简介：【摘要】 目的 本文主要围绕HBV感染所致慢加急性肝衰竭患者接受核苷（酸）类抗病毒药物治疗的效果进行研究。方法 抽取100例我院在2022年1月-2023年1月期间HBV感染所致慢加急性肝衰竭患者均分两组进行研究，针对不同组别采用常规抗 HBV 感染药物（参照组）以及核苷 ( 酸 ) 类抗病毒药物治疗（研究组），观察两组治疗效果。结果 研究组：治疗总有效率49（98.00%）、ALT指标（73.58±5.96）U/L、AST指标（80.43±6.01）U/L、TP指标（45.53±3.34）g/L、AFP指标（105.56±7.17）μg/L；参照组：治疗总有效率43（86.00%）、ALT指标（113.09±7.13）U/L、AST指标（115.06±5.38）U/L、TP指标（30.62±3.29）g/L、AFP指标（130.54±10.32）μg/L；两组数据对比，差异明显（P＜0.05）。结论 HBV感染所致慢加急性肝衰竭患者接受核苷（酸）类抗病毒药物治疗的效果显著，患者肝功能指标得到明显恢复，临床应用具有较高的安全性，显著的效果具有广泛应用价值。

简介：摘要目的探讨真菌游离DNA(cfDNA)聚合酶链反应(PCR)诊断侵袭性真菌感染的临床价值。方法本研究为前瞻性研究，选取2017年1月至2021年1月宁德市蕉城区医院检验科收治的120例真菌感染患者，男81例，女39例，年龄(52.33±2.69)岁，年龄范围为35~79岁。根据《侵袭性真菌感染诊断标准》将所有患者分为非侵袭性真菌感染组(n＝39)和侵袭性真菌感染组(n＝81)，比较两组患者的半乳甘露聚糖(GM)和cfDNA含量，并对GM和cfDNA的诊断效能进行分析。结果侵袭性真菌感染组患者的GM含量[(0.74±0.37)OD]高于非侵袭性真菌感染组[(0.21±0.05)OD]，差异有统计学意义(P<0.001)。侵袭性真菌感染组患者的cfDNA含量[(9 526.33±511.33)GE/ml]高于非侵袭性真菌感染组[(8 014.65±501.45)GE/ml]，差异有统计学意义(P<0.001)。cfDNA诊断的灵敏度(98.77%)显著高于GM诊断(86.42%)。结论真菌cfDNA PCR诊断侵袭性真菌感染的灵敏度较高，具有推广价值。

简介：AbstractThere is increasing evidence that cell-free DNA (cfDNA) in spent culture media (SCM) can be amplified for genetic testing. Therefore, this paper reviews the characteristics of cfDNA, including its fragment size, amount, origin, as well as some factors affecting the success rate of its amplification, together to provide researchers with a more comprehensive perspective on embryonic cfDNA. The origin of cfDNA in SCM is complicated and poses challenges to the interpretation of genetic test results. Advanced molecular techniques should distinguish between embryonic and contaminated DNA to maximize the success rate of amplification and analysis. Recent data showed that the type of culture medium, assisted hatching or not, the type of amplification kit, and fresh or thawed embryos were not related to the success rate of amplification, but the length of culture time might affect the success rate. The longer culture time, the more cfDNA is available in the SCM. Then we focused on the concordance between trophectoderm (TE), inner cell mass, whole embryo, and embryonic cfDNA. Despite successful amplification, the concordance between TE and embryonic cfDNA was low. In summary, non-invasive genetic testing using SCM could represent a major advance in future single embryo selection, however, contamination and timing for media collection are key factors affecting the results, and current non-invasive cfDNA testing should not be directly applied to clinical practice. Further research is needed to improve the methods used for testing techniques and genetic analysis to achieve greater accuracy and trace its origins before it can be used in the clinics.

