简介：摘要目的构建跨膜蛋白超家族6成员2（Tm6sf2） E167K基因敲入小鼠模型。方法构建同时表达针对小鼠Tm6sf2基因特定位点的单链向导RNA Cas9的质粒和携带Tm6sf2 E167K片段的Donor质粒，将上述2质粒一起注射入小鼠受精卵，通过PCR检测和测序验证得到F0代阳性小鼠。统计F2代中野生（Wt）、杂合和敲入（KI）3种基因型小鼠的存活数量。选取F2代同窝Wt和KI雄性小鼠（8只/组）给予普通饮食8周，每周记录小鼠的体质量，检测两种小鼠葡萄糖代谢和脂质代谢等指标。组间比较采用独立样本t检验。结果基因型检测和测序结果表明Tm6sf2 E167K基因敲入小鼠模型建立成功。KI小鼠不存在胚胎纯合致死的表型。哺乳期内KI小鼠较Wt小鼠的体质量升高，两组差异有统计学意义（P < 0.05）。KI小鼠的空腹血糖（9.50±0.33）mmol/L较Wt小鼠的空腹血糖（7.80±0.30）mmol/L升高，两组差异有统计学意义（P < 0.05）；KI小鼠的口服葡萄糖耐量试验2 h血糖（9.20±0.51）mmol/L较Wt小鼠的口服葡萄糖耐量试验2 h血糖（7.60±0.18）mmol/L升高，两组差异有统计学意义（P < 0.05）。KI小鼠的肝脏甘油三酯含量（8.40±0.55）mg/g较Wt小鼠的肝脏甘油三酯含量（7.30±0.63）mg/g升高，但差异无统计学意义（P < 0.05）；两种小鼠的血浆甘油三酯水平差异无统计学意义（P > 0.05）；肝脏油红O染色结果显示KI小鼠较Wt小鼠的肝小叶中央区有更多的脂质累积。结论Tm6sf2 E167K基因敲入小鼠构建成功。Tm6sf2 E167K基因敲入可引起小鼠葡萄糖代谢的异常，促进肝脏脂肪变性的发生。

简介：摘要半乳糖凝集素-9（galectin-9, Gal-9）是凝集素家族的成员之一，在自然杀伤细胞、树突状细胞、巨噬细胞、辅助性T细胞及调节性T细胞等多种细胞均有表达。T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3, Tim-3）与配体Gal-9相互作用，在不同免疫细胞介导不同的免疫调节作用，而且与多种疾病状态有关，如自身免疫性疾病、肿瘤、病毒感染及妊娠相关疾病等。本文综述了Tim-3-Gal-9通路通过调节固有免疫及适应性免疫应答以维持妊娠免疫耐受的机制及作用，并展望将其作为妊娠相关疾病免疫治疗新靶点的前景。

简介：摘要目的观察蓝萼甲素预处理对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤模型的保护作用，并采用网络药理学方法预测蓝萼甲素抗H9c2心肌细胞凋亡的作用机制。方法将H9c2心肌细胞按随机数字表法分为空白对照组、模型组及蓝萼甲素低、中、高剂量组。空白对照组使用无血清培养液处理。模型组采用无血清培养4 h后，加入250 μmol/L H2O2干预6 h。蓝萼甲素低、中、高剂量组分别给予蓝萼甲素0.125、0.250、0.500 μg/ml预处理4 h后，加入浓度为250 μmol/L H2O2干预6 h。采用MTT法检测心肌细胞活力，观察细胞形态，采用Annexin Ⅴ-FITC/PI荧光双染及Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡情况。通过Pubchem数据库获得蓝萼甲素的化学结构式，使用Swiss Target Prediction和Pharmmapper平台预测蓝萼甲素潜在靶点，利用GeneCards数据库筛选蓝萼甲素抗H9c2心肌细胞凋亡的作用靶点。采用Cytoscape软件构建蓝萼甲素作用的靶点网络，通过String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络，并用Metascape数据库对靶点进行GO及KEGG通路富集分析。结果与模型组比较，蓝萼甲素低、中、高剂量组H9c2心肌细胞活力[(66.56±6.51)%、(79.21±6.89)%、(94.06±5.19)%比(51.75±4.14)%]升高(P<0.01)，细胞凋亡率[(24.12±4.71)%、(17.42±4.39)%、(7.65±1.56)%比(36.73±5.65)%]降低(P<0.01)。网络药理学分析结果提示，蓝萼甲素有22个与抗H9c2心肌细胞凋亡相关的靶点，主要调节氧化应激、细胞迁移、激酶结合活性等，可调节MAPK1、VEGFA、MMP9、NOS3、MMP2、MAPK14等靶点通路，发挥抗H9c2心肌细胞凋亡作用。结论蓝萼甲素预处理对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤有保护作用，其机制可能通过多靶点-多途径发挥抗氧化应激和减少细胞凋亡的作用。

