简介：摘要目的观察微小RNA(miRNA，miR)-22-3p靶向α-烯醇化酶(ENO1)对对神经胶质瘤细胞迁移和黏附的影响。方法选取2015年6月到2018年6月安阳市人民医院手术治疗的91例患者的神经胶质瘤组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析神经胶质瘤组织和癌旁组织中miR-22-3p表达水平。采用脂质体转染miR-22-3p模拟物和对照质粒于神经胶质瘤U251细胞，分别命名为miR-22-3p组和miRNA对照组。采用荧光定量PCR检测miR-22-3p组和miRNA对照组细胞中miR-22-3p表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定两组细胞增殖能力；采用基质胶黏附实验测定两组细胞黏附能力变化；采用Transwell检测两组细胞迁移能力。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-22-3p的靶基因。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-22-3p靶基因蛋白质表达水平。组间数据比较采用t检验。结果与癌旁组织miR-22-3p表达水平(1.25±0.20)比较，神经胶质瘤组织中mRNA-22-3p表达水平(0.47±0.16)显著下降，差异有统计学意义(t＝2.999，P<0.05)。转染48 h后，miR-22-3p组细胞miR-22-3p表达水平(2.47±0.17)较miRNA对照组(1.23±0.21)显著下降，差异有统计学意义(t＝2.419，P<0.05)。miR-22-3p组细胞增殖能力(1.27±0.29)比miRNA对照组(2.07±0.23)显著下降，差异有统计学意义(t＝1.940，P<0.05)。miR-22-3p组细胞黏附率[(0.19±0.09)%]比miRNA对照组细胞黏附率[(0.84±0.13)%]显著下降，差异有统计学意义(t＝1.599，P<0.05)。miR-22-3p组细胞迁移数量[(174.08±10.98)个]比miRNA对照组细胞迁移数量[(69.48±7.01)个]显著增加，差异有统计学意义(t＝2.011，P<0.05)。ENO1是miR-22-3p的靶基因。miR-22-3p组细胞ENO1蛋白表达水平(0.32±0.11)比miRNA对照组细胞(0.96±0.17)明显下降，差异有统计学意义(t＝3.001，P<0.05)。结论miR-22-3p在脑胶质瘤发生发展过程中发挥重要作用，通过靶向ENO1蛋白调控着胶质瘤细胞增殖、黏附和迁移。

简介：摘要目的研究食管癌组织中微小RNA-501-5p(miR-501-5p)与溶血磷脂酸受体1(LPAR1)mRNA的表达水平，并分析其与临床病理资料之间的关系。方法选取2015年1月至2017年8月于滇南中心医院住院治疗的130例食管癌患者为研究对象。应用荧光实时定量PCR技术(qRT-PCR)检测食管癌组织和癌旁正常组织中miR-501-5p及LPAR1 mRNA的相对表达量，分析miR-501-5p和LPAR1 mRNA与患者临床病理资料的关系及两指标的相关性。采用Kaplan-Meier检验分析miR-501-5p和LPAR1 mRNA的表达与患者预后的关系。结果食管癌组织中miR-501-5p的相对表达量高于癌旁组织，LPAR1 mRNA的相对表达量低于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌组织中miR-501-5p和LPAR1 mRNA的相对表达量与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)，与患者年龄、性别及肿瘤长径无关(P>0.05)。相关性分析结果显示，食管癌组织中miR-501-5p和LPAR1 mRNA的表达呈负相关(r＝-0.632，P<0.05)。Kaplan-Meier检验结果显示，高miR-501-5p表达组患者3年总体生存率(OS)低于低表达组，高LPAR1 mRNA表达组患者3年OS高于低表达组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论食管癌组织中miR-501-5p表达水平高于癌旁组织、LPAR1 mRNA表达水平低于癌旁组织，并与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关，有望成为食管癌诊断、治疗及预后评估的生物标志物。

