简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-193b-3p在新生脓毒症大鼠海马组织中的表达情况，以及其在脓毒症神经炎症反应中的作用及可能机制。方法将24只2 d龄SD大鼠按随机数字表法分为对照组与脂多糖组及阴性对照组与miR-193b-3p组，每组6只。脂多糖组、阴性对照组及miR-193b-3p组通过腹腔注射脂多糖(2.5 mg/kg)制备脓毒症模型，miR-193b-3p组和阴性对照组分别于脂多糖注射前3 d将5 µL miR-193b-3p模拟物或阴性对照物(20 nmol/L)注入大鼠侧脑室。将PC12细胞分为对照组、脂多糖组、miR-193b-3p组和脂多糖+miR-193b-3p组，其中miR-193b-3p组和脂多糖+miR-193b-3p组将miR-193b-3p模拟物转染入细胞内，脂多糖组和脂多糖+miR-193b-3p组细胞暴露于100 ng/mL脂多糖中孵育。采用基因芯片检测及双荧光素酶报告分析方法明确miR-193b-3p的靶基因。采用神经行为学评分评估各组大鼠特定时间点的神经功能，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组大鼠海马组织或各组PC12细胞中miR-193b-3p及炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA的表达，采用免疫荧光双标染色检测各组大鼠海马组织中视黄酸受体相关孤儿受体α(RORα)与神经元特异性核蛋白(NeuN)、离子钙接头蛋白-1(IBA-1)或胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的共表达情况，采用免疫荧光染色检测各组PC12细胞中RORα的荧光强度。结果(1)基因芯片检测及双荧光素酶报告分析确定RORα为miR-193b-3p的靶基因。(2)与对照组相比，脂多糖组大鼠的神经行为学评分自脂多糖注射后6 h开始明显降低，24 h时达最低，差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，脂多糖组大鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显升高，miR-193b-3p的表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与阴性对照组[(3.23±0.92)分]相比，miR-193b-3p组大鼠脂多糖注射后48 h的神经行为学评分[(7.51±0.84)分]明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组相比，miR-193b-3p组大鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显降低，miR-193b-3p的表达明显增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)与对照组相比，脂多糖组大鼠海马组织中NeuN(+)RORα(+)细胞数量明显减少，差异有统计学意义(P<0.05)；与阴性对照组相比，miR-193b-3p组大鼠海马组织中NeuN(+)RORα(+)细胞数量明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)。(5)与对照组相比，脂多糖组PC12细胞中RORα的荧光强度明显降低，IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；与脂多糖组相比，脂多糖+miR-193b-3p组PC12细胞中RORα的荧光强度明显增加，IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-193b-3p通过调控其靶基因RORα在海马神经细胞中的表达，抑制新生脓毒症大鼠的神经炎症反应。

简介：摘要目的明确1例智力低下、语言发育迟缓及自闭症患儿的遗传学病因。方法选取2019年6月30日于泉州市妇幼保健院就诊的1例罕见8p部分缺失伴重复患儿为研究对象。采集患儿及其父母的外周血样，进行G显带染色体核型分析以及单核苷酸多态性微阵列(SNP-array)检测。结果患儿核型为46，XX，dup(8p？)，其父母均未见明显异常。SNP-array检测显示患儿染色体8p23.3p23.1区存在6.8 Mb的片段缺失，8p23.1p12区存在21.8 Mb的片段重复，上述拷贝数变异均为新发，并判断为致病变异。结论患儿的临床表型与染色体8p部分缺失重复相关，SNP-array检测对智力低下的患儿的诊断具有一定的价值。