简介：摘要目的探讨前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin9型（PCSK9）抑制剂对极高危动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）患者的降脂效果及其安全性。方法选择2019年4月至10月重庆医科大学附属第二医院门诊及住院的极高危ASCVD患者。应用随机数字表法将入选患者分为两组。阿托伐他汀组仅每晚单独给予阿托伐他汀20 mg口服，疗程为4周；联合用药组在口服阿托伐他汀的基础上皮下注射PCSK9抑制剂依洛尤单抗注射液140 mg，2周1次，疗程为4周。分别于治疗前及治疗4周后检测患者血脂谱水平，包括三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和脂蛋白-a（Lp-a）；并记录患者不良反应发生情况。结果研究期间共纳入40例患者，阿托伐他汀组和联合用药组各20例。两组治疗前血脂谱水平差异无统计学意义；经过4周治疗后，两组TC和LDL-C水平以及联合用药组Lp-a水平均较治疗前明显降低，而两组TG和HDL-C水平与治疗前差异无统计学意义。进一步分析显示，联合用药组TC、LDL-C和Lp-a治疗前后的差值均较阿托伐他汀组明显增加〔TC差值（mmol/L）：2.78±1.98比0.54±0.83，LDL-C差值（mmol/L）：1.91±1.38比0.39±0.72，Lp-a差值（mg/L）：115.87±138.93比-84.19±251.85，均P<0.05〕。联合用药组仅有1例患者发生过敏反应，主要表现为皮疹，经抗过敏治疗后好转；两组均无肝功能异常、肌酶增高等其他不良反应发生。结论PCSK9抑制剂可快速有效降低极高危ASCVD患者TC、LDL-C及Lp-a水平，但对TG、HDL-C水平影响不大，并具有一定安全性。

简介：【摘要】目的：探讨康莱特联合洛铂治疗NSCLC伴恶性胸腔积液的疗效及对VEGF、MMP-9和T淋巴细胞水平的影响。方法：将2017年1月至2018年12月期间于我院接受治疗的NSCLC伴恶性胸腔积液80例患者纳入研究，并采用随机数字表法分成两组各40例，对照组给予洛铂治疗，观察组给予康莱特联合洛铂治疗，观察比较两组的疗效及相关指标的差异。结果：观察组的治疗总有效率及T淋巴细胞水平高于对照组 (P＜0.05)；两组患者VEGF、MMP-9的含量均低于治疗前，且观察组低于对照组（P＜0.05）。结论：康莱特联合洛铂治疗NSCLC伴恶性胸腔积液疗效显著，能提高T淋巴细胞水平，提高机体免疫功能，降低血管新生指标VEGF、MMP-9水平，抑制肿瘤血管再生。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤易感性候选基因9(CASC9)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响，明确微小RNA-195-5p(miR-195-5p)与lncRNA CASC9的靶向关系。方法收集2017年4月至2018年5月间湖北省襄阳市中西医结合医院40例行手术切除并经组织病理学确诊的胰腺癌组织及相应癌旁正常胰腺组织，选取4株胰腺癌细胞(AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1)和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7，采用实时定量PCR法检测胰腺癌组织和各株细胞lncRNA CASC9表达。将BxPC-3细胞分为si-CASC9组(转染靶向lncRNA CASC9的siRNA)、si-control组(转染与lncRNA CASC9不匹配的siRNA)和CASC9组(转染lncRNA CASC9过表达质粒)、CASC9/miR-195-5p组(共转染CASC9过表达质粒和miR-195-5p mimics)。采用MTT法检测各组细胞增殖活性，采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达，采用生物信息学和荧光素酶实验分析CASC9和miR-195-5p的靶向关系。结果胰腺癌组织lncRNA CASC9表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(4.70±1.25比2.15±0.82，P＝0.04)，胰腺癌细胞株AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1细胞lncRNA CASC9表达量分别为1.43±0.12、1.86±0.13、2.03±0.14、1.73±0.15，均显著高于HPDE6-C7细胞的1.00±0.10(P值均<0.001)，其中以BxPC-3细胞的表达量最高。si-CASC9组细胞较si-control组细胞的增殖活性显著下降(细胞培养第3天0.57±0.05比0.72±0.04，P＝0.01；第4天0.75±0.07比0.95±0.07，P＝0.02)；Bax表达上调(1.39±0.13比1.07±0.11，P＝0.03)，Bcl-2表达显著下调(1.44±0.11比1.71±0.12、P＝0.04)。CASC9/miR-195-5p组细胞增殖活性较CASC9组显著下降(P值<0.005)；Bax表达水平显著高于CASC9组(0.68±0.04比0.56±0.03，P＝0.01)，Bcl-2表达显著低于CASC9组(1.05±0.03比1.47±0.04，P<0.001)。结论lncRNA CASC9靶向结合miR-195-5p可逆转CASC9促进胰腺癌细胞增殖和抑制胰腺癌细胞凋亡的作用。