简介：摘要目的初步探讨微小RNA-9a-5p(miR-9a-5p)靶向丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基2(SPTLC2)抑制大鼠原代神经元创伤后凋亡的作用及其机制。方法体外培养大鼠原代神经元，将其分为对照组(n＝9)、无意义序列转染组(n＝9)和miR-9a-5p模拟物转染组(n＝9)，并分别建立机械划伤模型。通过转染、实时荧光定量PCR、Western blot和TUNEL荧光染色等方法观察miR-9a-5p对大鼠原代神经元凋亡的影响。利用生物信息学预测、荧光素酶基因报告实验和挽救实验验证SPTLC2与miR-9a-5p的关系。利用蛋白质相互作用数据库预测、免疫共沉淀实验验证SPTLC2相互作用的蛋白。结果实时荧光定量PCR结果显示，miR-9a-5p模拟物转染组miR-9a-5p的相对表达量(6.162±0.184)较对照组(0.938±0.058)和无意义序列转染组(1.010±0.095)明显增高(均P<0.05)。Western blot实验结果显示，miR-9a-5p模拟物转染组SPTLC2的相对表达量(0.272±0.034)较对照组(0.855±0.037)和无意义序列转染组(0.880±0.040)明显降低(均P<0.05)；凋亡相关蛋白检测结果表明，miR-9a-5p模拟物转染组神经元的凋亡程度较对照组和无意义序列转染组显著降低(均P<0.05)。TUNEL染色结果显示，高表达miR-9a-5p可抑制神经元凋亡，miR-9a-5p模拟物转染组的凋亡细胞比例(0.165±0.004)较对照组(0.239±0.008)和无意义序列转染组(0.229±0.010)显著降低(均P<0.05)。荧光素酶基因报告实验和挽救实验证实，SPTLC2是miR-9a-5p的直接靶点。免疫共沉淀实验和Western blot结果表明，SPTLC2可与Toll样受体4(TLR4)、核因子NF-κB p105亚基(NF-κB1)分别相互作用，但不影响二者的表达水平(均P>0.05)。miR-9a-5p可影响TLR4的表达水平(P<0.05)，但不影响NF-κB1的表达水平(P>0.05)。结论SPTLC2是miR-9a-5p抑制神经元凋亡的一个新靶基因。MiR-9a-5p可降低细胞损伤后SPTLC2的表达水平，并通过TLR4/NF-κB信号通路抑制神经元凋亡。

简介：摘要目的探讨甲状腺结节患者中细胞角蛋白19（CK19）、半乳糖凝集素3（Galectin-3）、HBME-1、BRAF V600E的表达水平，从而分析4种分子标志物在鉴别甲状腺结节良恶性和甲状腺乳头状癌（PTC）的临床应用价值。方法用免疫组织化学法检测746例甲状腺恶性结节（恶性组）及287例甲状腺良性结节（良性组）患者术后病理标本中CK19、HBME-1、Galectin-3和BRAF V600E的表达，评估各标志物单独及联合检测对PTC的诊断效能及意义。结果（1）CK19、HBME-1、Galectin-3及BRAF V600E在恶性组的表达阳性率明显高于良性组（P<0.05）。（2）单独诊断PTC时，Galectin-3敏感度和准确性最高，BRAF V600E特异度最高；CK19+HBME-1+Galectin-3联合检测敏感度和准确性最高，分别为93.60%、94.49%。（3）CK19、Galectin-3、HBME-1及BRAF V600E表达阳性率均与PTC合并甲状腺良性病变呈正相关（rs>0，P<0.05）。CK19、Galectin-3及BRAF V600E表达与病灶数目相关（P<0.05），且Galectin-3、BRAF V600E表达与微小癌病灶大小呈负相关（rs<0，P<0.05）。BRAF V600E表达与淋巴结转移、促甲状腺激素水平相关（P<0.05）。（4）与单纯PTC比较，合并良性病变的PTC不易发生淋巴结转移，合并桥本甲状腺炎的PTC多灶癌所占比例较高。结论CK19、Galectin-3、HBME-1、BRAF V600E是甲状腺良恶性结节鉴别诊断重要的辅助指标，也是诊断PTC的肿瘤标志物，其中Galectin-3诊断效能最高，CK19、Galectin-3、HBME-1联合检测可提高PTC的诊断准确性。

