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  • 简介:摘要目的观察脱细胞真皮基质(ADM)对巨噬细胞特征性标志物表达影响。方法实验分组:A组,巨噬细胞组;B组,ADM(5 μg/μl)与巨噬细胞共培养组;C组,脂多糖(LPS,100 ng/ml)及γ-干扰素(IFN-γ)(10 ng/ml)联合诱导巨噬细胞组;D组,白细胞介素-4(IL-4,10 ng/ml)诱导巨噬细胞组;E组,LPS(100 ng/ml)及IFN-γ(10 ng/ml)联合诱导巨噬细胞后再与ADM(5 μg/μl)共培养组。采用实时反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测不同组巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS)、分化抗原86(CD86)、甘露糖受体(CD206)和精氨酸酶-1(Arg-1) mRNA和蛋白相对表达水平,组间比较采用t检验,多组间采用单因素方差分析。结果RT-PCR检测结果显示,M1型巨噬细胞标志物iNOS、CD86表达在C组中最高(2.82±0.07、3.07±0.24,FiNOS=210.3,FCD86=85.6,P<0.01)。M2型巨噬细胞标志物CD206、Arg-1表达在D组中最高(3.30±0.26、3.23±0.32,FCD206=115.4,FArg-1=71.2,P<0.01)。B组与A组比较,M1型和M2型巨噬细胞标志物表达差异无统计学意义(t=1.706,P>0.05)。E组与C组比较,M1型巨噬细胞标志物iNOS、CD86表达量下降,分别由C组2.82±0.07、3.07±0.24下降到E组2.21±0.10、1.96±0.04;而M2型巨噬细胞标志物CD206、Arg-1表达量增高,分别由C组1.01±0.16、0.97±0.16上升到E组1.87±0.14、1.91±0.14;两组差异有统计学意义(tiNOS=8.523,tCD86=7.702,tCD206=7.028,tArg-1=7.904,P<0.05)。Western blot检测结果与RT-PCR检测结果趋势一致。结论ADM有诱导巨噬细胞从M1型向M2型极化作用。

  • 标签: 脱细胞真皮基质 巨噬细胞 一氧化氮合成酶 CD206
  • 简介:摘要原发性肝细胞癌世界上常见、恶性程度很高肿瘤之一,在中国恶性肿瘤中发病率排第5位,肝癌各种治疗措施疗效不佳。M2型丙酮酸激酶作为糖酵解途径关键酶,它异常表达与肝癌增殖、转移、诊断、治疗及预后密切相关,与肝癌药物治疗耐药和放射线抗拒也有关联,采用多种途径靶向调控肝癌细胞M2型丙酮酸激酶,有望成为治疗原发性肝癌一个新方向。

  • 标签: 肝细胞癌 M2型丙酮酸激酶
  • 简介:摘要SSc一种以血管病变、皮肤和内脏纤维化、免疫调节紊乱为特征慢性、多系统自身免疫病,其10年生存率约为66%,且伴随内脏受侵犯生存率骤降为38%。首要死因肺纤维化和肺动脉高压。如何破解SSc纤维化难题,降低SSc患者死亡率关键。巨噬细胞极化可以分化两种表型,促进炎症M1表型和消炎、伤口愈合M2表型。近年来研究表明,M2型巨噬细胞通过促进Th2细胞因子表达和TGF-β合成增加,在SSc纤维化发病中起着重要作用。通过抑制巨噬细胞替代激活可以降低SSc纤维化,有望为预防SSc纤维化探索新思路和治疗靶点。

