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  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-628-3p调控的DNA螺旋对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法首先收集2013年1月至2017年12月郑州大学第二附属医院骨科收治的股骨骨肉瘤患者60例,同期收集股骨创伤性骨折患者60例作为对照组,采用定量聚合链反应(qPCR)检测和比较外周血循环miR-628-3p的表达水平差异,并根据随访结果进行生存分析。以人骨肉瘤细胞U2OS和HOS为研究对象,过表达miR-628-3p,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验检测其增殖活性,采用流式细胞术检测其凋亡率。根据Starbase预测miR-628-3p可与Bloom综合征解螺旋(BLM)结合,故进一步采用蛋白质印迹法(Western blot)、qPCR和荧光素报告基因实验进行检测。两组间计量资料比较采用独立样本t检验,计数资料比较采用χ2检验。结果骨肉瘤患者外周血和肿瘤组织中miR-628-3p的表达水平(相对表达量分别为0.203±0.047、0.217±0.054)均明显低于正常对照组(相对表达量分别为0.951±0.106、1.013±0.072,P<0.01),差异有统计学意义,受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-628-3p在骨肉瘤患者中的表达,曲线下面积(AUC)=0.707(P<0.01),K-M生存分析显示miR-628-3p低表达患者生存时间明显短于高表达患者。CCK-8和集落形成实验检测显示miR-628-3p过表达后可抑制骨肉瘤细胞U2OS和NOS的增殖;流式细胞术检测显示miR-628-3p过表达后可促进骨肉瘤细胞的凋亡;qPCR和Western blot检测显示miR-628-3p过表达后,BLM的表达水平明显低于miR-628-3p nc组(P<0.01),差异有统计学意义。荧光素报告基因实验显示miR-628-3p mimc与BLM-mt共转染骨肉瘤细胞U2OS和NOS后,其荧光值明显低于其他转染组(U2OS:0.208±0.017比1.082±0.046,t=4.698,P<0.01;HOS:0.224±0.047比0.966±0.053,t=5.548,P<0.01),差异有统计学意义。裸鼠成瘤证实miR-628-3p过表达后肿瘤大小和重量明显低于miR-628-3p nc组[(1.419±0.274) g比(2.825±0.148) g,t=3.717,P<0.01],差异有统计学意义。结论miR-628-3p在骨肉瘤患者中存在低表达现象,与患者的不良预后和生存时间相关,miR-628-3p过表达可下调DNA螺旋BLM,抑制骨肉瘤细胞的增殖。

  • 标签: 骨肉瘤 微小RNA-628-3p DNA解螺旋酶 Bloom综合征解螺旋酶 细胞增殖
  • 简介:螺旋藻是近年来国内外竞相开发的一种高蛋白营养源。富含多糖、蛋白质、多种有效成份;本项研究对其干粉进行处理,,制成母液,同时对关键性的技术环节作了介绍,为综合开发该产品提供了广阔的前景。

  • 标签: 酶解 螺旋藻 研究
  • 简介:通过几种不同水提工艺比较,改善白及的出膏率和溶化性.通过加入植物精提复合SPE-002、SPE-006和耐高温的α-淀粉,对白及进行提取实验,考察在白及的提取工艺中加入不同的对其出膏率及膏粉溶化性的影响.从实验的澄清度和出膏率分析可以得出,上述几种的使用对白及的生产没有产生较好效果.所以实际生产中我们可以选择沉降或者使用澄清剂的方法,弃去沉淀,以期达到生产需求、用药需求.

  • 标签: 白及 酶解 出膏率 溶化性
  • 简介:据2007年6月29日《细胞》杂志报道,美国科学家的一项最新研究回答了一个关于DNA的基本问题,即DNA在复制过程中是如何在的作用下解开双螺旋结构的。

  • 标签: 双螺旋结构 DNA 美国科学家 《细胞》 复制过程
  • 简介:本实验以牛骨为原料,以水解度为牛骨蛋白程度的指标,确定了木瓜蛋白和碱性蛋白分步水解牛骨的工艺条件:将粉碎粒度为10mm-20mm的牛骨碎片,在2kg/cm^2的高压蒸汽压下烝煮3h,降温至50℃,后调节pH6.5,后加入木瓜蛋白和碱性蛋白分步水解,通过正交试验确定了小瓜蛋白工艺:温度为50℃,pH为6.5,时间为3h,E/S为4000U/g;碱性蛋白工艺:温度为65℃,pH为8.5,时间为3h,E/S为7000U/g。并对液前后的氨基酸种类和含量进行了比较,后较前多了苯丙氨酸和色氨酸,各氨基酸含量较前明显增加,为牛骨蛋白水解液制备肉味香精提供了依据。