简介：摘要目的研究血清外泌体miR-744-5p在非小细胞肺癌中的表达变化及临床应用价值。方法回顾性研究。收集南方医科大学南方医院2016年11月至2018年2月就诊的92例非小细胞肺癌患者和91名健康对照者的血清，分离血清外泌体，同时进行RNA提取。应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测血清外泌体miR-744-5p的表达量，利用受试者工作特征（ROC）曲线评价外泌体miR-744-5p的诊断效能。结果非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平（0.012 2±0.019 7）较健康对照组（0.093 6±0.081 9）明显下调，差异有统计学意义（U=553.5，P<0.001）。在肺癌组中，早、晚期肺癌患者血清外泌体miR-744-5p的表达水平（0.011 7±0.013 9，0.012 6±0.021 2）与健康对照组相比，均明显降低（U=72.5，U=471.5，P均<0.001）；肺腺癌外泌体miR-744-5p表达水平（0.010 6±0.020 3）低于肺鳞癌（0.017 3±0.017 8），差异具有统计学意义（U=394.5，P<0.001）。ROC曲线显示血清外泌体miR-744-5p能够有效区分非小细胞肺癌患者和健康人群，曲线下面积为0.933 9（95%CI=0.899 6~0.968 1，P<0.000 1）；外泌体miRNA-744-5p能够有效诊断早期肺癌，曲线下面积为0.943 1（95%CI=0.883 7~1.000 0，P<0.000 1）。结论血清外泌体miR-744-5p有希望作为非小细胞肺癌非侵入性的分子诊断标志物，但尚需要进一步比较研究和扩大验证。

简介：摘要目的制备吸附重组戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)P179抗原的海藻酸钠/壳聚糖微球混悬制剂，并观察其免疫效果。方法乳化法制备海藻酸钠/壳聚糖微球，采用不同海藻酸钠浓度、混合乳化剂添加量、混合乳化剂亲水亲油平衡值设计正交试验，确定最佳制备工艺参数。将重组HEV P179抗原吸附在最佳工艺制备的微球表面，制备吸附重组HEV P179的海藻酸钠/壳聚糖微球混悬制剂，皮下多点免疫BALB/c小鼠，测定其诱导小鼠产生特异性IgG抗体的能力，与同剂量含弗氏佐剂的重组HEV P179免疫制剂对比。结果经正交试验确定乳化最佳工艺参数为：海藻酸钠质量分数1%、混合乳化剂体积分数2%，混合乳化剂亲水亲油平衡值4。制备的微球平均粒径为6.73 μm(分布范围3.90～9.10 μm，方差1.78 μm)，形态较为均一，透射电镜观察结果与双层球体及内部疏松多孔的微球结构特点相符。用此条件制备抗原质量浓度为500 μg/ml的混悬制剂，微球对抗原的吸附率为90.64%。免疫效果观察试验结果表明，皮下多点免疫试验中微球制剂诱导特异性IgG抗体的能力优于含弗氏佐剂抗原。结论成功制备了吸附重组HEV P179的海藻酸钠/壳聚糖微球混悬制剂，且诱导产生特异性IgG抗体的能力优于含弗氏佐剂抗原，为其在新型实验动物超敏制剂中的应用奠定了基础。

简介：摘要目的探讨血清微小RNA-206(miR-206)、微小RNA-590-3p(miR-590-3p)水平与室性心律失常患者预后的关系。方法选取2016年7月至2019年2月于河北燕达医院住院治疗的117例室性心律失常患者(室性心律失常组)，同期选取104例健康体健者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组血清中miR-206和miR-590-3p水平；分析室性心律失常患者血压、血脂水平与血清miR-206、miR-590-3p水平的相关性；比较室性心律失常患者不同预后组血清miR-206和miR-590-3p水平；分析室性心律失常患者预后不良的影响因素。结果室性心律失常组与对照组的性别、年龄、体质指数、肌酐、高血压、高脂血症和吸烟比例比较，差异均无统计学意义(均为P>0.05)。室性心律失常组的miR-206、miR-590-3p、收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平显著高于对照组，而高密度脂蛋白胆固醇水平低于对照组(均为P<0.05)。室性心律失常患者miR-206与miR-590-3p水平呈正相关，且与收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平呈正相关，与高密度脂蛋白胆固醇水平呈负相关(均为P<0.05)。预后不良组患者的血清miR-206和miR-590-3p水平均显著高于预后良好组(均为P<0.05)；miR-206升高(OR＝6.98，95%CI：2.96～16.45，P＝0.001)、miR-590-3p升高(OR＝7.07，95%CI：4.33～11.54，P＝0.002)和总胆固醇升高(OR＝6.27，95%CI：4.38～8.97，P＝0.008)是室性心律失常患者预后不良的危险因素，高密度脂蛋白胆固醇升高(OR＝0.42，95%CI：0.21～0.84，P＝0.004)是室性心律失常患者预后不良的保护因素。结论室性心律失常患者血清miR-206和miR- 590-3p水平升高与预后不良密切相关，可作为评估预后的参考指标。