简介：摘要目的探讨p21在脂多糖(LPS)所致小鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)后肺纤维化中的作用。方法本研究为实验研究。SPF级C57BL/6J小鼠共36只，采用完全随机设计将小鼠分为生理盐水对照组、LPS-0 h组、LPS-6 h组、LPS-24 h组、LPS-48 h组和LPS-72 h组，每组6只。HE染色观察纤维化程度，Masson染色评估纤维性增生的分布，免疫组织化学观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原及p21蛋白的表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织中α-SMA、p21蛋白的表达。用10 mg/kg LPS气管滴药作用小鼠24 h后提取肺成纤维细胞，使用Lipofectamine 2000转染试剂转染细胞，敲低p21表达，分为对照组(si-control)、si-control+LPS组(si-control+LPS-24 h)、LPS组(LPS-24 h)和si-p21+LPS组(siRNA-p21+LPS-24 h)。Western blot检测肺成纤维细胞中α-SMA、p21、p-IκBα及p-p38蛋白的表达。结果LPS-24 h组与生理盐水对照组、LPS-0 h组、LPS-6 h组比较，HE染色气道壁纤维组织增生，Masson染色胶原沉积增多，免疫组织化学α-SMA、Ⅰ型胶原及p21蛋白的表达增多，肺组织中α-SMA、p21蛋白的表达增多，差异均有统计学意义(均P<0.05)。随着LPS作用时间的延长，小鼠肺组织免疫组织化学及Western blot中p21蛋白的表达均逐渐增多，但LPS-48 h组、LPS-72 h组p21蛋白的表达较与LPS-24 h组相比，差异均无统计学意义(均P>0.05)。Western blot发现肺成纤维细胞中，si-control+LPS组、LPS组α-SMA、p21、p-IκBα及p-p38蛋白表达均较si-control组增加(α-SMA分别为1.10±0.12、1.11±0.06、0.23±0.02，p21分别为0.65±0.05、0.72±0.03、0.16±0.00，p-IκBα分别为1.19±0.06、1.07±0.17、0.21±0.02，p-p38分别为1.18±0.05、1.20±0.08、0.08±0.01)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。si-p21+LPS组α-SMA、p21、p-IκBα及p-p38蛋白表达均较LPS组、si-control+LPS组降低(α-SMA分别为0.27±0.01、1.11±0.06、1.10±0.12，p21分别为0.23±0.01、0.72±0.03、0.65±0.05，p-IκBα分别为0.05±0.03、1.07±0.17、1.19±0.06，p-p38分别为0.36±0.02、1.20±0.08、1.18±0.05)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论p21在ARDS肺纤维化的早期表达增加。抑制肺成纤维细胞中p21的表达可降低细胞外基质的沉积，抑制p38及IκBα的活化。

简介：摘要目的对6例9p24区微缺失的胎儿进行产前诊断与遗传学分析。方法回顾性分析2018年1月至2020年1月因血清学唐氏综合征筛查高风险/临界高风险就诊于河南省人民医院遗传咨询门诊6例孕妇的遗传学检测资料。采用常规G显带和微阵列比较基因组杂交（array comparative genomic hybridization，aCGH）技术检测胎儿羊水及其父母的外周血，对检出的拷贝数变异致病性采用美国医学遗传学与基因组学学会（American College of Medical Genetics and Genomics，ACMG）评分标准进行分级。对结果进行描述性分析。结果6例胎儿孕中期超声检查均未发现异常。G显带分析结果显示，6例胎儿及其父母染色体核型分析均未见异常。aCGH检测结果显示，6例胎儿在9p24区存在1 019~6 001 kb染色体缺失，涉及DMRT1、SMARCA2和DOCK8等疾病相关基因；其中例3胎儿的缺失遗传自无临床表型父亲，其他胎儿染色体缺失为新发突变。参考ACMG分级指南，例1~2、5~6胎儿检出微缺失为致病性/可能致病性，例3和4胎儿检出微缺失为临床意义未明。经遗传咨询后，例1~2、5~6孕妇及家属选择终止妊娠；例3和4选择继续妊娠，出生后半年随访婴儿发育良好。结论9p24区微缺失胎儿产前缺乏特异性表型，DMRT1和SMARCA2可能为该区域关键基因。

