简介：摘要目的探讨肾移植术后抗人类白细胞抗原特异性抗体(HLADSA)诱导人单核细胞向巨噬细胞分化的机制。方法构建人内皮细胞(HAEC)与单核细胞(Mon)体外共培养模型。分为未活化(UT)组、完整HLADSA(Ab)活化组、Ides酶切HLADSA活化组(Fab)组，并添加中和抗体/融合蛋白阻断，流式细胞技术分析HLADSA活化后的HAEC对Mon分化及胞内信号转导的影响。采用方差分析检验。结果Ab活化组Mon胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2T202/Y204磷酸化水平高于UT组(2.163±0.311，F＝23.070，MD＝-1.163，P<0.01)，Fab组ERK仅部分磷酸化(1.211±0.072，F＝23.070，MD＝-0.211，P<0.05)，且低于Ab组(MD＝0.952，P<0.05)。U0126可完全阻断Ab和Fab活化组Mon胞内ERK磷酸化(1.045±0.087，F＝22.240，MD＝0.449，P<0.001；0.992±0.032，F＝9.474，MD＝0.122，P<0.01)。rPSGL-1-Ig及ICAM-1抗体预处理HAEC均可部分阻断Ab诱导的ERK磷酸化(1.375±0.168，F＝11.020，MD＝0.410，P<0.01；1.509±0.188，F＝11.020，MD＝0.277，P<0.01)。单用P-选择素糖蛋白配体1(PSGL-1)抗体、CD18抗体预处理Mon后均可完全抑制Fab活化诱导的ERK磷酸化(1.025±0.035，F＝21.050，MD＝0.242，P<0.01；0.982±0.031，F＝21.050，MD＝0.285，P<0.01)，而单用CD11a抗体仅能部分抑制(1.117±0.027，F＝21.050，MD＝0.150，P<0.05)，CD11b抗体则无法抑制(1.205±0.033，F＝21.050，MD＝0.062，P>0.05)。CD64抗体预处理Mon可部分抑制Ab诱导的ERK磷酸化(1.438±0.045，F＝26.250，MD＝0.415，P<0.05)，但当联合使用CD64及CD32抗体时可完全抑制(1.239±0.049，F＝26.250，MD＝0.614，P<0.01)。结论Ab活化后的HAEC主要通过激活Mon胞内ERK信号诱导后者分化。

简介：摘要：细节描写在许多经典片段的写作中发挥着重要的作用，因此在写作经典片段时需要重视细节描写，成功的细节描写一般能迅速吸引眼球，是提高写作水平和质量的重要手段。从写作的角度来看，细节描写主要有外貌、动作、语言、心理、环境等方面的描写。尤其在经典片段的写作过程中使用细节描写能有效将人物、背景、情节、主题等内容凸显出来，提高写作的趣味性。相反，经典片段的写作中缺乏细节描写的内容，这篇文章就不可能成为一篇优秀的文章。细节描写运用在经典片段的写作中，可以增添文章的真实性和生动性，确保人物形象更加饱满，景色更具有吸引力，并且细节描写较为细致也能增强画面感，使创作者和读者都能身临其境，令人流连忘返，沉浸在文章描写的氛围内。所以，对作者而言，细节描写的出神入化，是当前考量作文水平的最重要的标志，同时也是考验创作者写作能力的重要法宝。

