简介：目的构建稳定过表达X连锁凋亡抑制蛋白相关因子1（X-linkedinhibitorofapoptosisassociatedfactor1,XAF1）基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。方法分别将携带XAF1基因感染复数（multiplicityofinfection,MOI）为50的慢病毒稀释液。MOI为100的慢病毒原液和MOI为100的慢病毒原液加入终浓度为5μg/mL的聚凝胺（polybrene）转染人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。通过倒置荧光显微镜观察细胞内荧光数量及强度评判转染效率,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,qRT-PCR）和蛋白免疫印记法（westernblot）检测XAF1基因mRNA和蛋白的表达。结果慢病毒稀释液转染,约60%的细胞可观察到微弱荧光;慢病毒原液转染,约70%的细胞观察到较弱荧光;慢病毒原液加入5μg/mLpolybrene的转染效率较高,约90%的细胞观察到较强荧光。嘌呤霉素筛选上述转染效率最高的慢病毒原液加5μg/mLpolybrene组细胞,其成功将携带XAF1基因的慢病毒转入鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。qRT-PCR和westernblot进一步证实细胞株稳定过表达XAF1基因。结论慢病毒加polybrene转染可成功构建稳定过表达XAF1基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。

简介：目的观察知信行模式干预在改善肺癌患者术后疼痛及睡眠质量中的作用。方法将100例行肺癌手术的患者随机分为观察组和对照组,每组50例。对照组实施常规护理,观察组在常规护理的基础上采用知信行模式干预,比较两组患者术后疼痛、镇静及匹茨堡睡眠质量指数量表（pittsburghsleepqualityindex,PSQI）评分。结果与对照组比较,观察组患者的镇静评分明显增加,疼痛评分和镇痛药量明显降低（P〈0.05）。与术前1d比较,两组患者术后3d的睡眠质量评分、睡眠时间评分和PSQI总评分明显降低（P〈0.05）。观察组患者术后3d的睡眠质量评分、睡眠时间评分、入睡时间评分和PSQI总评分较术后1d降低,且均低于对照组患者术后3d的相应项目评分（P〈0.05）。观察组患者术后3d的日间功能障碍评分低于对照组（P〈0.05）。结论知信行模式干预可有效降低肺癌患者术后疼痛,改善术后镇静和睡眠。

简介：目的探讨结直肠癌组织中突触核蛋白（Synuclein）的表达模式，并分析其与临床病理特征的关系。方法半定量RT-PCR检测20例结直肠癌及其癌旁组织中α-synuclein、β—synuclein和γ-synuclein基因的mRNA水平，免疫组化SP法检测51例结直肠癌及其癌旁组织中α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein蛋白的表达。结果结直肠癌组织中α—synucle—in、β—synuclein和γ-synucleinmRNA的的相对表达量分别为0．62±0．32、0．61±0．32和0．72±0．37，显著高于癌旁组织的0．41±0．27、0．40±0．25和0．45±0．25（P=0．034，P=0．026，P=0．007）。γ-synuclein蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为47．1％，显著高于癌旁组织的23．5％（P=0．022），而α—synuclein、β—synuclein蛋白在结直肠癌和癌旁组织中的表达差异无统计学意义。在α-synuclein、β—synuclein和γ-synuclein表达模式的8种组合中，任一种蛋白表达、α-synuclein或γ-synuclein、β—synucleln或γ-synuclein、α-synuclein和γ-synuclein在结直肠癌组织中的表达率明显高于癌旁组织（P〈0．05）。α-synuclein、β—synuclein蛋白的表达与临床病理特征无关，γ-synuclein蛋白的表达与分期和淋巴结转移有关（P=0．047，P=0．048）。淋巴结转移及分期较晚者任一蛋白的阳性表达率明显高于无淋巴结转移及分期较早者（P=0．030，P=0．040）。结论Synuclein在结直肠癌组织中的表达较癌旁组织有增高的趋势，其中γ-synuclein对于评估结直肠癌病程的发展和转归具有潜在价值。