简介：摘要目的探讨以P-GEMOX（培门冬酶、吉西他滨、奥沙利铂）方案作为一线方案治疗原发鼻外鼻型NK/T细胞淋巴瘤（NKTCL）的临床疗效。方法回顾性分析深圳市人民医院2015年9月至2018年10月收治的一线接受P-GEMOX方案化疗的7例原发鼻外鼻型NKTCL患者的临床表现、治疗反应及预后。结果7例原发鼻外鼻型NKTCL患者中位发病年龄41岁（27~74岁），男性多见（6例）；原发及侵犯的鼻外部位包括回盲部、淋巴结、皮肤、睾丸、肾上腺、中枢神经系统等。患者一线采用P-GEMOX方案化疗，虽部分患者能获得短暂疗效，但最终所有患者均快速进展并死亡，总生存期2周至21个月。结论P-GEMOX方案一线治疗原发鼻外的鼻型NKTCL近期疗效尚可，但远期疗效较差。

简介：摘要目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）基因沉默对大气细颗粒物（PM2.5）染毒肝细胞（L02细胞）相关基因表达的影响。方法于2019年6至9月，根据GenBank提供的p38MAPK基因序列，设计合成3条干扰序列，退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中，将重组慢病毒载体转染L02细胞。用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白免疫印迹（Western blotting）法对p38MAPK基因沉默效果进行鉴定。用浓度为50 μg/ml的PM2.5水溶物和10 μmol/L阳性对照Cr6+分别染毒L02细胞、p38MAPK基因沉默细胞24 h，同时设立空白对照组。用荧光定量PCR检测癌基因（c-fos、c-myc、k-ras）、抑癌基因（p53）和凋亡基因（Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9）的相对表达水平。结果p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK基因和蛋白表达水平较正常L02细胞明显下降（P<0.05），p38MAPK基因沉默细胞株构建成功。与空白对照组比较，PM2.5染毒L02细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平升高，抑癌基因p53表达水平下降，差异均有统计学意义（P<0.05）；与PM2.5染毒L02细胞组比较，PM2.5染毒p38MAPK基因沉默细胞组癌基因c-fos、c-myc、k-ras和凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达水平下降，抑癌基因p53表达水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论PM2.5对L02细胞癌基因、抑癌基因和凋亡基因表达有明显影响，而p38MAPK基因沉默可抑制PM2.5对L02细胞的影响。

简介：摘要目的探讨血清E-选择素和P-选择素在重症肺炎支原体肺炎(MPP)发病机制中的作用，并评估其对重症MPP的早期临床识别价值。方法收集2017年12月至2018年10月首都儿科研究所附属儿童医院呼吸科病房收治的87例MPP患儿的临床资料。根据病情严重程度将入组患儿分为轻症组和重症组。轻症组37例，其中男20例，女17例；年龄(7.62±2.02)岁。重症组50例，其中男17例，女33例；年龄(6.97±2.41)岁。测定2组患儿血清E-选择素和P-选择素水平，对2组患儿血清E-选择素、P-选择素和相关炎症反应指标进行比较，并与重症MPP行相关性和受试者工作特征曲线(ROC)分析。结果与轻症组比较，重症组患儿住院时间[(8.46±2.53) d比(5.19±1.20) d，P<0.001]、C反应蛋白(CRP)水平[(23.05±37.05) mg/L比(15.06±13.79) mg/L，P＝0.001]、乳酸脱氢酶(LDH)水平[(342.50±186.00) U/L比(284.44±64.82) U/L，P<0.001]、降钙素原(PCT)水平[(0.19±0.26) μg/L比(0.15±0.14) μg/L，P＝0.012]、铁蛋白(SF)[(197.33±429.43) μg/L比(124.60±66.30) μg/L，P<0.001]、D-二聚体[(539.00±576.00) μg/L比(226.00±170.50) μg/L，P<0.001]、E-选择素[(2.36±4.22) μg/L比(0.86±0.20) μg/L，P<0.001]和P-选择素水平[(4.15±4.40) μg/L比(1.72±1.22) μg/L，P<0.001]均明显增高，差异均有统计学意义。2组白细胞(WBC)、红细胞沉降率(ESR)比较差异均无统计学意义。CRP、LDH、SF、D-二聚体、E-选择素、P-选择素与重症MPP相关(均P<0.05)，而WBC、PCT、ESR与重症MPP无相关性。CRP、LDH、SF、D-二聚体、E-选择素、P-选择素的ROC曲线下面积均>0.5，其中，E-选择素的曲线下面积最大，P-选择素次之，均>0.8。结论重症MPP患儿可能存在机体过度炎症反应，E-选择素和P-选择素在该过程中可能起重要作用，且对重症MPP早期识别有较好提示价值。