简介：摘要目的探讨布鲁菌病患者血清可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（sTim-3）、半乳糖凝集素-9（Galectin-9）水平与炎症因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）水平的相关性。方法选择2016年1月至2018年12月烟台业达医院收治的布鲁菌病患者90例为研究对象纳入观察组，其中急性期49例、慢性期41例；另选择同期进行健康体检的健康受试者50例为对照组。采集布鲁菌病患者和健康受试者空腹静脉血5 ml，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测sTim-3、Galectin-9水平，流式液相多重蛋白定量技术（CBA）检测IFN-γ、IL-4水平；并应用Pearson相关性检验对布鲁菌病患者血清中的sTim-3、Galectin-9及sTim-3/Galectin-9水平与IFN-γ、IL-4水平进行相关性分析。结果观察组、对照组人群血清中sTim-3[（18.28 ± 5.38）、（7.01 ± 1.97）ng/L]、Galectin-9[（2.79 ± 0.94）、（1.67 ± 0.23）ng/L]、sTim-3/Galectin-9（6.55 ± 2.96、4.20 ± 0.67）、IFN-γ[（5.99 ± 1.94）、（10.09 ± 2.03）ng/L]、IL-4[（7.34 ± 3.13）、（3.71 ± 1.76）ng/L]水平组间比较差异有统计学意义（t = 14.271、8.276、5.527、11.785、7.556，P均< 0.05）。观察组中，急性期、慢性期布鲁菌病患者sTim-3[（22.09 ± 3.13）、（14.21 ± 3.42）ng/L]、Galectin-9[（2.98 ± 0.67）、（2.41 ± 0.74）ng/L]、sTim-3/Galectin-9（7.41 ± 1.07、5.90 ± 1.72）、IFN-γ[（3.78 ± 1.65）、（7.02 ± 1.73）ng/L]、IL-4[（9.17 ± 2.04）、（5.67 ± 1.54）ng/L]水平组间比较差异有统计学意义（t = 11.402、3.833、5.084、9.075、9.037，P均< 0.05）。经Pearson相关性检验，布鲁菌病患者的sTim-3、Galectin-9、sTim-3/Galectin-9水平与IFN-γ水平呈负相关（r = - 0.568、- 0.531、- 0.519，P均< 0.05），与IL-4水平呈正相关（r = 0.517、0.524、0.536，P均< 0.05）。结论布鲁菌病患者血清中sTim-3、Galectin-9呈现高表达，且与IFN-γ、IL-4水平显著相关，提示sTim-3、Galectin-9可能与布鲁菌病的发生、发展过程有关。

简介：摘要目的研制用于H7N9禽流感病毒诊断的血凝素线性B细胞抗原表位单克隆抗体。方法采用H7N9禽流感病毒血凝素特异性线性B细胞抗原表位免疫BALB/c小鼠，通过杂交瘤细胞技术和间接ELISA法筛选、鉴定获得稳定分泌抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株；通过SDS-PAGE、间接ELISA和斑点免疫印迹技术鉴定其亚型、效价、纯度等生物学特征。结果共获得2株单克隆抗体（7C8H8和8E9E2），其中7C8H8抗体亚类为IgG2a，腹水抗体效价>1∶512 000，且可以特异性结合H7N9禽流感病毒血凝素。8E9E2仅具有较低的H7N9禽流感病毒血凝素蛋白结合力。结论获得1株可分泌高效价、高特异性的抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株7C8H8。