  • 标签: 巨噬细胞 硬化病,系统性 纤维化
  • 简介:摘要目的验证喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)铁死亡变化以及探讨M2巨噬细胞来源外泌体对喉癌铁死亡调控作用。方法收集哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉头颈外科2018年9月至2021年4月诊治32例喉鳞癌和邻近非癌组织标本,其中男性26例,女性6例,年龄43~79岁。通过免疫组化和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织铁死亡标志物谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)表达并分析其与临床病理因素关系。通过透射电镜、细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆试验、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、线粒体膜电位、RT-PCR和蛋白免疫印迹法(WB),检测铁死亡诱导剂erastin处理后喉鳞癌TU212细胞变化。分离M0/M2巨噬细胞上清液中外泌体(M0-exos/M2-exos),并与经过erastin处理TU212细胞共同孵育,检测各组铁死亡变化情况。数据采用SPSS 19.0软件统计分析结果。结果铁死亡标志物GPX4在喉鳞癌组织中表达水平明显高于邻近非癌组织(2.04±0.65比0.99±0.09,F=30.36,P<0.001),且与临床分期及T分期密切相关(Ⅰ-Ⅱ期比Ⅲ-Ⅳ期:1.75±0.39比2.18±0.71,F=2.25;T1-2期比T3-4期:1.71±0.42比2.20±0.69,F=2.06,P值均<0.05)。TU212细胞经erastin处理后,出现铁死亡改变,表现为细胞线粒体嵴变小、膜密度增大、增殖率降低、细胞内ROS和MDA水平升高、GSH含量下降、线粒体膜电位发生去极化,细胞内GPX4mRNA和蛋白表达降低。在白介素4(IL-4)诱导下,M0巨噬细胞极化为M2型,分离M2巨噬细胞上清液,获得外泌体(M2-exos),发现M2-exos能够诱导erastin处理TU212细胞高表达GPX4和GSH,下调ROS和MDA表达水平,逆转细胞增殖能力(P值均<0.05)。结论铁死亡喉鳞癌细胞死亡方式之一,M2巨噬细胞源性外泌体能够抑制喉鳞癌铁死亡发生。

  • 标签: 喉肿瘤 癌,鳞状细胞 巨噬细胞 外泌体 铁死亡
  • 简介:摘要目的探讨雷帕霉素(RAP)激活M2巨噬细胞(type-Ⅱ macrophage)自噬对大肠癌移植瘤放射敏感性影响。方法经佛波酯(PMA)单独及联合人重组白介素4(IL-4)诱导人单核白血病细胞THP-1分化为M0和M2型巨噬细胞。使用RAP激活M2自噬,设置巴弗洛霉素(bafilomycin A1)下调M2已被激活自噬作为对照。大肠癌LoVo细胞接种BALB/c-nu/nu裸鼠,待形成直径10 mm瘤体后,利用随机数表法,18只裸鼠分为M2自噬未激活组、激活组和激活后下调组,LoVo细胞单独成瘤为阴性对照组,每组6只。对荷瘤鼠行2次8 Gy X射线局部照射,分析各组间移植瘤放射敏感性变化。结果M2巨噬细胞标志物Arg-1、CCL-22相对表达量显著高于M0巨噬细胞(t=78.77、60.02,P<0.05)。M2自噬未激活组瘤体质量、体积和微血管密度(MVD)[(1.93±0.05)g、(2.14±0.06)cm3、36.37±1.04]较阴性对照组[(1.35±0.05)g、(1.77±0.02)cm3、25.69±1.34]显著提高(t=20.07、14.56、10.92,P<0.05);激活M2自噬后,瘤体重量、体积和微血管密度均显著下降[(0.89±0.03)g、(1.24±0.01)cm3、13.60±1.52](t=44.37、40.32、21.43,P<0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,瘤体质量、体积和微血管密度有所回升[(1.02±0.07)g、(1.37±0.02)cm3、21.06±1.41](t=4.67、13.79、6.23,P<0.05)。与阴性对照组相比,自噬未激活M2能够抑制Livin和Survivin在瘤体组织中表达(t=2.64、7.90,P<0.05);RAP激活M2自噬后,可进一步下调上述蛋白表达(t=5.43、9.39,P<0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,Livin、Survivin表达量均有所回升(t=2.80、3.17,P<0.05)。结论利用RAP激活M2自噬,可抑制M2促进肿瘤微血管形成能力,从而抑制移植瘤生长;同时,通过下调大肠癌移植瘤中抗凋亡基因Livin与Survivin表达,诱导大肠癌移植瘤放疗后凋亡发生,提高大肠癌放射敏感性。

