简介：目的：建立单纯庖疹病毒1型（herpessimplexvirustype1，HSV-I）感染造成的面神经麻痹动物模型，研究HSV-I与面神经麻痹之间的关系。方法：Balb／c小鼠66只，切断双侧面神经耳后支，右侧神经断端接种HSV-1，左侧接种胎牛血清作为对照。观察小鼠全身情况、双侧面肌运动的对称性；颞骨连续切片HE染色；颞外段面神经锇酸染色：双侧面神经、脑干、三叉神经节、脊髓行PCR检测HSV-1DNA片断。结果：28只小鼠（4242％）于接种后2-5d发生右侧面神经麻痹，病程持续3-6d后恢复。38只未发生面神经麻痹。与对侧比较，颞骨连续切片显示面神经麻痹鼠右侧神经肿胀、神经周围间隙变小、

简介：

简介：对新生儿高胆红素脑病的关注引起人们对胆红素神经毒性的认识。高胆红素血症是新生儿期最常见的疾病。胆红素对神经系统的毒性易造成患儿眼球运动障碍、听觉障碍和智力低下等严重神经系统后遗症[1]。除此之外，研究表明脑出血后也会导致神经功能缺失。其中脑水肿是导致脑出血后继发脑损伤的重要因素之一，血肿的组成成分及其降解产物（如血红蛋白、胆红素、铁离子和CO等）的毒性导致脑出血后脑水肿，胆红素对神经系统的毒性作用可能是继发脑损伤的一个重要因素[2]。在对成人胆汁郁积引起的高胆红素血症的临床研究中，发现胆汁郁积性黄疸主要的临床表现为瘙痒、疲劳等症状，这与中枢神经系统内一些神经递质的传导异常密切相关[3]。胆红素血症患者的脑脊液中，游离胆红素的浓度平均可达到10μmol[4]。临床和动物实验两方面的研究都表明胆汁郁积引起的高胆红素血症对吸入麻醉药全麻敏感性增强，这些现象可能都与游离胆红素的神经毒性密切相关[5]。

简介：目的庆大霉素是一种临床上常用的氨基糖苷类抗生素,随着其使用剂量和作用时间的增加,它的耳毒性逐渐明显。本实验在体外用新生C57BL/6J小鼠的耳蜗基底膜构建庆大霉素耳毒性模型观察自噬的发生。方法体外原代培养的耳蜗基底膜应用庆大霉素之后,行透射电镜观察自噬体的结构,免疫荧光、免疫印迹检测自噬相关蛋白LC3-II的变化。结果在庆大霉素的耳毒性模型中,观察到了自噬现象的发生。结论自噬参与了庆大霉素的耳毒性过程,提示我们干预自噬可以影响庆大霉素的耳毒性过程。

简介：目的探讨阿米卡星对幼年大鼠内耳的毒性作用。方法实验组9天龄sD大鼠皮下注射500mg·k^-1·d^-1阿米卡星连续1周,对照组皮下注射0．9％生理盐水连续1周。分别于用药后l天、1周和3周行听觉脑干反应测听（ABR）仪测试实验组和对照组大鼠耳蜗听功能，并对耳蜗进行扫描电镜观察和常规切片观察。结果实验组大鼠ABR阈值，用药后1天与对照组比较、用药后1周与用药后1天和对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）．而用药后3周和用药后1周比较，差异尢统计学意义（P〉0．05）。形态学观察，随用药后时间延长，何替器细胞损伤从感觉毛细胞到非感觉支持细胞，用药后3周出现立方上皮样结构。实验组大鼠无前庭功能障碍。结论阿米卡星连续用药可导致幼年大鼠耳蜗毛细胞的严重损伤，而对前庭功能影响较小。

