简介:摘要目的探讨端粒酶逆转录酶(TERE)对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠中性粒细胞凋亡的影响。方法24只SD大鼠按数字表法随机分为正常对照组、ANP 3 h组、ANP 6 h组、TERT抑制剂BIBR1532干预组(BIBR1532组),每组6只。采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠构建ANP模型,分别在造模后3、6 h收集和分离大鼠外周血中性粒细胞BIBR1532组在造模前腹腔注射2 mg/kg BIBR1532,在造模后3 h处死大鼠,收集外周血中性粒细胞。应用荧光定量PCR法检测中性粒细胞TERT mRNA表达量;蛋白质免疫印迹法检测中性粒细胞TERT蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-xL、Bax表达量;流式细胞术检测中性粒细胞的凋亡;ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-6水平。取大鼠胰腺组织行病理学检查。结果正常对照组、ANP 3 h组、ANP 6 h组、BIBR1532组大鼠外周血中性粒细胞TERT mRNA表达量分别为1.03±0.26、3.31±1.07、5.21±0.78、1.95±0.49;TERT蛋白表达量分别为0.09±0.03、0.43±0.12、0.58±0.11、0.22±0.07;Bcl-xL蛋白表达量分别为0.19±0.05、0.50±0.07、0.85±0.04、0.40±0.11;Bax蛋白表达量分别为0.29±0.08、0.23±0.03、0.17±0.02、0.43±0.12;细胞凋亡率分别为(10.03±0.74)%、(7.99±0.27)%、(6.65±0.36)%、(22.98±2.86)%。ANP 3、6 h组TERT mRNA和蛋白表达量、Bcl-xL蛋白表达量高于对照组,Bax蛋白表达量、细胞凋亡率低于对照组,而BIBR1532组TERT mRNA和蛋白表达量、Bcl-xL蛋白表达量低于ANP 3 h组,Bax蛋白表达量、细胞凋亡率高于ANP 3 h组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。正常对照组、ANP 3 h组、BIBR1532组血清TNF-α水平分别为(96.67±27.12)、(382.30±46.33)、(206.88±36.42)ng/L,IL-6水平分别为(43.34±14.50)、(134.21±16.13)、(88.06±13.05)ng/L,ANP 3 h组均高于正常对照组,而BIBR1532组均低于ANP 3 h组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。BEBR1532组大鼠胰腺组织病理改变较ANP组明显改善。结论ANP大鼠外周血中性粒细胞TERT表达量显著升高,给予TERT抑制剂干预后,ANP大鼠中性粒细胞凋亡率显著升高,表明TERT可抑制ANP大鼠外周血中性粒细胞的凋亡。
简介:摘要目的通过检测端粒酶反转录酶(TERT)启动子在放射性碘难治性甲状腺乳头状癌(RAIR-PTC)中的突变频率,探讨该基因突变对RAIR-PTC的摄碘特征及碘治疗疗效的影响。方法对2005年1月至2020年6月在江苏省原子医学研究所附属江原医院进行放射性碘治疗的RAIR-PTC[37例,其中男15例,女22例,年龄(49.8±16.1)岁]和碘治疗有效[40例,其中男13例,女27例,年龄(39.8±10.9)岁]PTC患者的TERT启动子突变及B-Raf原癌基因丝/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)V600E突变情况进行回顾性研究,分析不同基因突变类型的摄碘特征及碘治疗疗效差异。采用Fisher确切概率法及两独立样本t检验进行数据比较。结果RAIR-PTC中,TERT启动子突变率为40.54%(15/37),高于碘治疗有效组(0,0/40;P<0.001),均为C228T位点突变,未发现C250T突变;而BRAFV600E突变率(64.86%,24/37)与碘治疗有效组(72.50%,29/40)比较差异无统计学意义(P=0.858)。TERT启动子突变患者年龄更大(t=3.76,P=0.001),远处转移灶不摄碘率更高(P=0.037)。启动靶向治疗者及死亡病例中TERT启动子突变患者分别占2/3和3/4。35例甲状腺球蛋白抗体(TgAb)阴性患者中,11/14的TERT启动子突变者刺激性甲状腺球蛋白(sTg)升高,而无突变组该比例为57.1%(12/21),但差异无统计学意义(P=0.357)。结论RAIR-PTC患者中TERT启动子突变率增高,临床工作中可将该基因突变作为预测碘难治的指标之一。