简介：

简介：摘要目的探讨环状RNA锌指蛋白652(circZNF652)/微小RNA(miR)-1278/叉头盒P1蛋白(FOXP1)轴对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞活性、增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测circZNF652、miR-1278以及FOXP1 mRNA表达；细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞活性；EdU实验检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞凋亡；Transwell实验检测细胞侵袭；蛋白质印迹法(Western blot)实验检测FOXP1蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验和RNA免疫共沉淀(RIP)实验验证circZNF652与miR-1278之间的靶向关系，以及miR-1278与FOXP1之间的靶向关系。以t检验或单因素方差分析进行统计分析。结果ESCC细胞系KYSE-510和TE-10中circZNF652、FOXP1 mRNA和蛋白表达高于正常食管上皮细胞HEEC(3.37±0.24比1.97±0.06、4.38±0.29比2.88±0.12、2.95±0.25比1.48±0.12)，差异有统计学意义(F＝209.4、267.3、75.5，P<0.05)，而KYSE-510和TE-10中miR-1278表达低于HEEC(0.47±0.06比0.71±0.03)，差异有统计学意义(F＝152.5，P<0.05)。circZNF652小干扰RNA(si-circZNF652)组的细胞活性、增殖和侵袭能力低于阴性对照小干扰RNA(si-NC)组，差异有统计学意义(0.44±0.04比0.71±0.03、0.50±0.04比1.05±0.05、0.46±0.05比1.01±0.07)，差异有统计学意义(F＝1.5、1.3、2.1，P<0.05)；而si-circZNF652组的细胞凋亡率高于si-NC组[(30.2±0.28)%比(5.20±1.27)%]，差异有统计学意义(F＝2.3，P<0.05)。miR-1278拮抗剂(抗miR-1278)组的细胞活性、增殖和侵袭能力高于阴性对照拮抗剂(抗NC)组(1.02±0.03比0.71±0.03、1.38±0.04比1.04±0.05、1.51±0.06比0.99±0.04)，差异有统计学意义(F＝484.1、306.1、190.6，P<0.05)，而si-circZNF652+抗miR-1278组的细胞活性、增殖和侵袭能力高于si-circZNF652+抗NC组(0.57±0.02比0.35±0.02、0.89±0.04比0.49±0.02、0.88±0.04比0.52±0.06)，差异有统计学意义(F＝484.1、306.1、190.6，P<0.05)。miR-1278 mimic+FOXP1过表达(OE-FOXP1)组的细胞活性、增殖和侵袭能力高于miR-1278 mimic+FOXP1过表达阴性对照(OE-NC)组(0.52±0.07比0.23±0.04、0.92±0.03比0.46±0.05、0.91±0.05比0.53±0.04)，差异有统计学意义(F＝35.9、242.7、237.5，P<0.05)，但miR-1278 mimic+OE-FOXP1组的细胞凋亡率低于miR-1278 mimic+OE-NC组(17.35±1.77比33.95±4.88)，差异有统计学意义(F＝66.1，P<0.05)。结论circZNF652通过抑制miR-1278提高FOXP1的表达，进而促进ESCC细胞增殖和侵袭能力，并降低细胞凋亡率。

简介：摘要目的探讨人肿瘤抑制因子Folliculin(FLCN)对白癜风发病相关免疫因子介导的黑素细胞(MC)趋化因子表达的调控。方法收集2019年1—4月杭州市第三人民医院皮肤科接受自体黑素细胞移植白癜风患者MC，Western印迹法分析正常MC、白癜风患者MC、免疫因子诱导MC中FLCN蛋白表达差异；通过短发卡RNA(shRNA)构建FLCN shRNA慢病毒并转染正常黑素细胞(FLCN shRNA MC)干扰沉默FLCN基因的表达，ELISA方法检测免疫因子对FLCN shRNA MC中趋化因子的影响。结果Westem印迹结果显示，白癜风患者MC中FLCN高表达；免疫因子可刺激正常MC中FLCN表达显著升高(t＝1.27；P<0.001)，也可诱导趋化因子CXCL10和CCL20显著升高(t分别为104.53、60.21；均P<0.001)；FLCN shRNA MC的FLCN表达显著降低(F＝1.95；P<0.001)，且显著抑制免疫因子诱导的CXCL10和CCL20高表达(F＝93.68、74.10；均P<0.001)。结论免疫因子刺激MC中CXCL10、CCL20高表达，与白癜风发病密切相关，FLCN是参与免疫因子诱导MC趋化因子表达的关键蛋白。

简介：摘要蛋白质组学研究的对象是生命活动的直接执行者——蛋白质，蛋白质在人体的发育生长和疾病发生发展过程中起着至关重要的作用，是目前临床应用最广泛的标志物类型，也是最直接的药物作用靶标。近年来，以色谱和质谱技术为核心的蛋白组学技术的进步，推动了蛋白质组学研究在深度和广度上的快速发展，其在肝细胞癌临床队列样本研究中的应用，开启了“蛋白质组学驱动的精准医学”新时代。现对近年来蛋白质组学研究凸现的新技术、新方向和在肝癌研究中的新发现做一综述，为临床医生了解蛋白质组学，并利用蛋白质组学助力疾病的诊断和个性化治疗药物研发提供新的思路和参考。