简介：摘要目的探究在急性早幼粒白血病(APL)细胞向粒系细胞终末分化过程中，miR-5581-5p的功能及其与三基序蛋白22(TRIM22)的相互作用。方法利用全反式维甲酸(ATRA)诱导APL细胞(NB4)向粒系细胞分化，以二甲基亚砜作为对照，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blotting检测分化前后TRIM22的表达变化，qRT-PCR检测分化前后miR-5581-5p的表达变化。通过细胞转染miR-5581-5p mimic和inhibitor调控miRNA表达，并设阴性对照，qRT-PCR验证调控效果，荧光素酶结合实验检测二者是否存在靶向结合，Western blotting检测miRNA差异表达后对TRIM22的表达影响。流式细胞术检测调控miR-5581-5p对ATRA诱导的NB4细胞分化的影响。结果ATRA诱导NB4细胞向粒系细胞分化后，TRIM22在基因水平表达量较对照组明显升高(24.56±2.80 vs. 1.02±0.13；t＝8.392，P＝0.001)，在蛋白水平表达量也较对照组明显升高(0.80±0.01 vs. 0.17±0.01；t＝44.900，P<0.001)。而NB4细胞诱导分化后miR-5581-5p在基因水平表达量明显低于对照组(0.14±0.02 vs. 1.01±0.08；t＝10.840，P<0.001)。双荧光素酶报告基因结果显示，共转染miR-5581-5p mimic和TRIM22 WT组的荧光素酶活性明显低于共转染miR-5581-5p mimic和TRIM22 MUT组(0.73±0.02 vs. 0.98±0.03；t＝7.534，P＝0.002)。Western blotting检测发现，转染miR-5581-5p inhibitor后，TRIM22表达较阴性对照明显升高(0.44±0.01 vs. 0.21±0.01；t＝18.290，P<0.001)；转染miR-5581-5p mimic后，TRIM22表达较阴性对照明显下降(0.62±0.01 vs. 0.80±0.02；t＝6.402，P＝0.003)。ATRA作用后miR-5581-5p mimic组CD11b表达量明显低于对照组(45.80±1.80 vs. 56.61±1.88；t＝4.159，P＝0.014)，而miR-5581-5p inhibitor组CD11b表达量明显高于对照组(66.48±2.54 vs. 52.60±1.70；t＝4.539，P＝0.011)。结论miR-5581-5p靶向结合TRIM22 3′UTR区，通过负性调控机制影响TRIM22的表达。下调miR-5581-5p可增加TRIM22的表达，从而促进ATRA诱导的NB4细胞粒系分化。