简介:摘要:唾液淀粉酶是唾液蛋白的重要组成部分,并且唾液淀粉酶的活性是反映自主神经系统最为灵敏的指标,有理想的应用研究价值。本文总结介绍了影响唾液淀粉酶的常见因素,以及五种唾液淀粉酶活性的测定方法,对于临床实验以及后续研究提供一定参考。
简介:摘要:目的是利用基因工程将淀粉酶 (RSAA)转化为人类唾液,并利用它来代替唾液中的SAA来处理淀粉。通过热休克法对大肠杆菌DH5进行改造,在含有卡那霉素的LB培养皿中筛选抗逆转录病毒,培养、提取、消化和质粒测序抗逆转录病毒。重组质粒转化为大肠杆菌BL21。用含有卡那霉素的LB培养皿筛选抗体b -ps1,培养bl-ps1。细菌在pH值为6.8的磷酸酶缓冲液中被收集和重新激活。顶部的浮油通过离心和超声离心来检测其淀粉的活性。结果是,SAA cDNA的PS1原始细胞核表达载体已经建立。RSAA可以在主BL21 (DE3)中溶解,RSAA可以有效地溶解淀粉。结论用RSAA代替唾液中的SAA唾液淀粉是安全、方便和环保的。
简介:摘要:本文主要研究连栽方法对红心杉土壤酶活性及其林木生长量的影响,在本文进行研究的过程中,为了确保研究有理有据,建立了相关试验,试验中选择广西柳州市融水县贝江河林场某地块连栽种植红心杉,并且在试验研究过程中,针对红心杉不同发育阶段的林木生长特性和土壤酶活性进行了分析对比,同时确定了红心杉与土壤酶活性之间的相关关系。
简介:摘要:黄芪是豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,主要分布在山西、甘肃、陕西、黑龙江、山东省等地。药理研究表明,黄酮、皂苷和多糖是黄芪的主要药效成分,具有抗炎、免疫刺激、抗氧化、抗衰老、保护心脏等作用。随着人们健康保健意识的提高,特别是中医药在抗击非典、新冠疫情中发挥的独特作用,中药材生产迎来了难得的发展机遇。目前,市场所售商品黄芪主要通过人工种植进行生产。然而,黄芪在种植过程中缺乏科学施肥指导,盲目施用化肥以追求产量,导致氮肥流失、土壤酸化、有机质含量下降、病虫害频发;同时,黄芪产量和品质也明显降低。因此,施用生物有机肥是实现土地用养结合,推进黄芪生态种植的必经之路。
简介:摘要目的探讨不同能量Q开关Nd:YAG 1 064 nm激光对糠秕马拉色菌的细胞活性、蛋白酶活性及菌体结构的影响。方法选用糠秕马拉色菌标准株,分别予以Q开关Nd:YAG 1 064 nm激光0(对照组)、500、600、700、800、900 mJ能量照射,培养7 d后测量各组菌落直径及菌落数,评估菌体细胞活性,采用全脂牛奶平板法测定蛋白酶活性,透射电镜观察各组菌体超微结构。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,激光能量与菌落直径、菌落数及蛋白酶活性的相关性采用Pearson相关分析。结果对照组及500、600、700、800、900 mJ组菌落直径[(4.05 ± 0.69)、(3.76 ± 0.51)、(3.28 ± 0.41)、(3.09 ± 0.72)、(2.54 ± 0.64)、(2.43 ± 0.41)mm]、菌落数(4 787 ± 597、4 287 ± 761、1 879 ± 275、1 082 ± 248、209 ± 42、72 ± 31)差异均有统计学意义(F值分别为14.83、231.85,P < 0.05),600、700、800、900 mJ组菌落直径、菌落数均小于对照组(均P < 0.05)。激光能量与菌落直径和菌落数均呈负相关(r值分别为-0.67、-0.91,P < 0.05)。对照组、500 mJ组、700 mJ组、900 mJ组蛋白酶活性差异有统计学意义(F = 346.60,P < 0.05),700 mJ、900 mJ组蛋白酶活性均低于对照组(P < 0.05)。激光能量与蛋白酶活性呈负相关(r = -0.94,P < 0.05)。透射电镜下观察到对照组菌体结构完整,500 mJ组菌体结构较完整,600 ~ 900 mJ组结构明显受破坏,且激光能量越大菌体结构破坏越严重。结论Q开关Nd:YAG 1 064 nm激光可影响糠秕马拉色菌细胞及蛋白酶活性,破坏菌体结构。
