简介：摘要目的探讨miR-140-5p介导Jagged1对肾透明细胞癌(ccRCC)迁移、侵袭及血管生成能力的影响。方法选取福建省漳州市医院泌尿外科2019年4月至2020年12月经肾癌根治术患者的肾透明细胞癌及癌旁组织标本17例，选取购自美国菌种保藏中心肾透明细胞癌细胞系(786-0)和肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)，荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-140-5p的表达。免疫组织化学检测ccRCC组织中Jagged1的表达。将786-0细胞分为miRNA阴性对照组(miR-NC组)、过表达miR-140-5p组(miR-140-5p组)、Jagged1阴性对照组(Jagged1-NC组)、敲减Jagged1组(si-Jagged1组)。使用划痕、transwell小室和血管生成实验，分别检测细胞迁移、侵袭和血管生成的改变。RT-qPCR检测miR-140-5p过表达后Jagged1 mRNA的表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测Notch/Jagged1信号通路中Jagged 1蛋白的表达。计量资料比较采用t检验，计数资料采用χ2检验。结果ccRCC组织(0.318±0.144)中miR-140-5p的表达量显著低于正常肾组织(1.028±0.033)，差异有统计学意义(t＝-19.787，P<0.01)；786-0肾癌细胞(0.295±0.064)中miR-140-5p的表达量显著低于HK-2正常肾细胞(1.009±0.157)，差异有统计学意义(t＝-8.366，P<0.01)；在体外，miR-140-5p组的细胞迁移率(0.394±0.015)、侵袭细胞数(142.000±17.874)和血管管腔样结构的形成数(46.000±5.291)显著少于miR-NC组的细胞迁移率(0.548±0.020)、侵袭细胞数(267.000±26.357)和血管管腔样结构的形成数(74.000±8.000)，差异有统计学意义(t＝-10.362、-14.445、-5.056，P<0.01)；与miR-140-5p相反，ccRCC组织中Jagged1的表达(92.30%)显着高于正常肾组织(36.67%)，差异有统计学意义(χ2＝5.356，P<0.05) ；si-Jagged1组的细胞迁移率(0.429±0.011)、侵袭细胞数(130.533±19.379)和血管管腔样结构的形成数(45.333±3.214，)都显著少于Jagged1-NC组的细胞迁移率(0.495±0.025)、侵袭细胞数(252.466±19.231)和血管管腔样结构的形成数(66.000±3.605)，差异有统计学意义(t＝-3.999、-17.297、-7.410，P<0.05)；miR-140-5p组中Jagged1 mRNA的相对表达量(0.434±0.150)显著低于miR-NC组(1.026±0.265)，差异有统计学意义(t＝-3.425，P<0.05)。miR-140-5p组(0.336±0.159)中Jagged1蛋白的表达较miR-NC组(0.900±0.121)降低，差异有统计学意义(t＝-4.901，P<0.01)。结论miR-140-5p可抑制ccRCC的进展，miR-140-5p可能下调Jagged1抑制ccRCC迁移、侵袭及血管生成。