简介：目的:观察大分割放疗用于局部晚期非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)的治疗效果,探讨放疗前后血清EGFR、TGF-α含量的变化及临床意义.方法:回顾性选取本院放疗科2011年7月至2016年7月收治的局部晚期非小细胞肺癌患者70例,分为常规分割放疗组(处方剂量为PTV60Gy/30f,单次剂量为2Gy)和大分割放疗组(处方剂量为PTV50Gy/10f,单次剂量为5Gy),疗程结束后观察两组疗效,通过放射免疫分析和酶联法测定治疗前后患者血清中表皮生长因子受体(EGFR)和转化生长因子-α(TGF-α)的含量.结果:大分割放疗组胸部病灶治疗的有效率和稳定率分别为75.00%和85.00%,明显高于常规分割放疗组的68.00%和80.00%(P<0.05),大分割放疗组和常规分割放疗组治疗前血清EGFR、TGF-α含量分别为(24.31±4.06)μg/L、(26.30±2.16)μg/L和(24.42±4.04)μg/L、(25.96±2.24)μg/L,两组比较无统计学差异(P>0.05);治疗后两组血清EGFR、TGF-α含量分别为(12.11±3.58)μg/L、(14.13±1.72)μg/L和(14.31±3.64)μg/L、(18.25±1.65)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05).结论:大分割放疗在不增加不良反应的情况下较常规分割放疗有更高的局控率,可能与其降低血清EGFR、TGF-α水平有关.因此,大分割放疗有望成为局部晚期非小细胞肺癌患者放疗剂量分割方式的新选择。

简介：目的探讨知信行模式对肺癌患者术后负性情绪及生活质量的影响。方法将80例肺癌患者按照随机数字表法分为观察组及对照组,每组40例。观察组给予知信行模式干预,对照组给予常规模式干预,比较两组患者负性情绪及生活质量情况。结果术前、术后2周两组患者焦虑、抑郁发生情况比较,差异均无统计学意义（P﹥0.05）,术后4周观察组患者焦虑、抑郁发生情况均少于对照组,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。观察组术后4周SF-36评分为（59.8±7.6）分,明显高于术前的（48.9±7.2）分,差异有统计学意义（t=32.827,P﹤0.01）。对照组术后4周SF-36评分为（51.2±6.7）分,明显高于术前的（47.8±7.9）分,差异有统计学意义（t=35.312,P﹤0.01）。两组患者治疗前SF-36评分比较,差异无统计学意义（t=0.651,P﹥0.05）;而治疗后观察组SF-36评分明显高于对照组,差异有统计学意义（t=5.368,P﹤0.01）。结论知信行模式可以减少肺癌患者术后焦虑、抑郁的发生,提高患者生活质量,值得临床推广。

简介：目的：构建含MDR1基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,并检测其在朊蛋白高表达胃癌细胞系中的活性表达。方法：PCR克隆人MDR1基因启动子片段,通过亚克隆将启动子分别插入到pMD18-T载体和荧光素酶报告基因pGL3-Enhancer载体中,建立含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL-MDR1,并经测序及酶切确定扩增序列;脂质体基因转染法将pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系SGC7901-PrP,并测定其荧光素酶活性。结果：PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系的荧光素酶活性,较转染入pcDNA3.1空载体细胞系相比升高3-5倍。结论：成功构建含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒;上调朊蛋白表达可激活MDR1的转录活性。

简介：目的：构建双特异性细胞因子融合基因表达载体及在肝细胞癌细胞中瞬时表达。方法：应用PCR方法对各目的基因进行扩增并经测序载体pGEM-T-Easy测序后，以逆转录病毒载体pLXSN中的多克隆位点将二者融合为融合基因TK-TNF-α，并将其亚克隆至pEGFP-N3的EcoRl和BamHl位点间，成功地构建表达载体pEGFP-TK-TNF-α仅，并在该载体转染人肝细胞癌细胞HCC9204后观察融合蛋白表达情况。结果：酶切鉴定证实TK-TNF-α融合基因片段已克隆到pEGFP-N3的EcoRl和BamHl位点问，并在转染人肝细胞癌细胞7901中观察到TK-TNF-α融合基因绿色荧光蛋白的表达。结论：pEGFP-TK-TNF-α表达载体便于观察转染细胞中融合蛋白的表达情况及蛋白定位，为双特异细胞因子基因疗法提供有利条件。

