简介：摘要目的观察椎基底动脉延长扩张症(VBD)大鼠血管中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和巨噬细胞标志物MAC387表达的变化，探讨瑞舒伐他汀对VBD的治疗作用及机制。方法将60只SD大鼠按随机数字法机分为3组：假手术组、VBD模型组和瑞舒伐他汀干预组，每组20只。后2组大鼠通过枕大池注入0.3 μL(1.5 U/μL)弹性蛋白酶以制备VBD模型，假手术组大鼠注入等量生理盐水。造模后24 h瑞舒伐他汀干预组大鼠给予5 mg/kg瑞舒伐他汀灌胃，1次/d，连续4周，其余2组大鼠每天给予等量蒸馏水灌胃。测量并比较各组大鼠的椎基底动脉弯曲扩张程度，采用Western blotting和免疫荧光染色分别检测椎基底动脉中JNK、MMP-9和MAC387的表达。结果瑞舒伐他汀干预组、VBD模型组均有14只大鼠造模成功。与假手术组比较，VBD模型组、瑞舒伐他汀干预组大鼠的基底动脉直径增加，基底动脉迂曲指数增加，差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组相比，VBD模型组、瑞舒伐他汀干预组大鼠椎基底动脉中JNK、MMP-9、MAC387的表达均增多，差异均有统计学意义(P<0.05)；与VBD模型组相比，瑞舒伐他汀干预组大鼠椎基底动脉中JNK、MMP-9、MAC387的表达均减少，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论瑞舒伐他汀可延缓VBD的进展，其机制可能与抑制炎症反应有关。

简介：【摘要】目的：探究冠心病心绞痛（CHD）患者采取瑞舒伐他汀+阿托伐他汀的治疗效果。方法：择本院96例患者，随机分为对照（基础治疗）、研究（瑞舒伐他汀+阿托伐他汀），对比治疗结局。结果：治疗后，研究组治疗效果、临床指标更优，差异显著，P＜0.05。结论：CHD患者采取瑞舒伐他汀+阿托伐他汀治疗，临床价值高。

简介：摘要目的探讨OX40L作为H7N9全病毒灭活疫苗(whole-virion inactivated vaccine，WIV)免疫佐剂的保护效果。方法将50只BALB/c小鼠随机分为5组进行肌肉免疫：未免疫组(对照组)、单独疫苗组(1.5 μg WIV)、佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)。免疫后21 d，通过ELISA和血凝抑制(hemagglutination inhibition，HI)试验检测免疫小鼠血清中各类抗体水平，并使用50×半数致死量(median lethal dose，LD50)的H7N9流感病毒适应株攻击小鼠，记录小鼠体重变化及存活率，以评价OX40L/Fc与H7N9 WIV共免疫后的保护效果。免疫后7 d，通过流式细胞术探究OX40L佐剂效应的机制。结果与单独疫苗组相比较，共免疫OX40L/Fc可使小鼠血清中的特异性IgG抗体水平显著升高，3组佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)的抗体几何平均滴度(lgGMT)分别为3.79、4.40和4.20。共免疫显著增加了IgG1和IgG2a抗体的滴度，但对Th1/Th2免疫应答平衡没有显著影响。与单独疫苗组相比较，共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc小鼠的HI抗体水平分别为6.25±0.50和5.70±0.97，差异有统计学意义(P<0.05)。共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc能够有效保护80%和75%的小鼠抵抗致死剂量病毒的攻击，损失的体重少于单独疫苗组，1.8 μg OX40L/Fc为最佳浓度。流式细胞术显示，与单独疫苗组相比，OX40L(0.6/1.8/3.0 μg)能够促进趋化因子受体CXCR5和程序性细胞死亡蛋白PD-1高效表达，增强H7N9 WIV免疫后淋巴结中滤泡辅助性T(Tfh)细胞的增殖(P均<0.05)。结论OX40L能够通过增殖Tfh细胞以增强H7N9 WIV诱导的抗体反应。

