简介:摘要目的探讨微小RNA191-5p(miR-191-5p)对胃癌细胞迁移、克隆形成和增殖的影响。方法采用实时定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)检测分析了来自山西省肿瘤医院的60例胃癌患者的胃癌组织(C组)及其癌旁正常组织(N组)中miR-191-5p的表达水平;应用pcDNA3.1载体构建过表达miR-191-5p的重组质粒(pcDNA-mRNA-191-5p),实现miR-191-5p在胃癌细胞中的过表达,用miRNA-191-5p inhibitor实现miR-191-5p在胃癌细胞中的低表达;分别用划痕愈合实验、克隆形成实验和CCK-8法检测细胞迁移、克隆形成和增殖能力;Targetscan预测miR-191-5p与周期素依赖性激酶6(CDK6)的结合位点,并通过双荧光报告基因验证;Western印迹检测miR-191-5p对p21和CDK6蛋白表达的影响。结果与N组相比,C组中有53例(88%)胃癌组织中出现miR-191-5p的表达下调;C组miR-191-5p的表达水平为0.43±0.13,显著低于N组的0.88±0.12,P<0.001,过表达miR-191-5p能显著抑制胃癌细胞的迁移、克隆形成和增殖能力,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光报告基因证实miR-191-5p与CDK6的3′UTR结合;Western印迹显示胃癌细胞中pcDNA-miR-191-5p下调了CDK6表达而上调了p21表达。结论miR-191-5p表达下调可能参与胃癌的发生发展,过表达miR-191-5p能下调CDK6并抑制胃癌细胞生长。
简介:AbstractBird infections with highly pathogenic avian influenza A(H5N6) viruses have been identified since 2014. With very limited occasion, the virus could sporadically spilled over to infect humans. It has been recognized that all human infections were within southern region of Mainland China until the case reported here in Beijing in Aug. 2019. This was the first human case infected with highly pathogenic avian influenza A(H5N6) virus in northern China. The infection was confirmed by real-time RT-PCR assay. The whole genome sequences were obtained from clinical sample. Genetic characteristics of the virus were identified similar to those of previous avian influenza A(H5N6) viruses, retaining the main features of the avian influenza virus.
简介:摘要: 数学学科是小学课程教学的重要组成部分,其不同于语文、英语等学科的课程教学,数学 教学 对于学生思维能力的要求较高,对于学生独立思考与解决问题的能力培养较强。鉴于此,切实关注和重视数学学科的课程教学就尤为必要。本文以小学 5-6 年级这一学生群体为研究对象,在分析 总结 小学 5-6 年级 高效率数学学习者所表现出的非智力特征的基础之上,尝试提出推进小学生进行高效率数学学习的相关举措。 关键词:小学 高效率 数学学习 非智力特征 引言: 小学生的数学学习受智力因素和非智力因素的共同作用与影响,智力因素的可变性不高,而非智力因素则不同,其可变性高,影响力强,尤其是对于智力水平相当的学生而言,非智力因素在其学习发展中更是发挥着不可忽视的重要作用。鉴于此,积极探究小学 5-6 年级高效率数学学习者的非智力特征便已然成为小学数学教师教育教学工作的重要出发点和着力点。
简介:【摘 要】《普通高中英语课程标准( 2017 年版)》提出英语学习活动观,旨在提高学生的学用能力。小学英语主题单元教学理念与之相契合。在主题单元教学中,单元是承载主题意义的基本单位,单元教学目标要围绕主题语境整体设计教学活动,以达到促进学生全面发展,更高效地提升课堂教学,最终落实英语学科核心素养的目的。
