膜生长活力情况。确定生物膜体外模型构建成功后,分成6组,阴性对照组不加入ALA、不照光;ALA组仅予ALA孵育30 min,不照光;LED组仅予照光但不加入ALA;ALA-PDT1组、ALA-PDT2组、ALA-PDT3组分别与ALA孵育15、30、60 min后,接受LED光照射。处理完成后采用CLSM检测生物膜结构、死菌/活菌比例,XTT法观察生物膜生长活力差异。组间差异比较采用单因素方差分析及LSD-t检验。结果CLSM观察显示,痤疮丙酸杆菌生物膜体外模型构建成功。ALA-PDT1组、ALA-PDT2组、ALA-PDT3组死菌/活菌比值分别为0.90 ± 0.16、1.75 ± 0.19和2.57 ± 0.32,均显著高于阴性对照组(0.31 ± 0.01,t值分别为55.56、138.62、74.64,均P<0.001);生物膜活力值分别为0.35 ± 0.02、0.26 ± 0.02和0.18 ± 0.01,均显著低于阴性对照组(0.43 ± 0.00;t值分别为35.66、2.64、110.96,均P<0.001)。CLSM显示,痤疮丙酸杆菌生物膜在ALA-PDT作用下结构被破坏,且随着ALA孵育时间延长,生物膜破坏越严重。结论ALA孵育时间延长会增强ALA-PDT抑制痤疮丙酸杆菌生物膜效应。
简介:摘要目的观察HTK液在灭菌孵育期间对大鼠带瓣管道活性的影响并探讨其作用机制。方法将SD大鼠随机分成4组,取下主动脉带瓣管道,(1)对照组带瓣管道不经灭菌孵育直接进行各项指标的检测。(2)实验组A带瓣管道置于含有RPMI1640培养基和抗生素的无菌标本瓶中4℃灭菌孵育24小时。(3)实验组B带瓣管道置于含有半量RPMI1640培养基,半量HTK液及抗生素的无菌标本瓶中4℃灭菌孵育24小时。(4)实验组C带瓣管道置于含有HTK液和抗生素的无菌标本瓶中4℃灭菌孵育24小时。对灭菌孵育后的带瓣管道进行细菌学、细胞活性、组织学检测。结果各组灭菌孵育后的带瓣管道均未检出细菌及真菌,除对照组之外,实验组C带瓣管道的细胞活性保存最好,组织结构保存最完整。结论在灭菌孵育期间采用HTK液,能提高大鼠带瓣管道的细胞活性及组织结构的保存效果。其主要机制是在灭菌孵育期间,HTK液中的组氨酸缓冲对能有效维持细胞内外环境的稳定,色氨酸及酮戊二酸作为能量底物,对缺血状态下的带瓣管道提供能量。
简介:目的:研究透明质酸对小鼠骨髓来源树突状细胞功能的影响以及回输后荷黑色素瘤小鼠脾淋巴细胞增殖、活化和细胞因子的变化,进而探讨透明质酸诱导的树突状细胞增强荷瘤小鼠免疫功能的机制。方法:体外细胞因子联合诱导培养小鼠骨髓细胞获得树突状细胞(DCs),免疫磁珠分选纯化获得CD11c+树突状细胞,经不同浓度透明质酸(HA)刺激后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中细胞因子IL-12p70含量。建立小鼠皮下B16黑色素瘤模型,肿瘤局部皮下回输HA孵育DC后检测肿瘤大小,应用ConA检测脾淋巴细胞增殖情况,应用MTT法检测脾淋巴细胞杀伤活性,ELISA法检测脾淋巴细胞分泌的TNF-α和IFN-γ的表达,以单纯DC回输、生理盐水注射以及正常小鼠(无瘤)组作为对照。结果:在10~100μg/mL范围内,HA以剂量依赖的方式上调DCs分泌IL-12p70。HA孵育DC处理组肿瘤生长明显受到抑制;淋巴细胞增殖反应、杀伤活性和细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达明显高于单纯DC组和生理盐水组(P〈0.05)。结论:透明质酸可促进小鼠骨髓DC的成熟;透明质酸孵育的DC通过增强荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫功能而抑制肿瘤的生长。