简介：摘要目的探讨钴胺素转运蛋白1(TCN1)在肺腺癌中的表达及其与肺腺癌患者预后的关系，以及TCN1对肺腺癌细胞增殖和迁移侵袭能力的影响。方法采用非随机抽样的方法选取2020年7月至2021年7月在成都医学院第一附属医院行肺腺癌切除术的患者20例，收集20对经组织病理学证实的肺腺癌样本和距离肿瘤组织至少5 cm的正常肺组织样本。免疫组织化学染色分析TCN1在肺腺癌组织及癌旁正常肺组织中的表达情况，实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测肺腺癌细胞系及正常肺上皮细胞系内TCN1表达情况。下载TCGA数据库中肺腺癌数据，分析TCN1与肺腺癌患者生存预后的关系，使用加权基因共表达网络分析与TCN1关系最密切的模块，用R 3.6.1软件对该模块内的基因进行基因本体注释(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析，以TCN1的中位值为截断值，将TCGA数据库中的肺腺癌样本分为TCN1高表达组和低表达组，采用GSEA 4.2.3软件分析预测高表达TCN1的肿瘤组织样本内基因富集的信号通路。选用A549肺腺癌细胞系为研究对象，运用噻唑蓝(MTT)和Transwell实验检测敲减TCN1后对A549细胞的增殖和迁移侵袭的影响，采用Western blot检测敲减TCN1后A549肺腺癌细胞内上皮间充质转化(EMT)相关蛋白的表达情况。结果免疫组织化学染色显示肺腺癌患者肺腺癌组织中TCN1染色为阳性。RT-qPCR和Western blot结果显示，与正常肺上皮细胞系BEAS-2B相比，肺腺癌细胞系A549、LC-2、HCC515和PC14中TCN1普遍高表达(P值均<0.05)。对TCGA数据库中肺腺癌的生存资料进行分析显示TCN1高表达的患者总生存期更短(HR＝1.6，P＝0.002 6)。富集分析结果显示WGCNA筛选出的与TCN1表达最相关的模块内的基因主要涉及胞外基质组成、胞外结构组成、细胞基质黏附等生物学过程以及黏着斑、细胞外基质受体相互作用等相关通路。GSEA软件结果也显示高表达TCN1的肿瘤样本内的基因主要富集在EMT相关通路。MTT结果显示，敲减TCN1 96 h后，A549细胞的增殖能力受到抑制，差异有统计学意义(t＝4.657，P＝0.009)。Transwell实验结果显示，敲减TCN1后，A549细胞的迁移和侵袭能力均受到抑制，差异均有统计学意义(t值分别为10.502、9.604，P值均<0.05)。Western blot结果显示，敲减TCN1后A549细胞内N-cad、ASMA、Slug、Vimentin、Snail等EMT相关蛋白表达降低(P值均<0.05)。结论TCN1在肺腺癌组织中为高表达，且与不良预后密切相关。TCN1低表达可能通过抑制EMT影响肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的探讨神经轴突导向因子2(Slit2)对神经胶质瘤细胞的增殖、迁移和糖酵解的影响。方法选取2018年6月到2022年6月河南省商丘市第一人民医院收治的61例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析Slit2蛋白在神经胶质瘤和癌旁组织的阳性率。将神经胶质瘤细胞株U251堆积分为对照组和Slit2 KD组，分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析细胞增殖；采用Transwell和划痕实验分析细胞迁移；采用试剂盒检测葡萄糖提呈和乳酸水平；采用生物化学酶法检测己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性。组间比较采用t检验。结果神经胶质瘤组织中Slit2蛋白表达阳性率(43/61，72.13%)明显低于癌旁组织(16/61，26.23%)，差异有统计学意义(χ2＝12.091，P<0.05)。对照组细胞活力(1.86±0.07)明显高于Slit2 KD组细胞(1.22±0.08)，差异有统计学意义(t＝13.910，P<0.05)。对照组细胞在体内成瘤体积[(829.50±44.12) mm3]明显高于Slit2 KD组细胞[(531.00±64.42) mm3]，差异有统计学意义(t＝12.090，P<0.05)。对照组细胞在体内成瘤重量[(4.63±0.66) g]明显高于Slit2 KD组细胞[(2.22±0.20) g]，差异有统计学意义(t＝11.070，P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(81.17±4.49)个]和划痕愈合率[(78.33±8.04)%]明显高于Slit2 KD组细胞(56.50±6.66)[(54.67±6.21)%]，差异有统计学意义(t＝7.525、5.703，P<0.05)。对照组细胞己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性(0.96±0.04、0.95±0.04、0.97±0.04)明显高于Slit2 KD组细胞(0.64±0.09、0.73±0.04、0.51±0.05)，差异有统计学意义(t＝7.961、8.963、15.780，P<0.05)。对照组细胞葡萄糖摄取量和乳酸水平[(0.75±0.08)、(3.92±0.31) mmol/L]明显高于Slit2 KD组细胞[(0.32±0.04)、(2.75±0.28) mmol/L]，差异有统计学意义(t＝12.350、6.782，P<0.05)。结论Slit2在神经胶质瘤细胞中高表达，通过调节糖酵解通路关键酶活，介导神经胶质瘤细胞的增殖和迁移能力。