简介：摘要目的探讨磷酸化叉头框O4型（phosphorylated forkhead box subtype O4, p-FoxO4）在H9c2心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation, H/R）损伤过程中的作用。方法H9c2细胞正常培养24 h后，均匀接种于6孔板中，密度为4.5×105个/ml，每组≥3次重复，按照随机数字表法分为4组：对照组（Control组）、缺氧1 h复氧1 h组（H1R1组）、缺氧1 h复氧3 h组（H1R3组）和缺氧1 h复氧6 h组（H1R6组）。采用细胞增殖-毒性检测法检测4组细胞相对存活率；实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction, qPCR）法检测叉头框O4型（forkhead box subtype O4, FoxO4）、Bcl-2细胞死亡的相互作用介质（Bcl-2 interacting mediator of cell death, Bim）、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bcl2-Associated X, Bax）的mRNA含量，以此确定最佳H/R时间点。Control组与H1R1组分别通过Hoechst染色检测细胞凋亡程度，Western blot法检测FoxO4、p-FoxO4、Bim、Bcl-2和Bax蛋白含量。将6~8周C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组（每组3只）：假手术组（sham组）、缺血30 min再灌注3 h组（R3组）、缺血30 min再灌注6 h组（R6组）、缺血30 min再灌注12 h组（R12组）、缺血30 min再灌注24 h组（R24组）。采用qPCR法检测结扎小鼠左前降支后导致缺血的左心室前壁的FoxO4、Bim、Bcl-2和Bax的mRNA含量。结果与Control组比较，H1R1组、H1R3组和H1R6组细胞相对生存率下降，H1R1组最低（P<0.05）；与H1R1组比较，H1R3组和H1R6组细胞相对存活率升高（P<0.05）；与H1R3组比较，H1R6组细胞相对存活率升高（P<0.05）。与Control比较，H1R1组、H1R3组、H1R6组FoxO4 mRNA表达增加（P<0.05），H1R1组Bim mRNA表达增加（P<0.05），H1R1组Bcl-2 mRNA表达降低（P<0.05），H1R1组Bax mRNA表达增加（P<0.05），H1R3组、H1R6组Bax mRNA表达减少（P<0.05）；与H1R1组比较，H1R3组、H1R6组Bim mRNA表达和Bax mRNA表达降低（P<0.05）。与Sham组比较，R12组、R24组FoxO4 mRNA含量增加（P<0.05），R6组Bim mRNA减少（P<0.05），R24组Bim mRNA含量增加（P<0.05），R3组、R12组、R24组Bcl-2 mRNA含量减少（P<0.05）；R6组和R24组Bax mRNA含量增加（P<0.05）；与R3组比较，R12组和R24组FoxO4 mRNA含量增加（P<0.05），R12组和R24组Bim mRNA含量增加（P<0.05），R6组、R12组和R24组Bax mRNA含量增加（P<0.05）。与R6组比较，R12组和R24组FoxO4 mRNA含量及Bim mRNA含量增加（P<0.05）；与R12组比较，R24组FoxO4 mRNA、Bim mRNA、Bax mRNA含量增加（P<0.05）。与Control组比较，H1R1组出现较多核固缩、高亮的凋亡细胞，凋亡率差异有统计学意义（P<0.05）。与Control组比较，H1R1组FoxO4、p-FoxO4、Bim、Bax蛋白含量增高，Bcl-2蛋白含量降低（P<0.05）。结论p-FoxO4可能通过调控细胞凋亡内在途径参与H9c2心肌细胞的H/R损伤。

简介：摘要目的分析中国9个长寿地区65岁及以上人群中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）与抑郁风险的关联。方法研究对象来自2017—2018年在我国9个长寿地区开展的“老年健康生物标志物队列研究”，最终将2 018名中性粒细胞计数、淋巴细胞计数和抑郁状态数据完整的65岁及以上人群纳入研究。通过问卷调查和体格检测，收集调查对象的人口学特征、行为生活方式、健康状况等信息；同时收集调查对象的空腹静脉血以检测淋巴细胞、中性粒细胞等水平。根据调查对象NLR的四分位数将对象分为Q1、Q2、Q3、Q4四组，采用logistic回归模型分析NLR与抑郁症状的关联。结果2 018名调查对象年龄为（82.60±10.73）岁，其中男性1 032名（51.14%），抑郁症状检出率19.33%（390名）。多因素logistic回归模型分析结果显示，调整相关混杂因素后，与NLR的Q1组相比，Q2、Q3、Q4组检出抑郁症状的风险较高［OR（95%CI）值分别为1.47（0.99~2.19）、1.67（1.13~2.47）和1.95（1.32~2.89）］。结论中国9个长寿地区65岁及以上老年人NLR水平与抑郁症状患病风险存在正向关联。