简介：摘要目的探讨事件相关电位(event-related potential，ERP)在脑小血管病(cerebral small vessel disease，CSVD)患者视觉注意损害评估中的作用。方法选择2019年7月至2020年12月于山东第一医科大学附属省立医院确诊的CSVD患者25例作为CSVD组，以同期体检的25例健康者为对照组。使用蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment，MoCA)、广泛性焦虑量表(7-items generalized anxiety disorder，GAD-7)、患者健康问卷-9(patient health questionnaire-9，PHQ-9)对CSVD组和对照组进行神经心理评估；使用Fazekas量表对两组进行磁共振脑白质高信号评分；使用视觉三刺激Oddball实验范式测定两组ERP成分P3的波幅与潜伏期。采用SPSS 23.0软件进行统计分析，重复测量方差分析比较两组波幅、潜伏期的差异；采用Pearson和Spearman相关分析探讨P3波幅、潜伏期与相关量表评分之间的相关性。结果(1)P3波幅组别×刺激交互效应显著[F(2，96)＝3.922，P＝0.023]；组别主效应显著[F(1，46)＝15.976，P<0.01]；刺激主效应显著[F(2，96)＝86.212，P<0.01]；进一步的简单效应分析显示，与正常对照组比较[(9.82±5.14)μV，(11.12±4.72)μV]，CSVD组靶刺激[(6.59±4.22)μV，F(1，48)＝7.363，P＝0.009]以及新异刺激[(7.08±3.91)μV，F(1，48)＝13.907，P＝0.001]诱发的P3波幅均显著降低。(2)P3潜伏期的组别主效应显著[F(1，48)＝4.870，P＝0.032]，P3潜伏期的组别×刺激交互效应显著[F(2，96)＝4.561，P＝0.013]；刺激主效应显著[F(2，96)＝16.299，P<0.01]；进一步简单效应分析，CSVD组新异刺激诱发的P3潜伏期较对照组延长[F(1，48)＝17.124，P<0.01]。(3)靶刺激诱发的P3波幅与MoCA评分呈正相关(r＝0.255，P＝0.027)，新异刺激诱发的P3波幅(r＝-0.502，P<0.01)和P3潜伏期(r＝-0.265，P＝0.022)与Fazekas评分呈负相关。结论CSVD患者处理视觉空间信息的速度和能力受损，尤其是对罕见刺激。ERP检查可能成为辅助诊断CSVD视觉注意损害的一种快速、客观和敏感的方法。

简介：摘要目的观察氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠视网膜组织中miRNA的表达，筛选与p21及视网膜新生血管（RNV）形成相关的miRNA。方法实验研究。40只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机分为正常组和OIR组，每组20只。OIR组构建氧诱导RNV模型，正常组不做任何处理。小鼠17日龄时，处死小鼠，视网膜荧光铺片观察小鼠RNV发生情况；光学显微镜下计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核。取视网膜组织行miRNA芯片分析，检测正常组与OIR组之间差异表达的miRNA。所得差异miRNA靶基因分别进行基于基因注释（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）的富集分析；通过Targetscan、MiRanda、MicroT-CDS数据库比对筛选可能与p21有关的miRNA及通路。组间两两比较采用独立样本t检验。结果与正常组比较，OIR组小鼠视网膜无灌注区面积、RNV及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量增加，差异均有统计学意义（t=18.800、9.025，P<0.05）。与正常组比较，OIR组有统计学差异表达的miRNA 54个，其中，上调、下调者分别为47、7个。从3个数据库与所得差异miRNA的比对结果中共筛选到与p21相关miRNA 13个，按差异倍数从高到低分别为miR-7218-5p、miR-322-5p、miR-224-5p、miR-335-5p、miR-329-3p、miR-362-3p、miR-532-5p、miR-20b-5p、miR-20a-5p、miR-195a-5p、miR-423-5p、miR-497a-5p、miR-129-5p。差异miRNA靶基因富集分析，得到1 112个GO条目及50条KEGG通路，其中50个GO条目和13条KEGG通路与p21相关。结论在OIR模型中共筛选出13个与P21相关的miRNA。

