简介：目的探讨重组ANGPTL-1基因转染人皮肤成纤维细胞的可行性，以及转染转染后对细胞增殖速率和I、Ⅲ型胶原合成的影响。方法体外重组ANGFPTL-1基因．借助真核表达载体系统．转入体外培养的人皮肤成纤维细胞．流式细胞仪检测基因表达及细胞转染效率；RT—PCR比较转染前后ANGPTL-1mRNA及I、Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果基因转染后，（63±7．1）％的被转染细胞表达目的基因：转染组ANGPTL-1mRNA相对表达量较未转染组和转染空载体组明显增高（P〈0．01，n=5）：转染组I、Ⅲ型胶原mRNA相对表达量较未转染组和转染空载体组均明显增高（P〈0．01．n=5）。结论人皮肤成纤维细胞可作为ANGPTL-1转染的靶细胞，ANGPTL-1基因可能是促进I、Ⅲ型胶原合成的重要基因之一．

简介：目的探讨强直性脊柱炎（AS）滑膜细胞培养上清液对韧带成纤维细胞成骨分化的影响。方法分别进行AS患者滑膜和韧带成纤维细胞原代培养,收集第1代的滑膜细胞培养液上清液,应用此上清液对韧带成纤维细胞进行诱导,分别于0、5、10、15、20d检测碱性磷酸酶和骨钙素表达水平,并于25d时进行钙结节染色。结果在应用AS滑膜细胞培养上清液对韧带成纤维细胞进行诱导的第10天,碱性磷酸酶（ALP）和骨钙素（OC）表达水平明显升高,并在第15天达到高峰。第25天时进行钙结节VonKossa染色,发现有钙结节形成。结论AS滑膜细胞培养上清液对韧带成纤维细胞具有成骨诱导分化的能力。

简介：目的探讨血清成纤维细胞生长因子-21（FGF-21）水平与2型糖尿病（T2DM）合并冠心病（CHD）的关系及其临床意义。方法选取单纯T2DM患者50例（T2DM组）、T2DM合并CHD患者48例（T2DM＋CHD组）、单纯CHD患者47例（CHD组）、门诊健康体检者50例（对照组），用酶联免疫吸附法检测血清FGF-21水平，并测定空腹血糖、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇浓度，糖化血红蛋白和空腹血清胰岛素，计算胰岛素抵抗指数、体重指数及腰臀比，并作相关比较和分析。结果T2DM＋CHD组血清FGF-21水平均明显高于砣DM组、CHD组和对照组，差异均有统计学意义（q分别=3.55、3．74、3．96，P均〈O．05）；T2DM＋CHD组FGF-21水平与腰臀比、三酰甘油和胰岛素抵抗指数呈正相关（r分别=0．195、0．255、0．189。P均〈0．05）；FGF-21和糖化血红蛋白是T2DM危险因素，FGF-21和三酰甘油是T2DM合并CHD的危险因素。结论血清FGF-21与T2DM合并CHD的发病有一定联系。

简介：目的观察地塞米松对体外培养的人牙髓细胞增殖和分化的影响。方法收集拔除的无龋坏、无牙周疾病的健康前磨牙及第三磨牙，获得牙髓，酶消化联合组织块法体外培养人牙髓细胞（Humandentalpulpcells，hDPCs），扩增后取第4代生长状态良好的细胞用于实验。分为两组，实验组hDPCs在含2％胎牛血清（Fetalbovineserum，FBS）的aMEM培养基中加入10^-8mol／L地塞米松（Dexamethasone，Dex）培养，对照组单纯使用含2％FBS的aMEM培养基培养。在细胞培养第1、3、5天检测细胞增殖情况；细胞培养的第1、5、10天分别进行AIP染色及ALP定量分析检测细胞分化情况：细胞培养第10天进行茜素红染色观察钙化结节形成情况。结果细胞增殖活性检测显示，实验组培养第3天及第5天可见hDPCs增殖活性得到显著抑制，与对照组相比有统计学差异；AIP染色及定量测定：培养10d后，地塞米松实验组ALP活性明显高于对照组：茜素红染色结果：培养10d后两组细胞茜素红染色均为阳性。表明实验组与对照组均有钙化结节形成．但是实验组钙化结节形成数量较多。结论酶消化联合组织块法可以成功体外培养hDPCs。10^-8mol／L地塞米松可显著抑制hDPCs的增殖活性，提高hDPCs的ALP活性及矿化能力。

