简介：摘要以培养创新型人才为目标，大连医科大学制定实施了"5+3"创新人才培养改革方案，以导师制培养为载体，在医学本科教育全过程中，制定分阶段创新能力培养体系，涵盖课程、讲座、实验设计、论文等基本科研能力训练，强化本科生科研能力培养。通过对首届"5+3"学生阶段性培养成果的统计学分析发现，"5+3"学生发表中文期刊、SCI，主持国家级创新项目、省级创新项目的比例均显著高于普通5年制学生，差异具有统计学意义（P<0.05）。虽然实施过程中存在一些问题和不足，但以导师制为核心的科研基础训练对提高学生科研思维和创新能力效果显著，对培养医学创新型人才具有可实施性。

简介：摘要目的研究姜黄素通过激活miR-192-5p/PI3K/Akt信号通路抑制肾母细胞瘤增殖并诱导细胞凋亡。方法采用CCK-8法探讨姜黄素对肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞增殖的影响，并探究其合适的作用浓度；V-FITC/PI检测SK-NEP-1细胞的凋亡率；荧光素酶报告试验验证miR-192-5p和PI3K的结合活性；RT-PCR检测miR-192-5p mRNA的表达水平；Western blot检测PI3K和Akt的蛋白质表达水平。结果姜黄素能够显著抑制SK-NEP-1细胞的增殖，并诱导细胞凋亡，且呈剂量依赖性。RT-PCR检测结果表明姜黄素能够显著提高miR-192-5p的表达。此外，miR-192-5p显著抑制细胞的增殖并诱导其凋亡，且能够增强姜黄素对SK-NEP-1细胞的作用。荧光素酶报告试验结果表明miR-192-5p能够靶向结合PI3K，Western blot结果表明姜黄素可通过介导miR-192-5p的表达抑制PI3K和Akt的蛋白质表达水平。结论姜黄素能够抑制肾母细胞瘤细胞的增殖并诱导其凋亡，其作用机制是通过介导miR-192-5p的表达并进一步抑制下游PI3K/Akt信号通路来实现的。

简介：摘要目的总结首次手术年龄大于5个月的脏器异位综合征合并功能性单心室和完全性肺静脉异位引流患儿的外科治疗效果。方法2008年9月至2018年12月，在我中心接受第1次手术的脏器异位综合征合并功能性单心室和完全性肺静脉异位引流患儿共34例，其中手术年龄大于5个月共29例，手术中位年龄440天(159～3718天)，体质量4.9～19.2 kg，完全性肺静脉异位引流为心上型29例；合并完全性房室间隔缺损22例，三尖瓣闭锁1例，二尖瓣闭锁1例；中度以上房室瓣反流6例，肺静脉狭窄5例。结果住院死亡4例(13.9%，4/29)，死亡原因均为肺动脉高压和低心排血量综合征，生存25例患儿平均随访(61.8 ± 35.1)个月(11～130个月)，3例患儿分别死于低心排血量综合征、蛋白丢失性胃肠病和肺静脉梗阻。1年生存率和5年生存率为79.3%和75.7%。13例完成二期改良Fontan手术，完成率44.8%(13/29)。术前合并肺静脉狭窄的患儿病死率为60%(3/5)，多因素分析提示肺静脉狭窄是死亡危险因素。结论脏器异位综合征合并功能性单心室和完全性肺静脉异位引流的延迟外科治疗可以取得较好的结果，Fontan术完成率也比较高，但合并肺静脉狭窄时手术治疗仍具有较高病死率，肺静脉狭窄是手术治疗的危险因素。早期干预可能取得更好的结果，早期诊断，早期治疗仍然是外科治疗的首要原则。