简介：无

简介：摘要目的探讨脑小血管病(cerebral small vascular disease，CSVD)患者血清基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)水平与非痴呆性血管性认知功能障碍(vascular cognitive impairment with no dementia，VCIND)的相关性。方法收集2016年1月至2020年1月新乡医学院第一附属医院神经内科收治的374例CSVD患者，及同期150例健康体检者作为对照组。所有受试者均采用酶联免疫吸附法检测血清MMP-9水平，蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment，MoCA)进行认知功能评分。374例CSVD患者分为非痴呆性血管性认知功能障碍组(A组，n＝186)和无认知障碍组(B组，n＝188)，比较三组间一般资料、血清MMP-9水平、认知功能评分，并分析MMP-9水平与认知功能的相关性。结果A组和B组MMP-9水平[(335.10±105.10)μg/L，(261.62±80.32)μg/L]均高于对照组[(168.23±48.85)μg/L]，且A组的MMP-9水平高于B组(P<0.05)。A组和B组MoCA评分[(18.45±5.24)分，(28.31±1.52)分]均低于对照组[(29.49±0.90)分]，且A组的MoCA评分低于B组(P<0.05)。血清MMP-9水平是CSVD患者VCIND的危险因素(β＝1.505，OR＝ 1.323，95%CI＝1.149～1.527，P<0.05)，与MoCA量表总分、视空间与执行功能、命名、语言、抽象思维、延迟回忆、定向力呈负相关(相关系数分别为r＝-0.299、r＝-0.155、r＝-0.383、r＝-0.358、r＝-0.192、r＝-0.259、r＝-0.246，均P<0.05)。结论血清MMP-9水平升高可能是CSVD患者非痴呆性血管性认知功能障碍的危险因素，且与患者认知功能有一定的相关性。

简介：AbstractBackground:Long non-coding RNAs (lncRNAs) play key roles in human cancers. In our previous study, we demonstrated that lncRNA FKBP prolyl isomerase 9 pseudogene 1 (FKBP9P1) was highly expressed in head and neck squamous cell cancer (HNSCC) tissues. However, its functional significance remains poorly understood. In the present study, we identify the role and potential molecular biologic mechanisms of FKBP9P1 in HNSCC.Methods:Quantitative real-time polymerase chain reaction was used to detect the expression of FKBP9P1 in HNSCC tissues, matched adjacent normal tissues, human HNSCC cells (FaDu, Cal-27, SCC4, and SCC9), and human immortalized keratinocytes cell HaCaT (normal control). Cal-27 and SCC9 cells were transfected with sh-FKBP9P1-1, sh-FKBP9P1-2, and normal control (sh-NC) lentivirus. Cell counting kit-8 assay, colony formation assay, wound healing assay, and trans-well assay were used to explore the biologic function of FKBP9P1 in HNSCC cells. Furthermore, western blotting was used to determine the mechanism of FKBP9P1 in HNSCC progression. Chi-squared test was performed to assess the clinical significance among FKBP9P1 high-expression and low-expression groups. Survival analyses were performed using the Kaplan-Meier method and assessed using the log-rank test. The comparison between two groups was analyzed by Student t test, and comparisons among multiple samples were performed by one-way analysis of variance and a Bonferroni post hoc test.Results:FKBP9P1 expression was significantly up-regulated in HNSCC tissues (tumor vs. normal, 1.914 vs. 0.957, t = 7.746, P < 0.001) and cell lines (P < 0.01 in all HNSCC cell lines). Besides, the median FKBP9P1 expression of HNSCC tissues (1.677) was considered as the threshold. High FKBP9P1 level was correlated with advanced T stage (P = 0.022), advanced N stage (P = 0.036), advanced clinical stage (P = 0.018), and poor prognosis of HNSCC patients (overall survival, P = 0.002 and disease-free survival, P < 0.001). Knockdown of FKBP9P1 led to marked repression in proliferation, migration, and invasion of HNSCC cells in vitro (P all < 0.01). Mechanistically, silencing FKBP9P1 was observed to restrain the PI3K/AKT signaling pathway.Conclusions:Silencing lncRNA FKBP9P1 represses HNSCC progression and inhibits PI3K/AKT (phosphatidylinositol 3 kinase/AKT Serine/Threonine Kinase) signaling in vitro. Therefore, FKBP9P1 could be a potential new target for the diagnosis and treatment of HNSCC patients.