简介：摘要目的探讨染色体16p11.2微缺失相关癫痫的临床及遗传学特点。方法收集首都医科大学附属北京儿童医院2018年1月至2021年1月收治的癫痫患儿中发现16p11.2微缺失者10例的病例资料，回顾性总结分析其临床表现、基因变异情况、随访情况及预后。结果10例患儿中男5例、女5例，癫痫起病年龄为4.5（4.1，5.0）月龄。癫痫发作类型中，7例为局灶性发作伴泛化，2例为全面性发作，1例为强直发作及痉挛发作。9例发作有丛集性，3例发生癫痫持续状态。脑电图发作间期7例为局灶或多灶性癫痫样放电，3例为界线性或无明显异常。头颅磁共振成像1例多小脑回畸形，1例侧脑室旁白质软化，3例脑白质髓鞘化延迟，余5例脑实质无明显异常。随访0.5~3.5年，患儿口服1~3种抗癫痫药物。存在脑发育畸形的1例仍有抽搐，余9例发作控制，末次发作的年龄为8（6，12）月龄。6例癫痫发病前即存在智力、运动发育落后，随访中7例不同程度发育落后，3例发育正常。7例患儿行全外显子组测序，2例行全基因组拷贝数变异检测，1例行全基因组测序；10例患儿的16p11.2缺失长度为525~951 kb不等，均完整包含PRRT2基因；6例为新生变异，1例遗传自母亲，其母幼儿期有抽搐史，3例未验证变异来源，其父母均无相关表型。结论16p11.2微缺失相关癫痫与该区域的PRRT2基因杂合缺失有关，表型较重，常存在发育性癫痫性脑病。对于病因考虑遗传性因素但二代测序结果阴性的患儿，应重视拷贝数变异的检测。

简介：无

简介：摘要目的探讨miR-485-5p对顺铂耐药卵巢癌细胞的影响及其机制。方法RT-qPCR检测人正常卵巢上皮细胞株（IOSE-80）及卵巢癌细胞株（A2780、SKOV3、OVCAR3、OVCA433）中miR-485-5p的表达。构建顺铂（DDP）耐药卵巢癌细胞并检测miR-485-5p与EGFR的表达。CCK8法检测各组细胞增殖能力，流式细胞术测定细胞凋亡。结果相对于IOSE-80细胞，各卵巢癌细胞株中miR-485-5p的表达显著下降，EGFR表达上升（均P<0.05）。SKOV3/DDP细胞株（0.17±0.02）中miR-485-5p表达较SKOV3细胞（0.32±0.04）进一步下降（t=5.81, P=0.004）。而SKOV3/DDP细胞中EGFR表达则较SKVO3进一步上升（P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染miR-485-5p mimic能抑制细胞增殖活力、诱导细胞凋亡，转染miR-485-5p inhibitor则相反（均P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染EGFR能促进细胞增殖并抑制细胞凋亡，该作用被miR-485-5p mimic部分抵消。结论miR-485-5p参与调控卵巢癌细胞的顺铂耐药，过表达miR-485-5p能提高卵巢癌化疗敏感性，该作用可能是通过负调控EGFR实现的。

简介：摘要目的检测微小RNA-128-3p（miR-128-3p）在重症胰腺炎（severe pancreatitis，SAP）患者血浆中的表达情况及临床意义。方法选择2017年6月至2020年12月在上海市宝山区中西医结合医院就诊的SAP患者175例为观察对象，根据患者严重程度分级，将患者分为轻症急性胰腺炎（mild acute pancreatitis，MAP）组78例，中重症急性胰腺炎（moderate to severe acute pancreatitis，MSAP）组50例和SAP组47例。根据患者预后情况，将SAP组分为存活组28例和死亡组19例。qRT-PCR法检测miR-128-3p水平，对患者进行急性生理健康与慢性疾病（APACHEⅡ）评分、Ranson评分，pearson分析血浆miR-128-3p水平与APACHEⅡ、Ranson评分相关性，ROC曲线分析血浆miR-128-3p对SAP患者预后不良的预测价值。结果MAP组、MSAP组、SAP组3组间APACHEⅡ[（3.41±1.56）、（5.63±1.78）、（6.57±1.83）分]、Ranson[（2.58±1.34）、（4.95±1.47）、（6.06±1.92）分]评分及血浆CRP[（39.73±12.31）、（70.25±24.38）、（142.51±40.55）mg/L]、血钙[（1.95±0.31）、（13.26±5.24）、（14.21±6.32）mmol/L]水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）；与MAP组（1.05±0.12）比较，MSAP组（0.83±0.08）与SAP组（0.57±0.05）患者血浆miR-128-3p表达水平显著降低（P<0.05）；与MSAP组（0.83±0.08）比较，SAP组（0.57±0.05）患者血浆miR-128-3p表达水平显著降低（P<0.05）；与存活组[（0.65±0.08）、（5.91±1.64）分、（5.45±1.25）分、（120.43±30.56）mg/L]比较，死亡组SAP患者血浆miR-128-3p（0.43±0.05）表达水平显著降低，APACHEⅡ[（7.43±2.21）分]、Ranson评分[（7.22±1.59）分]及血浆CRP水平[（171.52±42.38）mg/L]显著升高（P<0.05）。相关性分析结果显示，血浆miR-128-3p水平与APACHEⅡ、Ranson评分呈负相关性（r=-0.531，-0.609，P<0.05）；血浆miR-128-3p预测SAP患者预后不良诊断效能优于APACHEⅡ、Ranson评分、CRP。结论SAP患者血浆miR-128-3p水平降低，对SAP的诊断与预后评估具有一定价值。