简介:摘要目的分析2019年8月北京市朝阳区确诊的l例人感染H5N6禽流感病例流行病学特征,为人感染H5N6禽流感疫情防控提供依据。方法对病例家属进行访谈,获取病例发病、诊治过程及密切接触者信息,采集病例及密切接触者的呼吸道标本、病家及共同暴露者家中剩余禽类标本进行核酸检测及全基因组分析。结果病例表现为重症肺炎,发病前仅加工制作邻居从湖南某市场购买的冷冻鸡。病例发病早期采集的肺泡灌洗液、痰液为H5N6禽流感病毒核酸阳性,肺泡灌洗液与病例家中剩余冷冻禽类制品全基因组序列分析高度同源,HA基因Clade分型属于高致病性禽流感病毒2.3.4.4分支。结论加工制作带毒的冷冻禽制品也可感染禽流感病毒,提示未经检疫的冷冻禽制品存在风险。
简介:摘要目的分析1例5p微缺失伴6q微重复患儿临床表型与基因组拷贝数变异(copy number variants,CNVs)的关系。方法应用单核苷酸多态性微阵列技术(single nucleotide polymorphism array,SNP-array)对患儿进行全基因组CNVs筛查,分析临床表型与CNVs的关系。结果患儿主要表现为足月小样儿,哭声低弱伴吸气性喉鸣,小下颌,流涎,四肢肌张力低下,无吸允动作,左侧隐睾等异常。SNP-array检测结果发现患儿chr5p15.33p15.31区域发生8.3 Mb片段缺失,该区域包含SDHA、TERT等33个OMIM基因;此外还发现该患儿chr6q25.3q27区域发生11.6 Mb片段重复,为临床致病性拷贝数变异。结论5p微缺失合并6q微重复可能是该患儿的主要致病原因。
简介:摘要目的分析1例由气溶胶暴露引起人感染H5N6禽流感病毒病例的发生和传播途径,为人禽流感防控提供依据。方法对病例开展流行病学调查,明确病例暴露史及感染途径,追踪病例病情进展与转归。对病例、密切接触者、病家环境、禽类交易市场环境标本进行核酸检测。结果病例无活禽、禽类交易市场暴露史,发病前1 d具有禽类临时存放密闭狭小环境气溶胶暴露史。病例下呼吸道提取物及病家冰箱剩余冷冻鸡块表面涂抹标本检出H5N6禽流感核酸阳性。结论病例感染来源为批发市场购买的活禽,禽类临时存放密闭狭小环境气溶胶暴露可能为其感染途径。应在广州市范围推进"集中屠宰、冷链配送、生鲜上市",加强健康宣教,树立消费生鲜禽肉的观念。
简介:摘要目的探讨沉默Krüppel样因子5(KLF5)对电离辐射后体外培养的大鼠小肠上皮IEC-6细胞生物学功能的影响。方法给予大鼠小肠上皮IEC-6细胞12 Gy照射,分别在照后0、0.5、1、2、3、5、7、24 h,检测KLF5的表达。给予IEC-6细胞0、2、4、8、12和16 Gy X射线照射,照后3 h收集细胞蛋白,采用Western blot法检测IEC-6细胞中KLF5的表达。设计并合成特异性针对大鼠KLF5基因的shRNA靶序列,构建到慢病毒载体中,通过感染人胚肾293T细胞,对慢病毒进行包装和滴度测定。使用包装好的慢病毒感染IEC-6细胞,荧光显微镜下观察转染效率,转染72 h后分别采用实时-PCR和Western blot方法检测感染后细胞中KLF5 mRNA及蛋白的表达。后续实验分为阴性对照组、shKLF5组、单纯照射组、照射+ shKLF5组4组。采用CCK-8法观察8 Gy照射后KLF5沉默细胞的增殖活性,流式细胞术检测8 Gy照射后KLF5沉默细胞的周期分布和凋亡,免疫荧光染色观察2 Gy照射后KLF5沉默细胞中γ-H2AX焦点数量。结果不同剂量射线照射后KLF5表达逐渐增加,呈现明显的剂量效应关系。12 Gy照射后KLF5表达呈现先升高后降低的趋势,照后5 h表达量最高。KLF5 shRNA慢病毒载体构建成功,感染的IEC-6细胞中KLF5 mRNA及蛋白水平均在转染72 h明显降低。照射+shKLF5组细胞在照射后24 h阻滞在G2/M期现象显著(t=11.56,P<0.05),细胞增殖明显受到抑制,其细胞凋亡率(12.49±0.63)%,明显高于单纯照射组(7.42±0.49)%,两组比较差异有统计学意义(t=10.98,P<0.05),照射+shkLF5组细胞核中各时间点的γ-H2AX焦点数量明显多于同一时间点阴性对照组(t=22.07、23.89、11.24、59.97、20.85,P<0.05)。结论成功构建KLF5 shRNA慢病毒载体,并建立KLF5敲低小肠上皮细胞株。下调细胞内KLF5表达,能够使细胞周期阻滞在G2/M期,抑制照射后细胞的增殖,促进细胞的凋亡,DNA双链断裂水平增加,修复延迟。