简介：摘要目的分析广西汉族儿童IFNG基因DNA甲基化与乙型肝炎（乙肝）疫苗（HepB）免疫应答水平的关联性。方法采用非匹配病例对照方法，招募广西3家医院就诊的263名已完成HepB免疫程序的8~9月龄汉族儿童作为研究对象，将乙肝表面抗体浓度（抗-HBs）<100 mIU/ml设为病例组，≥100 mIU/ml设为对照组。采用多重PCR技术、重亚硫酸盐测序、使用Illumina平台对IFNG基因目标区域及其CpG位点进行DNA甲基化高通量测序。采用非条件logistic回归模型分析IFNG基因18个位点胞嘧啶-磷酸-鸟苷酸 DNA甲基化情况与HepB免疫应答水平的关联。结果病例组（104名）和对照组（159名）抗-HBs［M（Q1，Q3）］分别为62.34（30.06，98.88）mIU/ml和1 089.10（710.35，1 233.45）mIU/ml。病例组IFNG_1基因44和93位点甲基化水平差异高于对照组（P<0.05），非条件logistic回归模型显示，IFNG_1基因44位点（OR=1.18，95%CI：1.03~1.35）和93位点（OR=1.21，95%CI：1.07~1.38）DNA甲基化水平与HepB应答水平具有相关性。结论IFNG_1基因44和93位点DNA甲基化水平改变可能是影响广西汉族儿童HepB应答水平的相关因素。

简介：摘要目的探讨DNA甲基化与职业性噪声听力损失的关联。方法采用病例对照研究方法，从2006年建立的某钢铁厂噪声作业工人研究队列中，选择职业性噪声暴露听力损失病例为病例组，职业性噪声暴露听力正常人群为对照组。共纳入60例调查对象，其中病例组和对照组各30例。应用850K全基因组DNA甲基化芯片技术检测甲基化水平，采用R包champ进行差异甲基化位点（DMP）的显著性检验，采用R包champ的Bumphunter算法，进行差异甲基化区域（DMR）分析。采用clusterProfiler对基因列表进行GO和KEGG通路富集分析。结果两组研究对象在双耳高频平均听阈差异具有统计学意义（P<0.05），在年龄、吸烟情况、饮酒情况、高血压情况、体育锻炼和累积噪声暴露量方面差别均无统计学意义。DMP和DMR分析结果显示，病例组和对照组中检测了713875个位点，差异显著的甲基化位点439个，占比0.06%；检测了650个区域，差异显著的甲基化区域72个，占比11.08%。GO富集分析结果显示，与对照组相比，病例组在中枢神经系统投射神经元轴突发生、中枢神经系统神经元发育、中枢神经系统神经元轴索发生和中枢神经系统神经元分化4个通路差异具有统计学意义。KEGG富集分析结果显示，与对照组相比，病例组和对照组在鞘脂代谢、醛固酮的合成和分泌、初级胆汁酸生物合成通路差异具有统计学意义。结论职业性噪声听力损失的发生可能与中枢神经系统投射神经元轴突发生、中枢神经系统神经元发育、中枢神经系统神经元轴索发生、中枢神经系统神经元分化、鞘脂代谢、醛固酮的合成和分泌、初级胆汁酸生物合成等通路相关的基因表达调控或代谢有关的基因甲基化状态有关。

简介：摘要目的探讨先天性心脏病患儿体外循环术后肠道屏障功能损伤、细菌DNA移位及其与术后发生全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）之间的关系。方法收集2018年7月至2019年7月上海交通大学医学院附属儿童医院心胸外科收治的61例先天性心脏病行体外循环手术患儿，其中男29例，女32例；年龄为（744.8±947.8）d，年龄范围为2 d~14岁。按术后是否发生SIRS分为SIRS组及无SIRS组。术前和术后2 h、24 h采集静脉血，利用PCR技术进行细菌DNA检测，同时检测肠道损伤标志物二胺氧化酶及肠型脂肪酸结合蛋白，并观察术后是否发生SIRS。结果①所有患儿术前细菌PCR均为阴性，术后2 h（322.4±279.6 copies/μl）、术后24 h（366.6±294.9 copies/μl）细菌DNA拷贝数明显较术前升高，与术前相比差异均有显著性（P<0.001）；②体外循环术后2 h血清二胺氧化酶（148.5±93.2 mIU/ml）、肠型脂肪酸结合蛋白（7.8±7.2 ng/ml）水平较术前明显升高，24 h后开始下降，术后2 h、24 h与术前相比差异有显著性（P=0.012、P=0.0089）；③SIRS组术后24 h二胺氧化酶、肠型脂肪酸结合蛋白水平明显升高，与非SIRS组相比差异有显著性（P=0.0308、P=0.0282）。结论体外循环术后早期即可发生肠道细菌DNA移位，先天性心脏病体外循环术后SIRS与肠道细菌DNA移位有相关性。