简介：摘要目的探讨血清微小RNA（miR）-155-5p对脓毒症急性肝损伤患者预后的评估价值。方法回顾性分析2017年3月至2019年3月浙江省荣军医院103例脓毒症急性肝损伤患者的临床资料。其中，治疗好转57例（存活组），院内死亡46例（死亡组）。比较两组患者临床资料及血清miR-155-5p，分析影响脓毒症急性肝损伤患者预后的相关危险因素，并采用受试者工作特征（ROC）曲线分析miR-155-5p对患者预后的评估价值。结果死亡组脓毒症休克发生率、年龄、降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）、D-二聚体、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHE Ⅱ）、序贯器官衰竭评分（SOFA）和miR-155-5p均明显高于存活组[95.65%（44/46）比45.61%（26/57）、（50.82 ± 10.52）岁比（43.84 ± 7.32）岁、（16.42 ± 4.97）μg/L比（7.20 ± 2.19）μg/L、（23.21 ± 8.59）mg/L比（16.73 ± 5.04）mg/L、（10.84 ± 3.17）mg/L比（4.16 ± 2.15）mg/L、（22.37 ± 3.16）分比（16.72 ± 4.10）分、（10.98 ± 3.74）分比（6.84 ± 2.47）分和3.10 ± 0.97比2.25 ± 0.63]，差异有统计学意义（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，APACHE Ⅱ、SOFA、PCT和miR-155-5p是影响脓毒症急性肝损伤患者预后的独立危险因素（OR=3.173、2.732、2.553和2.153，95% CI 2.127~6.312、2.018~6.056、1.249~4.466和1.234~4.153，P<0.01或<0.05）。ROC曲线分析结果显示，miR-155-5p最佳截断值为2.89时，评估脓毒症急性肝损伤患者预后的曲线下面积为0.871（95% CI 0.782~0.951），敏感度为86.1%，特异度为80.4%。结论血清miR-155-5p与脓毒症急性肝损伤患者临床预后密切相关，可作为患者预后评估的潜在指标之一。

简介：【摘要】 目的 检测 DSG3、 P40、 TTF-1、 NapsinA在低分化非小细胞肺癌（ NSCLC）活检小标本中鳞状细胞癌（ SCC）与腺癌（ AC）的表达及其鉴别意义。方法 采用免疫组化 SP法检测 2016年 1月 -2017年 12月在滕州市中心人民医院住院治疗的 96例低分化非小细胞肺癌活检小标本中 DSG3、 P40、 TTF-1、 NapsinA表达，并结合 NSCLC的临床特征进行分析。结果 DSG3和 P40在肺鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为 88.9%（ 40/45）和 93.3%（ 42/45），特异性分别为 100%、 100%； TTF-1、 NapsinA在肺腺癌中的阳性表达率分别为 90.2%（ 46/51）、 80.4%（ 41/51），特异性分别为 93.3%、 100%。 DSG3和 P40在肺鳞状细胞癌组的表达与在肺腺癌组中的表达有差异，结果具有统计学意义（ P<0.01）， NapsinA、 TTF-1在肺腺癌中的表达较肺鳞癌组的表达差异显著，结果具有统计学意义（ P<0.01）。结论 在低分化非小细胞肺癌活检小标本中联合检测 DSG3、 P40、 TTF-1、 NapsinA对鳞癌与腺癌的鉴别诊断具有重要意义。

简介：摘要目的探讨BCR-ABL p210融合基因阳性急性髓系白血病的临床特点。方法对嘉兴市第二医院确诊的1例BCR-ABL p210融合基因阳性急性髓系白血病患者的临床特征进行分析，并复习相关文献。结果通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及荧光原位杂交（FISH）等方法检测到该例患者存在费城染色体（Ph）及BCR-ABL p210融合基因，给予伊马替尼联合多药静脉化疗，疗效不佳。结论Ph+/BCR-ABL+急性髓系白血病患者临床少见，预后极差，目前无统一标准治疗方案。酪氨酸激酶抑制剂疗效尚不明确，联合化疗及造血干细胞移植有望改善预后。