简介：摘要目的通过锥形束CT探讨骨性Ⅱ类错伴高角成人下颌垂直向高度控制矫治前后颞下颌关节形态和位置的变化，以及下颌垂直向变化量与髁突位置变化量之间的相关性，以期为正畸临床诊断和矫治设计提供参考。方法选取2017年10月至2020年11月于兰州大学口腔医院正畸科行减数矫治并进行主动垂直向高度控制的骨性Ⅱ类错伴高角成年患者20例，其中男性6例，女性14例，年龄（21.4±2.4）岁。将矫治前后患者锥形束CT导入Invivo Dental 5.0软件进行三维重建和校正后，测量头颅侧位截面的下颌垂直向指标（下颌平面角、后前面高比、下颌真性旋转角）、切道斜度以及髁突形态和位置及关节窝形态指标，并对矫治前后结果进行配对t检验。计算Pearson相关系数，分析下颌垂直向指标变化量与髁突位置变化量的相关性。结果矫治后20例患者前牙覆、覆盖正常，磨牙垂直向高度得到控制。与矫治前相比，矫治后下颌平面角显著减小2.05°±1.22°（t=7.60，P<0.001）、后前面高比显著增加（1.89±3.32）%（t=2.56，P=0.019）、下颌真性旋转角显著减小1.42°±1.92°（t=3.54，P=0.002）；矫治后髁突内外径显著增加（0.55±0.76）mm（t=-2.73，P=0.015）、髁突前后径显著增加（0.27±3.51）mm（t=-3.23，P=0.006）、髁突最大轴面面积显著增加（6.01±7.36）mm2（t=-2.80，P=0.013）、髁突头高度显著增加（0.33±0.72）mm（t=-2.14，P=0.046）；关节窝宽度显著增加（0.56±0.93）mm（t=-2.37，P=0.032）、关节窝深度显著增加0.33（0.14，0.51）mm（Z=-2.76，P=0.006）、关节结节角显著增加1.50°±2.40°（t=-2.44，P=0.028）；髁突内间隙显著减小（0.33±0.49）mm（t=2.31，P=0.035）、髁突外间隙显著减小（0.20±0.23）mm（t=3.58，P=0.003）。矫治前6例患者髁突存在前移位、7例髁突为居中位、7例髁突后移位；矫治后髁突居中位者变化不大，2例髁突后移位及3例髁突前移位者矫治后髁突处于居中位，3例髁突前移位及3例髁突后移位者关节间隙指数更接近居中位，1例后移位及1例前移位者髁突位置基本无变化。患者后前面高比变化量与髁突内间隙变化量呈显著负相关（r=-0.52，P=0.019），与髁突中间隙及外间隙呈低度相关（r=-0.48，P=0.031；r=-0.47，P=0.035）。结论骨性Ⅱ类错伴高角成年患者经过下颌垂直向高度控制矫治后，前牙覆覆盖正常，侧貌改善，同时髁突和关节窝发生适当生理改建。后前面高比变化量与髁突间隙变化量存在一定的负相关关系。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA)-1303通过靶向调控溶血磷脂酸受体3(LPAR3)的表达抑制肾癌786-O细胞增殖和迁移的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞株(A498、ACHN、786-O、OS-RC-2)及正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-1303的相对表达量。将miR-1303模拟物和阴性对照序列分别转染至miR-1303表达最低的肾癌细胞，分别作为miR-1303组和阴性对照组。qRT-PCR检测两组细胞miR-1303的相对表达量。MTT法和Transwell迁移实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力。生物信息学软件RegRNA 2.0预测miR-1303的靶基因。双荧光素酶报告基因检测miR-1303与靶基因的结合。qRT-PCR和Western blotting法检测LPAR3的相对表达量。计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果肾癌细胞株A498、ACHN、786-O、OS-RC-2和正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-1303表达分别为0.51±0.04、0.79±0.02、0.21±0.04、0.55±0.07和1.00±0.05，肾癌细胞株中miR-1303表达均低于HK-2(P<0.05)，786-O细胞中的相对表达量最低(F＝29.50，P<0.01)。与阴性对照组相比，miR-1303组细胞miR-1303的表达明显增加[(1.00±0.01)比(7.98±0.88)，t＝7.95，P<0.01]。miR-1303组细胞吸光度值明显低于阴性对照组(P<0.05)。miR-1303组细胞迁移数明显低于阴性对照组(P<0.05)。miR-1303可与LPAR3 mRNA互补配对结合(P<0.01)。与阴性对照组相比，miR-1303组786-O细胞中LPAR3基因表达显著下降[(1.00±0.01)比(0.23±0.03)，t＝23.56，P<0.01]。结论miR-1303可能通过靶向抑制LPAR3的表达，抑制肾癌786-O细胞的增殖能力和迁移能力。

简介：摘要目的研究原代人脐静脉内皮细胞(primary human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)被登革病毒2型(dengue virus type 2, DENV2)感染后，巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)对腺苷酸激活蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase，AMPK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases，ERK)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)自噬信号途径的影响。方法TCID50检测DENV2对C6/36细胞的毒力，RT-PCR检测DENV2感染后HUVEC内病毒NS1基因部分片段；透射电子显微镜观察自噬体结构，Western blot检测不同剂量病毒感染HUVEC后对微管关联蛋白Ⅱ(microtubule-associated proteins Ⅱ，LC3-Ⅱ)表达的影响和不同时间MIF的蛋白质水平变化，分析MIF与自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相关性；MIF抑制剂和通路抑制剂分别预处理DENV2感染的HUVEC，Western blot检测MIF、AMPK、ERK、mTOR和LC3-Ⅱ蛋白变化，分析MIF与AMPK自噬通路的关联。结果实验用毒株对C6/36细胞的TCID50为10-9.09/ml，被感染的HUVEC内可检测病毒NS1基因部分片段序列。不同剂量病毒感染后，在HUVEC内可形成自噬小体或自噬溶酶体，自噬水平有差异。DENV2感染HUVEC引起MIF和LC3-Ⅱ mRNA水平的变化呈正相关，MIF抑制剂的处理影响通路蛋白AMPK、ERK和LC3-Ⅱ的表达，但几乎不影响MIF的蛋白质水平。结论DENV2感染HUVEC引起的MIF变化可影响自噬水平，MIF通过调控AMPK/ERK/mTOR途径影响自噬。