简介：【摘要】目的：分析在临床诊断中实施乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测的应用价值。方法：将本院2020年2月～2022年6月期间收治的64例乙型肝炎病毒患者作为本次研究对象（其中HBsAg(+）、HBeAg（+）、抗-HBc（+）患者25例，HBsAg(+）、抗-HBe（+）、抗-HBc（+）患者23例，HBsAg（+）、抗-HBc（+）患者16例），对所有患者分别实施PCR检验HBV-DNA检验（研究组）及ELISA检验（参照组），比较两种检验技术的诊断价值。结果：两组检验诊断后对比的各项指标的差异较为显著（P＜0.05），统计学有意义。结论：在临床检验乙型肝炎病毒的过程中实施DNA实时荧光定量PCR检测的特异性、敏感度较高，能准确真实的反映HBV在体内的复制程度，为患者治疗方案的制定提供可靠的参考依据。

简介：摘要：目的：分析精液不液化患者精子DNA碎片（DFI）与精液常规参数的相关性。方法：选取2021年8月~2022年7月我院收治的114例精液不液化患者作为研究对象，按照《WHO人类精液检查与处理实验室手册（第五版）》，检测患者的精液常规参数（精子浓度、精子前向运动率、正常形态精子率），采用精子染色质扩散实验（SCD）检测DFI值，采用Pearson检验分析DFI指数与精液常规参数相关性。结果：＞40岁患者的DFI＜10%比例显著低于＜30岁、30~40岁，DFI 10%~20%比例、DFI＞20%比例显著高于＜30岁、30~40岁，30~40岁患者的DFI＜10%比例显著低于＜30岁，DFI 10%~20%比例显著高于＜30岁（P＜0.05）。DFI＜10%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率显著高于DFI 10%~20%、DFI＞20%，DFI 10%~20%患者的精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率显著高于DFI＞20%（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示，精液不液化患者的DFI值与精子浓度、正常形态精子率、精子前向运动率呈负相关性（r＜0，P＜0.001），与年龄呈正相关性（r>0，P＜0.001）。结论：精液不液化患者的DFI与年龄存在正相关性，与精液常规参数存在负相关性，DFI可作为评估精液不液化患者精液质量及生育能力的重要指标。

简介：摘要目的探讨Peplau理论下个案管理对乙型肝炎病毒(HBV)感染患者应对方式、服药依从性、心理弹性的影响。方法选取2018年8月至2020年8月该院HBV感染患者114例，按照入院顺序分对照组和观察组，各57例。对照组采取传统护理，观察组基于对照组采取Peplau理论下个案管理，连续干预1个月。观察两组服药依从性、护理满意度、干预前及干预1个月后心理弹性、应对方式、自我管理能力及生活质量。结果干预1个月后观察组回避、屈服评分低于对照组，面对评分高于对照组，疾病治疗管理、日常生活管理、心理社会管理和疾病信息管理评分高于对照组，坚韧、乐观、自强评分高于对照组，疾病、生理、心理和社会评分高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；观察组服药依从性及护理满意度高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论Peplau理论下个案管理可改善HBV感染患者应对方式，提高患者心理弹性及服药依从性，在增强患者自我管理能力，提高生活质量及护理满意度方面具有积极意义。