简介：【摘要】目的 对人肺腺癌吉非替尼获得性耐药株H1975细胞和敏感株PC9细胞miRNA谱在表达上的不同进行对比。 方法 使用特定芯片先对H1975细胞进行检测，再检测PC9细胞miRNA表达谱，经特定软件筛选表达差异超出5倍的miRNA，对存在差异者可能靶基因进行分析，通过实时定量PCR技术对芯片检测结果予以验证。 结果 22个H1975细胞株miRNA表达上调超出5倍，24个表达下调在5倍以上；表达异常的33个miRNA有潜在靶基因。 结论 H1975对吉非替尼耐药，可能受miRNA谱异常表达影响，后者可能在调控靶基因的过程中参与获得性耐药。

简介：摘要目的探讨丙泊酚介导miR-137/FGF9通路对人黑色素瘤细胞A375增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法体外培养A375细胞，采用MTT法确定丙泊酚对A375细胞的半数抑制浓度和半数抑制时间，lipofectamine法分别将miR-137 mimics和miR-137 inhibitors转染到A375细胞。将A375细胞分为对照组、丙泊酚组、miR-137 mimics组、丙泊酚+miR-137 mimics组、miR-137 inhibitors组和丙泊酚+miR-137 inhibitors组。选用最佳浓度和时间分别进行相应处理后用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-137和FGF9 mRNA表达，同时Transwell法检测细胞体外侵袭和迁移能力。结果随着丙泊酚浓度增加，A375细胞增殖率降低，选80 μmol/L作为半数抑制浓度；随着丙泊酚作用时间的增长，A375细胞增殖率降低，选48 h作为半数抑制时间。与对照组比较，丙泊酚可以促进miR-137 mRNA表达，抑制FGF9 mRNA表达，抑制A375细胞侵袭和迁移能力(P<0.05)；miR-137 mimics可以促进miR-137 mRNA表达，抑制FGF9 mRNA表达，抑制A375细胞侵袭和迁移能力，同时给予丙泊酚干预后，促进miR-137 mRNA表达、抑制FGF9 mRNA表达、抑制A375细胞侵袭和迁移能力的效果更显著(P<0.05)；miR-137 inhibitors可以抑制miR-137 mRNA表达，促进FGF9 mRNA表达，促进A375细胞侵袭和迁移能力(P<0.05)，同时给予丙泊酚干预后，抑制miR-137 mRNA表达、促进FGF9 mRNA表达、促进A375细胞侵袭和迁移能力的效果受到一定的抑制(P<0.05)。结论丙泊酚对人黑色素瘤细胞A375增殖、侵袭及迁移能力具有明显的抑制作用，其机制可能与丙泊酚抑制miR-137/FGF9通路的激活有关。

简介：摘要目的探讨急性髓系白血病（AML）自发缓解的临床特点及可能的机制。方法回顾性分析郑州大学第一附属医院诊治的1例伴有MLL-AF9基因重排和肝功能损伤的AML自发缓解患者的临床资料，并进行相关文献报道病例汇总分析。结果该患者伴有MLL-AF9基因重排，经历了肺部感染、发热、肝功能损伤，治疗上给予抗感染、输注血制品，未经化疗，患者获完全缓解（CR），随访35个月，仍处于CR，期间伴有轻度间接胆红素升高。1990年至2021年6月文献报道的有骨髓检测支持的AML（非急性早幼粒细胞白血病）自发缓解患者56例，与本次报道的1例汇总分析，共57例患者，其中男37例，女20例，中位年龄51（20~83）岁，中位缓解时间为5个月，52例患者获得CR，5例具有染色体核型资料的长期缓解且至今未复发的病例，3例为正常染色体核型，2例伴有t（9;11）（q21;q23）异常。结论AML自发缓解罕见，可能与免疫抑制、基因均有关。