简介：摘要目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及CCR5Δ32基因多态性与A（H1N1）pdm09的相关性。方法全面检索PubMed、Cochrane Library、OVID、EBSCO、Web of Science于2019年2月7日及以前发表的相关文献，收集TNF-α及CCR5Δ32基因多态性与A（H1N1）pdm09相关的观察性研究，并按照NOS量表进行严格地质量评价，采用Revman 5.0和Stata 11.0软件进行Meta分析。结果经筛选，共8篇符合排除纳入标准的研究被纳入本次Meta分析，结果显示，TNF-α的基因多态性与A（H1N1）pdm09的发病风险可能具有相关性。rs361525位点携带A等位基因的患者A（H1N1）pdm09是G等位基因的2.25倍（A vs. G：OR=2.25，95%CI：1.09~4.65，P=0.03）；rs361525位点AA基因型的携带者感染A（H1N1）pdm09的可能性分别为GG基因型、AG+GG基因型携带者的4.34倍（95%CI：1.65~11.41，P=0.003）、4.38倍（95%CI：1.67~11.48，P=0.003）。rs361525位点的AA+AG基因型可能是人群感染A（H1N1）pdm09的危险因素（rs1800750：AA+AG vs. GG：OR=2.42，95%CI：1.24~4.71，P=0.01）。亚组分析的结果提示，rs361525位点的A等位基因、AA+AG基因型是高加索人种感染A（H1N1）pdm09的危险因素，AA基因型是墨西哥人种感染A（H1N1）pdm09的危险因素（P<0.05）。CCR5的基因多态性与A（H1N1）pdm09的严重程度均无统计学意义（P>0.05）。结论TNF-α基因的rs361525位点具有等位基因A或者AA基因型，或rs1800750位点具有基因型AA+AG的人群可能更易感染A（H1N1）pdm09。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA CDKN2BAS(lncRNA CDKN2BAS)是否通过靶向微小RNA(miRNA，miR)-98-5p影响骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成骨细胞hFOB1.19(购自上海通派生物科技有限公司)与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1(购自美国典型菌种保藏中心)中CDKN2BAS、miR-98-5p的表达水平；按照随机数字表法随机分组为si-con组、si-CDKN2BAS组、miR-con组、miR-98-5p组、si-CDKN2BAS＋anti-miR-con组、si-CDKN2BAS ＋anti-miR-98-5p组，噻唑蓝(MTT)法检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞增殖活力的影响；流式细胞术检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞凋亡能力的影响；Transwell小室实验检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞迁移及侵袭能力的影响；双荧光素酶报告实验检测CDKN2BAS是否靶向miR-98-5p；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、Cleaved Caspase-9、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)的表达量。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果hFOB1.19细胞与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1中CDKN2BAS的表达水平分别为1.05±0.28、4.26±0.42、3.65±0.56、4.02±0.46、3.75±0.41，miR-98-5p的表达水平分别为0.98±0.06、0.41±0.05、0.64±0.07、0.57±0.06、0.47±0.05，与hFOB1.19细胞比，骨肉瘤细胞株中CDKN2BAS表达明显上调(F＝80.889，P<0.05)，miR-98-5p表达明显下调(F＝130.868，P<0.05)，差异均有统计学意义；沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞存活率分别为(68.57±8.63)%、(64.68±7.24)%，迁移细胞数分别为(98.43±11.51)、(93.46±12.54)个，侵袭细胞数分别为(47.93±6.84)、(38.64±6.69)个，沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞增殖活力明显降低(F＝37.873、60.131，P<0.05)，细胞迁移及侵袭能力明显减弱(F＝159.281、189.097，167.638、302.502，P<0.05)，Ki-67、MMP-2、MMP-9、p-p38 MAPK蛋白表达水平明显降低(F＝101.455、161.465、196.590、149.229、157.759、55.555，P<0.05)，而细胞凋亡率明显升高(F＝260.694、270.939，P<0.05)，p21、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平明显升高(F＝88.672、448.342、202.034、118.338、121.661、290.273，P<0.05)，差异均有统计学意义；双荧光素酶报告实验证实CDKN2BAS靶向抑制miR-98-5p的表达；与si-CDKN2BAS＋anti-miR-con组比较，si-CDKN2BAS＋anti-miR-98-5p组细胞增殖、迁移、侵袭能力明显增强(t＝4.546、10.682、5.648，P<0.05)，细胞凋亡能力明显减弱(t＝6.996，P<0.05)，差异均有统计学意义。结论lncRNA CDKN2BAS通过靶向负调控miR-98-5p的表达影响骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力。

简介：摘要1例糖尿病伴蛋白尿的23岁男性患者就诊于肾脏内科，结合实验室检查、影像学检查及基因检测结果，诊断为青少年的成人起病型糖尿病（MODY）5型。该患者出现重度右肾萎缩及双肾囊肿引起肾功能损伤，血清镁离子浓度低于正常值，基因检测提示患者肝细胞核因子1β（HNF-1B）基因发生无义突变，c.1132C>T，p.Gln378Ter，父母为野生型，故该突变属于新发突变。通过相关文献研究低镁血症可能较糖尿病更早发生，结合本病例临床特征提示伴肾脏结构畸形、低镁血症的MODY患者应警惕HNF-1B的变异。