简介：摘要目的探讨康莱特联合经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)术对肝癌患者肿瘤学疗效及血清基质金属蛋白酶－9(MMP－9)、B细胞淋巴瘤－2(Bcl－2)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法选取2018年1至2018年9月河南省人民医院收治的100例肝癌患者为研究对象，依据非随机临床同期对照研究及患者自愿原则分为单一组(45例，行TACE术治疗)和联合组(55例，行康莱特联合TACE术治疗)。比较两组肿瘤学疗效，疾病控制率，血清MMP－9、Bcl－2、VEGF水平变化，癌性疼痛[视觉模拟评分法(VAS)]，随访复发率及不良反应发生情况。结果治疗后，联合组总有效率(54.55%，30/55)、疾病控制率(83.64%，46/55)高于单一组(31.11%，14/45；66.67%，30/45)，P<0.05；与同组治疗前比较，治疗后两组血清MMP－9、Bcl－2、VEGF水平及VAS评分降低，且联合组低于单一组(P<0.05)；两组患者均成功获得随访，随访时间6～12(8.58±1.21)个月，联合组治疗后1年随访复发率(10.91%，5/55)低于单一组(24.44%，11/45)，χ2＝4.341，P<0.05；治疗后联合组Ⅰ/Ⅱ级骨髓抑制、消化道反应、肝功能损害发生率低于单一组(P<0.05)。结论康莱特联合TACE术治疗可有效提高肝癌患者肿瘤学疗效、减轻癌性疼痛并降低复发率，机制或与联合方案能更有效降低血清MMP－9、Bcl－2、VEGF水平有关，且联合治疗方案安全性更好。

简介：摘要目的探讨外周血Septin9基因甲基化联合测定粪便样本中硫酸类肝素蛋白多糖基因（syndecan-2，SDC2）甲基化和组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor 2，TFPI2）基因甲基化与粪便隐血试验（fecal occult blood test，FOBT）在大肠病变筛查中的临床价值。方法选取2017年1月至2019年6月期间于四川省广元市中心医院治疗的75例大肠癌患者和50例进展期腺瘤患者分别作为大肠癌组和进展期腺瘤组，并以同期40例结肠镜检查结果为阴性者作为对照组，采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测全部3组受试者外周血Septin9、SDC2和TFPI2基因甲基化状态以及粪便隐血试验筛查大肠癌和进展期腺瘤。绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC），比较联合检测与各指标单独检测的诊断价值。结果大肠癌组Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT的阳性检出率分别为53.04%（61/115例）、55.65%（64/115例）、59.13%（68/115例）、26.09%（30/115例），进展期腺瘤组Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT的阳性检出率分别为33.33%（30/90例）、50.00%（45/90例）、40.00%（36/90例）、17.78%（16/90例）。以病理学检查判断为金标准，Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化联合检查筛查大肠癌时检测敏感度（82.7%）高于各单项检查以及SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测敏感度[Septin9基因甲基化（66.7%）、SDC2基因甲基化（69.3%）、TFPI2基因甲基化（73.3%）、FOBT（26.7%）、SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测（77.3%）]，同时还保持了较高的特异度（80.0%）。Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化联合检查筛查进展期腺瘤检测敏感度（70.0%）高于各单项检查以及SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测敏感度[Septin9基因甲基化（40.0%）、SDC2基因甲基化（64.0%）、TFPI2基因甲基化（50.0%）、FOBT（18.0%）、SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测（64.0%）]，也保持了较高的特异度（82.5%）。ROC曲线分析结果显示3种基因甲基化联合检查筛查大肠癌时的ROC曲线下面积0.918显著高于Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT单独检查时以及SDC2联合TFPI2基因甲基化检测的ROC曲线下面积（0.684、0.765、0.623、0.796和0.566），差异具有统计学意义（P<0.05）；3种基因甲基化联合检查筛查进展期腺瘤的ROC曲线下面积0.867显著高于Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT单独检查以及SDC2联合TFPI2基因甲基化的ROC曲线下面积（0.568、0.685、0.535、0.723和0.489），差异具有统计学意义（P<0.05）。结论联合检测Septin9、SDC2和TFPI2基因甲基化可提高大肠病变诊断的敏感度，并有较高的特异度。