简介：目的氨基糖苷类抗生素的分离和鉴定距今已70多年，对治疗严重革兰阴性菌感染，如肠球菌和结核杆菌感染有着强大的功效。然而，随着氨基糖苷类抗生素用药疗程的延长或（和）剂量的增加往往导致。肾毒性和耳毒性，阻碍了其在临床上的广泛应用。由于非耳毒性抗生素也具有较广的抗菌谱，用于许多系统感染性疾病的治疗，使得曾经作为优先选择使用的氨基糖苷类抗生素逐渐被取代。然而现在，氨基糖苷类抗生素处于一个潜伏的复兴时期，正逐渐用于治疗对大多数一线抗生素耐受生物所引起的严重性感染，如多重耐药结核、复杂性院内获得性急性尿路感染等。氨基糖苷类抗生素使用的增加，再次向科学家和医生提出了挑战，即。肾毒性和耳毒性的问题，尤其该类抗生素导致的耳聋对于具有遗传易感性的患者往往是极重度且不可逆转的。基于这个原因，在过去二十年里，科学家提出了很多种分子治疗策略与氨基糖苷类抗生素导致的耳毒性副作用相抗衡。本文主要概述了：①氨基糖苷类药物杀菌的分子机制，②氨基糖苷类抗生素如何导致具有遗传易感倾向的患者发生耳毒性，③到目前为止，在临床实验和，或临床上已被证明的能阻止和调节氨基糖苷类耳毒性的药物和化合物，④减少氨基糖苷类抗生素剂量来减少耳毒性的发生率。

简介：摘要目的研究中药联合高效联合抗病毒疗法治疗艾滋病的疗效。方法选择2012年5月-2014年10月在我院所在地区内确诊的38例艾滋病患者作为研究对象，根据治疗方法不同随机分为两组，观察组患者接受中药联合高效抗反转录病毒疗法，对照组患者仅接受高效抗反转录病毒疗法治疗，比较两组患者的证候积分以及CD4+T细胞计数。结果治疗前，两组患者的证候积分、CD4+T细胞计数无差异（P＞0.05）；治疗后3、4、5、6个月时，观察组患者的证候积分均低于对照组，CD4+T细胞计数高于对照组。结论中药联合高效联合抗病毒疗法有助于改善中医证候、增加CD4+T细胞计数，是治疗艾滋病更为理想且有效的方案。

简介：摘要艾滋病是一种性传播及母婴垂直传播疾病，主要由人类免疫缺陷病毒（HIV）传播引起。高效抗逆转录病毒联合疗法（HAART）是目前临床治疗、控制艾滋病的有效方法，在艾滋病的治疗史上具有里程碑意义。高效抗逆转录病毒联合疗法（HAART）能大幅降低艾滋病的病死率和发病率，改善艾滋病患者的生活质量。本文通过对近几年国内外文献资料的梳理，从AIDS的发病机制、HAART的免疫重建作用、HAART治疗方案、HARRT最佳治疗时间、HAART耐药性及毒副作用等几个方面分析艾滋病高效联合抗病毒疗法进展。

简介：摘要目的研究乙型肝炎患者HBsAg-IgM与HBVDNA及肝脏损伤的关系。方法采用ELISA法测HBsAg-IgM，采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法和奥林巴斯5400及ACL9000分别检测HBsAg-IgM阳性组及对照组（各40例）血清的HBVDNA及ALT、AST、CHE、TBIL、PT（a）的值。结果HBsAg-IgM阳性组及对照组的HBVDNA阳性率存在明显差异（P=0.005）；HBsAg-IgM阳性组的HBVDNA阳性率明显高于对照组；HBsAg-IgM阳性组及对照组的ALT存在明显差异（P=0.040），阳性组低于对照组；HBsAg-IgM阳性组及对照组的AST（P=0.195）、PT（a）（P=0.923）、TBIL（P=0.183）、CHE（P=0.302）均无明显差异。结论HBsAg-IgM特异性复合物的存在与病毒复制及肝脏损伤有一定的关系，HBsAg-IgM结合HBVDNA含量和肝功能相关指标可判断HBV的感染和复制情况，为临床决策提供依据。