简介：AbstractBackground:Pancreatic cancer (PC) is a highly deadly malignancy with few effective therapies. We aimed to unmask the role that long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 6 (SNHG6) plays in PC cells by targeting far upstream element binding protein 1 (FUBP1) via microRNA-26a-5p (miR-26a-5p).Methods:SNHG6 expression was predicted by bioinformatics, followed by verification via reverse transcription quantitative polymerase chain reaction. Then, the interactions among SNHG6, miR-26a-5p, and FUBP1 were detected through online software analysis, dual luciferase reporter assay and RNA pull-down. After that, cells were treated with different small interfering RNAs and/or mimic to determine the interactions among SNHG6, miR-26a-5p, and FUBP1 and their roles in PC cells. Finally, the role of SNHG6 in tumor growth in vivo was evaluated by measuring the growth and weight of transplanted tumors in nude mice. A t-test, one-way and two-way analysis of variance were used for data analysis.Results:Compared with that in normal tissues, SNHG6 was highly expressed in PC tissues (1.00 ± 0.05 vs. 1.56 ± 0.06, t= 16.03, P < 0.001). Compared with that in human pancreatic duct epithelial cells (HPDE6-C7), SNHG6 showed the highest expression in PANC-1 cells (1.00 ± 0.06 vs. 3.87 ± 0.13, t= 34.72, P < 0.001) and the lowest expression in human pancreatic cancer cells (MIAPaCa-2) (1.00 ± 0.06 vs. 1.41 ± 0.07, t= 7.70, P= 0.0015). Compared with the levels in the si-negative control group, SNHG6 (0.97 ± 0.05 vs. 0.21 ± 0.06, t = 16.85, P < 0.001), N-cadherin (0.74 ± 0.05 vs. 0.41 ± 0.04, t= 8.93, P < 0.001), Vimentin (0.55 ± 0.04 vs. 0.25 ± 0.03, t= 10.39, P < 0.001), and β-catenin (0.62 ± 0.05 vs . 0.32 ± 0.03, t= 8.91, P < 0.001) were decreased, while E-cadherin (0.65 ± 0.06 vs. 1.36 ± 0.07, t= 13.34, P < 0.001) was increased after SNHG6 knockdown or miR-26a-5p overexpression, accompanied by inhibited cell proliferation, migration, and invasion. SNHG6 overexpression exerted the opposite effects. SNHG6 upregulated FUBP1 expression by sponging miR-26a-5p. Silencing SNHG6 blocked the growth of PC in vivo.Conclusion:Silencing SNHG6 might ameliorate PC through inhibition of FUBP1 by sponging miR-26a-5p, thus providing further supporting evidence for its use in PC treatment.

简介：无

简介：摘要目的探讨miR-133a-5p靶向细胞间黏附分子1(ICAM1)对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞A549损伤的影响。方法双荧光素酶报告基因分析法验证miR-133a-5p对ICAM1的靶向作用。体外用LPS诱导A549细胞，分为对照组、LPS组、LPS＋阴性对照(miR-NC)组、LPS＋miR-133a-5p组、LPS＋小干扰RNA(si)-NC组、LPS＋si-ICAM1组。采用实时荧光定量PCR检测miR-133a-5p和ICAM1 mRNA的表达水平；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot检测ICAM1、Bcl-2、Bax和活化半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)蛋白的表达；酶联免疫吸附检测白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果与对照组比较，LPS组A549细胞miR-133a-5p的表达水平(0.39±0.04比1.00±0.09)显著降低，ICAM1的表达水平(0.86±0.08比0.39±0.03)显著升高，细胞凋亡率[(27.65±2.47)%比(8.13±0.89)%]显著升高，IL-6[(624.59±51.42) ng/L比(194.25±18.43) ng/L]和TNF-α[(548.35±51.42) ng/L比(174.26±19.43) ng/L]的分泌显著增加，差异均有统计学意义(均P<0.05)。与LPS＋miR-NC组比较，LPS＋miR-133a-5p组A549细胞凋亡率[(13.46±1.38)%比(28.71±2.54)%]显著降低，IL-6[(296.43±23.51) ng/L比(635.86±55.41) ng/L]和TNF-α[(321.14±30.56) ng/L比(563.24±49.52) ng/L]的分泌显著减少，差异均有统计学意义(均P<0.05)；与LPS＋si-NC组比较，LPS＋si-ICAM1组A549细胞凋亡率[(13.65±1.64)%比(23.51±2.33)%]显著降低，IL-6[(324.15±29.41) ng/L比(625.39±52.59) ng/L]和TNF-α[(334.65±20.46) ng/L比(534.97±51.42) ng/L]的分泌显著减少，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-133a-5p能减轻LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤，其机制可能与下调ICAM1表达有关。