简介：摘要目的探讨微小核糖核酸-589-5p(miR-589-5p)对喉癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法喉癌细胞系(TU177、TU686和AMC-HN-8)及人正常支气管上皮细胞(16HBE)购自美国典型培养物保藏中心。将miR-NC、miR-589-5p、si-NC和si-FGD4转染至TU686细胞(分别标记为miR-NC组、miR-589-5p组、si-NC组和si-FGD4组)；miR-589-5p与pcDNA、miR-589-5p与pcDNA-FGD4共转染至TU686细胞(分别标记为miR-589-5p+pcDNA组和miR-589-5p+pcDNA-FGD4组)。溴化-3-(4，5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基四氮唑(MTT)检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞凋亡；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-589-5p和FYVE、RhoGEF和PH域包含4(FYVE，RhoGEF And PH domain containing 4，FGD4)基因信使核糖核酸(mRNA)表达水平；蛋白质印迹法检测FGD4、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)、p21、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(bax)蛋白表达。两组间比较行t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK检验。结果miR-589-5p组喉癌细胞凋亡率[(31.77±3.26)%比(18.82±1.27)%、miR-589-5p(0.74±0.06比0.31±0.02)、p21(0.78±0.05比0.37±0.02)和bax(0.68±0.04比0.31±0.03)表达水平显著高于miR-NC组，细胞活性(0.47±0.03比0.79±0.06)、Cyclin D1(0.25±0.02比0.66±0.04)及bcl-2(0.18±0.02比0.59±0.03)表达水平显著低于miR-NC组，差异有统计学意义(t＝18.891、8.276、12.452、21.439、11.766、19.231、10.545，P<0.05)。转染miR-589-5p组喉癌细胞FGD4基因mRNA(0.41±0.03比0.72±0.05)及蛋白表达(0.25±0.02比0.45±0.03)显著低于miR-NC组细胞，差异有统计学意义(t＝21.133、15.509，P<0.05)；转染anti-miR-589-5p组喉癌细胞FGD4基因mRNA(0.81±0.07比0.56±0.05)及蛋白表达(0.51±0.04比0.32±0.03)显著高于anti-miR-NC组细胞，差异有统计学意义(t＝15.024、20.235，P<0.05)。miR-589-5p+pcDNA-FGD4组细胞活性(0.79±0.06比0.62±0.04)、FGD4(0.68±0.04比0.31±0.03)、Cyclin D1(0.66±0.04比0.28±0.03)和bcl-2(0.61±0.04比0.34±0.03)表达水平显著高于miR-589-5p+pcDNA组细胞，细胞凋亡率[(20.17±2.44)%比(33.14±3.02)%]、p21(0.41±0.03比0.67±0.5)和bax(0.38±0.06比0.59±0.04)表达水平显著低于miR-589-5p+pcDNA组细胞，差异有统计学意义(t＝9.465、15.133、12.307、11.731、18.235、15.133、21.347，P<0.05)。结论miR-589-5p通过下调FGD4基因表达调控喉癌细胞的增殖和凋亡。

简介：摘要目的观察视频显示终端干眼(VDT)应用嘌呤受体族中的P2Y2受体的激动剂(地夸磷索钠滴眼液)治疗的效果。方法前瞻性随机对照研究。纳入2020年2月至2020年8月与2021年6月至2021年9月福建省立医院的视频显示终端干眼连续病例60例，年龄(26.05±1.97)岁，随机分为两组：研究组30例予嘌呤受体族中的P2Y2受体的激动剂滴眼，对照组30例未予干预。随访4周进行两组效果对比。结果随访4周，研究组的干眼相关生活质量评分、泪膜破裂时间、角结膜染色评分和泪河高度显著改善，而且优于对照组(均P<0.001)；泪液分泌试验及结膜充血评分无明显改善(t＝-1.757，1.157；P＝0.084，0.252)，与对照组相比差异无统计学意义(t＝1.478，1.856；P＝0.145，0.068)；结膜印迹细胞学与基线相比未见明显改变。随访期间，未观察到严重不良反应。结论视频显示终端年轻干眼患者使用P2Y2受体激动剂治疗安全有效。

