简介:【摘要】:目的 探讨Sartorius生物反应器清洁存放有效期的验证对降低产品交叉污染的概率和保证产品质量的重要性。方法 按照在线清洗程序对Sartorius生物反应器进行清洗,吹干后按相应的要求将反应器在密闭条件下进行存放7天后,确认各项检测指标在可接受的范围内,连续进行清洁有效期验证三次。结果 三次验证,Sartorius生物反应器按照在线清洗(CIP)程序进行在线清洗后贮存期7天内设备各项检测均达到可接受标准。结论 Sartorius生物反应器设备根据在线清洗(CIP)程序实施清洁验证,放置7天内,可有效防止对下一次生产产品的安全性和质量带来不利影响的污染,对保证产品质量具有重要意义。
简介:背景:前期实验自行研发了一种可进行成骨及成软骨双向诱导分化的双腔搅拌式生物反应器。目的:探索双腔搅拌式生物反应器的力学刺激能否提高组织工程骨软骨修复山羊膝关节缺损的效果。方法:取青山羊12只,制作双侧后肢股骨内髁骨软骨缺损,随机分组,实验组与对照组缺损处均植入在双腔搅拌式生物反应器中进行成软骨、成骨诱导2周的自体骨髓间充质干细胞与β-磷酸三钙复合体,不同的是实验组将双腔搅拌式生物反应器置于磁力搅拌仪上给予力学刺激,对照组未给予力学刺激;空白对照组不做处置。植入后12,24周进行大体观察,Masson染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和组织学评分。结果与结论:实验组与对照组均有新生软骨与骨组织生成,实验组修复骨缺损效果明显优于对照组(P〈0.05);空白对照组无新生软骨生成。表明通过双腔搅拌式生物反应器体外培养阶段的力学刺激,可以改善以山羊骨髓间充质干细胞为种子细胞、β-磷酸三钙为支架的组织工程骨软骨复合物对膝关节缺损的修复效果。
简介:摘要目的对篮式生物反应器在BSL-3实验室进行高致病性病毒培养的风险点加以评估,通过对病毒接种、培养、收获3个阶段环境中病毒浓度的监测判断其在BSL-3实验室病毒培养的安全性。方法用灭菌的拭子在病毒的接种、培养、收获3个阶段对篮式生物反应器的罐体及连接处进行涂抹采样,同时在安全柜中,用AirPort MD8空气采样器对病毒的接种和收获操作过成进行空气采样,并且对在3个阶段操作后,实验人员的个人防护装备进行涂抹采样,3种方式进行监测。结果在病毒接种、培养、收获3个阶段,篮式生物反应器的罐体及连接处采样病毒检测结果均为阴性,在病毒接种和收获操作过程中的空气采样病毒检测结果均为阴性,实验人员个人防护装备采样的病毒检测结果均为阴性。结论在BSL-3实验室采用篮式生物反应器进行病毒培养的方法是安全可靠的,通过检测结果显示其在整个操作过程中,未有病毒的泄露,进而确保了实验人员和实验室内环境的生物安全。
简介:目的研究体外利用灌注式生物反应器构建大段组织工程化骨的可行性。方法把在体外培养扩增的第三代人骨髓基质干细胞与大段多孔β-磷酸三钙(β-TCP)支架复合。将细胞/支架复合体放入灌注式生物反应器中,进行连续灌注培养。28d后,检测细胞的增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性,同时对培养后的细胞/支架复合体进行组织学检测及形态学计量,用以评价体外组织工程化骨的构建。以静态培养作为对照组。结果培养28d后,灌注培养组的细胞活性明显高于静态培养组。灌注培养组细胞的ALP活性显著高于静态培养组。静态培养组细胞仅在多孔β-TCP支架周缘增殖,形成的新骨量较少。灌注培养组细胞在整个β—TCP支架内增殖,形成的新骨量较多。结论利用灌注式生物反应器的灌注培养,可以使人骨髓基质干细胞在大段β-TCP载体内增殖并形成新骨,使体外大段组织工程化骨的构建成为可能。