简介：摘要目的探讨微小RNA（miR）-128-3p在胃癌中的表达及其临床意义。方法通过qRT-PCR检测2014年1月至2016年1月126例在河南省肿瘤医院手术切除的胃癌和癌旁组织中miR-128-3p表达水平，同时检测miR-128-3p在胃癌细胞系中表达情况，在AGS和BGC823细胞中转染miR-128-3p抑制剂后观察其对胃癌细胞侵袭、迁移能力的影响，寻找miR-128-3p直接调控的下游靶基因。结果miR-128-3p在胃癌组织中的表达水平（6.30±2.39）高于癌旁组织（4.17±0.9）（P<0.05）。miR-128-3p表达水平与脉管癌栓、pN分期和pTNM分期有关（均P<0.05），miR-128-3p高表达的患者预后较差（P<0.05）。miR-128-3p在胃癌细胞系中高表达（P<0.05）。沉默miR-128-3p明显抑制AGS和BGC823细胞的迁移和侵袭。在线靶点预测工具和双荧光素酶报告基因显示CLDN18是miR-128-3p直接调控的下游靶基因，抑制CLDN18表达后细胞的侵袭和迁移能力明显增强。结论miR-128-3p高表达与胃癌患者较差的预后有关。

简介：摘要目的研究线粒体精氨酰-tRNA合成酶(RARS2)基因表达对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及化疗敏感性的影响。方法人胰腺癌细胞株AsPC-1及PANC-1分别设置阴性对照组、RARS2干扰组-1、RARS2干扰组-2、过表达对照组、RARS2过表达组，通过瞬时转染法降低或过表达RARS2。细胞计数CCK-8法检测细胞增殖以及化疗敏感性，采用Transwell检测细胞侵袭及迁移。采用Western印迹检测RARS2在不同浓度及不同时间吉西他滨作用下的表达。Western印迹与聚合酶链式反应检测耐药株RARS2表达。结果在胰腺癌细胞AsPC-1及PANC-1中，干扰降低RARS2的表达可以显著抑制细胞增殖能力，增强吉西他滨化疗敏感性；过表达RARS2后细胞增殖能力增强，吉西他滨化疗敏感性降低。在AsPC-1细胞中，阴性对照组、RARS2干扰组-1、RARS2干扰组-2、过表达对照组、RARS2过表达组迁移细胞数(100倍显微镜下)(586.7±37.4)个/视野、(195.7±18.6)个/视野、(237.0±17.1)个/视野、(157.7±19.1)个/视野、(456.0±23.1)个/视野，侵袭细胞数分别为(87.7±13.2)个/视野、(24.7±6.5)个/视野、(31.7±6.1)个/视野、(29.3±4.5)个/视野、(94.3±9.3)个/视野。降低RARS2表达后细胞迁移与侵袭能力降低，过表达RARS2细胞迁移与侵袭能力增强。聚合酶链式反应与Western印迹实验表明，吉西他滨耐药株AsPC-1中RARS2的相对表达高于普通细胞株。在AsPC-1细胞中，随着吉西他滨浓度及处理时间增加，RARS2表达随之上升。结论RARS2基因调控胰腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移及化疗敏感性，且RARS2表达与吉西他滨浓度与处理时间正相关。

简介：摘要目的探讨细胞迁移诱导蛋白(CEMIP)对胆囊癌细胞系GBC-SD生物学功能的影响及其可能机制。方法检测CEMIP在胆管上皮细胞HIBEC及胆囊癌细胞系NOZ、GBC-SD中的表达。取对数生长期的人胆囊癌细胞系GBC-SD作为空白对照组；转染无意义的小干扰RNA作为阴性对照组；将siCEMIP-1或siCEMIP-2转染至GBC-SD细胞中，分别作为siCEMIP-1组和siCEMIP-2组。蛋白质印迹法检测GBC-SD细胞中CEMIP、免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)、钙网蛋白(CRT)的表达量，CCK-8法检测GBC-SD细胞相对存活率。分别采用划痕实验、流式细胞术检测细胞划痕修复率及细胞凋亡率。Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。选取12只5周龄BALB/c-nude小鼠分为对照组和实验组，每组6只，两组小鼠分别于右侧腋下(前肢)皮下注射GBC-SD细胞和沉默CEMIP的GBC-SD细胞，33 d后比较移植瘤体积和重量。结果与HIBEC细胞相比，GBC-SD[(0.750±0.034)比(0.120±0.002)]和NOZ[(0.690±0.013)比(0.120±0.002)]细胞中CEMIP蛋白相对表达量均增高，差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组及阴性对照组比较，siCEMIP-1组及siCEMIP-2组CEMIP、Bip及CRT的表达量、细胞相对存活率、细胞划痕修复率、细胞迁移及侵袭能力均下降，而细胞凋亡率增加，差异有统计意义(P<0.05)。与对照组相比，实验组小鼠的瘤体体积[(543.6±114.7)比(801.5±256.3)mm3]和瘤体重量[(0.453±0.093)比(0.728±0.278)g]均下降，差异有统计学意义(P<0.05)。结论CEMIP在胆囊癌细胞系GBC-SD及NOZ中高表达，沉默CEMIP基因表达可抑制胆囊癌细胞系GBC-SD增殖、划痕修复能力、迁移及侵袭能力，促进细胞凋亡，这可能与CEMIP抑制内质网分子伴侣Bip及CRT表达相关。