简介：摘要目的利用生物信息学技术对骨关节炎(osteoarthritis，OA)差异表达基因进行识别和功能富集分析，并通过临床数据研究P53对基于MRI的OA间隙狭窄程度的影响。材料与方法下载微阵列数据(GSE55235)，利用GEO2R鉴别OA患者与正常滑膜样本间的差异表达基因(differentially expressed genes，DEGs)。利用基因本体论(gene ontology，GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG)对差异表达基因进行基因富集分析，进一步构建蛋白—蛋白互作(protein-protein interaction，PPI)网络分析，识别重要模块，鉴定核心基因。选取50例OA间隙狭窄患者，利用MRI检测其骨关节情况，分析其临床资料，运用Pearson卡方检验、Spearman相关性分析和多因素Logistic回归进行统计学分析。结果对照组与OA组滑膜组织之间存在差异。GSE55235的分析结果识别出91个差异表达基因。DEGs集富集分析全面概述了OA的一些主要病理生理机制：细胞对过氧化氢的反应、P53信号通路。鉴定出了4个关键基因：MMP1、CXCL8、VEGFA和JUN。与正常组对比，MMP1在OA组中高表达，CXCL8、VEGFA和JUN在OA组中低表达。Pearson卡方检验、Spearman相关性分析和多因素Logistic回归结果显示P53与OA间隙狭窄程度显著相关(OR=0.112，95% CI：0.025～0.495，P=0.004)，而性别、年龄、MMP1、VEGFA、CXCL8与OA间隙狭窄程度无显著相关性(P值均大于0.05)。结论基于MRI结果的基础上，判断细胞对过氧化氢的反应、P53信号通路能为OA的诊断和治疗提供新的研究靶点。P53在OA患者中低表达,可能作为其潜在治疗靶点。MRI也有利于OA患者早期的诊断与治疗，降低OA发病率。

简介：摘要目的2016年冬季出现了一种重组型GII.2[P16]诺如病毒（norovirus，NoV），并造成了我国急性胃肠炎大规模暴发，本研究旨在探究2016—2017年该病毒在我国的进化动力学和时空传播模式。方法利用MEGA 7.0和BEAST等软件对先前获得的暴发标本中GII.2[P16] NoV全基因组、主要结构蛋白（viral protein 1，VP1）和RNA依赖RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase，RdRp）基因全编码区序列进行分析。结果序列分析显示此次重组型病毒VP1相比于RdRp基因的进化速度更快，在暴发中期，VP1蛋白的第256位出现了特异性氨基酸突变，即Val256Ile突变，且该突变位点形成的新型变异株在暴发后期成为优势流行株。基于该毒株P二聚体晶体结构的分析，发现该病毒VP1蛋白中第256位残基位点可能参与了B细胞抗原表位的组成，提示Val256Ile突变可能导致了新型变异株的抗原性发生改变，这可能是该病毒在暴发后期优势流行的原因之一，但需要进一步血清学实验的验证。基于贝叶斯地理推演结果显示，广东省可能为我国此次病毒流行的起源地，对该病毒在我国的暴发流行起了重要的作用。结论鉴于出现功能性改变的GII.2[P16]新型变异株和广东省为我国该型病毒的暴发中心，提示有必要在珠江三角洲地区对GII.2[P16] NoV开展持续的监测和研究。