简介：摘要目的探讨微小RNA（miR）-216a-5p在妊娠期糖尿病（GDM）患者胎盘中的表达及其对滋养层HTR-8/SVneo细胞侵袭、迁移的影响及可能机制。方法收集2018年10月至2019年10月烟台市烟台山医院的28例GDM孕妇（GDM组）和28例正常孕妇（对照组）胎盘组织，将体外培养HTR-8/SVneo细胞分为空白组（正常培养）、模拟物（mimics）-NC组（转染mimics-NC）和miR-216a-5p mimics组（转染miR-216a-5p mimics），采用实时荧光定量PCR检测胎盘组织和各组HTR-8/SVneo细胞中miR-216a-5p表达水平，Transwell实验检测各组HTR-8/SVneo细胞侵袭和迁移，免疫印迹法（Western blot）检测各组HTR-8/SVneo细胞中E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、锌指E盒结合蛋白-1（ZEB1）和N-钙黏附分子（N-cadherin）蛋白表达，双荧光素酶报告基因实验检测miR-216a-5p和ZEB1的靶向关系。结果与对照组比较，miR-216a-5p在GDM组胎盘组织中表达明显升高（2.86±0.35 vs 0.96±0.07, P<0.05）；与mimics-NC组比较，miR-216a-5p mimics组细胞中miR-216a-5p和E-cadherin蛋白表达水平明显升高[（1.01±0.08）vs（22.48±3.26），（0.25±0.03）vs（0.68±0.05）]，而细胞侵袭、迁移能力和细胞中Vimentin、N-cadherin、ZEB1蛋白表达水平明显降低[（106.83±9.35）vs（59.16±5.28），（205.48±18.25）vs（87.32±6.50），（0.65±0.05）vs（0.35±0.02），（0.55±0.04）vs（0.32±0.03），（0.50±0.03）vs（0.36±0.02）]（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-216a-5p可与ZEB1靶向结合。结论miR-216a-5p在GDM患者胎盘组织中表达上调，可能通过靶向调控ZEB1表达抑制滋养层HTR-8/SVneo细胞转移。

简介：摘要目的评价上海市60岁及以上老年人群接种23价肺炎球菌多糖疫苗（PPV23）对预防社区获得性肺炎（CAP）的保护效果。方法根据前瞻性队列研究，于2013年10月采用分层随机抽样的方法，在上海市选取1 214和2 387名60岁及以上老人作为接种组和对照组。采用统一设计的调查问卷，对接种组和对照组研究对象进行基本信息调查。于2013年10月至2018年12月期间对研究对象进行入户或电话随访，共随访20次，随访内容主要为观察期内是否罹患CAP。采用多因素logistic回归模型分析方法计算接种组与对照组CAP发病情况的RR及95%CI值，进行两组比较。结果接种组中男性556名（45.8%），对照组中男性1 012名（42.4%）。接种组的CAP发病密度低于对照组（0.848/百人年比1.452/百人年），RR（95%CI）值为0.584（0.428~0.790），疫苗保护率为41.6%，差异有统计学意义（P<0.001）；对年龄进行调整后，RR（95%CI）值为0.699（0.507~0.956），差异仍有统计学意义（P=0.025）。分层分析结果显示，PPV23在60~69、70~79和≥80岁组中的疫苗保护率分别为36.7%、21.6%和26.0%，但仅在60~69岁组中有统计学意义［RR（95%CI）=0.633（0.399~0.990），P=0.045］。结论在上海市60岁及以上老年人群中接种PPV23可一定程度降低CAP发病率，应进一步在低年龄段老年人群中推荐使用。