简介：摘要目的探讨丝切蛋白（cofilin, CFL）在神经母细胞瘤中的表达变化与意义。方法收集2017年1月至2019年1月在新疆维吾尔自治区人民医院及新疆维吾尔自治区儿童医院进行手术治疗的神经母细胞瘤患儿的肿瘤组织和癌旁组织各10例，将最终符合实验标准的12例组织分为两组，其中6例肿瘤组织作为肿瘤组织组，6例癌旁组织作为癌旁组织组，通过实时定量聚合酶链反应（quanti-ficational real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）和蛋白质印迹法检测两组CFL、Bax、Bcl-2、MCL-1的表达水平。将CFL siRNA转染至SK-N-SH细胞内，采用CCK-8法检测细胞生长情况，采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的差异变化。结果CFL mRNA和蛋白在肿瘤组织组中的表达水平较癌旁组织组显著升高，分别为（2.53±1.01）比（1.12±0.47）、（0.74±0.19）比（0.48± 0.15 ），差异均具有统计学意义（P<0.05）；Bax mRNA和蛋白在肿瘤组织组中的表达水平较癌旁组织组显著降低，分别为（0.81±0.22）比（1.37±0.26）、（0.38±0.03）比（0.53±0.06），差异均具有统计学意义（P<0.05）；Bcl-2、MCL-1的mRNA、蛋白在肿瘤组织组中的表达水平较癌旁组织组显著升高，其中Bcl-2 mRNA、蛋白水平分别为（2.98±0.57）比（1.67±0.55）、（0.54±0.09）比（0.37± 0.10）；MCL-1 mRNA、蛋白水平分别为（4.48±1.26）比（1.61±0.62）、（0.51±0.08）比（0.33± 0.08 ），差异均具有统计学意义（P<0.05）。CFL siRNA转染的SK-N-SH细胞增殖活性为78%，较CFL siRNA-NC SK-N-SH和SK-N-SH降低了22%，而凋亡率为18.61%显著高于CFL siRNA-NC SK-N-SH的4.99%和SK-N-SH的4.79%，差异具有统计学意义（P<0.05）。在G1期，CFL siRNA SK-N-SH细胞占比为63%，CFL siRNA-NC SK-N-SH和SK-N-SH的分别为50%和49%，差异具有统计学意义（P<0.05 ）；在G2期与S期，CFL siRNA SK-N-SH细胞占比分别为25%、12%，CFL siRNA-NC SK-N-SH和SK-N-SH细胞占比均为34%、16%，差异均具有统计学意义（P<0.05 ）。结论CFL在神经母细胞瘤组织中高表达，下调CFL可以抑制神经母细胞株SK-N-SH的增殖，促进细胞凋亡，调节细胞周期。这为神经母细胞瘤的诊断和未来的靶向治疗提供了新的思路和方向。

简介：摘要目的探索原核表达系统生产的T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白-1-Fc(Tim-1-Fc)融合蛋白能否为Tim-1蛋白模拟品。方法大肠杆菌合成Tim-1-Fc融合蛋白，以体外蛋白质结合实验测定其能否与Tim-4蛋白结合。通过荧光激活的细胞分选(FACS)检测磷脂酰丝氨酸(PS)与膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)间的结合情况，间接探明该蛋白与PS的结合。结果体外蛋白相互作用实验证实Tim-1-Fc融合蛋白可以结合Tim-4蛋白。FACS数据分析表明无论有无过氧化氢诱导，Tim-1-Fc组凋亡细胞FITC信号平均强度(231.16±8.27、263.45±7.91)均高于对照组(190.80±5.09、203.29±10.89，t＝－7.200、7.739，P<0.01)，差异有统计学意义。结论原核表达版本的Tim-1-Fc融合蛋白可能具备在体外模拟Tim-1蛋白的作用。

简介：摘要目的探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9)，荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度，采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量，筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×105巨噬细胞和100 μg/ml β葡聚糖体外常规培养12、24 h后，分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组，采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×105巨噬细胞、1×105胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后，分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组，取下室的胰腺腺泡细胞，采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。结果siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强，浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后，巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06，β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强，且呈β葡聚糖剂量依赖性；而阴性细胞组、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。结论巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化，提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。