简介：摘要目的对怀柔区妇女宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染情况调查。方法对2013年1月至2014年12月在我院妇科门诊就诊疑似HPV感染的2245例患者进行23种HPV基因分析检测，其中高危型18种（HPV-16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4）低危型5种（HPV-6、11、42、43、44）结果HPV检测阳性者812例，高危型683例，低危型84例，其中多项感染45例。阴道镜下宫颈活检病理结果为宫颈癌及高级别病变（CINII及CINIII）的221例患者中HPV-16阳性51例，HPV-58阳性40例，HPV-18阳性18例，HPV33阳性13例，HPV-52阳性9例,其中多项感染23例,其他高危及低危型HPV感染67例。病理结果为低级别病变（CINI）及慢性宫颈炎的591例患者中HPV-58阳性108例，HPV-56阳性73例，HPV52阳性69例，HPV16阳性57例，HPV-18阳性39例，其中多项感染68例,其他高危及低危型HPV感染177例。20～30岁，31～40岁，41～50岁和＞50岁各年龄组中HPV阳性的比率分别为20.21%，32.56%,29.95%，17.28%。结论怀柔区妇女人乳头瘤病毒感染率较高，排在前四位的感染类型为HPV-58、16、52、18；其中宫颈癌及宫颈高级别病变中人乳头瘤病毒(HPV)感染类型主要为HPV-16、58、18、33、52。宫颈低级别病变（CINI）及宫颈炎的HPV感染类型主要为HPV-58、56、52、16、18。31～50岁为感染的高峰人群。

简介：目的：通过研究铜锌超氧化物歧化酶（Cu/Znsuperoxidedismutase，Cu/ZnSOD或SOD1）的蛋白表达和活性变化，探讨川芎嗪（tetramethylplyrazine，TMP）拮抗庆大霉素（Gentamycin，GM）耳毒性作用的抗氧化机制。方法将60只听力正常豚鼠随机分为GM组、TMP组、GM＋TMP组和对照组4个组，每组15只。GM组肌注硫酸庆大霉素120mg·kg-1·d-1，TMP组腹腔注射盐酸川芎嗪30mg·kg^-1·d^-1，GM＋TMP组肌注硫酸庆大霉素120mg·kg^-1·d^-1及腹腔注射盐酸川芎嗪30mg·kg^-1·d^-1，对照组腹腔注射与GM组等量的生理盐水2.5ml·kg^-1·d^-1；每组连续注射12天。每组首次用药前及末次用药后行ABR检测。实验结束后取耳蜗标本，将耳蜗组织研磨，采用Westernblot法检测SOD1蛋白表达，ELISA法检测SOD1活性。结果用药后GM＋TMP组ABR反应阈值明显低于GM组（P〈0.01），但较对照组、TMP组仍有升高；GM组、GM＋TMP组SOD1蛋白表达水平高于TMP组、对照组（P〈0.05），且GM＋TMP组高于GM组（P〈0.05）；SOD1活性强弱顺序为：GM＋TMP组〉对照组≈TMP组〉GM组。结论川芎嗪可能通过调控SOD1的蛋白表达及活性变化降低庆大霉素的耳毒性，推测这是川芎嗪抗氧化作用机制之一。

简介：摘要目的探讨小儿手足口病的临床特征及诊治方法。方法对1543例普通手足口病的临床资料进行回顾性分析。结果手足口病多见于5岁以下的婴幼儿及学龄前儿童，男性患儿发病率较女性患儿多；发病时间集中在春夏季。手足口病患儿均有不同程度的皮疹表现；所有患儿有口腔疱疹或溃疡；约有50.8%的患儿存在发热。结论经喜炎平、利巴韦林、施保利通片、蒲地蓝等综合治疗，全部治愈，预后较好。

简介：目的：建立Ⅰ型庖疹病毒感染致小鼠面神经麻痹的动物模型，并探讨单纯庖疹病毒1型（herpessimplexvirustype1，HSV-1）在小鼠面神经麻痹发生过程中的致病机制及作用部位。方法：选择53只16-18g、4周龄雌性Balb／c小鼠，用26G针头在49只实验组小鼠右耳廓背面近耳根部皮肤连续搔刮后，将25μLHSV-1病毒液滴在创面上。同样方法搔刮左耳廓，滴25μLPBS作为对照。另4只动物不作处理，作为空白对照。PCR法检测接种病毒后不同时间段的实验动物相关部位的HSV-1DNA表达。结果：49只接种动物中，37只（75．51％）出现不同程度的面神经麻痹。其中，右侧14只（14／37，37．84％），左侧3只（8．11％），双％20只（54．05％）。