简介：摘要目的探讨人骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体对骨肉瘤细胞MG63增殖与迁移的影响。方法采用贴壁培养法分离人BMSCs，流式细胞技术对BMSCs鉴定。采用超速离心法分离BMSCs外泌体，透射电镜观察外泌体形态、蛋白质印迹法(Western blot)检测外泌体特异性分子标志物CD81、CD63。将体外培养的MG63细胞分为BMSCs外泌体实验组和对照组。采用细胞计数法、细胞增殖实验(CCK-8)和细胞划痕实验检测细胞的增殖和迁移，采用聚合酶链反应(PCR)及Western blot技术检测外泌体干预后B淋巴细胞瘤-2蛋白(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果透射电镜观察到外泌体超微结构，Western blot检测到外泌体表面标志物CD81、CD63。BMSCs外泌体被骨肉瘤MG63细胞摄取24 h后，实验组与对照组MG63细胞分别为(4.469±0.132)×106个和(2.445±0.673)×106个，差异有统计学意义(t＝5.110，P<0.05)。浓度为200、400、600、800 μg/ml BMSCs外泌体组细胞的吸光度(A)值分别为1.380±0.093、1.770±0.206、1.865±0.090和1.878±0.182，与空白对照组(0.994±0.084)比较，差异均有统计学意义(F＝22.272，P<0.05)。细胞划痕实验表明实验组24、48 h后MG63迁移面积分别达(75.114±5.981)%和(94.720±3.024)%，与对照组比较[(56.324±7.834)%和(68.217±2.204)%]，差异均有统计学意义(t＝3.302、12.267，P<0.05)。流式细胞术发现实验组MG63细胞凋亡显著低于空白对照组，差异有统计学意义(t＝26.210，P<0.01)。与对照组比较，BMSCs外泌体可上调MG63细胞bcl-2表达，bax的表达水平下调，差异有统计学意义(t＝6.550、－5.591，P<0.05)。Western blot结果显示，BMSCs外泌体可上调MG63细胞bcl-2的表达，而bax的表达水平下调，差异有统计学意义(t＝3.178、－4.457，P<0.05)。结论人BMSCs源性外泌体对骨肉瘤细胞MG63具有促进其增殖与迁移作用。

简介：摘要目的探讨微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)在结直肠癌(CRC)中的表达及对增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法体外培养人结直肠癌细胞系和人正常结肠上皮细胞。将miR-519d-3p模拟物(mimic)分别转染于RKO及SW620，同时设置mimic阴性对照(mimic NC)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-519d-3p表达及DCAF4L2 mRNA表达水平。细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆实验检测细胞增殖活性。划痕愈合实验、Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测DCAF4L2蛋白表达水平。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示，采用两样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果miR-519d-3p在人结直肠癌细胞系中显著下降，其中RKO和SW620表达倍数明显低于NCM460[RKO：(0.311±0.165)倍比1.000倍，t＝7.783，P<0.05；SW620：(0.354±0.079)倍比1.000倍，t＝15.72，P<0.01]，差异有统计学意义。成功转染mimic过表达miR-519d-3p，过表达组表达倍数高于对照组 [RKO：(2.913±0.602)倍比1.000倍，t＝5.409，P<0.01；SW620：(3.194±0.427)倍比1.000倍，t＝8.765，P<0.001]，差异有统计学意义。通过生物学功能实验证实miR-519d-3p表达升高能显著抑制CRC细胞的增殖、迁移和侵袭能力。CCK-8检测结果示，过表达组24、48、72、96 h细胞吸光度值低于对照组(RKO：0.248±0.018比0.184±0.012、0.388±0.007比0.277±0.010、0.658±0.033比0.496±0.008、0.877±0.020比0.681±0.021，t＝3.064，P<0.01；SW620：0.213±0.018比0.181±0.050、0.375±0.008比0.274±0.014、0.720±0.009比0.482±0.006、0.978±0.115比0.721±0.032，t＝2.432，P<0.01)，差异有统计学意义。过表达组平板克隆集落形成个数显著低于对照组[RKO：(262.300±11.320)个比(181.700±2.333)个，t＝7.127，P<0.05；SW620：(448.000±33.260)个比(190.300±7.446)个，t＝9.387，P<0.05]，差异有统计学意义。过表达组划痕愈合率低于对照组[RKO：(39.040±0.812)%比(8.979±0.846)%，t＝394.900，P<0.01；SW620：(28.840±0.848)%比(5.576±1.435)%，t＝21.350，P<0.01]，差异有统计学意义。Transwell迁移和侵袭实验中过表达组穿透微孔膜的细胞个数明显低于对照组，迁移实验[RKO：(196.700±6.360)个比(93.330±4.096)个，t＝44.290，P<0.01；SW620：(198.300±4.485)个比(101.300±1.764)个，t＝16.090，P<0.01]，差异有统计学意义；侵袭实验[RKO：(274.700±3.844)个比(85.670±2.728)个，t＝33.950，P<0.01；SW620：(263.300±6.566)个比(70.330±4.256)个，t＝50.980，P<0.01]，差异有统计学意义。在线预测软件(miRWalk、StarBase 2.0和TCGA)预测，并通过qRT-PCR及Western blot验证结果显示，DCAF4L2作为miR-519d-3p靶基因调控CRC，过表达组DCAF4L2的mRNA表达及蛋白表达倍数明显低于对照组，mRNA表达倍数[RKO：(0.170±0.050)倍比1.000倍，t＝18.400，P<0.01; SW620：(0.256±0.069)倍比1.000倍，t＝26.800，P<0.01]，差异有统计学意义；蛋白倍数[RKO：(45.504±6.076)%比100.000%，t＝15.540，P<0.01；SW620：(43.567±3.760)%比100.000%，t＝26.000，P<0.01]，差异有统计学意义。结论结直肠癌细胞中miR-519d-3p表达显著下降，并通过调控DCAF4L2表达抑制结直肠癌增殖、迁移及侵袭能力。