  • 标签: 雷帕霉素 M2巨噬细胞 自噬 大肠癌 放射敏感性
  • 简介:摘要目的探讨低氧肺癌细胞来源外泌体微小RNA(miR)-1278对巨噬细胞M2极化调节作用及其机制。方法收集正常条件和缺氧肺癌细胞培养上清液,差速离心法分离外泌体,透射电子显微镜观察并计数,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-1278表达水平。运用收集外泌体(各10 μg)处理CD14+单核细胞(主要是巨噬细胞),诱导细胞M2型分化,流式细胞术评估分化效果。miR-1278 mimic、miR-1278 inhibitor以及各自阴性对照转染CD14+单核细胞,检测M2型巨噬细胞比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)、趋化因子CC配体18(CCL-18)和血管内皮生长因子-A(VEGF-A)分泌量。预测、筛选和验证miR-1278靶基因,研究miR-1278对靶基因及其下游通路调节作用。常氧和低氧CL1-5细胞外泌体分别与通路抑制剂WP1066或miR-1278 inhibitor处理CD14+单核细胞,检测M2型巨噬细胞比例,并研究巨噬细胞条件培养基对肺癌细胞迁移和内皮细胞血管形成作用。采用Student′s t检验分析两组间差异,多组间数据差异采用方差分析进行比较。结果与常氧肺癌细胞比较,低氧肺癌细胞分泌外泌体数量显著增加(0.8~1.5倍,P<0.05)。过表达和抑制miR-1278水平分别促进常氧(12.06%比38.21%,P<0.05)和抑制低氧(30.55%比9.53%,P<0.05)巨噬细胞M2极化,伴随IL-10、CCL-18和VEGF-A分泌量变化。miR-1278靶向抑制磷酸酶SHP-1表达(约70%,P<0.05),进而促进信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路活性。WP1066(STAT3抑制剂)处理可以抑制低氧肺癌细胞外泌体诱导M2极化,WP1066和miR-1278 inhibitor均可抑制低氧肺癌外泌体诱生巨噬细胞条件培养基对肿瘤细胞迁移和内皮细胞血管形成诱导作用。结论低氧肺癌来源外泌体携带miR-1278通过靶向抑制SHP-1表达,激活STAT3通路,从而诱导巨噬细胞M2极化,有助于构建免疫抑制微环境,进而促进肿瘤迁移和血管形成。

  • 标签: 肿瘤微环境 巨噬细胞M2极化 外泌体 微小RNA-1278 信号转导与转录激活因子-3通路
  • 简介:摘要:林果业包含树林、园林、果木、花卉,农业产业结构重要组成部分,因此,林果产业发展持续受到广大人民密切关注,农民经济收益主要来源。在果树栽种面积持续增加前提下,就显示出了果园作业机械化重要性。作业机械化不仅能优化结构,增强果树对病虫害抵抗性,提高结果几率,达成规模化管理模式,推进果园和谐发展。除此之外,果园机械化在使用过程中也存在很多弊端,需要人们在实践里改进。本文就果园机械化在实际使用时出现问题进行研究。

  • 标签: 状况 问题 措施
  • 简介:摘要:随着经济社会不断发展,人们对生活质量追求逐渐提高。为了满足人们对更好生活环境要求,需要进行合理规划建设。土地资源管理在规划建设中占据着重要位置,科学土地资源管理能够很好地促进规划建设发展。对目前规划建设中存在土地资源管理问题进行探讨,并提出一系列基于规划建设土地资源管理策略,以期促进规划建设与利用土地资源和谐发展。

  • 标签: 建筑拆除工程,安全问题,探讨
  • 简介:摘要:在物联网工程当中,M2M技术作为其中关键性技术发挥着重要作用,可有效与其他技术相结合,提高企业通信质量和服务质量。为了进一步研究M2M技术在物联网工程中应用,本文对M2M技术基本内容及发展现状进行分析,并根据M2M技术服务能力和功能架构,进一步阐述M2M技术在物联网工程中具体应用,以期促进物联网工程向前发展,实现物联网在各领域中更加完善应用。

  • 标签: 物联网工程 M2M技术 功能架构 服务能力
  • 简介:摘要:在周边存在大量既有建筑情况下,爆破施工产生爆破力和振动具有一定风险,因此应采用合理定向爆破拆除技术,保证周边建筑和人民安全。本文以东莞市轨道交通一号线一期工程工区内35m水塔定向爆破拆除为例,在受到周边既有建构筑物情况下,合理分析了爆破参数,设计了安全有效定向爆破拆除施工方案,希望能够为爆破拆除技术顺利实施提供技术参考。