简介：摘要目的鼻咽癌病人多项免疫功能及EB病毒PCR检测的综合研究。方法本文选取我院于2014年04月~2015年04月收治的18例鼻咽癌患者，对其免疫功能及其EB病毒PCR检测方式之间存在的关系加以有效研究和探讨，进一步对鼻咽癌患者血液中EB病毒抗体、其他氧化物活性等多项指标值进行测定。结果鼻咽癌患者患者的锌离子、铜离子、钙离子微量元素指标大小结果分别是（16.09±5.17）umol/l、（17.40±5.13）umol/l、（2.19±0.17）umol/l，和正常人群的三项微量元素指标大小结果对比存在显著性差异（P<0.05），具有统计学意义。结论鼻咽癌患者采用通过开展免疫功能及其EB病毒PCR检测方式的有效探索，发现鼻咽癌患者血清中含有多种微量元素及其EB病毒抗体等物质成分，这对于通过血液指标含量来测定鼻咽癌疾病奠定了坚实的条件。

简介：目的比较腺病毒、脂质体、纳米材料三种不同类型的载体携带目的基因对293T细胞的转染效率及细胞毒性的大小,筛选理想的基因载体。方法用重组腺病毒、Lipofectamine^TM2000、Entranster^TM—D纳米材料为转染载体,携带含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的Math1-EGFP基因及真核表达质粒pRK5-Math1—EGFP，按照转染试剂盒说明优化其转染条件，分别转染293T细胞。24小时后在共聚焦显微镜下观察转染结果并计数阳性细胞率，采用RT—PCR法检测转染细胞中Math1基因mRNA的表达，用MTT法检测不同转染条件下，不同转染载体对293T细胞的细胞毒性。结果经优化转染条件，重组腺病毒载体转导的细胞中荧光蛋白表达几乎为95％以上,Lipofectamine^TM2000、Entranste^TM-D纳米材料载体转染的细胞中荧光蛋白表达也分别达到70％和80％以上，而Entranste^rTM-D纳米材料载体在最高转染效率的剂量下仍然保持80％以上的细胞生存率。RT-PCR进一步证实，三种载体转染细胞均有Math1基因mRNA的表达。结论Entranster^TM—D纳米载体作为一种新型纳米聚合物转染试剂，能成功携带内耳基因治疗关键基因Math1基因转染293T细胞，并表现了低毒、高效性能。

简介：目的构建含有小鼠Smad4基因和增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）的慢病毒病毒表达载体,为今后应用该重组慢病毒介导的内耳基因导入和相关的聋病基因治疗奠定实验基础.方法利用基因重组、限制性内切酶酶切及基因测序的方法,构建并鉴定pLenti6.3-Smad4-IRES2-EGFP真核表达质粒;利用脂质体介导转染的方法,将pLenti6.3-Smad4-IRES2-EGFP转染导入293T细胞,荧光显微镜下观察EGFP基因表达情况,利用实时荧光PCR的方法检测小鼠Smad4基因mRNA水平的表达情况.结果经PCR鉴定和基因测序证实了小鼠Smad4基因序列与基因bank中的序列相一致.pLenti6.3-Smad4-IRES2-EGFP质粒转入293T细胞后,荧光显微镜下可见有绿色荧光蛋白表达.293T细胞经慢病毒感染后,其小鼠Smad4基因mRNA表达量增加了66427倍.病毒滴度经测定为2.5×108TU/ml.结论成功地构建了含有小鼠Smad4基因的慢病毒表达载体,并能在293T细胞中表达.

简介：目的构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因（pEGFP）的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2,并将其与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒。对重组腺病毒进行扩增、纯化及滴度测定,用聚合酶链反应和测序方法验证穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2穿梭质粒的构建;通过荧光显微镜和Westernblot（蛋白质印迹）方法,分别检测质粒pDC315-GFP-E2F2和重组腺病毒表达E2F2蛋白情况。结果经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2与设计一致;经荧光显微镜检测,分别由穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2、重组腺病毒转染的HEK293细胞均可观察到GFP表达;经WesternBlot检测出在72kDa～95kDa处有条特征带,其大小和E2F2-GFP融合蛋白（～76kDa）相吻合;滴度测定为1×1011PFU/ml（PFU,plaqueformingunit,空斑形成单位）。结论成功构建了人E2F2基因重组腺病毒载体,并能在HEK293细胞中表达。