简介：摘要目的探讨姜黄素调控miR-199a-3p的基因表达对前列腺癌C4-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法将miR-199a-3p抑制物及阴性对照转染至C4-2细胞中，并分别标记为anti-miR-199a-3p组和anti-miR-con组；将仅加入脂质体的C4-2细胞标记为对照组。运用MTT法检测通过姜黄素(0、20、40、80 μmol/L)处理的C4-2细胞的增殖情况。40 μmol/L姜黄素处理C4-2细胞后，Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力；qRT-PCR检测细胞的miR-199a-3p表达量。将inhibitor NC、miR-199a-3p inhibitor转染至C4-2细胞中，再用40 μmol/L姜黄素处理48 h，采用MTT法、Transwell法检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭情况；Western blot检测各组C4-2细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、β-catenin、Cyclin D1和c-Myc的蛋白表达量。结果与对照组比较，姜黄素能明显抑制C4-2细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。姜黄素(40 μmol/L)处理后，C4-2细胞中miR-199a-3p的表达量显著增加(P<0.05)。抑制miR-199a-3p的表达，可逆转姜黄素对C4-2细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。使用姜黄素处理miR-199a-3p低表达的C4-2细胞后，与anti-miR-con组相比，anti-miR-199a-3p组C4-2细胞的MMP-2、MMP-9的表达量显著增加(P<0.05)，β-catenin、Cyclin D1和c-Myc蛋白表达量均显著增加(P<0.05)。结论姜黄素可上调miR-199a-3p的表达，从而抑制前列腺癌C4-2细胞的增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要：

简介：【摘要】目的：探讨基于微信平台的垂直护理模式对胰腺癌术后患者自我护理效能及治疗依从性的影响。方法：选取2021年1月到2021年12月期间胰腺癌手术患者，共有80例纳入本次研究。对照组采取常规护理，研究组实施基于微信平台的垂直护理模式，对比护理效果。结果：在自我管理方面，研究组自我护理效能评分较高，P＜0.05。研究组治疗依从性高于对照组，P