简介：摘要目的探讨针刺治疗对肌筋膜触发点大鼠模型脊髓背角P物质和突触素表达的影响。方法采用随机数字表法将64只健康雄性SD大鼠分为空白对照组(16只)和模型组(48只)。模型组大鼠通过钝性打击+离心跑建立触发点模型，造模成功后再将模型组随机分为模型对照组、按摩治疗组和针刺治疗组。对针刺治疗组进行4周的针刺治疗，按摩治疗组则进行4周的按摩治疗。于治疗前和模型组干预4周后(治疗后)测量4组大鼠的疼痛阈值。第2次(治疗后)疼痛阈值检测完毕后，对4组大鼠进行取材，分别通过免疫印迹法和免疫组化法对大鼠脊髓背角P物质和突触素含量进行测定，并进行统计学分析。结果治疗后，模型对照组有14只(93.33%)依然存在触发点，显著高于按摩治疗组治疗后的8只(50.00%)，针刺治疗组治疗后的7只(43.75%)，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后，模型对照组、按摩治疗组的疼痛阈值显著低于空白对照组治疗后，差异均有统计学意义(P<0.05)，而针刺治疗组治疗后的疼痛阈值与空白对照组治疗后比较，差异则无统计学意义(P>0.05)。治疗后，模型对照组、按摩治疗组和针刺治疗组大鼠的疼痛阈值较组内治疗前均明显改善，差异均有统计学意义(P<0.05)；且按摩治疗组和针刺治疗组的疼痛阈值显著高于模型对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示，模型对照组大鼠脊髓背角P物质表达明显高于空白对照组、按摩治疗组和针刺治疗组，差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫印迹的结果显示，模型对照组P物质/GAPDH比值明显高于空白对照组、按摩治疗组和针刺治疗组，差异均有统计学意义(P<0.05)。按摩治疗组P物质/GAPDH比值高于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论针刺和按摩治疗均可缓解触发点模型大鼠的疼痛，有效地灭活触发点，并降低脊髓背角P物质的含量。

简介：摘要目的探讨miR-122-5p对创伤性脑外伤后小胶质细胞凋亡、极化和炎症反应的影响。方法建立创伤性脑外伤（traumatic brain injury，TBI）小鼠模型和细胞模型。使用TBI小鼠脑匀浆刺激星型胶质细胞产生外泌体，microRNA微阵列分析外泌体中显著改变的microRNA。实时荧光定量PCR检测TBI小鼠模型和TBI细胞模型中miR-122-5p表达。使用TUNEL凋亡染色、免疫荧光共聚焦、蛋白质印迹研究miR-122-5p抑制剂在TBI神经炎症中对小胶质细胞凋亡、小胶质细胞M1/M2表型转化、NLRP3通路及NFκB磷酸化的作用。结果通过microRNA微阵列分析发现有83个下调miRNA（改变2倍以上，P <0.05）,其中miR-122-5p显著下调（P<0.01），miR-122-5p在TBI小鼠及细胞模型中表达显著下降[(1.0±0.00）vs.(0.41±0.15)，P <0.001；[(1.0±0.00）vs.(0.34±0.07)，P<0.001]。TUNEL凋亡检测、免疫荧光染色结果表明抑制miR-122-5p表达，可以显著减轻LPS诱导的小胶质细胞凋亡[(8.03±1.30）vs. (3.17±0.34)，P<0.001]，促进小胶质细胞M1向M2表型转化，即M1表型极化减少[(56.96±13.70）vs. (34.70±3.47)，P =0.002]，M2表型极化增加[(30.46±3.67）vs. (40.74±2.49)，P =0.005]。蛋白质印迹结果表明miR-122-5p抑制剂降低NLRP3炎症小体活化[(0.77±0.10）vs. (0.51±0.11)，P =0.02]，降低NFκB的磷酸化[(0.73±0.08）vs. (0.50±0.07)，P =0.003]。结论miR-122-5p在TBI星形胶质细胞分泌的外泌体及小胶质细胞中表达下调,miR-122-5p抑制剂可以通过抑制TBI后NLRP3炎症小体通路的活化及NFκB的磷酸化，促进小胶质细胞M1向M2表型转化，减少小胶质细胞凋亡，从而减轻TBI后小胶质细胞炎症损伤。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLR通过靶基因微小RNA(miR)-93-5p调控胃癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞株(HS-746T、BGC823、SGC7901、MGC803)和正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)中HAGLR的表达水平。选择HAGLR表达最低的细胞株分别转染阴性对照质粒(阴性对照组)和HAGLR高表达质粒(HAGLR组)。分别采用MTS法和划痕愈合实验检测转染后细胞的增殖情况和迁移能力。生物信息学软件miRcode数据库预测HAGLR的靶基因，双荧光素酶报告基因实验验证HAGLR与靶基因的结合。qRT-PCR检测HAGLR靶基因的表达。Western blot检测Hippo信号通路的表达。采用SPSS 21.0软件进行统计分析，组间比较应用t检验，多组间比较应用单因素方差分析。结果与GES-1细胞相比，胃癌细胞株HAGLR的表达水平均降低(均P<0.05)，HAGLR表达最低的细胞株是SGC7901细胞(P<0.01)。HAGLR组和阴性对照组SGC7901细胞中HAGLR表达分别为1.03±0.13和9.75±1.10，阴性对照组HAGLR的表达水平明显低于HAGLR组(t＝7.87，P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞的吸光度值明显降低(P<0.05)，划痕愈合率明显减少(P<0.01)。miRcode数据库显示HAGLR与miR-93-5p存在互补结合位点。双荧光素酶报告基因实验显示HAGLR可互补结合miR-93-5p(P<0.01)。与阴性对照组比较，HAGLR组SGC7901细胞中miR-93-5p表达明显降低(P<0.01)，Hippo信号通路蛋白表达明显降低(均P<0.01)。结论HAGLR在胃癌细胞株中呈低表达，HAGLR通过靶向负调控miR-93-5p抑制胃癌SGC7901细胞的增殖和迁移能力。