简介：摘要目的探讨CK5/6、DSG3、P40、TTF-1、CK7、NapsinA在非小细胞肺癌(NSCLC)活检小标本中鳞状细胞癌(SCC)与腺癌(AC)的表达及其鉴别意义。方法采用免疫组化SP法检测2016年1月至2017年12月在滕州市中心人民医院住院治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)120例活检小标本中CK5/6、DSG3、P40、TTF-1、CK7、NapsinA表达，并结合NSCLC的临床特征进行分析。结果CK5/6、DSG3和P40在肺鳞状细胞癌(SCC)组织中的表达率分别为100.0%(56/56)、89.3%(50/56)和96.4%(54/56)，特异度分别为90.6%、100.0%和100.0%；NapsinA、TTF-1、CK7在肺腺癌(AC)组织中的表达率分别为81.3%(52/64)、90.6%(58/64)和93.8%(60/64)，特异度分别为100.0%、92.9%和96.4%。CK5/6、DSG3和P40在SCC组织中的表达与在AC组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)，NapsinA、TTF-1、CK7在AC组织中的表达较SCC组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论CK5/6、DSG3、P40、TTF-1、CK7、NapsinA在非小细胞肺癌活检小标本SCC与AC的鉴别诊断中具有重要意义。

简介：摘要目的探讨黄连碱对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)细胞损伤的影响及其机制。方法用0.3 mmol/L的MPP+处理SK-N-SH细胞作为PD细胞模型，记为MPP+组，以正常培养的细胞作为空白对照组。用浓度分别为10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L的黄连碱预处理4h后再用0.3 mmol/L的MPP+处理作为不同浓度黄连碱处理组。将miR-con、miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后再用0.3 mmol/L的MPP+处理记为MPP++miR-con组、MPP++miR-146a-5p组；将anti-miR-con、anti-miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后用20 μmol/L的黄连碱预处理4h及0.3 mmol/L的MPP+处理记为MPP++Cop+anti-miR-con组、MPP++Cop+anti-miR-146a-5p组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率；Western blotting实验检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)蛋白表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-146a-5p表达水平。结果与空白对照组比较，MPP+处理后SK-N-SH细胞存活率显著降低，活化caspase-3表达水平显著升高，细胞凋亡率显著升高，CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。黄连碱处理及miR-146a-5p过表达后MPP+诱导的SK-N-SH细胞中细胞存活率显著升高，活化caspase-3表达水平显著降低，细胞凋亡率显著降低，CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。低表达miR-146a-5p逆转了黄连碱对SK-N-SH细胞增殖促进和凋亡抑制的作用。黄连碱处理后MPP+诱导的SK-N-SH细胞中p-AKT、p-PI3K表达水平显著升高，低表达miR-146a-5p逆转了黄连碱对p-AKT、p-PI3K表达水平的促进作用。结论黄连碱可促进细胞存活，抑制MPP+诱导的细胞凋亡，其机制可能与miR-146a-5p及PI3K/AKT信号通路有关。

简介：【摘要】目的：探讨各类瘢痕手术治疗的适应症及治疗方法。方法：自 2018年至 2019年对 72例瘢痕患者，根据瘢痕的不同类型采用不同的手术方式治疗。结果：每例患者均得到了良好的恢复，效果满意。结论：手术是治疗严重瘢痕的一种重要手段，由于瘢痕的部位及种类不同，治疗方法也不尽相同，所以要根据不同部位及类型选择不同的手术方式，才能获得良好的效果。

简介：【摘 要】众所周知， OTC药品属于常见的药品类型，被人们称为“非处方药”。患者不需要医生开药方就可以自行在药店购买，这在一定程度上增加了药品购买的便利性，很大概率上患者在得知患病后都会先去购买符合自身症状的 OTC药品，以期望达到治愈疾病的目的。与此同时，药品生产商家以及药店方面会更为重视 OTC药品的销售情况，如何制定有效的 OTC药品营销策略通常是经营者所思考的问题。基于此，本文主要从 OTC药品消费特性进行探究，并总结了一些常见的非处方药销售对策，希望能够给有关商家提供参考。

简介：摘要：21世纪以来，我国经济发展，科技进步，化工制药企业在我国社会发展中具有重要作用，人类的生产生活与化工制药企业息息相关。经济的发展，给化工制药企业带来机遇的同时，也带来挑战，我国化工制药企业有着独特的制药技术。唯有不断优化制药技术的工作效率，才能够在市场激流中得以生存，促进我国化工制药企业的健康可持续发展。在竞争日益激烈的大环境下，我国制药企业必须对所存在的问题进行探究，以提出科学的解决措施，促进我国经济的发展。