简介：摘要目的探讨丙泊酚介导miR-137/FGF9通路对人黑色素瘤细胞A375增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法体外培养A375细胞，采用MTT法确定丙泊酚对A375细胞的半数抑制浓度和半数抑制时间，lipofectamine法分别将miR-137 mimics和miR-137 inhibitors转染到A375细胞。将A375细胞分为对照组、丙泊酚组、miR-137 mimics组、丙泊酚+miR-137 mimics组、miR-137 inhibitors组和丙泊酚+miR-137 inhibitors组。选用最佳浓度和时间分别进行相应处理后用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-137和FGF9 mRNA表达，同时Transwell法检测细胞体外侵袭和迁移能力。结果随着丙泊酚浓度增加，A375细胞增殖率降低，选80 μmol/L作为半数抑制浓度；随着丙泊酚作用时间的增长，A375细胞增殖率降低，选48 h作为半数抑制时间。与对照组比较，丙泊酚可以促进miR-137 mRNA表达，抑制FGF9 mRNA表达，抑制A375细胞侵袭和迁移能力(P<0.05)；miR-137 mimics可以促进miR-137 mRNA表达，抑制FGF9 mRNA表达，抑制A375细胞侵袭和迁移能力，同时给予丙泊酚干预后，促进miR-137 mRNA表达、抑制FGF9 mRNA表达、抑制A375细胞侵袭和迁移能力的效果更显著(P<0.05)；miR-137 inhibitors可以抑制miR-137 mRNA表达，促进FGF9 mRNA表达，促进A375细胞侵袭和迁移能力(P<0.05)，同时给予丙泊酚干预后，抑制miR-137 mRNA表达、促进FGF9 mRNA表达、促进A375细胞侵袭和迁移能力的效果受到一定的抑制(P<0.05)。结论丙泊酚对人黑色素瘤细胞A375增殖、侵袭及迁移能力具有明显的抑制作用，其机制可能与丙泊酚抑制miR-137/FGF9通路的激活有关。

简介：摘要目的探讨急性髓系白血病（AML）自发缓解的临床特点及可能的机制。方法回顾性分析郑州大学第一附属医院诊治的1例伴有MLL-AF9基因重排和肝功能损伤的AML自发缓解患者的临床资料，并进行相关文献报道病例汇总分析。结果该患者伴有MLL-AF9基因重排，经历了肺部感染、发热、肝功能损伤，治疗上给予抗感染、输注血制品，未经化疗，患者获完全缓解（CR），随访35个月，仍处于CR，期间伴有轻度间接胆红素升高。1990年至2021年6月文献报道的有骨髓检测支持的AML（非急性早幼粒细胞白血病）自发缓解患者56例，与本次报道的1例汇总分析，共57例患者，其中男37例，女20例，中位年龄51（20~83）岁，中位缓解时间为5个月，52例患者获得CR，5例具有染色体核型资料的长期缓解且至今未复发的病例，3例为正常染色体核型，2例伴有t（9;11）（q21;q23）异常。结论AML自发缓解罕见，可能与免疫抑制、基因均有关。

简介：摘要目的探讨脓毒症患儿行连续肾脏替代疗法(CRRT)前应用9 g/L生理盐水液体复苏对后期肾功能及炎症因子水平的影响。方法选取2017年2月至2019年10月期间我院收治的105例脓毒症行CRRT治疗的患儿作为研究对象，按随机平行对照法分为两组，对照组52例CRRT前给予羟乙基淀粉液体复苏，观察组53例给予9 g/L生理盐水液体复苏，比较两组患儿肾功能指标(包括血清尿素氮、肌酐及尿量等)、炎症因子水平[包括C-反应蛋白(CRP)、前降钙素原(PCT)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、急性肾损伤(AKI)发生率和生存率。结果两组治疗后血清尿素氮、肌酐均比治疗前降低，尿量均比治疗前增加，并且观察组治疗效果明显优于对照组，两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后CRP、PCT和TNF-α均比治疗前降低，观察组明显低于对照组，两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。观察组AKI发生率为15.09%，生存率为71.69%，对照组AKI发生率为32.69%，生存率为48.08%，两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论9 g/L生理盐水液体复苏可以改善脓毒症患儿的血流动力学，联合应用CRRT治疗可明显改善患儿的肾功能，降低炎性因子水平和AKI发生率，提高患儿的生存率，值得在临床上推广应用。

