简介:摘要:小学教学主要的目的在于锻炼培养学生学习方法的掌握,让学生在良好的学习氛围中逐步养成自主思考问题的方法。同样小学的数学教学也是通过学生可以理解接受的数学教学模式,开发学生的数学思维模式,建立起对数学问题的认知。小学的数学教学除了强调理论知识之外,主要是为学生塑造起用数学的逻辑进行对问题的分析,学会数学的思维模式,是小学数学教学阶段的基础与重点工作。小学生的整体认知水平能力还在发展中,导致数学教学的工作开展困难,其中教师不清楚学生的问题在哪里、学生课堂保持沉默、不将问题反馈给教师等也导致数学教学困难的原因之一。“沉默不是金”本文以人教版小学高年级数学教学为例,对课堂沉默现象之成因及对策进行分析。
简介:摘要目的检测NCSTN基因稳定沉默的人永生化角质形成细胞(HaCaT)增殖活性及相关分化蛋白的改变,初步探索反常性痤疮发病的可能机制。方法构建慢病毒介导shRNA沉默NCSTN基因的HaCaT细胞模型(shRNA组),转染空载慢病毒的HaCaT细胞作为阴性对照组,实时定量PCR和Western印迹法检测NCSTN基因的沉默效率。CCK8法检测HaCaT细胞增殖活性,实时定量PCR和Western印迹法检测HaCaT细胞角蛋白(CK1、CK5、CK7、CK10、CK14、CK16、CK17、CK18、CK19、CK20)及其他分化分子(内披蛋白、兜甲蛋白)mRNA和蛋白的表达。两组计量资料的比较采用两独立样本t检验。结果shRNA组NCSTN mRNA及蛋白表达(0.42 ± 0.19、0.30 ± 0.07)均显著低于阴性对照组(1.00 ± 0.34、1.00 ± 0.26;t = 5.196、2.637,P < 0.001、< 0.05),基因沉默效率达70%。与阴性对照组相比,shRNA组HaCaT细胞明显增殖活跃,CK16、CK19蛋白表达显著下调(t = 3.787、3.817,P < 0.01、< 0.05),终末分化分子内披蛋白表达明显降低(t = 2.904,P < 0.05)。结论稳定沉默NCSTN基因表达会引起HaCaT细胞异常增殖分化,为后续探究NCSTN基因突变引起反常性痤疮提供新思路。
简介:摘要目的通过沉默人永生化角质形成细胞HaCaT细胞中nicastrin(NCSTN)基因的表达,研究其下游细胞增殖及分化相关信号通路的改变。方法将HaCaT细胞分为干扰组、阴性对照组和空白对照组:干扰组转染特异性NCSTN-siRNA,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组转染等量转染试剂。实时PCR及Western印迹检测各组NCSTN mRNA和蛋白表达验证转染效率。运用Agilent人类全基因组表达谱芯片技术研究干扰组HaCaT细胞基因表达谱与阴性对照组之间的差异,以表达上调或者下调倍数≥ 2.0且P ≤ 0.05为标准,将差异基因用GO分析进行富集,筛选出表达差异显著且与角质形成细胞增生分化相关的基因,用实时PCR验证结果。结果干扰组HaCaT细胞NCSTN mRNA及蛋白相对表达量分别为0.287 ± 0.090、0.443 ± 0.085,明显低于阴性对照组(0.969 ± 0.127、1.047 ± 0.114)以及空白对照组(1.000 ± 0.151、1.000 ± 0.111),差异均有统计学意义(F值分别为30.787、31.139,P值均为0.001)。表达谱芯片显示,与阴性对照组相比,干扰组表达下调基因605条,上调基因444条。GO分析显示,干扰后差异表达基因富集到上皮发育、上皮细胞分化、角质形成细胞分化、角化4种生物学过程。对表达差异显著且与角质形成细胞增生分化相关的Sprouty相关蛋白2基因、表皮生长因子7基因、胰岛素样生长因子结合蛋白5基因、人Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶2基因和骨形成发生蛋白6基因通过实时PCR验证,验证结果与芯片结果显示的差异趋势一致。结论NCSTN基因功能缺失有可能通过调节其下游细胞增殖及分化相关信号通路的表达,影响角质形成细胞的正常增殖和分化。
简介:摘要目的调查肿瘤科护士组织沉默现状及影响因素。方法采用一般资料问卷、护士组织沉默测评问卷、领悟社会支持量表和心理弹性简化量表对重庆市4所三级甲等医院278名肿瘤科护士进行调查。结果肿瘤科护士组织沉默总分为(51.27 ± 17.28)分,其中默许性沉默为(15.91 ± 5.42)分、防御性沉默为(15.83 ± 6.29)分、亲社会性沉默为(11.03 ± 4.16)分、漠视性沉默为(8.50 ± 3.46)分。肿瘤科护士组织沉默总分与领悟社会支持总分、心理弹性总分呈负相关(r值为-0.364、-0.497,均P<0.01)。回归结果显示年龄、受教育水平、领悟社会支持和心理弹性是肿瘤科护士组织沉默的影响因素(均P<0.05),可解释变异的45.00%。结论肿瘤科护士组织沉默处于中等水平,有待改善。护理管理者应重视护士组织沉默,并采取相应的干预措施打破沉默现象,进而提高护士的工作满意度和工作效率。