简介:摘要目的建立和验证全自动凝血分析仪检测人抗凝血酶Ⅲ(human antithrombin Ⅲ,AT-Ⅲ)活性的方法。方法参照全自动凝血分析仪操作说明书进行AT-Ⅲ活性的检测,并对方法的线性、检测范围、精密度和准确度进行方法学验证。结果全自动凝血分析仪检测AT-Ⅲ活性的方法稳定,仪器自动运行标准曲线的决定系数均>0.980,定标血浆标准曲线线性范围为0.12~1.23 IU/ml,定标血浆高、中、低值和定量下限稀释样品的效价回收率均在80%~120%范围内,且高、中、低值效价回收率的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均<15%,定量下限稀释样品的效价回收率的RSD<20%,供试品的批内精密度RSD均<5%,批间精密度RSD均<10%,对3批AT-Ⅲ制品及其中间品进行活性检测,每批样品分别测定3次的平均RSD均<5%。结论全自动凝血分析仪检测AT-Ⅲ活性的方法具有较好的线性、检测范围、准确度和精密度,可用于AT-Ⅲ生产工艺中活性的检测。
简介:【摘要】将指向艾叶的总生物碱提取数量作为主要关注对象,借助于单因素实验控制技术方法,具体获取到指向料液比技术参数项目、复合酶物质添加数量技术参数项目、酶解过程持续时间技术参数项目、酶解pH技术参数项目、超声时间技术参数项目、超声功率技术参数项目、乙醇物质溶液浓度技术参数项目,以及超声温度技术参数项目的最优化控制范围技术条件。要择取运用Plackett-Burman技术方法筛选确定针对艾叶总生物碱物质提取数量施加影响改变作用的各类因素,接续运用Box-Behnken技术方法针对正在运用的提取工艺流程展开优化分析,确定并且获取针对艾叶总生物碱物质展开提取技术环节的最优化工艺流程控制条件。要择取运用纸片技术方法,以及稀释技术方法,确定艾叶总生物碱提取物质,针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌所发挥的抑制作用效果,以及在发挥抑制作用效果过程中需要满足的最小浓度控制条件。本项研究过程中获取的结果显示,能够影响制约艾叶总生物碱提取量的代表性因素,涉及超声技术过程持续时间因素、复合酶物质添加数量因素,以及酶解技术过程持续时间因素。
简介:摘要:目的:研究沐古香浴球中药浸提液对酪氨酸酶活性及抗氧化功能影响。方法:蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定不同浓度浸提液吸光度值,判定浸提液对酪氨酸酶活性影响;浸提液灌肠给药大鼠三十天后,检测其血清丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(T-SOD和Cu-SOD)的变化情况。结果:不同浓度浸提液对酪氨酸酶的活性皆有抑制作用;30天灌肠结束后,结果显示,浸提液浓度增加,T-SOD和Cu-SOD活性随之增高,血清中MDA含量有所降低。结论:沐古香中药浸提液具有抑制酪氨酸酶活性,减少黑色素的生成,以及抗衰老作用。
简介:摘要目的探讨金雀异黄酮在健康受试者体内对咖啡因主要代谢产物药代动力学的影响,从而阐明金雀异黄酮对人CYP1A2、CTP2A6、NAT2及XO酶活性的影响。方法18名健康受试者于试验第1天口服咖啡因100 mg后收集0~24 h的外周静脉血以及0~12h总尿液,第2~15天服用金雀异黄酮1000 mg/d,第16天早上服用探药咖啡因100mg,第16天服用咖啡因后收集0~24h的外周静脉血以及0~12 h总尿液标本。血、尿标本中咖啡因及代谢产物的浓度采用高效液相色谱法(HPLC)定量检测,计算血中咖啡因及主要代谢产物的药代动力学参数及各代谢物的尿液排泄量。结果与服用金雀异黄酮后相比,受试者血浆中1,7-二甲基黄嘌呤(17X)的药时曲线下面积(AUC(0-24 h)显著降低了11.77%(P=0.007)。尿液中17X和1-甲基黄嘌呤(1X)的排泄量分别显著降低了14.31%(P=0.027)和27.18%(P=0.002),而1,7-二甲基尿酸(17U)显著性增加了57.33%(P=0.028),1-甲基尿酸(1U)显著降低了14.61%(P=0.028),未发现尿液中咖啡因和5-乙酰氨基-6-甲酰氨基-3-甲基尿酸(AFMU)排泄量的变化。结论金雀异黄酮在体内影响了中国健康受试者咖啡因的主要代谢产物药代动力学,通过对药物代谢活性酶的影响从而产生相应的药物相互作用。