简介：摘要目的观察microRNA-21（miR-21）敲除对耐伊马替尼的人慢性髓性白血病细胞株K562/G01细胞在增殖、药物敏感性等方面的影响，初步探讨miR-21影响K562/G01细胞伊马替尼敏感性的可能机制。方法运用CRISPR/Cas9技术敲除K562/G01细胞的miR-21，经PCR筛选、Sanger测序鉴定和实时定量PCR检测获得miR-21敲除的单细胞克隆。扩增培养后，采用MTT法、细胞克隆形成实验检测miR-21敲除对K562/G01细胞增殖的影响。使用伊马替尼处理细胞后，用MTT法和Annexin Ⅴ-APC/7-AAD双染流式细胞检测法观察敲除miR-21后K562/G01细胞对伊马替尼的敏感性的变化。Western blot法检测miR-21敲除前后K562/G01细胞PTEN、AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K、P210BCR-ABL、p-P210BCR-ABL蛋白表达量的变化。结果成功构建了3个miR-21敲除的K562/G01单细胞克隆，CRISPR/Cas9介导的突变效率为7.12%~8.11%。miR-21敲除使K562/G01细胞的增殖受抑，野生型和1#、2#、6#单细胞克隆的克隆形成率依次为（57.67±8.25）%、（26.94±5.36）%、（7.17±2.11）%、（31.50±3.65）%，差异有统计学意义（P<0.05）。miR-21敲除使K562/G01细胞对伊马替尼的敏感性增加，野生型和1#、2#、6#单细胞克隆对伊马替尼的IC50值分别为（21.92±1.36）µmol/ml、（3.98±0.39）µmol/ml、（5.38±1.01）µmol/ml、（9.24±1.36）µmol/ml，差异有统计学意义（P<0.05）。miR-21敲除后，其靶基因PTEN的蛋白表达水平未见明显变化，但PI3K、AKT信号分子的活化受到抑制，并且P210BCR-ABL、p-P210BCR-ABL蛋白表达也下调。结论miR-21敲除抑制K562/G01细胞增殖，提高其对伊马替尼的敏感性，这可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路和BCR-ABL表达实现的。

简介：摘要目的观察microRNA-21（miR-21）敲除对耐伊马替尼的人慢性髓性白血病细胞株K562/G01细胞在增殖、药物敏感性等方面的影响，初步探讨miR-21影响K562/G01细胞伊马替尼敏感性的可能机制。方法运用CRISPR/Cas9技术敲除K562/G01细胞的miR-21，经PCR筛选、Sanger测序鉴定和实时定量PCR检测获得miR-21敲除的单细胞克隆。扩增培养后，采用MTT法、细胞克隆形成实验检测miR-21敲除对K562/G01细胞增殖的影响。使用伊马替尼处理细胞后，用MTT法和Annexin Ⅴ-APC/7-AAD双染流式细胞检测法观察敲除miR-21后K562/G01细胞对伊马替尼的敏感性的变化。Western blot法检测miR-21敲除前后K562/G01细胞PTEN、AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K、P210BCR-ABL、p-P210BCR-ABL蛋白表达量的变化。结果成功构建了3个miR-21敲除的K562/G01单细胞克隆，CRISPR/Cas9介导的突变效率为7.12%~8.11%。miR-21敲除使K562/G01细胞的增殖受抑，野生型和1#、2#、6#单细胞克隆的克隆形成率依次为（57.67±8.25）%、（26.94±5.36）%、（7.17±2.11）%、（31.50±3.65）%，差异有统计学意义（P<0.05）。miR-21敲除使K562/G01细胞对伊马替尼的敏感性增加，野生型和1#、2#、6#单细胞克隆对伊马替尼的IC50值分别为（21.92±1.36）µmol/ml、（3.98±0.39）µmol/ml、（5.38±1.01）µmol/ml、（9.24±1.36）µmol/ml，差异有统计学意义（P<0.05）。miR-21敲除后，其靶基因PTEN的蛋白表达水平未见明显变化，但PI3K、AKT信号分子的活化受到抑制，并且P210BCR-ABL、p-P210BCR-ABL蛋白表达也下调。结论miR-21敲除抑制K562/G01细胞增殖，提高其对伊马替尼的敏感性，这可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路和BCR-ABL表达实现的。