简介：摘要目的探讨miRNA-296-5p（miR-296-5p）对缺氧诱导的胰腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其相关机制。方法选择人胰腺癌细胞株PANC-1；收集上海市奉贤区中心医院和蚌埠医学院附属第一医院2010年1月至2014年12月55例胰腺癌患者手术切除的胰腺癌组织和10例癌旁正常胰腺组织。采用免疫组织化学及原位杂交法检测胰腺癌及癌旁正常胰腺组织芯片中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、miR-296-5p的表达水平，分析二者的相关性及其与患者临床病理特征的关系。PANC-1细胞分为缺氧组和常氧组，采用Transwell法测定两组细胞迁移与侵袭能力，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测两组细胞miR-296-5p及HIF-1α mRNA表达。转染小干扰RNA（siRNA）干扰HIF-1α的表达，将细胞分为PANC-1组（空白对照）、PANC-1-NC组（阴性对照）、PANC-1-siRNA组，检测miR-296-5p的表达；同时转染miR-296-5p激动剂和抑制剂，分为Agomir-miR-296-5p组（激动剂组）、Agomir-miR-296-5p-NC组（激动剂阴性对照组）、Antagomir-miR-296-5p组（抑制剂组）、Antagomir-miR-296-5p-NC组（抑制剂阴性对照组）；Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力。采用荧光素酶报告基因系统验证miR-296-5p启动子区是否存在HIF-1α的结合位点。结果胰腺癌组织HIF-1α高表达率高于癌旁正常胰腺组织[81.8%（45/55）比0（0/10），P<0.01]；胰腺癌组织miR-296-5p高表达率低于癌旁正常胰腺组织[12.7%（7/55）比90.0%（9/10），χ2=27.23，P<0.01]。HIF-1α表达和miR-296-5p表达呈负相关（r=-0.53，P<0.01）；miR-296-5p低表达与肿瘤长径、TNM分期、淋巴结转移均有关（均P<0.05）。常氧组PANC-1侵袭细胞数为（15.3±2.1）个，缺氧组为（24.7±1.5）个，差异有统计学意义（t=0.26，P=0.003）；常氧组PANC-1迁移细胞数为（20.7±3.8）个，缺氧组为（32.7±1.2）个，差异有统计学意义（t=5.25，P=0.006）。常氧组PANC-1细胞HIF-1α mRNA相对表达量为0.30±0.02，缺氧组为1.00±0.01，差异有统计学意义（t=56.45，P<0.01）；常氧组PANC-1细胞miR-296-5p相对表达量为3.05±0.20，缺氧组为1.14±0.04，差异有统计学意义（t=16.05，P<0.01）。PANC-1组、PANC-1-NC组、PANC-1-siRNA组侵袭细胞数分别为（24.7±1.5）个、（25.7±1.5）个、（12.0±1.7）个，差异有统计学意义（F=68.13，P<0.01），PANC-1-siRNA组较PANC-1组细胞侵袭能力下降（t=9.50，P=0.001）；迁移细胞数分别为（32.7±1.2）个、（37.0±1.0）个、（17.3±1.2）个，差异有统计学意义（F=262.09，P<0.01），PANC-1-siRNA组较PANC-1组细胞迁移能力下降（t=16.26，P<0.01）。Antagomir-miR-296-5p组与PANC-1组比较，细胞侵袭和迁移能力增强（均P<0.05）；Agomir-miR-296-5p组与PANC-1组比较，细胞侵袭和迁移能力减弱（均P<0.05）。荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性结果显示，miR-296-5p存在与HIF-1α结合的靶点。结论HIF-1α通过负向调控miR-296-5p在缺氧诱导的胰腺癌细胞的侵袭、迁移中发挥重要作用。

简介：摘要炎症在新生儿缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）中发挥重要作用。高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein，HMGB1）作为神经炎症的触发器，在HIBD中具有双重作用：在急性期，加重缺血组织的损伤；在HIBD后期，参与神经血管修复重建过程。但其在HIBD中的病理生理机制仍未完全清楚。本文从HMGB1生物学功能出发，针对HMGB1在HIBD中的病理生理机制如其对于神经元、神经胶质细胞和血脑屏障的影响及作用机制进行归纳，同时总结了近年来HMGB1在发育不成熟大脑中的研究进展，希望为HIBD的神经保护提供新的思路。

简介：摘要目的观察miR-5011-5p对膀胱癌细胞系J82凋亡和迁移的影响并探讨可能的作用机制。方法以J82细胞为研究对象，分别转染随机序列分子（NC组）和miR-5011-5p序列分子（miR-5011-5p组）。通过流式细胞术和划痕实验分析miR-5011-5p对J82细胞凋亡和迁移的影响，通过生物信息学预测miR-5011-5p的靶基因，通过实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）和Western blot分别检测miR-5011-5p对靶基因表达的影响。结果miR-5011-5p组J82细胞中miR-5011-5p相对表达量为10.73±1.67，显著高于NC组的1.04±0.16（t=5.81，P < 0.01）。NC组、miR-5011-5p组J82细胞凋亡率分别为（8.83±1.67）%、（34.96±3.80）%，差异有统计学意义（t=6.30，P < 0.01）。NC组、miR-5011-5p组J82细胞迁移率分别为（71.31±7.69）%、（37.43±5.01）%，差异有统计学意义（t=3.69，P < 0.05）。miR-5011-5p的靶基因可能是Yes相关蛋白1（YAP1）。与NC组相比，miR-5011-5p对J82细胞YAP1表达具有显著抑制效应（P < 0.01）。结论miR-5011-5p可能通过靶向抑制YAP1基因表达，促进膀胱癌J82细胞的凋亡并抑制其迁移。