简介：摘要目的分析我国19~79岁成年人中血铅和血硒与血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）升高的关联。方法调查对象来自第一轮中国国家人体生物监测项目（2017-2018年），共纳入10 153名19~79岁的成年人。采集调查对象的空腹静脉血，检测全血中铅和硒的水平、血清hs-CRP水平，将hs-CRP>3.0 mg/L定义为hs-CRP升高。采用广义线性混合效应模型和限制性立方样条函数分析血铅和血硒与血清hs-CRP升高的关联。采用logistic回归模型分析血铅和血硒对血清hs-CRP升高的相乘和相加交互作用。结果调查对象的年龄为（48.91±15.38）岁，其中男性5 054名（61.47%），hs-CRP升高者1 181名（11.29%）。广义线性模型的结果显示，在调整了相关混杂因素后，与血铅水平处于最低四分位数（Q1）者相比较，第二（Q2）、第三（Q3）和最高四分位数（Q4）者hs-CRP升高的OR值（95%CI）分别为1.14（0.94~1.37）、1.25（1.04~1.52）和1.38（1.13~1.68）；与血硒水平处于Q1组者相比较，Q2、Q3和Q4组者hs-CRP升高的OR值（95%CI）分别为0.86（0.72~1.04）、0.91（0.76~1.11）和0.75（0.61~0.92）。logistic回归模型结果显示，未发现血铅和血硒对血清hs-CRP升高的相乘和相加交互作用。结论血铅水平与血清hs-CRP升高存在正向关联，血硒水平与血清hs-CRP升高存在负向关联，未发现血铅和血硒之间存在交互作用。

简介：摘要目的探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者血清成纤维细胞生长因子19（FGF19）、人Klotho蛋白（Klotho）及成纤维细胞肾脏因子受体蛋白4（FGFR4）表达的意义。方法选择中国科学院大学宁波华美医院2017年8月至2020年7月收治的PBC患者63例作为PBC组，另选择该院同期健康体检者51例作为对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清FGF19、Klotho蛋白和FGFR4蛋白表达水平。结果PBC组血清FGF19［（178.86±21.28）ng/L］、FGFR4蛋白［（2.96±0.47）ng/L］均高于对照组的（69.93±12.12）ng/L和（1.21±0.35）ng/L，Klotho蛋白［（3.25±0.89）μg/L］低于对照组的（9.67±1.53）μg/L（t=32.51、27.98、22.08，均P < 0.05）。PBC组血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）［（84.25±13.24）U/L］、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）［（71.82±10.35）U/L］、碱性磷酸酶（ALP）［（278.93±32.45）U/L］均高于对照组的（23.76±3.42）U/L、（23.10±4.53）U/L和（76.81±16.36）U/L（t=31.75、31.26、40.48，均P < 0.05）。经受试者工作特征（ROC）曲线分析显示，FGF19诊断PBC灵敏度为76.67%，特异度为61.90%；Klotho蛋白诊断PBC灵敏度为58.82%，特异度为66.67%；FGFR4蛋白诊断PBC灵敏度为54.55%，特异度为76.67%。经Pearson分析，FGF19与FGFR4蛋白呈线性正相关（r=0.78，P < 0.05），而Klotho蛋白与FGFR4蛋白呈线性负相关（r=-0.72，P < 0.05）。结论PBC患者血清FGF19和FGFR4蛋白水平升高，而Klotho蛋白水平降低，且FGF19与FGFR4蛋白呈线性正相关，而Klotho蛋白与FGFR4蛋白呈线性负相关，该研究具备显著创新性和科学性。

简介：摘要目的探讨巴西苏木素对膀胱癌细胞的抑制作用及其机制。方法采用化学合成法制备巴西苏木素。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测合成的巴西苏木素对膀胱癌T24细胞和BIU87细胞增殖的抑制作用，采用蛋白质组学技术检测巴西苏木素对两种细胞蛋白表达水平的影响，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）及蛋白质印迹法验证巴西苏木素对两种细胞的细胞质分裂调控蛋白1（PRC1）基因水平和蛋白水平表达的影响。结果MTT法检测显示，巴西苏木素可明显抑制膀胱癌T24和BIU87细胞的增殖，其对T24细胞和BIU87细胞的半抑制浓度（IC50）分别为9.9 µg/ml和5.1 µg/ml；蛋白质组学检测结果显示，巴西苏木素可下调两种细胞中PRC1蛋白的表达，并经qRT-PCR及蛋白质印迹法得到了验证。结论巴西苏木素可能通过下调PRC1表达抑制膀胱癌细胞的增殖。

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简介：摘要：片段教学是虚拟的课堂教学，听课者不是学生，却要虚拟有学生的课堂，也就是教师既是编剧又是导演，同时也是演员。那么教师如何既当好编剧、导演又当好演员呢？片段教学内容的选择宜“减”，片段教学设计宜“精”，虚拟教学情景宜“真”，片段教学心态宜“开”，片段教学课宜“活”。