简介：【摘要】目的：研究EGF基因多态性与HBV相关原发性肝癌对化疗药物顺铂敏感性的关系。方法：选取2019年1月～2020年1月院内收治的原发性肝癌患者120例为观察对象，所有患者均应用顺铂药物化疗，化疗2周后进行效果评估。观察治疗有效与无效患者的肿瘤大小及分化程度；观察不同基因分型患者化疗有效率。结果：肿瘤大小以5cm进行区分，两组患者的化疗有效率并无差异性；分化程度方面，中高分化患者的化疗有效率为41.54%，与低分化患者的52.73%对比无差异性（P＞0.05）。rs3756261基因型患者的化疗有效率之间并无差异性，但化疗后复发率存在显著差异（P＜0.05）；rs11568835基因型中患者化疗有效率之间存在显著差异（P＜0.05），化疗后复发率之间无差异性。结论：EGF经活化NF-κB信号通路可影响原发性肝癌发生与发展。同时在EGF基因多态性对于患者化疗敏感性也可形成一定影响。

简介：摘要目的探讨相对线粒体DNA拷贝数（mitochondrial DNA copy number，mtDNA-CN）与燃煤污染型地方性氟中毒（简称燃煤型地氟病）的关联。方法2018年6月至2019年3月，采用横断面研究，在贵州省典型燃煤型地氟病病区毕节市选择482例燃煤型地氟病患者作为病例组；同时，在非病区长顺县选择212例健康人群作为对照组。通过问卷调查和体格检查收集两组人群基本信息、生活行为习惯等一般情况，采集外周静脉血血样，采用实时荧光定量PCR法检测外周血相对mtDNA-CN；应用二分类和无序多分类logistic回归等方法分析相对mtDNA-CN与燃煤型地氟病的相关性。结果对照组与病例组人群的体质指数（body mass index，BMI）及性别比例、婚姻状况、文化程度分布情况比较差异均有统计学意义（t = 7.91，χ2 = 5.11、13.33、34.32，P均< 0.05）；且对照组人群相对mtDNA-CN高于病例组[中位数（四分位数）：202（138，292）比131（96，217），Z = - 7.80，P < 0.001]。二分类logistic回归分析结果[比值比（95%置信区间）]显示，文化程度[小学：0.572（0.377 ~0.868）、初中及以上：0.292（0.174 ~ 0.493）]、相对mtDNA-CN[131 ~ < 217：0.265（0.144 ~ 0.488）、≥217：0.183（0.100 ~ 0.335）]、BMI[1.222（1.142 ~ 1.307）]均为燃煤型地氟病患病风险的影响因素（P均< 0.05）。在不同BMI及文化程度亚组中，相对mtDNA-CN与燃煤型地氟病患病风险均呈显著负相关（P趋势均< 0.05）；相对mtDNA-CN与人群BMI、文化程度对燃煤型地氟病均不存在交互效应（P交互均> 0.05）。无序多分类logistic回归分析结果显示，相对mtDNA-CN与氟斑牙、氟骨症的患病风险均呈显著负相关（P趋势均< 0.05）。结论相对mtDNA-CN越高，人群燃煤型地氟病患病风险越低，提示mtDNA-CN可能是燃煤型地氟病的潜在生物标志物。

简介：摘要7岁患儿以左眼结膜出血、凝血因子减少及血小板减少为首发表现，影像检查发现颅面、肺间质和脾脏受侵犯，因不能手术未获标本进行病理检查。丙种球蛋白、糖皮质激素等治疗无效，西罗莫司初始治疗有部分效果但后续又加重，改用曲美替尼治疗后病情缓解。外周血循环肿瘤细胞DNA检测发现NRAS 基因c.182A>G（p.Q61R）突变，确诊为卡波西样淋巴管瘤病。口服曲美替尼治疗11个月，左眼结膜出血未再反复，脾脏缩小，肺间质病变逐渐好转。