简介：摘要目的探讨骨形成蛋白2(BMP2)信号通路在颅内动脉瘤中的表达情况及其介导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的作用机制。方法将健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组(n＝32)和假手术组(n＝32)。模型组通过结扎左侧颈外动脉、翼颚动脉及右侧颈总动脉制备颅内动脉瘤模型，假手术组不结扎血管。两组于术后3个月处死，采用电镜和HE染色法判断成模情况；采用免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法分别检测BMP2及下游磷酸化Smad1/5(p-Smad1/5)在两组大鼠前交通动脉复合体VSMCs中的表达情况。进一步离体培养大鼠脑动脉的VSMCs，分为对照组、BMP2组(加入BMP2 100 ng/ml)以及Smad6＋BMP2过表达组(转染Smad6过表达载体＋BMP2 100 ng/ml)。采用TUNEL法检测各组细胞的凋亡情况，进一步采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞中BMP2、Caspase3及p-Smad1/5的表达情况。结果电镜和HE染色结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠前交通动脉复合体的血管壁均发生不同程度的瘤样病变，且VSMCs发生明显的重构和凋亡，说明建模成功。免疫组织化学染色结果显示，模型组大鼠前交通动脉复合体中的Caspase3(0.25±0.03)和BMP2(0.12±0.03)相对表达量均较假手术组(均为0.06±0.01)增加(均P<0.05)。蛋白免疫印迹法结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠BMP2(分别为：0.75±0.07、0.50±0.04)和p-Smad1/5(分别为：0.73±0.07、0.27±0.04)的相对表达量均明显增高(均P<0.05)。TUNEL法检测离体VSMCs，结果显示BMP2组[(74.63±6.05)%]和Smad6＋BMP2组[(45.92±1.08)%]的细胞凋亡率均较对照组增加[(4.35±0.65)%，均P<0.01]；但Smad6＋BMP2组的细胞凋亡率较BMP2组低(P<0.01)。蛋白免疫印迹法结果显示，BMP2组和Smad6＋BMP2组的p-Smad1/5、Caspase3的相对表达量均较对照组增加(均P<0.01)；但Smad6＋BMP2组的p-Smad1/5、Caspase3相对表达量均较BMP2组低(均P<0.05)。结论BMP/Smad信号通路在颅内动脉瘤中被激活，且可能通过BMP2上调p-Smad1/5进而促进VSMCs凋亡。

简介：摘要目的探讨癌易感性候选基因19（CASC19）调控微小RNA-449b-5p（miR-449b-5p）的表达后对子宫颈癌细胞增殖、凋亡和辐射敏感性的影响。方法（1）培养子宫颈癌细胞系HeLa细胞，予不同剂量（分别为0、2、4、6、8 Gy）的X线照射，实时荧光定量PCR技术检测HeLa细胞中CASC19 mRNA和miR-449b-5p的表达水平。（2）不同条件处理后HeLa细胞增殖、凋亡、辐射敏感性及其相关蛋白表达的检测，其中，不同处理条件包括沉默CASC19表达、过度表达miR-449b-5p、下调miR-449b-5p并沉默CASC19表达，相关蛋白包括细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase-3）和组蛋白变异体H2AX（γ-H2AX）；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，细胞克隆形成实验检测细胞的辐射敏感性（以存活分数表示）。（3）采用双荧光素酶报告基因实验（结果以荧光素酶活性表示）和实时荧光定量PCR技术验证CASC19和miR-449b-5p之间的靶向调控关系。结果（1）随着X线照射剂量（0、2、4、6、8 Gy）的增加，HeLa细胞中CASC19 mRNA的表达水平逐渐升高（F=502.681，P=0.000），miR-449b-5p的表达水平逐渐降低（F=202.936，P=0.000）。（2）沉默CASC19表达、过度表达miR-449b-5p后，HeLa细胞的存活率显著降低（P<0.05），凋亡率显著升高（P<0.05），存活分数显著降低（P<0.05），cyclin D1蛋白的表达水平显著降低（P<0.05），cleaved-caspase-3和γ-H2AX蛋白的表达水平显著升高（P<0.05）；下调miR-449b-5p并沉默CASC19表达后，HeLa细胞的存活率显著升高（P<0.05），凋亡率显著降低（P<0.05），存活分数显著升高（P<0.05），cyclin D1、γ-H2AX蛋白的表达水平显著升高（P<0.05），cleaved-caspase-3的表达水平显著降低（P<0.05）。（3）与对照比较，过度表达miR-449b-5p可显著降低CASC19基因野生型HeLa细胞的荧光素酶活性（分别为1.00±0.09、0.37±0.05，P<0.01），而对CASC19基因突变型HeLa细胞的荧光素酶活性无显著影响（分别为0.92±0.07、0.94±0.05，P>0.05）。与对照比较，沉默CASC19表达后HeLa细胞中miR-449b-5p的表达水平显著升高（分别为1.00±0.12、4.84±0.49，P<0.05），过度表达CASC19后HeLa细胞中miR-449b-5p的表达水平显著降低（分别为1.00±0.09、0.38±0.04，P<0.05）。结论HeLa细胞中CASC19可负调控miR-449b-5p的表达，下调miR-449b-5p表达可部分逆转沉默CASC19对HeLa细胞增殖、凋亡及辐射敏感性的影响。