简介：目的评价促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）和铁剂以及静脉多次应用氨甲环酸（tranexamicacid,TXA）在全髋关节置换术（totalhiparthroplasty,THA）中的临床效果,能否进一步降低围术期失血量和异体输血率。方法回顾性分析于2014年5月至2017年1月,在我中心行初次单侧THA的患者1998例,根据相关血液管理策略分为A组、B组和C组,静脉单次应用TXA的患者分为A组,在此基础上应用EPO和铁剂的患者分为B组,在此基础上静脉多次TXA的患者分为C组,比较三组患者的围术期失血量、异体输血率、血红蛋白和血细胞比容下降水平。结果围术期失血量A组（1102.0±503.7）ml,B组（937.0±441.9）ml,C组（774.5±380.6）ml;异体输血率A组7.3%,B组4.1%、C组1.6%;术后第1天血红蛋白A组（23.8±12.4）g/L,B组（18.3±10.8）g/L,C组（16.1±10.3）g/L;术后第1天血细胞比容A组（0.068±0.038）,B组（0.056±0.036）,C组（0.048±0.036）;术后第3天血红蛋白A组（12.1±16.3）g/L,B组（10.1±8.3）g/L,C组（7.5±9.2）g/L;术后第3天血细胞比容A组（0.033±0.027）,B组（0.030±0.025）,C组（0.026±0.019）,差异有统计学意义（P=0.002）。C组的围术期失血量、异体输血率、血红蛋白和血细胞比容下降水平均少于A和B组,三组的异体输血率依次为7.3%,4.1%和1.6%,差异有统计学意义（P〈0.001）。结论应用EPO和铁剂联合可显著减少THA围术期失血量和异体失血率,联合静脉多次应用TXA效果更优。

简介：目的分析行胸中上段食管癌三野淋巴清扫术患者局部复发的模式,为术后放疗设野提供依据。方法收集福建省泉州市第一医院2005~2010年行胸中上段食管癌三野淋巴结根治术后未接受放疗局部复发的158例患者的临床资料,分析其复发模式。结果术后局部复发类型以淋巴结转移最多见,占90.50%;淋巴结转移中以颈部及中、上纵隔淋巴结转移多见。原腹部淋巴结转移状态与腹部淋巴结复发部位有关（χ2=10.853,P=0.001）。结论颈部、上、中纵隔区是胸中、上段食管癌三野淋巴结清扫术后局部复发的主要部位。术后放疗靶区须包括颈部、上中纵隔区,并酌情考虑腹腔淋巴结转移状态。

简介：目的构建细胞外基质蛋白1基因（ECM1）的真核表达载体ECM1-pEGFP-N2，检测其在人乳腺癌细胞系MCF-7中表达。方法采用PCR方法，以ECMleDNA为模板，扩增出ECM1基因，用Bg1Ⅱ和KpnⅠ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体，连接酶切目的片段，转化大肠杆菌DH5，筛选阳性克隆酶切、测序鉴定；利用脂质体介导的转染技术转染MCF-7细胞，荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP，免疫组化检测ECM1蛋白表达。结果利用PCR克隆出约1．6kb的ECM1基因；PCR鉴定、酶切鉴定及测序结果证实成功构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体；转染MCF-7细胞后，可在细胞内观察到报告基因产生的绿色荧光，用免疫组化方法可检测到ECM1蛋白。结论成功构建了ECM1-pEGFP-N2真核表达载体，并在MCF-7细胞中表达，为进一步研究ECM1的功能奠定了基础。

简介：目的：构建miR-15a-5p和miR-16-5p的荧光素酶报告载体,利用此载体分析并验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因3＇-UTR区域的确切结合位点,探讨miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的相互作用关系。方法：通过Pubmed和miRBase数据库分别寻找到CCND1基因3＇-UTR区域碱基序列和miR-15a-5p、miR-16-5p的碱基序列。找出理论结合位点后,构建荧光素酶报告载体,并用荧光素酶报告基因方法验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因之间的作用关系。结果：通过基因测序表明,本实验成功构建了CCND1a/Ma和CCND1b/Mb荧光素酶报告基因表达载体。将上述载体应用于荧光素酶报告基因实验,结果发现CCND1b组的荧光素酶表达强度显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的3＇-UTR区域存在结合位点,其具体结合位置在CCND1b区。这在理论上意味着miR-15a-5p和miR-16-5p可以抑制CCND1基因的表达。

简介：目的探讨基于“精准宣教”的个性化快速康复外科配合家庭“O2O”宣教模式在老年结直肠癌患者围手术期的应用。方法选择2017年3月-2018年3月的老年结直肠癌手术患者58例,并将患者随机分为对照组和观察组,对照组采用常规宣教,观察组采用个性化快速康复外科配合家庭“O2O”宣教。比较两组患者一般自我效能、相关知识缺失率、各项术后恢复指标、负性情绪、满意度情况、并发症发生率。结果观察组在一般自我效能优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在8项知识缺失率比较中,观察组除“手术形式知识”外,其余各项均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各项术后恢复指标(首次肛门排气以及排便时间、胃管拔除时间、尿管拔除时间、引流管拔除时间、首次进食时间、伤口拆线时间、首次下地时间、术后住院时间),除拆线时间外,其余各项均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在出院前1d比较HAMD、HAMA、满意度,观察组均优于对照组,差异有统计学意义;在并发症发生率上,观察组同样优于对照组(P<0.05)。结论基于“精准宣教”的个性化快速康复外科配合家庭“O2O”宣教模式,能提高患者的一般自我效能,弥补相关知识的缺失,使病人能够对疾病有正确认识、有效控制疾病,并提高生活质量;且在加快康复速度的同时,也能降低并发症的发生率,促进卫生资源的有效利用,值得继续研究。