简介：目的评价胶原/细菌纤维素复合材料的细胞相容性。方法将胶原（collagen,Col）和细菌纤维素（bacterialcellulose,BC）通过物理交联法和化学交联法制备成Col/BC物理组和Col/BC化学组,以BC为对照组,采用SEM（扫描电镜）观察材料形貌。采用小鼠胚胎成骨细胞株（MC3T3-E1）与材料复合培养,分为空白对照组（等量的细胞悬液）、材料对照组：BC、实验组1：Col/BC物理组、实验组2：Col/BC化学组观察细胞生长状况,MTT（四氮唑盐）观测细胞在1、2、3、4、5、6d后的增殖情况,细胞与材料复合第48h,SEM观察细胞粘附形貌。结果SEM观察在BC纤维上均匀包覆了一层蛋白质,MTT检测结果表明3d后Col/BC（物理交联组）组高于其他组,实验组与材料对照组：BC相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SEM观察在细胞与材料复合培养48h,纤维表面均有少量成骨细胞粘附。结论与材料对照组：BC相比,Col/BC物理组和Col/BC化学组均具有良好的细胞相容性,其中,Col/BC物理组表现出更好的细胞相容性。

简介：背景：加载在椎间盘上的重力引起的静态压力刺激是椎间盘细胞代谢的重要调节因素。目的：观察静水压对体外单层培养人椎间盘髓核细胞形态学及基质代谢的影响。方法：在静水压加载系统中对体外单层培养的传4代人髓核细胞施以0.3,0.7,3MPa的静压,分别加压30,60,90,120min,以常压0.1MPa为对照。结果与结论：①髓核细胞形态：在静水压干预下细胞体积均变小。0.3,0.7MPa静水压下轻微缩小,细胞形态相对完整;3MPa静水压下缩小最明显,且细胞形态不完整。②髓核细胞存活率：在持续静水压刺激下开始的30min,不论压力大小存活率都偏低,在0.3,0.7MPa时随作用时间延长而增加或维持稳定,细胞增殖逐渐增强,在3MPa时随时间趋于下降,最终细胞总体数量减少。③髓核细胞蛋白多糖：各组表达量随时间增加逐渐增加,当持续加压120min时,在0.3,0.7MPa静水压下合成量呈高表达状态,在0.1,3MPa静压表达相对较少。表明静水压会对髓核细胞形态学、存活率及基质表达产生影响。

简介：目的观察人脐带间充质干细胞（HUC—MSCs）经低温冻存复苏后的生物学特性，验证其是否仍具有间充质干细胞的基本特征。方法用胶原酶和胰蛋白酶消化脐带，分离诱导获得HUC-MSCs，传代培养，取第3代细胞加入冷冻保护剂（10％DMSO＋40％FBS＋50％DMEM／F12）后将其冻存于一80oc冰箱过夜，再转入液氮气相中保存1个月后复苏。采用倒置显微镜观察复苏后贴壁生长细胞的形态；台盼蓝拒染法比较冻存前后细胞活力；MTT法测定HUC—MSCs的增殖活性，比较冻存前后HUC—MSCs增殖活性的差异；流式细胞仪检测HUC—MSCs经冻存复苏后表面抗原的表达情况；复苏后HUC—MSCs进行成骨诱导分化培养，检验其是否仍具有多向分化潜能。结果HUC—MSCs经低温保存复苏后，细胞仍保持贴壁生长等外形特征，复苏后HUC—MSCs存活率为91．17oA；增殖活性与未冻存细胞比较，差异无统计学意义；细胞表面高表达CDl05、CD73、CD71、CD90、CD29、CD44、CDl3抗原，低表达或不表达CD34、CDl33、CD45、CDl4，HLA—DR、CD86、CD83、CD80、CDla~复苏后HUC—MSCs具有向成骨细胞诱导分化能力，细胞经茜素红、ALP和Von—Kossa’s染色呈阳性反应。结论经冻存复苏后的HUC—MSCs保持了间充质干细胞的基本形态，其表型满足间充质干细胞的基本要求，仍具有向成骨细胞分化的潜能。