简介：摘要目的观察溶瘤腺病毒差异显示编码3(DD3)-ZD55-精子相关抗原9(SPAG9)在体外对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞的治疗效果，并探讨作用机制。方法将LNCaP细胞分为4组进行干预，分别为磷酸盐缓液组(PBS)、病毒对照组[ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)，10 MOI]、病毒治疗组(ZD55-SPAG9，10 MOI)、DD3启动子调控组(DD3-ZD55-SPAG9，10 MOI)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率；Transwell检测细胞迁移和侵袭能；蛋白质印迹法(Western blot)检测SPAG9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和腺病毒早期区1A基因(E1A)的表达。多组之间采用方差分析，进一步组间比较采用SNK法。结果CCK-8结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组LNCaP细胞存活率均显著低于PBS组[(73.80 1.43)%、(73.66 2.19)%、(81.79 2.59)%比100%，F＝1038.210，P<0.01]，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞存活率降低更为显著，但两者之间存活率差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell迁移结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组小室底膜细胞数明显低于PBS组[(52.57±5.57)、(48.67±4.04)、(69.67±6.02)比(109.06±9.54)，F＝384.466，P<0.05]，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞迁移能力降低更为显著，且两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。侵袭实验结果，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组穿透Matrigel胶，进入小室下层的细胞数目明显少于PBS组[(58.33±3.79)、(55.36±7.51)、(78.06±4.36)比(115.67±11.59)，F＝305.885，P<0.01]，提示细胞侵袭能力显著降低，ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞侵袭能力降低更为显著。Western blot结果显示，与PBS组比较，DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组内SPAG9蛋白表达下调[(0.32±0.07)、(0.47±0.09)、(0.66±0.05)比1，F＝594.522，P<0.01]，E-cadherin表达上调[(4.80±0.34)、(3.80±0.35)、(2.81±0.52)比1，F＝482.275，P<0.01]，Vimentin表达下调[(0.33±0.04)、(0.46±0.06)、(0.53±0.05)比1，F＝903.749，P<0.01]，MMP-2表达下调[(0.30±0.03)、(0.44±0.05)、(0.60±0.05)比1，F＝1 540.940，P<0.01]，上述变化在ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组内更为显著。WPMY-1细胞内E1A在DD3-ZD55-SPAG9组内的表达明显低于ZD55-SPAG9和ZD55-EGFP组。结论溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SPAG9在体外可以有效降低LNCaP细胞的存活率，并抑制迁移和侵袭，并对正常细胞具有更高的安全性。

简介：摘要目的探讨高糖环境下基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对巨噬细胞生物学功能的影响及其机制。方法体外建立RAW264.7巨噬细胞系，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测SDF-1对巨噬细胞的毒性。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测高糖(22.5 mmol/L)和正常糖(5.5 mmol/L)对巨噬细胞相关蛋白表达的影响。实验分组：A组(对照)、B组(SDF-1)、C组(磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路抑制剂：LY294002)、D组(SDF-1+ LY294002)，Transwell实验检测巨噬细胞的迁移能力，Western blot检测各组相关蛋白的表达变化。两组间比较采用非配对t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果CCK-8实验结果显示，各组间比较差异无统计学意义(F＝0.464，P>0.05)。高糖组巨噬细胞SDF-1、血管内皮生长因子(VEGF)、SDF-1的特异受体(CXCR4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达低于正常糖组(SDF-1、VEGF、CXCR4、MMP-9组间比较，t＝50.510、11.020、27.660、55.350，均P<0.05)。Transwell实验中，A、B、C、D组迁移巨噬细胞数分别为(86.630±4.096)、(144.300±5.044)、(59.000±2.646)、(65.670±4.256)个。与A组比较，B组及C组差异有统计学意义(t＝21.460、5.574，均P<0.05)。此外，SDF-1可以增加巨噬细胞CXCR4、PI3K、蛋白激酶B(Akt)、MMP-9、VEGF的表达，而LY294002可以减少上述蛋白的表达(Western blot检测各蛋白，B组：CXCR4、PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较，t＝44.690、5.393、4.640、13.250、8.551，均P<0.05；C组：PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较，t＝13.430、5.287、4.381、45.510,均P<0.05)。结论高糖环境可以影响巨噬细胞SDF-1、VEGF、CXCR4及MMP-9的表达，SDF-1可能通过上调PI3K/Akt通路促进巨噬细胞分泌MMP-9及VEGF。