简介：摘要目的评价DNA甲基转移酶在脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用。方法健康雄性C57BL/6小鼠48只，6~8周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为4组(n＝12)：假手术组(Sham组)、假手术+DNA甲基转移酶抑制剂组(Sham+5-Aza组)、脓毒症组(Sepsis组)和脓毒症+DNA甲基转移酶抑制剂组(Sepsis+5-Aza组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症小鼠急性肺损伤模型。于CLP后24 h时处死小鼠取肺组织，提取DNA利用比色法测定全基因组DNA甲基化水平，提取RNA采用实时荧光定量PCR法检测DNA甲基转移酶(DNMTl、DNMT3a、DNMT3b)的mRNA表达，确定肺湿重/干重比值，HE染色观察肺组织病理学结果，采用ELISA法测定IL-6、TNF-α、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、MDA含量、SOD和过氧化氢酶(CAT)活性。结果与Sham组比较，Sepsis组和Sepsis+5-Aza组小鼠CLP后24 h时肺组织全基因组甲基化水平升高，DNMT1和DNMT3a的mRNA表达上调，肺组织病理学损伤评分和肺湿重/干重比值升高，IL-6、TNF-α、HMGB1和MDA含量升高，SOD和CAT活性降低(P<0.05)，Sham+5-Aza组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与Sepsis组比较，Sepsis+5-Aza组小鼠肺组织全基因组甲基化水平降低，DNMT1和DNMT3a的mRNA表达下调，肺组织病理学损伤评分、肺湿重/干重比值、IL-6、TNF-α、HMGB1和MDA含量降低，SOD和CAT活性增加(P<0.05)。结论DNMT1和DNMT3a介导的DNA高甲基化参与了脓毒症小鼠急性肺损伤的过程。

简介：摘要头颈鳞状细胞癌预后较差，首诊多为中晚期，患者生活质量差，复发、转移风险较高，故而亟待研发一种能够动态监测肿瘤进展的工具。液体活检作为一种肿瘤检测手段，以其非侵入性和灵活性受到极大关注。循环肿瘤细胞和循环肿瘤DNA是其中具有代表性的两种液体活检标志物。随着检测方法的进步，该技术与多种恶性肿瘤临床诊疗的研究取得了一定的进展。本文旨在介绍这两种标志物的相关概念、检测方法以及在头颈鳞状细胞癌中的应用现状。

简介：【摘要】目的  观察DNA免疫吸附治疗儿童重症系统性红斑狼疮护理干预效果。方法  研究DNA免疫吸附治疗的30例儿童重症系统性红斑狼疮（2017年1月~2022年6月收治）进行本次实验探究，给予所有患儿DNA免疫吸附治疗，同时对患者进行护理干预，观察患儿治疗效果、治疗过程中不良反应情况、治疗前及治疗后患儿ANA滴度及ds-DNA抗体滴度变化情况、治疗及护理干预前后患儿心理状态评分与生活质量评分变化情况。结果 患儿治疗效果较好，痊愈率为66.67%，总有效率为93.33%；患儿治疗过程中未出现不良反应；治疗及护理后患儿ANA滴度及ds-DNA抗体滴度均改善，p＜0.05；患儿治疗与护理干预后心理状态评分与生活质量评分均显著改善，p＜0.05。结论  DNA免疫吸附治疗儿童重症系统性红斑狼疮取得较好临床效果，同时给予患者有效的护理干预有助于帮助患者病情恢复，且未见不良反应，治疗安全可靠，患儿经治疗与护理后，心理状态佳，且生活质量较好，值得临床应用以及推广。

简介：无

简介：摘要糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病的主要并发症之一，也是终末期肾功能衰竭的主要原因。代谢记忆，即之前存在的高血糖增加了发生DN的风险，造成了长期的代谢紊乱。已有研究显示，表观遗传学与代谢记忆存在一定的相关性。表观遗传学是指在不改变核苷酸序列的前提下，引起基因表达模式的可遗传性变化，包括DNA甲基化、组蛋白的共价修饰和非编码RNAs。最近发现一些基因，AFF3、RGMA-MCTP2、SP3-CDCA7及其变异体与糖尿病肾病的相关性，已经达到全基因组性显著，更加说明表观遗传对糖尿病肾病发生发展的影响。本综述主要讨论糖尿病肾病患者的体液(包括唾液、尿液及外周血液)以及肾组织中DNA甲基化改变的发现和进展，进一步了解表观遗传在人类DN中的机制作用，并为DN表观遗传学的新兴课题提供新观点。