简介：目的比较CD204＋和CD204-两种人脂肪来源细胞的干细胞特性和体外诱导成软骨的能力。方法分离培养人脂肪来源细胞并进行流式细胞分选．分别获得CD204＋和CD204-两种细胞。将这两种细胞培养扩增至第2代，观察其形态学特点：成脂、成骨定向诱导分化，油红O染色、茜素红染色定性；同时将两种细胞进行pellet成软骨诱导分化，比较体外诱导成软骨的能力．并以HE、SafraninO和Ⅱ型胶原免疫组化染色等进行鉴定。结果经流式细胞分选，脂肪来源细胞中CD204表达15日性串约为10％。分选后的CD204＋和CD204-细胞均呈成纤维细胞样贴壁生长．但CD204-细胞具有更强的增殖能力。成脂诱导10d后．曲组细胞油红0染色均可见胞浆内有大量红染脂滴，但CD204＋细胞具有更强的成脂潜能。成骨诱导2周后．曲组细胞芮素红染色均可见钙结节红染．而CD204-细胞具有更强的成骨潜能。同时，细胞Dellet成软骨诱导4周后，人体观可见CD204细胞组pellet形成白色透明样软骨成分．而CD204＋细胞组pellet外观微黄。HE和Ⅱ型胶原免疫组化染色均妊示CD204组pellet可见成熟软骨陷窝形成．Safranin0染色显示CD204-组软骨特异性细胞外基质沉积：而CD204＋细胞组peliet则呈纤维化改变。结论脂肪组织来源的CD204-细胞具有干细胞的生物学特点．且有良好的成软骨潜能，可以成为软骨组织工程良好的种子细胞来源。

简介：本研究旨在探讨不同时期的胎盘组织悬液对脐血造血干细胞体外扩增的作用,进一步了解随着胎龄的增长胎盘造血功能发生的变化。应用早期（B组）、中期（C组）和足月（D组）胎盘绒毛组织悬液,并设定空白对照（A组）,以共培养的方式分4组进行体外扩增脐血造血干细胞并培养观察扩增后的集落形成能力。结果表明,以接种初浓度为对比,共培养7d后A组细胞呈逐渐衰减趋势,B组扩增效果不明显,仅为扩增前的1.40±0.20倍,C组和D组造血干细胞均能有效扩增,扩增倍数分别为2.93±0.50和4.80±0.40。集落培养14d后的结果显示,C、D组集落形成总数明显高于A、B组,C组CFU-GM、CFU-GEMM、BFU-E集落数均略高于D组。结论：在没有外源性细胞因子存在的情况下,不同时期的胎盘绒毛组织悬液均可以支持造血干细胞的体外扩增,且随着胎盘发育其支持造血的功能呈不断增强的趋势。扩增后的造血干细胞的集落形成能力却呈先增强后减弱的现象,中期胎盘培养扩增后的干细胞集落形成能力最强,略强于足月期胎盘扩增后的造血干细胞。

简介：本研究探讨氯吡格雷对体外培养人脐静脉内皮细胞（EA.hy926）基因表达谱的影响及作用的分子机制。将10μmol/L氯吡格雷与人脐静脉内皮细胞株共培养48h,运用AffymetrixU133plus2.0全基因组表达芯片检测氯吡格雷对人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响,应用分子注释系统MAS3.0软件进行聚类分析,实时定量RT-PCR验证基因表达谱结果。结果表明：氯吡格雷作用内皮细胞48h后,基因芯片分析筛选出差异表达大于1.5倍的基因508个,其中上调基因139个,下调基因369个,包括蛋白结合、转录因子活性、锌离子结合、DNA依赖的转录的调节、转录、RNA剪接等相关基因,RT-PCR验证结果与基因芯片结果一致。结论：氯吡格雷在基因水平通过多条通路调节内皮功能。

