简介:摘要目的构建miR-7-1启动子核心序列的真核表达载体,并初步探讨其意义。方法根据5’端缺失实验原理,设计引物,PCR法分别扩增含不同长度启动子序列和相同miR-7-1成熟体序列的产物;纯化、经KPNI和XHOI双酶切后将它们分别亚克隆入pGL3.0-Basic真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定;将三个构建成功的pGL3.0-miR-7载体(分别命名为p-1189-miR-7,p-1731-miR-7,p-2192-miR-7)体外瞬时转染小鼠乳腺癌4T1细胞;用Real-timePCR检测各组中miR-7成熟体的表达水平;CCK-8法检测细胞生长的变化;最后,利用TRANSFAC数据库预测结合miR-7-1启动子核心序列的潜在转录因子。结果酶切和测序验证成功构建了p-1189-miR-7、p-1731-miR-7、p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体;与表达载体p-1189-miR-7、p-1731-miR-7转染组相比,表达载体p-2192-miR-7瞬时转染4T1细胞后可有效表达miR-7成熟体,并显著抑制4T1细胞的体外生长(p<0.05),提示miR-7启动子序列-1593位点到-2024位点为核心序列;最后,预测结果显示NK2-同源盒-5(NK2-Homebox-5,NKX2-5)和肝细胞核因子4(hepatocytenuclearfactor4homeobox,HNF-4)可能是结合该核心序列的转录因子。结论成功构建了p-1189-miR-7,p-1731-miR-7,p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体,并筛选到miR-7-1启动子的核心序列(-1593位点到-2024位点),为后续深入研究miR-7-1在乳腺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。
简介:摘要目的探讨髓芯减压并自体骨髓干细胞移植术治疗股骨头坏死(ONFH)的手术护理配合。方法对2014年4月至2015年12月我院46例行髓芯减压、自体骨髓干细胞移植术治疗的ONFH患者采取手术护理配合,包括术前做好心理及健康宣教、备齐手术必需物品,术中严密观察病情,医护人员积极配合,术后做好器械保养工作及康复训练指导。结果46例ONFH患者均成功完成手术,术后无1例患者发生感染;手术平均时间为(69.74±4.21)min,平均住院(12.36±2.43)d,随访3个月后,95.65%患者关节疼痛消失。结论对ONFH患者行髓芯减压并自体骨髓干细胞移植术治疗时,要求护理人员熟练配合,以降低并发症,控制感染,是手术成功的关键。
简介:目的:了解不同术式切除子宫、卵巢对内分泌改变及绝经综合症的影响。方法:对135例45岁以下非绝经期妇女因妇科良性疾病而手术治疗的患者根据手术范围的不同分为三组进行研究,其中A组(n=38)行全子宫加一侧附件切除,B组(n=67)仅行全子宫切除而保留双侧附件,C组(n=30)仅行单侧附件切除,分别在术前一个月内,术后六个月测定血促卵泡激素(FSH)、泌乳素(LH)、雌二醇(E2)、孕激素(P)水平,并在术后6—12个月进行绝经综合症的随访,比较三组间上述指标的变化。结果:全子宫加一侧附件切除组术后FSH、LH较术前显著升高,E2较术前显著下降,P均〈0.01,绝经期症状较单侧附件切除组严重,P〈0.05;保留二侧附件而作子宫切除组术后FSH较术前显著升高,P〈0.01,E2较术前显著下降,P〈0.01,绝经期症状较单侧附件切除组严重,P〈0.05;保留子宫仅作一侧附件切除组术后体内激素水平无明显改变,绝经综合症出现率明显低于全子宫加一侧附件切除组和子宫切除组,P均〈0.05。结论:不同术式切除子宫、卵巢可影响其内分泌及绝经综合症,卵巢的功能与卵巢血液供应关系密切。
简介:摘要目的综合分析磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路在FSH(卵泡刺激素)促进卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用。方法选取在我院2015年2月-2016年2月收治的卵巢癌细胞患者临床资料42例作为研究对象,分别培养卵巢癌细胞株(SKOV3细胞与3AO细胞),随机分为FSH组与对照组,每组均为21例。采用MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测10U/L、30U/L、70U/L、150U/L等不同浓度以及FSH不同处理时间10h、20h、48h、70hSKOV3细胞与3AO细胞增殖情况;采用体外侵袭实验检测两组SKOV3细胞、3AO细胞的侵袭能力。结果FSH组与对照组SKOV3细胞与3AO细胞增殖在不同时间处理后的数据比较差异有统计学意义(P<0.05),FSH组与对照组SKOV3细胞与3AO细胞侵袭能力比较有差异有统计学意义(P<0.05)。结论FSH可能是通过PI3K蛋白激酶B信号通路调节卵巢癌SKOV3细胞、3AO细胞中核因子κB的活性,实现对卵巢癌细胞的促增殖和侵袭作用.
简介:摘要目的探讨分析胃大部分切除术与单纯修补术治疗急性胃穿孔临床治疗方式和临床疗效。方法随机将80例急性胃穿孔患者分为对照组和观察组,每组患者各40例。对照组采用胃大部分切除术治疗,观察组采用单纯修补术治疗,对比两组胃穿孔患者的术后疗效、所需手术时间、所需住院时间、胃肠功能恢复的时间以及术后复发Visick分级指标。结果治疗后,观察组急性胃穿孔患者的术后疗效、术后复发Visick分级指标均显著优于对照组,差异显著,具有统计学意义(P<0.05);观察组所需手术时间、所需住院时间以及胃肠功能恢复的时间较对照组更少,差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。结论单纯修补术治疗急性胃穿孔可以有效地改善临床效果,缩短患者手术时间和住院时间,有效避免患者术后的复发,值得在临床推广应用。