  • 标签: 牛骨蛋白 酶解工艺 水解度 游离氨基酸
  • 简介:聚合链式反应(PCR)技术的问世和发展是分子生物学研究领域中最重要的进步之一.在PCR技术中,DNA聚合起着至关重要的作用,从某种意义上说,DNA聚合的研究进展决定着PCR技术的发展趋势和应用范围,研究者们一直在努力探寻着学性能好、保真度高的PCR用DNA聚合.高中生物人教版选修1和选修3都对PCR技术的原理和过程作了详尽的介绍,但对热稳定DNA聚合的描述极少,仅仅提及Taq.因此,有必要对PCR用DNA聚合的基本类型和特点进行分析归纳.

  • 标签: 聚合酶链式反应 PCR技术 DNA 分子生物学 发展趋势 研究者
  • 简介:目的分别利用胃蛋白、胰蛋白、胰凝乳蛋白、弹性蛋白对蜈蚣粉进行并选取最佳用来制备抗肿瘤多肽。方法利用4种对蜈蚣粉进行,采用MTT体外抗肿瘤实验方法,以蛋白质的水解度及提取液对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率为指标,同时以蜈蚣粉的水溶性蛋白质含量为标准,评价4种对蜈蚣粉的效果并筛选出最佳用。结果胃蛋白对蜈蚣粉的水解度为10.44%;胰蛋白对蜈蚣粉的水解度为28.29%,在0.125mg·mL~(-1)及0.25mg·mL~(-1)的较小浓度下对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率低于对照组,但随浓度的增大抑制率逐渐增大,在0.5~2mg·mL~(-1)浓度时,胰蛋白在4种中达到最大抑瘤效果;胰凝乳蛋白和弹性蛋白的水解度分别为50.45%、44.16%,当浓度〉0.5mg·mL~(-1)时其对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率高于对照组,在浓度为0.5mg·mL~(-1)时抑制率分别为2.86%、36.37%,且随浓度增大抑制率增大。结论蜈蚣粉工艺最佳用为胰蛋白,其次是胰凝乳蛋白和弹性蛋白,而胃蛋白活性较低可以去除。

  • 标签: 蜈蚣粉 蛋白酶 水解度 乳腺癌MCF-7细胞株 细胞抑制率
  • 简介:尝试运用STEM的理念建构“DNA螺旋结构模型”,在制作过程中力求突出科学性、技术性、工程性。同时弥补以往此模型制作过程中不便于进行教学展示和保存等不足之处,使制作出来的模型能更好地为生物教学实践服务。

  • 标签: STEM DNA分子结构 模型制作
  • 简介:摘要 介绍三种用简易材料麻绳、双头棉签、扭扭棒、牙签、橡皮泥等制作DNA螺旋结构模型的方法。实验材料简单易得、经济实惠、准备耗时短,制作的三种模型科学性、实用性、创新性、趣味性、可推广性强,外形美观,能体现DNA的很多细节。

  • 标签: DNA  结构模型 建议材料 制作 方法
  • 简介:采用木瓜蛋白对罗非鱼进行,对不同液固比和浓度对水解罗非鱼的影响进行了研究。以总氨基态氮含量作为评价木瓜蛋白水解能力为指标,结果表明木瓜蛋白水解罗非鱼的最适加量为0.6%,水解最经济的固液比在1∶3左右。通过正交实验,得到木瓜蛋白水解罗非鱼的最佳工艺条件为:浓度0.7%、水解温度60℃、水解时间3h、pH值6.0。

  • 标签: 罗非鱼 木瓜蛋白酶 酶浓度 固液比 工艺条件
  • 简介:乳及其制品中均含有一定量的脂,该能水解乳脂肪生成游离脂肪酸,在一定程度上影响乳品的品质。乳的脂解作用分为两种:一是自发性水解,其作用起始于乳的冷藏过程;二是诱导性水解,是由乳的加工引起的,如经过均质后脂肪球膜被破坏,使脂有机会进入脂肪中发生水解。脂活性的测定方法主要有:pH值统计法、以脂肪酸量的增加来表示及琼脂糖扩散法等。本文采用琼脂糖扩散法对UHT乳中的脂活性进行定性分析,其测定原理为:脂以三丁酸甘油脂为底物,将其水解,从而使含有三定酸甘油脂产生肉眼可见的亮斑,测得亮斑的直径再通过换算即可知道