简介：摘要目的原核表达人腺病毒（HAdV）7型DNA结合蛋白（DBP），制备DBP蛋白多克隆抗体。方法合成HAdV-7 DBP基因并克隆至pET30a载体，转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，IPTG诱导进行原核表达。经镍离子金属螯合层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体，使用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）测定该抗体效价；使用Western blotting方法与间接免疫荧光方法（IFA）检测抗体特异性。以rDBP包被ELISA反应板使用间接ELISA对HAdV感染儿童急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体进行检测。结果成功构建HAdV-7 DBP原核表达载体，表达的重组DBP蛋白经镍柱亲和层析纯化后纯度>95%，间接ELISA方法测得制备的多克隆抗血清的抗体效价为1∶1 024 000，Western blotting方法和IFA方法显示该抗体具有较高的特异性，间接ELISA方法检测HAdV感染儿童 急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体的阳性率分别为50.0%（19/38）和63.2%（24/38）。结论成功构建HAdV-7 DBP蛋白的原达表达载体，获得了HAdV-7型DBP重组蛋白和高效价的兔多克隆抗体。

简介：摘要目的探讨特发性肺纤维化急性加重患者血浆天冬氨酸蛋白酶A(novel aspartie proteinase A, Napsin A)、表面活性蛋白A（surfactant protein A, SP-A）、表面活性蛋白D（surfactant protein D, SP-D）、血浆微小RNA29b-3p（miR29b-3p）、miR30c-5p、血浆外泌体miR21-5p和血浆游离线粒体DNA（mitochondrial DNA, mtDNA）的表达变化及其意义。方法本研究为前瞻性研究，纳入2014年5月至2019年10月在河南省胸科医院就诊的特发性肺纤维化患者，记录其临床表现、肺功能情况和高分辨率CT。采用ELISA法检测血浆Napsin A、SP-A和SP-D，采用RT-PCR法检测血浆外泌体miR21-5p、血浆miR29b-3p、miR30c-5p和mtDNA。采用方差分析、非参数检验和卡方检验比较两组间上述指标的表达差异。Logistic回归分析AE-IPF的预测因素，并做ROC曲线分析上述指标诊断AE-IPF的价值。结果本研究共纳入45例特发性肺纤维化患者，其中男性37例，女性8例，年龄为（63.1±8.5）岁。两组间年龄、性别及疾病构成进行比较，差异无统计学意义（均P>0.05）。AE-IPF组游离线粒体DNA表达水平高于IPF组[10 143.48（8 045.85，12 609.65）copies/μL vs. 6 404.22（2 671.50，9 386.00） copies/μL，P<0.05]。AE-IPF组的抗"O"抗体（ASO）水平高于IPF组[（88.04±52.25）IU/mL vs.（32.38±19.91）IU/mL，P<0.01]。Logistic回归结果显示ASO是发生AE-IPF的独立预测因子（OR=1.068，95%CI：1.007~1.131，P<0.05）。联合mtDNA和ASO作ROC曲线，曲线下面积为0.884，敏感度为87.5%，特异度为85.7%。结论IPF急性加重时，mtDNA及ASO水平均升高，ASO可作为AE-IPF发生的独立预测因子。

简介：【摘要】 目的 比较CD4+ CD25+ FoxP3+ 和CD4+ CD25+ CD127-/low 两种设门方法对CD4+ CD25+调节性T细胞( T reg) 细胞的界定效果, 并探讨HBV感染者外周血中T reg水平的表达及其临床意义。方法 选择慢性乙型肝炎患者74例, HBV携带者36例, 非活动性HBsAg携带者36例, 正常对照者40例, 采用CD4+ CD25+ CD127-/low设门方法用流式细胞仪进行检测, 其中正常对照组和26例慢性乙型肝炎患者同时采用CD4+ CD25+ FoxP3+设门进行检测并分析。结果 采用CD4+ CD25+ CD127-/low设门方法检测外周血T reg与CD4+ CD25+ FoxP3+设门方法在正常组和患者组均呈正相关( r=0.408, P