简介：无

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-628-3p调控的DNA解螺旋酶对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法首先收集2013年1月至2017年12月郑州大学第二附属医院骨科收治的股骨骨肉瘤患者60例，同期收集股骨创伤性骨折患者60例作为对照组，采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测和比较外周血循环miR-628-3p的表达水平差异，并根据随访结果进行生存分析。以人骨肉瘤细胞U2OS和HOS为研究对象，过表达miR-628-3p，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验检测其增殖活性，采用流式细胞术检测其凋亡率。根据Starbase预测miR-628-3p可与Bloom综合征解螺旋酶(BLM)结合，故进一步采用蛋白质印迹法(Western blot)、qPCR和荧光素酶报告基因实验进行检测。两组间计量资料比较采用独立样本t检验，计数资料比较采用χ2检验。结果骨肉瘤患者外周血和肿瘤组织中miR-628-3p的表达水平(相对表达量分别为0.203±0.047、0.217±0.054)均明显低于正常对照组(相对表达量分别为0.951±0.106、1.013±0.072，P<0.01)，差异有统计学意义，受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-628-3p在骨肉瘤患者中的表达，曲线下面积(AUC)＝0.707(P<0.01)，K-M生存分析显示miR-628-3p低表达患者生存时间明显短于高表达患者。CCK-8和集落形成实验检测显示miR-628-3p过表达后可抑制骨肉瘤细胞U2OS和NOS的增殖；流式细胞术检测显示miR-628-3p过表达后可促进骨肉瘤细胞的凋亡；qPCR和Western blot检测显示miR-628-3p过表达后，BLM的表达水平明显低于miR-628-3p nc组(P<0.01)，差异有统计学意义。荧光素酶报告基因实验显示miR-628-3p mimc与BLM-mt共转染骨肉瘤细胞U2OS和NOS后，其荧光值明显低于其他转染组(U2OS：0.208±0.017比1.082±0.046，t＝4.698，P<0.01；HOS：0.224±0.047比0.966±0.053，t＝5.548，P<0.01)，差异有统计学意义。裸鼠成瘤证实miR-628-3p过表达后肿瘤大小和重量明显低于miR-628-3p nc组[(1.419±0.274) g比(2.825±0.148) g，t＝3.717，P<0.01]，差异有统计学意义。结论miR-628-3p在骨肉瘤患者中存在低表达现象，与患者的不良预后和生存时间相关，miR-628-3p过表达可下调DNA解螺旋酶BLM，抑制骨肉瘤细胞的增殖。

简介：摘要将60只雄性SD大鼠分为对照组、急性坏死性胰腺炎(ANP)组、p38MAPK信号通路特异性抑制剂SB203580干预组。结果显示，干预组大鼠胰腺病理损伤较ANP组显著减轻，p38MAPKmRNA及蛋白表达显著下调，TNF-α表达也显著下调。表明p38MAPK在ANP中发挥重要作用，抑制其表达可有效改善ANP的严重程度。