简介：摘要目的探讨lncRNA-C21orF96调控miRNA-875-5p和USF2基因表达促进胃癌细胞的侵袭和转移机制。方法采用RT-PCR技术检测胃癌细胞中与lncRNA-C21orF96相关的miRNA的含量；胃癌细胞KATO-Ⅲ经pcDNA3.1质粒过表达lncRNA-C21orF96，SGC-7901细胞经siRNA干扰lncRNA-C21orF96表达后，采用RT-PCR技术检测胃癌细胞中miR-875-5p和USF2基因表达量的变化；胃癌细胞MKN45过表达lncRNA-C21orF96后，采用Transwell实验观察细胞侵袭和迁移能力的变化。结果在胃癌细胞中，lncRNA-C21orF96与miR-875-5p值呈显著的相反关系，两者之间相对定量值差异具有统计学意义(SGC-7901细胞：21.19 ±1.09比3.28 ±0.06，P<0.01；SNU-16细胞：24.76±2.09比8.16 ±0.07，P<0.01)；转染lncRNA-C21orF96表达载体的KATO-Ⅲ细胞中miR-875-5p表达显著下降而USF2基因表达升高(P<0.01)；转染lncRNA-C21orF96干扰载体的SGC-7901细胞中miR-875-5p表达显著升高而USF2基因表达降低(P<0.05); lncRNA-C21orF96过表达后，实验组穿过人工基底膜的平均细胞数与对照组相比差异具有统计学意义[迁移实验：(216.19 ± 2.30)个比(89.19 ± 4.60)个，P<0.001；侵袭实验：(146.18 ±5.3)个比(59.18 ± 2.60)个，P<0.001]。结论LncRNA-C21orF96的过表达能显著调控miR-875-5p表达同时促进USF2基因表达，促进胃癌细胞的侵袭和转移。

简介：摘要目的探讨miRNA-499a-5p靶向CD38对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养H9c2心肌细胞，采用H2O2诱导心肌细胞损伤模型。实验分为对照组、H2O2组、H2O2＋阴性对照(NC)组和H2O2＋miRNA-499a-5p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测心肌细胞中miRNA-499a-5p和CD38的表达，噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞存活率，试剂盒检测活性氧簇(ROS)水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性，Annexin V-FITC/PI双染法检测心肌细胞凋亡率，Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达量。双荧光素酶报告基因试验检测miRNA-499a-5p和CD38的靶向关系。结果H2O2组心肌细胞中miRNA-499a-5p、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt的表达水平及心肌细胞存活率与对照组相比均明显降低(P<0.05)，而CD38和Bax的表达水平、ROS水平、LDH活性及细胞凋亡率均明显升高(P<0.05)。H2O2＋miRNA-499a-5p组心肌细胞中miRNA-499a-5p、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt的表达水平及心肌细胞存活率与H2O2组相比均明显升高(P<0.05)，而CD38和Bax的表达水平、ROS水平、LDH活性及细胞凋亡率均明显降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因试验证实了CD38是miRNA-499a-5p的靶基因。结论miRNA-499a-5p能够通过抑制CD38的表达减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤，该作用机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。