简介：摘要目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（Tim-3）及半乳糖凝集素9（Gal-9）在初治急性淋巴细胞白血病（ALL）患者骨髓细胞中的表达水平、临床意义和预后评估价值。方法收集2016年9月至2018年9月新疆医科大学第一附属医院30例初诊ALL患者的骨髓标本，选取同期在该院体检的20名健康志愿者外周血标本作为对照。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Tim-3、Gal-9 mRNA相对表达水平。结合患者临床资料，比较不同临床病理特征ALL患者Tim-3、Gal-9 mRNA表达差异；采用Kaplan-Meier法对ALL患者总生存（OS）进行分析，采用Cox比例风险回归模型进行单因素、多因素生存分析。结果ALL患者在初诊时Tim-3、Gal-9 mRNA相对表达水平均高于健康对照组（2.86±0.47比0.45±0.05，9.79±0.58比0.96±0.23），差异均有统计学意义（t＝21.65，P<0.05；t＝63.24，P<0.05）。不同年龄，法、美、英（FAB）协作组分型，危险度分级及中枢神经系统是否侵犯患者间Tim-3 mRNA相对表达水平差异均有统计学意义（均P<0.01）；不同年龄、FAB协作组分型、白细胞计数及中枢神经系统是否侵犯、NOTCH1基因是否突变患者间Gal-9 mRNA相对表达水平差异均有统计学意义（均P<0.01）。根据Tim-3、Gal-9 mRNA相对表达水平分组，Tim-3高表达组（≥2.86）OS较低表达组（<2.86）差（P＝0.048）；Gal-9高表达组（≥9.79）OS较低表达组（<9.79）差（P＝0.031）；Tim-3、Gal-9均高表达组OS较二者均低表达组和任意一项低表达组均差（均P<0.05）；Tim-3高表达、Gal-9低表达组与Tim-3低表达、Gal-9高表达组之间OS比较差异无统计学意义（P>0.05）。Cox多因素回归分析结果显示外周血白细胞计数≥11.4×109/L、BCR-ABL基因突变、中枢神经系统侵犯、Tim-3高表达、Gal-9高表达为影响初治ALL患者OS的独立危险因素（均P<0.05）。Tim-3表达水平与Gal-9表达水平呈正相关（r＝0.788，P<0.01）。结论Tim-3及其配体Gal-9高表达为初治ALL患者预后不良的独立影响因素；Tim-3、Gal-9表达水平可以作为评估初治ALL患者预后的潜在指标。

简介：摘要目的了解不同剂量亚砷酸钠（NaAsO2）对正常人肝细胞（L-02细胞）核苷酸切除修复（NER）相关基因mRNA转录水平及其启动子区组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化（H3K9me2）修饰水平的影响。方法以0（对照）、5、10、20 μmol/L的NaAsO2处理L-02细胞24 h（n = 3），采用单细胞凝胶电泳法（SCGE）检测L-02细胞DNA损伤情况[Olive尾距（OTM）、尾部DNA百分含量（Tail DNA%）]；实时荧光定量PCR法检测NER相关基因着色性干皮病（XP）基因A（XPA）、XP基因D（XPD）、XP基因F（XPF）mRNA表达水平；定量染色质免疫沉淀（CHIP）技术检测XPA、XPD、XPF启动子区（CHIP1、CHIP2）H3K9me2修饰水平。结果OTM、Tail DNA%水平与染砷剂量均呈正相关（对照和5、10、20 μmol/L染砷组分别为0.35 ± 0.09、0.56 ± 0.18、3.18 ± 0.31、4.52 ± 0.55，0.72 ± 0.05、1.34 ± 0.26、3.93 ± 0.43、5.47 ± 0.65，r = 0.927、0.948，P均< 0.05）。与对照组比较，10、20 μmol/L染砷组L-02细胞XPA、XPD、XPF mRNA表达水平均较低（P均< 0.05）。与对照组比较，20 μmol/L染砷组L-02细胞XPA、XPD、XPF启动子区（CHIP1、CHIP2）H3K9me2富集水平均较高（P均< 0.05）。结论砷通过增加NER相关基因启动子区（CHIP1、CHIP2）H3K9me2富集水平，抑制NER相关基因转录，进而降低L-02细胞DNA损伤修复能力，导致DNA损伤加重。