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简介：摘要探讨隐色素基因1（CRY1）蛋白对裸鼠膀胱癌移植瘤生长的影响及其对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的作用。研究发现CRY1过表达抑制了移植瘤的生长，此外过表达的CRY1通过增加T24细胞凋亡抑制其增殖。因此靶向CRY1蛋白可能为治疗膀胱癌提供新思路。

简介：摘要目的探讨细胞分裂周期蛋白8(CDCA8)在肿瘤中的表达水平与临床预后的关系，以及对肿瘤免疫的影响。方法从UCSC Xena数据库中下载33种肿瘤的转录组、临床数据和突变数据，通过R软件进行整理和分析，采用Wilcoxon秩和检验分析基因CDCA8在不同肿瘤中的表达差异以及与临床特征的相关性，利用Kaplan-Meier分析其表达对恶性肿瘤患者预后的影响，斯皮尔曼(Spearman)相关性分析CDCA8与肿瘤突变的相关性，Estimate及Cibersort算法评估肿瘤组织的免疫微环境。基因集富集分析(GSEA)分析CDCA8在不同肿瘤中参与的通路，探究其机制。结果CDCA8在20种恶性肿瘤中表达显著高于对应的正常组织(2.86±1.43比1.12±0.96，Z＝71.28，P<0.01)，其高表达与14种恶性肿瘤患者的不良预后显著相关(P<0.05)；CDCA8表达水平与9种恶性肿瘤患者的临床分期呈正相关[风险比(HR)＝1.23，P<0.05]；CDCA8表达量与多种恶性肿瘤的突变负荷、微卫星不稳定性、基质评分以及免疫评分显著相关，并且在多数肿瘤中与不同类型的免疫细胞浸润水平相关；GSEA结果提示CDCA8在不同恶性肿瘤中参与多条免疫相关通路以及免疫功能。结论CDCA8可作为多数肿瘤的预后生物标志物，并且在肿瘤免疫中有重要作用。

简介：摘要目的探讨核心蛋白聚糖(DCN)对膀胱癌细胞生长的影响。方法以膀胱癌T24细胞株为研究对象，采用MTT法检测不同浓度、不同时间的DCN对T24细胞存活率的作用，采用流式细胞术分析DCN对T24细胞周期及凋亡的影响，采用ELISA和Western blot法检测DCN对转化生长因子-β1(TGF-β1)和P21蛋白表达的影响。结果与其他浓度相比，40、50 μg/mL DCN作用72 h时对T24细胞的抑制作用最强，差异有统计学意义(P<0.05)，且G1期细胞达到最高值，S期细胞达最低值(P<0.001)。5、10、20、30、40、50 μg/mL DCN作用72 h后均能促进T24细胞凋亡，且在40 μg/mL时达到最大值(P<0.001)；与0 μg/mL相比，5、10、20、30、40、50 μg/mL DCN作用72 h对TGF-β1表达均有抑制作用，最明显的抑制作用浓度为40 μg/mL(P<0.001)；与0 μg/mL相比，40 μg/mL DCN能促进P21蛋白上调(P<0.001)。结论DCN在体外能够抑制膀胱癌T24细胞生长，诱导其凋亡，其可能的作用机制为下调TGF-β1及上调P2l蛋白表达。

简介：摘要：随着现代医学的发展，对于药物外源性疾病越来越重视，而蛋白质作为一类重要的物质载体成了生物医理研究中必不可少而且不可或缺。在临床上细胞内蛋白是一种非常重要但又十分广泛使用且具有很高应用价值和安全性等优点。近年来，随着基因工程、分子生物技术和分子生物学学科的发展，人们对蛋白质药物研究逐渐深入。本文基于蛋白质药物对其在细胞内的递送策略总结，并分析其潜在的应用方式，了解蛋白质药物递送技术的实际进展。

简介：摘要供者自然杀伤(NK)细胞是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后最早重建的一类淋巴细胞亚群。移植后早期，供者NK细胞可以通过其表面的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)与靶细胞人类白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子特异性偶联，识别并杀伤被感染的细胞和血液肿瘤细胞，发挥抗感染和抗血液肿瘤等作用。根据供者KIR与受者HLA配型组合的不同模式，可预测NK细胞的同种异体反应性和移植结果。笔者拟就目前临床工作中常用的KIR/HLA配型模式及其对移植结果影响的研究现状进行阐述，旨在为优化供者筛选、改善移植结果和治疗提供思路。