简介：摘要野生型p53诱导的磷酸酶（Wip1）是一种丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，参与多种炎症相关疾病的免疫调节。最近研究发现，Wip1参与自噬、巨噬细胞迁移，平滑肌细胞增生，揭示Wip1参与了动脉粥样硬化（AS）过程。本文就Wip1与免疫炎症及AS关系的研究进展作一综述，希望为进一步探讨AS发生机制和AS相关疾病的治疗带来新思路。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-93-5p调控胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性及其机制。方法将抗miR-NC(anti-miR-NC组)、抗miR-93-5p(anti-miR-93-5p组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-93-5p(miR-93-5p组)、pcDNA-NC(pcDNA-NC组)和pcDNA-F-box富含亮氨酸重复蛋白5(FBXL5)(pcDNA-FBXL5组)转染至Capan-1胰腺癌细胞(购自中国科学院细胞库)，将anti-miR-93-5p分别与si-NC、si-FBXL5共转染至胰腺癌细胞，标记为anti-miR-93-5p＋si-NC组和anti-miR-93-5p＋si-FBXL5组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测mRNA表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达；噻唑蓝法(MTT)检测细胞存活率；流式细胞仪检测细胞凋亡；荧光素酶报告实验检测miR-93-5p和FBXL5的靶向关系。采用t检验或单因素方差分析比较不同组间计量资料差异。结果吉西他滨组Capan-1胰腺癌细胞miR-93-5p表达低于对照组(0.32±0.29比1.00±0.10，t＝6.650，P<0.05)，FBXL5基因mRNA和蛋白表达高于对照组(mRNA为3.14±0.31比1.00±0.02，蛋白为1.12±0.12比0.40±0.03，t＝19.710、17.076，P<0.05)。anti-miR-93-5p组胰腺癌细胞miR-93-5p、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、多药耐药基因相关蛋白1(MRP1)、细胞存活率和半数抑制浓度(IC50)低于anti-miR-NC组[0.35±0.04比1.00±0.11、0.45±0.05比1.15±0.12、0.33±0.03比0.75±0.08、(52.44±5.24)%比(97.22±10.03)%、(7.29±0.73) mg/L比(22.13±2.11) mg/L，t＝16.660、16.154、14.747、12.667、19.940，P值均<0.05]，裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)和细胞凋亡率高于anti-miR-NC组(0.85±0.09比0.39±0.04、16.27±1.63比4.25±0.43，t＝14.012、21.391，P<0.05)。miR-93-5p靶向调控FBXL5基因表达。anti-miR-93-5p组胰腺癌细胞磷磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达低于anti-miR-NC组(0.25±0.03比0.75±0.08、0.38±0.04比0.89±0.09，t＝20.176、12.399，P<0.05)。anti-miR-93-5p＋si-FBXL5组胰腺癌细胞p-PI3K和p-Akt蛋白表达高于anti-miR-93-5p＋si-NC组(0.66±0.07比0.32±0.04、0.79±0.08比0.42±0.05，t＝16.433、19.128，P<0.05)。结论抑制miR-93-5p表达可增强胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性，其机制可能与miR-93-5p靶向调控FBXL5及PI3K/Akt信号通路有关。

简介：摘要目的通过研究中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-HorseP[12]E403蛋白与寡糖、唾液受体的结合特征，进而为轮状病毒的跨种传播及受体间的作用机制提供重要科学依据。方法通过大肠杆菌表达系统表达、纯化中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白，并利用唾液及寡糖结合实验分析该基因型的受体结合特征。结果马源GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白与黏蛋白核心mucin core 2糖结合良好，与A、B、Lewis型等寡糖及唾液中的HBGAs均不结合。结论VP8*-Horse P[12]E403蛋白的潜在受体可能是黏蛋白核心2，未与人唾液发生结合。

简介：摘要1例2岁7月龄患儿因反复打鼾，睡眠呼吸异常，伴反复呼吸道感染于2019年5月就诊于深圳市儿童医院呼吸科。患儿语言和精神、运动发育落后，可见头围增大，特殊面容。睡眠呼吸监测示重度阻塞性睡眠呼吸暂停综合征。给予睡眠时持续呼气末正压通气治疗后症状改善。行腺样体和扁桃体切除术后2个月停辅助通气和吸氧治疗，睡眠时仍有轻度打鼾。全基因组拷贝数检测示染色体19p13.3中间约775 kb微缺失。染色体19p13.3中间微缺失综合征可引起早期起病的睡眠呼吸障碍，特殊面容，生长发育落后。