简介：摘要目的了解湖州市人感染H7N9禽流感病例的流行病学特征及外环境样本检测情况。方法收集2013—2018年现住址为湖州市的人感染H7N9禽流感确诊病例的流行病学信息，同时采集暴露可疑环境样本进行病原学检测。运用Spearman相关分析法分析发病数与环境阳性检出率的关系。结果2013—2018年湖州市确诊的人感染H7N9禽流感病例39例，死亡9例，病死率为23.08%。男性多于女性，病例主要60岁以上的老年群体和农民。病例溯源样本阳性检出率为8.47%（30/345），农贸市场活禽交易场所的阳性检出率为25.00%（127/508），发病数与样本、场所检出阳性率的Spearman相关系数分别为0.379和0.392。结论中老年男性及农民是人感染H7N9禽流感的高发群体，活禽暴露是发病的高危因素。

简介：摘要目的探讨性别决定相关基因簇9(SOX9)对胰腺癌干细胞增殖、侵袭的影响及其与吉西他滨耐药性的关系。方法流式细胞术分选PANC-1细胞(购自中国科学院上海细胞生物学研究所)中以CD24＋CD44＋ESA＋为标志物的细胞亚群，并通过小鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植成瘤实验验证胰腺癌干细胞的特性。分选的胰腺癌干细胞分为对照组、shNC组和shSOX9组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞中SOX9的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力。Transwell细胞侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力。CCK-8检测各组细胞对吉西他滨的敏感性。细胞流式术检测各组细胞经吉西他滨处理后的凋亡。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，率的比较采用χ2检验。结果PANC-1细胞中分选出CD24＋CD44＋ESA＋细胞(占0.8%)，其在小鼠皮下移植后的移植瘤体积[(567.35±23.21) mm3]大于接种PANC-1细胞小鼠的皮下移植瘤体积[(106.83±12.43) mm3，t＝18.040，P<0.01]。SOX9 mRNA在shSOX9组中的相对表达量(0.42±0.05)低于对照组(1.00±0.03)和shNC组(1.01±0.03，F＝77.470，P<0.01)；SOX9蛋白表达量在shSOX9组(0.12±0.04)中低于对照组(0.64±0.12)和shNC组(0.62±0.07，F＝85.230，P<0.01)。shSOX9组细胞的吸光度值(0.74±0.13)低于对照组(1.38±0.21)和shNC组(1.37±0.23，F＝78.320，P<0.01)。shSOX9组侵袭细胞数目[(162.20±16.34)个]低于对照组[(250.50±24.21)个]和shNC组[(253.13±21.78)个，F＝21.040，P<0.01]。shSOX9组吉西他滨的半数抑制浓度(IC50)值为(2.78±0.08) mg/L，低于对照组[(5.12±0.13) mg/L]和shNC组[(5.08±0.11) mg/L，F＝23.450，P<0.01]。shSOX9组细胞的凋亡率为[(35.93±3.25)%]，高于对照组[(20.08±3.14)%]和shNC组[(19.76±2.67)%，χ2＝50.130，P<0.01]。结论沉默SOX9可抑制胰腺癌干细胞增殖与侵袭，提高胰腺癌干细胞对吉西他滨的敏感性。