  • 标签: 脂解 UHT乳 油脂 水解 均质 冷藏过程
  • 简介:胰蛋白在近江牡蛎的工艺中温度、加量、底物浓度和pH等因素对水解度影响较大。通过正交试验和从能源、节省时间和操作方便性等角度出发,确定牡蛎的最佳工艺条件为:温度45℃,加量1.2%,底物浓度1:2,pH7.0,时间5h。

  • 标签: 近江牡蛎 胰蛋白酶 水解度
  • 简介:螺旋逻辑"呈现的是深藏于宇宙人生万事万物之间的动态规律。由"阴阳二元"的互动作用为基础,再经"移位"形成"秩序","转位"形成"变化","包孕"形成"联贯",然后由"对比、调和"形成"统一",使其层层"生灭转化"之"螺旋逻辑",而形成庞大的"多←→二←→一(0)"双螺旋系统。本文即以此"多←→二←→一(0)"与"DNA"双螺旋结构为范围,对哲学螺旋与科学螺旋之对应、贯通进行探讨,以见其密切的"螺旋逻辑"关系。

  • 标签: 螺旋逻辑 哲学与科学 “多←→二←→一(0)”与DNA双螺旋结构
  • 简介:以大豆蛋白为原料,采用复合蛋白Protamex与木瓜蛋白,并通过单因素和正交试验分析。结果表明,Protamex与木瓜蛋白配比为6∶4,pH值为7.0,底物质量分数为5%,时间为8h,温度为60℃且水解度达到34.59%,为最佳工艺。

  • 标签: 大豆多肽 复合酶解 正交试验
  • 简介:为推动鲍鱼的深加工,比较了鲍鱼提取物(Enzymolyticextractsofabalone,EEA)与传统水提物(Waterextractsofabalone,WEA)的生理活性.EEA的生理作用呈良好的量效关系,2~8mL/kg使小鼠耐常压缺氧时间延长18.4%~53.9%,耐化学性缺氧时间延长28.0%~67.7%,耐低温时间延长24.3%~36.9%,耐高温时间延长7.3%~30.9%,游泳时间延长66.7%~138.9%,爬杆时间延长23.1%~130.8%,碳粒吞噬指数提高13.9%~29.1%,溶血素水平提高26.4%~38.8%,WEA的生理活性较弱,多数指标仅在剂量达到8mL/kgBW时方能起效.结果表明,EEA可提高抗应激能力和免疫功能,作用强度远高于WEA.

  • 标签: 鲍鱼 酶解提取液 生理活性 免疫功能
  • 简介:牡蛎液在Fe2+诱发卵黄脂蛋白过不饱和脂肪酸(PUFA)过氧化体系中抗氧化活性由表4及图3可知牡蛎液对PUFA过氧化体系的抑制作用随样品浓度的增大,牡蛎液在DPPH体系中也具有较强的清除DPPH自由基的能力,结果牡蛎液清除DPPH·和·OH的EC50分别为7.313和1.330mg/ml

  • 标签: 抗氧化研究 液抗氧化 牡蛎酶
  • 简介:1题目人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图2所示。

  • 标签: DNA分子 理综卷 高考 细胞核 重组 转录
  • 简介:目的观察α-半乳糖苷对猕猴类人B抗原的效果,探讨α-半乳糖苷对猕猴红细胞结构、功能的影响.方法采用热吸收放散试验从30只华南猕猴中选取类人ABO血型抗原较强的2只A型、3只B型猕猴做为实验对象,以基因重组的α-半乳糖苷体外猕猴类人B型血抗原,并回输到A型猕猴体内,测定红细胞脆性、自身溶血率、胆固醇、高铁血红蛋白、乙酰胆碱脂、ATP等红细胞的结构功能指标.结果经α-半乳糖苷后,猕猴红细胞胞膜完整、携氧能力正常,后的"通用"型血回输给受体猕猴无任何输血反应发生.结论α-半乳糖苷对于猕猴红细胞的形态、结构、功能无不良影响,且在实验动物体内是安全的.

  • 标签: Α-半乳糖苷酶 猕猴 红细胞 形态 结构