简介：摘要目的发现和探讨miR-223-3p可能通过调控FOXO3a介导自噬在肝缺血再灌注损伤中发挥作用。方法采用C57/BL6小鼠建立小鼠缺血再灌注(IR)模型，根据再灌注时间不同分为2 h组、6 h组、12 h组和24 h组，假手术组不进行钳夹肝蒂操作。培养小鼠肝AML12细胞，用miR-223-3p mimics、miR-223-3p inhibitor以及FOXO3a的干扰RNA处理细胞，并建立缺氧1 h复氧6 h的模型，分为miRNA对照组、miR-223-3p模拟物组、miR-223-3p抑制剂组以及siRNA对照组、FOXO3a siRNA组。HE染色、TUNEL检测不同时间点肝脏的损伤及细胞凋亡状况。免疫组化检测肝细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)和Caspase-3的变化。RT-PCR和Western blot检测肝组织以及肝细胞内miR-223-3p、FOXO3a、LC3、p62和Caspase-3的表达变化。结果HE染色、TUNEL结果显示12 h肝组织再灌注损伤以及细胞凋亡最严重。在肝组织IR模型中，RT-PCR结果显示IR各组miR-223-3p、FOXO3a的表达均高于假手术组(1.00±0)，miR-223-3p在12 h时(9.13±2.12)达最高，FOXO3a在6 h时(5.23±0.90)达最高(P<0.05)。Western blot结果显示再灌注6 h时FOXO3a表达水平最高，12 h时LC3和Caspase-3表达水平最高(P<0.05)。在细胞缺氧复氧模型中，RT-PCR结果显示miRNA对照组(1.00±0)FOXO3a mRNA的表达较miR-223-3p模拟物组(0.45±0.21)降低，反之在miR-223-3p抑制剂组(2.73±0.53)升高(P<0.05)。Western blot检测显示FOXO3a蛋白表达在miR-223-3p抑制剂组最高，miR-223-3p模拟物组最低，反之LC3和Caspase-3均在miR-223-3p模拟物组表达最高(P<0.05)。siRNA对照组中FOXO3a表达较FOXO3a siRNA组高，同时FOXO3a siRNA组中Caspase-3和LC3表达更高。结论研究表明FOXO3a对肝缺血再灌注损伤具有保护作用，可能与其抑制细胞自噬以及凋亡有关，而miR-223-3p通过下调FOXO3a介导自噬促进损伤，提示miR-223-3p和FOXO3a成负相关且可能是肝脏损伤的潜在基因治疗靶点。

简介：摘要目的探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对脉络膜微血管内皮细胞增生和凋亡的影响及其调控机制。方法体外培养人脉络膜微血管内皮细胞，将培养的细胞分为血管内皮生长因子(VEGF)组和正常对照组，正常对照组细胞常规培养，VEGF组细胞应用VEGF处理24 h；将VEGF组培养的细胞分为4个亚组，分别将阴性对照(miR-NC)、miR-338-3p拟似物、miR-338-3p拟似物＋pcDNA、miR-338-3p拟似物＋pcDNA-TCF4转染至脉络膜微血管内皮细胞后用VEGF处理24 h。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测细胞中miR-338-3p和TCF4相对表达量；采用MTT法检测细胞增生率以评估细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡率；行双荧光素酶报告实验验证miR-338-3p与TCF4的靶向关系；采用Western blot法检测细胞中增生标记蛋白细胞增生核抗原-67(Ki-67)、增生细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(bax)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)蛋白相对表达量。结果与正常对照组比较，VEGF组细胞中miR-338-3p mRNA表达水平显著降低，TCF4 mRNA表达水平显著升高，细胞增生率显著升高，细胞凋亡率显著降低，细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著升高，bax蛋白水平显著降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)；与VEGF＋miR-NC组比较，VEGF＋miR-338-3p组细胞增生率显著降低，细胞凋亡率显著升高，细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著降低，bax蛋白表达水平显著升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)；双荧光素酶报告实验证实miR-338-3p可靶向结合TCF4；与VEGF＋miR-338-3p＋pcDNA组比较，VEGF＋miR-338-3p＋pcDNA-TCF4组细胞增生率显著升高[(56.48±13.20)% vs.(96.24±16.24)%]，细胞凋亡率显著降低[(30.59±3.57)% vs.(12.36±1.29)%]，细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著升高(0.41±0.11 vs. 0.96±0.19；0.44±0.10 vs. 0.97±0.20；0.55±0.12 vs. 0.98±0.15)，bax蛋白表达水平显著降低(0.87±0.13 vs. 0.42±0.11)，差异均有统计学意义(t＝5.700、14.408、7.516、7.111、6.715、7.927，均P<0.01)。结论miR-338-3p过表达可负向调控TCF4在细胞中的表达量，从而抑制脉络膜微血管内皮细胞的增生及诱导细胞凋亡。