简介：摘要目的探讨血液样本中胞裂蛋白9（SEPT9）、干扰素调节因子4（IRF4）、支链氨基酸转氨酶1（BCAT1）和Ikaros家族锌指蛋白1（IKZF1）基因甲基化单独检测和联合检测对结直肠癌临床诊断的价值。方法选取2015年2月至2018年5月于天津医科大学附属肿瘤医院结直肠肿瘤科接受手术治疗的105例结直肠癌患者作为病例组，同时选取年龄范围和性别比例与病例组相近的105例健康体检者作为对照组。采集各研究对象的血液样本及临床资料,采用甲基化特异性PCR检测血液中SEPT9、IRF4、BCAT1和IKZF1基因的甲基化状态，分析单基因和联合基因甲基化水平与结直肠癌临床病理特征的相关性。结果病例组血液中SEPT9、IRF4、BCAT1和IKZF1单基因甲基化阳性率分别为67%（70/105）、44%（46/105）、45%（47/105）和46%（48/105），均高于对照组（均为0），差异均具有统计学意义（均P<0.001）。病例组血液中上述4种基因甲基化联合检测的阳性率为76%，高于单基因甲基化阳性率。血液中SEPT9、IRF4、BCAT1、IKZF1单基因甲基化及4种基因联合甲基化状态均与结直肠癌患者的肿瘤临床分期、肿瘤最大径、无进展生存期（PFS）和总生存期相关（均P<0.05）。结论血液中SEPT9、IRF4、BCAT1和IKZF1基因甲基化联合检测较单基因甲基化检测可明显提高结直肠癌检测的阳性率，为结直肠癌的早期诊断提供理论依据。

简介：摘要目的了解我国9省≥18岁成年农民高血压患病率、知晓率和治疗率的变化趋势及人口经济学差异。方法利用"中国健康与营养调查"1991-2015年9轮调查的资料，选择≥18岁、具有完整人口统计学和社会经济特征、疾病史、体格测量数据，且职业为"农民、渔民或猎人（农民）"的调查对象作为研究对象。根据《中国高血压防治指南》定义高血压。分析9省成年农民高血压患病率、知晓率和治疗率变化趋势及影响因素。结果共纳入18 236人。1991-2015年，9省成年农民高血压患病率、知晓率和治疗率呈显著上升趋势（P<0.05）。多因素分析结果显示，2015年≥45岁组农民患高血压的可能性较18~44岁组高98%，超重或肥胖的农民患高血压的可能性分别是对照组（BMI<24.0 kg/m2）的1.58倍和5.21倍，肥胖的农民高血压知晓率和治疗率分别是对照组的5.77倍和7.52倍；文化程度为初中或高中及以上的农民高血压知晓率分别是小学及以下文化程度农民的0.23倍和0.12倍，初中文化程度农民高血压治疗率是小学及以下文化程度农民的0.30倍。结论1991-2015年我国9省成年农民高血压患病率呈显著上升趋势，但知晓率、治疗率尚不理想。高龄、超重及肥胖是农民患高血压的危险因素，在高血压的防治工作中，应加强对农民高血压的筛查和治疗，尤其要提高不同文化程度和肥胖农民高血压知晓率和治疗率。

简介：摘要目的通过分析9~17岁女性骨性Ⅰ类错锥形束CT颈椎影像特征与年龄的相关性，探讨并建立一种计算年龄的定量评价方法。方法选择2017年9月至2019年3月于青岛市口腔医院放射科行正畸治疗前锥形束CT检查的9~17岁女性骨性Ⅰ类错患者（轻度牙列不齐）108例，对锥形束CT上第三颈椎（C3）和第四颈椎（C4）椎体进行二维线性指标[椎体前缘高度（AH）、椎体中段高度（H）、椎体后缘高度（PH）、椎体宽度（AP）]、二维线性比率指标（AH/PH、AH/AP、AH/H、H/AP、H/PH、PH/AP）及三维重建体积指标的测量和计算，并进行指数变换，采用多元线性回归筛选评估年龄的最优指标，并比较多元线性回归方程的拟合度以及年龄推断的准确性。新增2019年4至7月于青岛市口腔医院放射科拍摄正畸治疗前锥形束CT的9~17岁女性骨性Ⅰ类错患者27例，用测量结果对回归方程进行准确性验证。结果通过C3、C4二维线性指标进行年龄推断的多元线性回归方程：Y=-113.928+33.743×eAH3/100+58.844×ePH4/100+20.590×eAP4/100（下标3、4分别代表C3、C4）（e为自然常数，e≈2.718），决定系数（R2）=0.745，标准估计误差（standard error of estimate，SEE）=1.31；通过C3、C4二维线性比率指标进行年龄推断的多元线性回归方程：Y=-0.076-2.284×eAH3/PH3+3.227×eAH3/AP3+2.149×eAH3/H3+1.961×eAH4/H4，R2=0.576，SEE=1.70；通过C3、C4椎体体积值V3、V4进行年龄推断的多元线性回归方程：Y=-16.828+22.184×eV3/10 000，R2=0.555，SEE=1.71；即各方程拟合度（R2）和准确性（SEE）排序由好至差的顺序为二维线性值、二维线性比率、三维重建体积值。27例新增患者数据的验证结果显示，二维线性指标SEE∶二维线性比率指标SEE∶三维重建体积指标SEE=1.74∶2.00∶2.37。结论本项研究通过锥形束CT二维线性指标对9~17岁女性骨性Ⅰ类错进行年龄推断的方法准确性较二维线性比率指标及三维重建体积指标高。