简介：目的腹腔镜辅助手术和多重管理方案（即加速康复程序,EnhancedRecoveryProgram,ERP）极大地改变了结直肠癌患者的围手术期管理,并改善了临床治疗结局。然而,腹腔镜手术尚未成为世界范围内结直肠癌手术治疗的标准,大量有着良好开腹手术技术的外科医生仍采用传统手术方式治疗。究竟传统开腹手术辅助ERP能否与腹腔镜辅助的微创治疗匹敌？这一问题还存在争议。EnROL（EnhancedRecoveryOpenversusLaparoscopic）多中心随机对照试验旨在解答上述问题。资料和方法该研究为Ⅲ期多中心随机对照临床试验,纳入可择期手术的成年结直肠癌患者（年龄≥18岁）,按1∶1随机分配至腹腔镜组或开腹组,两组均应用快速康复多重管理程序（ERP）进行围手术期管理。通过纳入中心、肿瘤部位（结肠或直肠）、年龄组（〈66/66~75/〉75岁）再进行分层分析。研究的主要结局指标为术后1个月的机体疲劳感（使用多维疲劳量表MFI-20评价）,次要结局指标包括：住院时间、术后并发症、患者其他不适情况及身体机能（简表SF-36）。术后7天或更早出院之前,受试患者和结局评估人员都不知晓治疗情况。手术质量及病理评估由中心负责人员进行盲评。该研究在英国临床伦理委员会南部牛津中心B注册,注册号为No.07/H0605/150。结果研究从2008年7月开始,至2012年4月结束,共在英国的12个中心纳入204例病人（其中腹腔镜组103人,开放结合ERP组101人）。腹腔组的切除范围[（6.8±3.7）vs.（18.4±7.5）cm]以及术中出血量[（115±152）vs.（257±290）ml]较开腹组减少,但手术时间[（182±69）vs.（135±54）min]相对延长,总体手术相关损伤评分[（31.2±6.0）vs.（31.8±6.0）]没有明显差别。两组病人术后1个月的机体疲劳感评分无显著差异[MFI-20（12.28,95%CI：11.3~13.1）vs.（12.05,95%CI：11.2~13.1）;P=0.93]。然而,腹腔镜组的中位

简介：目的探讨加速康复外科模式下初次单次全髋关节置换术（totalhiparthroplasty,THA）术中优化鸡尾酒疗法（罗哌卡因配伍氨甲环酸切口周围局部注射）的安全性和有效性。方法前瞻性纳入行加速康复外科模式下初次单次THA患者80例,根据术中鸡尾酒疗法方案,以数字表法随机分为试验组（40例,缝皮前切口周围局部浸润注射罗哌卡因200mg＋氨甲环酸80ml混合溶液100ml）和对照组（40例,缝皮前切口周围局部浸润注射罗哌卡因200mg＋生理盐水80ml混合溶液100ml）。主要指标为最大血红蛋白下降值、总失血量、输血率、视觉模拟疼痛评分（visualanaloguescale,VAS）;次要指标为补救镇痛率、术后并发症发生率、术后住院日及术后2周血栓发生事件。结果最大血红蛋白下降值：试验组（24.3±9.9）g/L,对照组（24.1±10.9）g/L,差异无统计学意义（P〉0.05）。总失血量：试验组（737.4±399.0）ml,对照组（730.1±401.3）ml,差异无统计学意义（P〉0.05）。术侧髋关节活动时VAS疼痛评分：术前、术后当天、术后第1、2天,试验组分别为（4.5±0.7）分、（1.7±0.5）分、（1.6±0.6）分、（1.2±0.4）分;对照组分别为（4.5±0.7）分、（1.5±0.5）分、（1.6±0.6）分、（1.1±0.4）分,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后补救镇痛率：试验组为12.5%,对照组为7.5%,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后并发症发生率：试验组为10.0%,对照组为17.5%,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后住院日：试验组为（2.5±0.6）天,对照组为（2.4±0.7）天,差异无统计学意义（P〉0.05）。两组均无1例输血,术后2周彩超检查无1例下肢深静脉血栓发生。结论加速康复外科模式下初次单侧THA术后失血少、疼痛轻、康复快,术中优化鸡尾酒疗法虽然是安全的,但其有效性尚需进一步研究证实。