简介:摘要细菌生物膜是指细菌粘附于接触表面,分泌多糖基质、纤维蛋白、脂质蛋白等,将其自身包绕其中而形成的大量细菌聚集膜样物。多糖基质通常是指多糖蛋白复合物,也包括由周边沉淀的有机物和无机物等。细菌生物膜是细菌为适应自然环境有利于生存的一种生命现象,由微生物及其分泌物积聚而形成。是细菌粘附表面生活时所采取的一种生长方式,一般由多菌种构成。临床上许多顽固性、难治性感染均与细菌生物膜形成有关。生物膜的成分80%为细胞外多聚物(多聚糖、蛋白质、核酸),20%为各种细菌。其具有特定的三维结构,便于营养物质的交换及废物的排出,便于群体感应分子的互相交流,从而使生物膜内细菌对抗生素敏感性降低1 000倍。所以细菌生物膜对伤口生长愈合具有重大的负面影响作用,造成伤口延迟愈合,引起伤口中持续的超炎症反应;降低上皮角化细胞迁移;经证明,动物体内和体外生物膜可诱导宿主体内的炎症反应并且可上调大量基质金属蛋白酶(MMP)相关基因表达。细胞生物膜可以分为浮游期、不可逆附着期、细胞增殖期、生长成熟期及扩散期。由于细菌生物膜在伤口表面广泛存在,如何防止与清除生物膜就成为一个迫切的问题。目前主要治疗方法有创面清创、应用抗生素、应用对生物膜有效的局部抗菌剂如银离子敷料和超氧化液、提高宿主免疫力等。
简介:摘要目的探索生物膜清洗剂与2种多酶清洗剂在内镜生物膜清除效果上的差异。方法建立铜绿假单胞菌内镜生物膜模型,对照组采用灭菌水浸泡,实验组分别采用1号多酶清洗剂、2号多酶清洗剂及生物膜清洗剂进行浸泡。在室温下分别作用5、10、15 min后,以细菌活菌计数法及扫描电镜法评价不同清洗剂对内镜生物膜模型的清洗效果。各组间活菌计数比较采用方差分析。结果作用5、10、15 min后,测定的生物膜菌落计数(CFU/cm2)空白对照组为7.92±0.21,1号多酶清洗剂组分别为5.31±0.10、5.04±0.08、4.90±0.16,2号多酶清洗剂组分别为5.53±0.30、5.39±0.21、5.03±0.42,生物膜清洗剂组分别为3.53±0.30、3.01±0.07、2.82±0.26。在相同作用时间下,两种多酶清洗剂组的菌落计数比较差异无统计学意义(P>0.05),生物膜清洗剂组菌落计数少于两种多酶清洗剂组(P<0.05)。且随着浸泡时间增加,生物膜清洗剂组菌落计数逐渐减少(P<0.05)。作用15 min后,扫描电镜下见生物膜清洗剂组清洗后的生物膜及细菌残留最少。结论两种多酶清洗剂的清洗效果相当,生物膜清洗剂较多酶清洗剂对内镜生物膜的清除效果更好,可明显提高内镜清洗质量。
简介:摘要目的观察维生素C的不同使用方法对正在使用醋酸纤维膜进行维持性血液透析患者出现透析膜生物相容性差的改善情况。方法对长期正规血液透析、年龄(65.4±8.5)岁患者,于出现透析膜生物不相容性后进行血液透析300次,分A、B组和对照组。A组于基础冲管后用0.9%生理盐水500ml+维生素C4.0闭路循环20分钟。B组在A组基础上于透析上机前30分钟口服维生素C0.2g,对照组采用基础冲管。观察下次透析前患者常规体检测及主观感觉,每2周化验一次血常规、每4周化验一次血脂、肝功能、血清离子水平。结果应用维生素C预冲及口服患者对透析的耐受性明显增强,与治疗前比较患者红细胞和血红蛋白及血浆白蛋白升高(P<0.05)。血清离子水平更趋于平稳。结论维生素C可作为维持性血液透析患者纠正透析膜生物不相容性的有效辅助治疗之一。
简介:摘要慢性骨髓炎作为常见的骨科感染性疾病,可导致内固定失败、死骨和窦道形成、长期排脓、甚至最终恶变等严重后果,影响患者的预后和生活质量,造成巨大的医疗和经济负担。骨髓炎的治疗手段由过去的清创术转为现在的清创+Masquelet骨重建术或截骨+Ilizarov骨搬运术,治疗效果显著提升,但缺点是手术次数多、疗程长、手术创伤和风险增加,暨需要新的治疗策略。慢性骨髓炎根治困难的原因包括自体免疫水平紊乱(炎症因子、氧化应激)、局部血供差、耐药细菌出现和细菌生物膜形成等因素,其中细菌生物膜作为细菌在体内的定植存在形式对慢性骨髓炎的影响显著,包括屏障抗生素、抵抗免疫清除、提高细菌耐受性、播散细菌和促进细菌间信号沟通,针对其中的关键因子和通路为靶点进行研究和干预是骨髓炎研究和治疗的热点和趋势。现对研究生物膜与慢性骨髓炎的关系的文献进行综述,便于了解生物膜对慢性骨髓炎的影响机制和相关靶点,为慢性骨髓炎的防治和药物开发提供理论基础。