简介：摘要目的分析中国汉族人群CYP2C9和VKORC1的基因多态性及其与华法林稳定维持剂量的相关性。方法回顾性研究。收集2017年10月至2018年4月在北京大学人民医院进行凝血分析检测的458例中国汉族患者，男性213例，女性245例，年龄范围26~94岁。采用PCR-荧光探针法检测CYP2C9*3位点和VKORC1-1639A>G位点基因多态性，458例患者中服用华法林进行抗凝治疗且凝血酶原时间国际标准化比值（INR）达标（在2.0~3.0范围内）的患者130例，记录患者基本信息、华法林用药剂量及凝血酶原时间国际标准化比值（INR），应用SPSS统计分析数据，与美国FDA推荐的不同基因型患者华法林推荐剂量的参考表格进行对比，并且对华法林预测剂量公式进行简单验证。结果458例抗凝患者中CYP2C9*1/*1（AA）基因型频率90.8%，CYP2C9*1/*3（AC）基因型频率8.5%，CYP2C9*3/*3（CC）基因型频率0.7%；VKORC1-1639GG基因型频率0.9%，VKORC1-1639AG基因型频率14.2%；VKORC1-1639AA基因型频率84.9%。在达到抗凝指标（国际标准化比值INR 2.0~3.0）后，结果显示CYP2C9*1/*3与*3/*3基因型患者平均每日剂量为（2.92±1.29）；3（2.75，3.375）mg，低于野生型CYP2C9*1/*1基因型患者所需的平均每日华法林剂量（3.91±1.63）；3（3，5）mg，差异有统计学意义（P=0.018）。VKORC1纯合突变基因型VKORC1-AA患者平均每日剂量为（3.68±1.64）；3（3，4.31）mg，低于杂合基因突变型的平均每日剂量（4.54±1.29）；4.5（3.28，6）mg，差异有统计学意义（P=0.001）。不同VKORC1+CYP2C9基因型患者的华法林应用剂量与美国FDA参考表格的推荐剂量具有一致性。Miao2007公式的预测准确度较IWPC公式低，且94.1%的患者华法林剂量被低估。结论携带CYP2C9*3突变基因或VKORC1-AA纯合突变基因型的患者所需华法林剂量较低，CYP2C9和VKORC1基因多态性与华法林稳定维持剂量具有一定的相关性。

简介：摘要目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达与肝癌患者临床病理特征及预后的关系，为肝癌发生发展机制提供依据。方法选择2015年4月至2016年3月在义乌市中心医院手术切除的肝癌组织95例，选择因肝外伤切除的正常肝组织标本45例作为对照。采用免疫组化染色法检测肝癌组织及正常肝组织VEGF、MMP-2、MMP-9表达情况，并分析VEGF、MMP-2、MMP-9表达与患者临床病理及预后的相关性。结果肝癌组织中VEGF、MMP-2以及MMP-9阳性表达率均明显高于正常肝组织(81.05%、75.79%、84.21%比42.22%、33.33%、48.89%)(χ2＝21.364、23.397、19.265，均P<0.05)。肝癌组织低分化、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期以及有血管侵袭患者肝癌组织VEGF、MMP-2、MMP-9表达阳性率均明显升高(均P<0.05)。肝癌组织VEGF、MMP-2以及MMP-9阴性表达患者生存情况均显著优于阳性表达患者(log χ2＝3.271、2.975、3.065，均P<0.05)。结论肝癌组织中VEGF、MMP-2以及MMP-9高表达，在肿瘤生长浸润和转移过程中发挥了重要作用，因此VEGF、MMP-2以及MMP-9可作为肝癌进展的生物学指标。