简介：本研究总结分析成人急性淋巴细胞白血病（T细胞型,T-ALL）的临床表现和生物学特征,比较化疗与移植组患者的疗效,以阐述影响长期生存的预后因素。2000年5月至2010年5月,我院收治的初诊成人T-ALL共计22例,根据MICM分型检查结果确诊。所有患者采用VDCLP方案诱导化疗。巩固治疗阶段,根据患者接受异基因造血干细胞移植或高强度联合化疗将患者划分为移植组或化疗组。采用SPSS13.0统计软件分析有关数据。临床特点及疗效的比较采用卡方检验,生存分析采用生命表法及Kaplan-Meier法,采用Cox回归分析影响生存的预后因素,不同组别的差异检验采用log-rank法。结果表明：①22例患者中位年龄23.5（16-63）岁;起病时脾肿大者15例,脾大患者无事件生存（EFS）期和总体生存（OS）期较无脾大患者明显缩短（EFS：11.6个月vs56.7个月,P=0.014;OS：14.7个月vs57.0个月,P=0.013）;中位白细胞（WBC）计数为148.82（5.51-546.0）×109/L,其中15例起病时WBC≥80×109/L,这些患者的EFS时间和OS时间明显缩短（EFS：11.8个月vs47.1个月,P=0.021;OS：16.1个月vs47.4个月,P=0.050）;中位血小板（Plt）计数为55.36（14-160）×109/L,其中6例起病时Plt≤30×109/L,这些患者EFS和OS时间较短（EFS：8.4个月vs30.0个月,P=0.033;OS：11.4个月vs32.6个月,P=0.035）。②22例中pro-T2例,pre-T14例,皮质T3例,髓质T3例;早期表型（pro-T＆pre-T）与晚期表型（皮质和髓质T）相比,晚期表型者的EFS和OS时间明显延长（EFS：25.8个月vs14.9个月,P=0.035;OS：28.2个月vs18.7个月,P=0.028）。③染色体核型结果可供分析的19例,包括正常核型12例、异常核型7例（其中复杂核型3例,亚二倍体2例,假二倍体2例）。正常核型组与异常核型组在EFS和OS时间方面没有明显差异。④诱导化疗总完全缓解（CR）率为72.7%,中位缓解时间为18.0个月。22例患者1年及3年EFS率分别为57.9%和23.0%,1年及

简介：1转化生长因子133重组腺病毒载体转染退变髓核细胞后的增殖活性，见2012年第24期4408-4412页2胰岛素样生长因子1及血小板源性生长因子对人退变髓核细胞生物学活性的影响，见2012年第2期223-226页3基质细胞衍生因子1对骨关节炎软骨Ⅱ型胶原及分泌基质金属蛋白酶的影响，见2012年第20期3639-3643页

简介：目的观察玻璃纤维桩在残根﹑残冠修复中的临床效果。方法对85例共97颗患牙进行根管治疗后,使用DMGLuxaPost纤维桩及LuxaCoreDual树脂制作桩核,烤瓷全冠修复。随访18个月,观察其临床效果。结果完成随访79例（91颗患牙）,4例纤维桩脱落,1例纤维桩折断,其余修复体均固位良好,成功率为94.5%（86/91）。结论使用玻璃纤维桩可以达到满意的修复效果,但应注意适应证的选择。

简介：本文总结儿童髓系/自然杀伤细胞祖细胞急性白血病（M/NKPAL）的治疗经验以提高对该病的认识。对1例罕见的3岁8个月女童M/NKPAL合并中枢神经系统白血病进行了确诊分析,并对其治疗经过及长期随访结果进行了总结。结果表明,女童M/NKPAL合并中枢神经系统浸润得到了确诊,其免疫表型特征为CD7,CD33,CD34,CD56和HLA-DR共表达,MPO阴性,其他NK细胞和T、B细胞分化抗原阴性,染色体核型有＋8和12p-。采用柔红霉素＋阿糖胞苷化疗后达完全缓解,随后应用急性髓系白血病的化疗方案巩固强化治疗5个疗程,化疗方案中均含有大剂量阿糖胞苷,期间共行腰穿及鞘内注射治疗10次。停止治疗后中枢神经系统白血病复发,腰穿及鞘内注射治疗9次后行颅脑放疗36Gy,取得了长期生存。结论：M/NKPAL是一种罕见的白血病,有特异的免疫表型特征,应用含有大剂量阿糖胞苷的急性髓系白血病化疗方案可能取得较好疗效。