简介：摘要目的探讨多配体蛋白聚糖-1(SDC1)在人静脉畸形组织中的表达，以及沉默SDC1表达对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移、侵袭及血管生成能力的影响。方法静脉畸形病理标本取自2020年12月至2021年6月郑州大学第三附属医院血管瘤外科手术切除的20例病变组织(患者男10例，女10例，年龄1~57岁，中位年龄7岁)；HUVECs购自美国模式培养物集存库(ATCC)。采用免疫组化方法检测静脉畸形组织中SDC1的表达情况。体外培养HUVECs细胞学实验均分为2组进行，分别转染SDC1的小干扰RNA(siRNA)(si-SDC1组)和对照siRNA(对照组)。采用实时定量PCR法和蛋白质印迹法筛选、验证所合成siRNA对SDC1表达的沉默效果并用于后续实验。分别通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验、血管生成实验检测HUVECs的迁移、侵袭、血管生成能力。结果(1)20例静脉畸形组织中，13例(65.0%)SDC1呈阳性表达，且主要表达于静脉内皮细胞胞质。(2)与对照组HUVECs相比，si-SDC1组HUVECs的SDC1 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)，说明所合成针对SDC1的siRNA可以沉默SDC1的表达。(3)与对照组相比，si-SDC1组HUVECs的迁移、侵袭和血管生成能力均增强(P<0.05)。结论SDC1在静脉畸形组织中多呈阳性表达，沉默SDC1表达后，HUVECs的迁移、侵袭和血管生成能力增强。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-618及羧基末端结合蛋白2(CtBP2)对胰腺癌增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胰腺癌细胞中miR-618的表达；分别转染miR-618 inhibitor和mimics后，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆集落形成及Transwell实验检测miR-618对胰腺癌MIA PaCa-2和SW1990细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响；运用在线数据库预测能够与miR-618结合的靶基因；RT-qPCR检测转染miR-618 inhibitor和mimics后相关靶基因的表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-618 inhibitor组和mimics组中CtBP2的表达量；双荧光素酶报告基因实验检测miR-618和CtBP2的靶向结合情况；CCK-8、克隆形成和Transwell实验检测同时转染si-CtBP2和miR-618 inhibitor较单独转染si-CtBP2后对胰腺癌增殖及侵袭迁移的影响。组间比较采用t检验，组内两两比较采用LSD-t检验。结果BxPC-3(0.65±0.01)、MIA PaCa-2(0.45±0.07)、PANC-1(0.51±0.04)和SW1990(0.53±0.01)中miR-618的表达量低于正常胰腺导管上皮细胞(HPDE)(1.01±0.13，t＝4.371、8.859、6.794、6.171，P<0.01)，差异有统计学意义；干扰miR-618的表达后可显著促进胰腺癌MIA PaCa-2和SW1990的增殖、侵袭及迁移能力；同时在线数据库预测miR-618的潜在靶基因，结合RT-qPCR验证转染mimics和inhibitor后各候选基因的表达，结果提示仅有CtBP2与miR-618的表达呈负相关；进一步Western blot结果显示，转染miR-618 mimics后MIA PaCa-2(0.32±0.06)和SW1990(0.45±0.03)中CtBP2的表达量低于对照组(1.02±0.05和0.99±0.05，t＝9.850、10.087，P<0.01)，差异有统计学意义；双荧光素酶报告结果显示miR-618与CtBP2靶向结合(t＝6.573，P<0.05)，差异有统计学意义；功能回复实验结果显示共转染miR-618 inhibitor及si-CtBP2组可逆转单独干扰CtBP2后对胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的抑制作用。结论miR-618靶向CtBP2抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移。

简介：摘要目的探讨卷曲螺旋结构域蛋白137(CCDC137)在骨肉瘤组织中的表达水平，及对骨肉瘤细胞增殖、迁移及血管新生的影响。方法免疫印记及实时定量PCR实验用于检测CCDC137在肿瘤组织中的表达水平及小干扰RNA(siRNA)下调CCDC137后的沉默效率验证；噻唑蓝(MTT)及细胞计数试剂盒(CCK-8)实验用于检测CCDC137对骨肉瘤细胞增殖的影响。划痕实验及管状结构形成实验用于检测CCDC137对骨肉瘤细胞迁移及血管新生的影响；免疫荧光实验检测CCDC137对骨肉瘤细胞极化的影响，组间比较采用t检验。结果CCDC137在骨肉瘤组织(1.56±0.45)表达高于癌旁组织(0.99±0.28)，差异有统计学意义(t＝4.854，P<0.01)；下调CCDC137后抑制骨肉瘤细胞的增殖，两条siRNA抑制CCDC137表达后490 nm波长处吸光度值(0.22±0.18、0.23±0.16)低于对照组(0.46±0.16)，差异均有统计学意义(t1＝2.956，t2＝3.025，P<0.01)，CCK-8实验抑制CCDC137表达后吸光度值(0.16±0.12、0.18±0.14)低于对照组(0.37±0.18)，差异均有统计学意义(t1＝2.843，t2＝2.361，P<0.01)；下调CCDC137后抑制内皮细胞迁移，两条siRNA抑制CCDC137表达后迁移能力(62.67±7.51、54.67±2.52)低于对照组(81.33±6.11)，差异均有统计学意义(t1＝3.341，t2＝6.990，P<0.01)；两条siRNA沉默CCDC137后血管新生能力(2.33±0.40、2.63±0.32)低于对照组(5.73±0.55)，差异均有统计学意义(t1＝8.621，t2＝8.420，P<0.01)。下调CCDC137后骨肉瘤细胞极化(52.67±4.04)细胞数目低于对照组(83.33±4.51)，差异均有统计学意义(t＝8.772，P<0.01)；角度(35.27±10.56)低于对照组(64.27±12.66)，差异均有统计学意义(t＝6.812，P<0.01)。结论CCDC137能够促进骨肉瘤细胞增殖、迁移、血管新生及细胞极化。