简介：摘要目的应用腺相关病毒(AAV)-规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9(CRISPR/Cas9)系统体外实验研究基因治疗威尔森氏症(WD)。方法选用2月龄雄性Toxic milk (TX)小鼠作WD模型，设计小向导RNA(sgRNA)并构建含有CRISPR元件的AAV载体质粒命名为pAAV-sgRNA1、2、3，制备AAV，病毒滴度达1～4×1013 GC/ml；感染WD肝细胞，72 h后提取基因组DNA，聚合酶链反应(PCR)后测序检测基因编辑效率，筛选出其中活性最高者sgRNA1，构建相应的同源修复模板(HT)质粒命名为pAAV-HT，应用AAV-sgRNA1和AAV-HT共感染WD肝细胞，测序和T7E1酶切检测模板修复效率；用HT特异性引物行PCR，验证HT掺入。组间比较采用Student’s t检验。结果Sanger测序结果显示，sgRNA1在体外有最高的编辑效率[(20.2±2.3)%]，与sgRNA2、3比较[(3.1±1.3)%、(14.6±2.0)%]，差异有统计学意义(P<0.05)。进一步用HT进行基因修正，能检出特异性修正后的ATP7B基因；二代测序测序显示修复率为(7.9±2.7)%。结论AAV-CRISPR系统在体外可以达到较高编辑效率和修复效率。

简介：摘要目的探讨外周血基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)和中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio, NLR)对自发性脑出血(spontaneous intracerebral hemorrhage, sICH)后迟发性血肿周围脑水肿(delayed perihematomal edema, dPHE)的预测价值。方法回顾性纳入2018年1月至2020年6月期间南京大学医学院附属鼓楼医院收治的sICH患者。在发病24 h内检测血清MMP-9水平、外周血细胞计数并计算NLR。dPHE定义为sICH发病后10～21 d绝对水肿体积较5～9 d时增加3 ml。比较dPHE组与非dPHE组人口统计学以及基线临床和影像学资料。应用多变量logistic回归分析确定dPHE的独立预测因素。应用受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估MMP-9和NLR对dPHE的预测价值。结果共纳入195例sICH患者，年龄(61.88±10.60)岁，男性148例(75.9%)；dPHE组53例(27.2%)，非dPHE组142例(72.8%)。单变量分析显示，dPHE组年龄、基线血肿体积、基线美国国立卫生研究院卒中量表评分、空腹血糖、超敏C反应蛋白、MMP-9、中性粒细胞计数、NLR以及不规则血肿比例均显著高于非dPHE组(P均<0.05)。多变量logistic回归分析显示，在校正混杂因素后，MMP-9较高[优势比(odds ratio, OR)4.291，95%置信区间(confidence interval, CI)2.041～6.590；P＝0.007]和NLR较高(OR 2.530，95% CI 1.157～4.022；P＝0.011)均为dPHE的独立预测因素。ROC曲线分析显示，MMP-9预测dPHE的曲线下面积为0.819(95% CI 0.756～0.884；P<0.001)，最佳截断值为164.0 μg/L，对应的敏感性和特异性分别为86.79%和66.90%；NLR预测dPHE的曲线下面积为0.788(95% CI 0.719～0.856；P<0.001)，最佳截断值为5.683，对应的敏感性和特异性分别为77.36%和71.13%。结论基线MMP-9和NLR较高的sICH患者更易发生dPHE，入院后早期检测外周血MMP-9和NLR可预测dPHE。

简介：【摘要】目的 分析丙戊酸钠、左乙拉西坦联合醒脑静治疗老年脑卒中后癫痫的应用效果。方法 选取本院74例老年脑卒中后癫痫患者开展本次研究，时间2020年03月-2021年03月，随机将其均分为对照组37例和观察组37例，对照组给予丙戊酸钠、左乙拉西坦治疗，观察组另加醒脑静治疗，比较两组临床疗效。结果 观察组的血清TNF-α指标、NSE指标、MMP-9指标和治疗有效率均明显优于对照组（P＜0.05）。 结论 给予老年脑卒中后癫痫患者醒脑静治疗临床疗效显著，具有推广价值。