简介：许多研究表明，肝细胞治疗已成为肝功能衰竭及先天性肝代谢疾病的主要治疗方法，但是肝细胞获取困难。近年来，随着分子生物学和基因技术的发展，肝细胞永生化已成为可能。本文就肝细胞永生化的研究进展进行综述。

简介：<正>肿瘤相关巨噬细胞(tumorassociatedmacro-phage,TAM)作为肿瘤微环境的重要组成部分,在多种恶性肿瘤发生、进展、侵袭和转移过程中起着重要作用,能明显促进肿瘤血管和淋巴管的生成,与患者的不良预后明显相关。本文就TAM的来源、TAM在肿瘤发生、进展和转移中的作用及TAM相关肿瘤靶向治疗进行综述,相信通过对TAM作用机制的深入研究可以为肿瘤治疗提供新的思路。1TAM与肿瘤微环境肿瘤的生物学特性不仅是由癌基因和抑癌基因表达调控,还依赖于肿瘤间质等构成的肿瘤微

简介：目的建立新的转移性人肝细胞癌细胞系并研究其生物学特性。方法从人肝细胞癌的腹腔转移灶取材,将标本分离成单细胞悬液,使用培养液进行原代和传代培养,取名为HN-HC1细胞,观察细胞的形态,绘制细胞生长曲线。于裸小鼠腹腔接种第18代HN-HC1细胞2×106个,观察癌细胞的生物学特性,检测AFP的表达。结果HN-HC1细胞体外连续传代至第18代,形态上具有典型的恶性上皮细胞的特征,裸小鼠腹腔HN-HC1细胞成瘤率100%,移植瘤细胞中AFP呈强阳性表达。结论HN-HC1细胞可能成为较稳定的来源于转移灶的人肝细胞癌细胞系,HN-HC1裸小鼠移植瘤是一种较理想的肝细胞癌动物模型,为肝细胞癌的研究提供了良好的动物实验平台。

简介：背景：以往在体外采用地塞米松、生长因子或用成骨样细胞与骨髓间充质干细胞按1∶1混合培养诱导成骨均存在种种局限。目的：观察在Transwell小室环境下成骨样细胞与骨髓基质干细胞体外共培养及成骨样细胞定向诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的可行性。方法：取第3代乳兔成骨样细胞与第3代兔骨髓基质干细胞接种共培养于Transwell小室内，成骨样细胞接种于培养板底层，骨髓基质干细胞接种于Transwell膜内膜上作为实验组。以骨髓基质干细胞单独接种于Transwell小室内，下层为基础培养液作为对照组。结果与结论：实验组共培养骨髓基质干细胞明显向成骨细胞分化，细胞碱性磷酸酶活性显著高于对照组（P〈0.05）。实验组骨髓基质干细胞茜素红染色强阳性，可见呈红色结节，经PT-PCR扩增后，可见成骨启动基因核心结合因子α1的表达；对照组未见矿化结节。说明应用Transwell小室可实现成骨样细胞与骨髓基质干细胞体外共培养，并能定向诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化。

简介：由于生理上的衰老,老年人的思维能力和生活自理能力日趋下降。若家庭和社会对老年人的关照未能相应加强,他们更容易产生心理危机。冬季老年人的生理调节能力和心理承受能力降低,更容易出现以下＂心理危机＂。黄昏心理一些老年人认为,自己已是风烛残年,死亡只不过是早晚的事,

简介：背景：混合物脑肽是从动物脑中提取的多肽混合物，含有神经生长因子成分。近年研究发现，神经生长因子与肝损伤密切相关。目的：使用自拟混合物脑肽观察对大鼠肝纤维化的影响。方法：利用四氯化碳诱导形成SD大鼠肝纤维化模型。将大鼠随机分成纤维化模型组、脑肽干预组和对照组。4，8周采集标本。通过活体解剖取门静脉血清采用全自动生化分析仪检测肝功能丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、白蛋白；采用放射免疫法检测血清肝纤维化指标透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原；常规苏木精-伊红和网状纤维染色检测肝组织标本。结果与结论：大鼠肝纤维化模型成功建立。脑肽干预组纤维化程度较纤维化模型组显著减轻，但肝组织炎症和肝细胞脂肪变性反而较纤维化模型组更显著。初步判断脑肽能够阻断四氯化碳诱导的肝纤维化，司能与神经生长因子有关。