  • 标签: 复杂环境 水塔 定向爆破拆除技术
  • 作者: 陈静燕 张佳 王红 董瑞 刘文洁 单凯悦 张高峰 陈怀龙 王明山
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华麻醉学杂志》 2022年第08期
  • 机构:南京医科大学青岛临床医学院 青岛市市立医院麻醉科,青岛 266071 青岛大学附属青岛市市立医院麻醉科,青岛 266071,青岛大学附属青岛市市立医院麻醉科,青岛 266071,青岛大学附属青岛市妇女儿童医院教育培训科,青岛 266034,青岛大学附属青岛市市立医院麻醉科,青岛 266071 青岛大学附属青岛市妇女儿童医院教育培训科,青岛 266034,青岛大学附属青岛市市立医院麻醉科,青岛 
  • 简介:摘要目的评价外泌体在M2型小胶质细胞减轻星形胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤中作用。方法体外培养原代星形胶质细胞至对数生长期,采用随机数字表法分为5组(n=14):对照组(C组)、氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)、氧糖剥夺-复糖复氧+M2型小胶质细胞组(O+M2组)、氧糖剥夺-复糖复氧+M2型小胶质细胞+GW4869组(O+M2+G组)和氧糖剥夺-复糖复氧+M2型小胶质细胞源性外泌体组(O+M2-E组)。C组在正常条件下培养,O组氧糖剥夺4 h,复糖复氧24 h;O+M2组氧糖剥夺4 h,复糖复氧时加入M2型小胶质细胞上清液2 ml培养24 h;O+M2+G组氧糖剥夺4 h,复糖复氧时加入经外泌体抑制剂GW4869 10 μmol/L处理后M2型小胶质细胞上清液2 ml培养24 h;O+M2-E组氧糖剥夺4 h,复糖复氧时加入M2型小胶质细胞源性外泌体10 μg/ml培养24 h。光镜下观察细胞形态变化,采用CCK-8法检测细胞活力,qRT-PCR法检测水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达水平,Western blot法检测AQP4及胀亡蛋白porimin表达水平。结果与C组相比,其余4组细胞活力下降,AQP4及其mRNA、porimin表达上调(P<0.05),细胞发生水肿;与O组相比,O+M2组和O+M2-E组细胞活力升高、AQP4及其mRNA和porimin表达下调,O+M2+G组上述指标差异无统计学意义(P>0.05),细胞水肿程度减轻;与O+M2组相比,O+M2+G组细胞活力下降,AQP4及其mRNA和porimin表达上调(P<0.05),O+M2-E组上述指标差异无统计学意义(P>0.05),细胞水肿程度增强。结论M2型小胶质细胞可通过外泌体减轻星形胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤。

  • 标签: 外泌体 小神经胶质细胞 星形细胞 再灌注损伤
  • 简介:

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  • 简介:摘要:高效历史课堂我们历史教师精心设计和用心打磨锤炼结果,也是多种手段有效组合和多个环节无缝对接最美呈现。本文探讨了高效历史课堂创建需要教师精心准备、创设和谐氛围、灵活教学手段和巧设问题实施。

  • 标签: 高中历史  高效课堂  创建
  • 简介:摘要目的探究吡非尼酮(PFD)对放射性肺纤维化(RILF)防治作用及其作用机制。方法采用小动物放射研究平台对C57BL/6小鼠进行单次50 Gy X线全胸照射,用药组小鼠照射前2 h灌胃给予300 mg/kg PFD,此后每天灌胃一次直至150 d处死小鼠并提取肺组织,肺组织采用HE和Masson染色、实时荧光定量PCR (qPCR)和蛋白质印迹法(WB)检测。巨噬细胞经PFD处理后,用白介素-4和白介素-13刺激,使其向M2型极化,采用qPCR、WB以及免疫荧光染色进行相关检测。结果PFD能显著抑制由X线诱导肺内炎性细胞浸润以及肺组织纤维化形成,降低M2型巨噬细胞表型标记物表达。细胞实验也证实,PFD能显著抑制巨噬细胞向M2型极化,表现为精氨酸酶-1和几丁质酶3样蛋白3表达降低,这个过程主要与干扰素调节因子4(IRF4)下调有关。结论PFD通过下调IRF4抑制巨噬细胞向M2型极化,对RILF具有一定防治作用。

  • 标签: 吡非尼酮 放射性肺纤维化 巨噬细胞 干扰素调节因子4
  • 简介:摘要:建筑拆除工程是非电力施工专业专长项目,建筑工程预算定额中没有专门子目及计算方法,现行工程大多按照余物清理费进行结算,计算结果与实际花费相差较大。本文主要从砖砌体结构拆除、钢筋混凝土结构拆除、金属结构拆除和余物清理费规定四个方面入手,分析了建筑工程预算拆除定额存在必要性,希望新定额能提供建筑拆除工程相应子目及计算方法。

  • 标签: 建筑工程 预算拆除定额 必要性
  • 简介:摘要:近几年,随着国民经济快速发展,我国电力工业行业管理水平、技术装备、投资主体发生了一系列变革、创新。在这一背景下,为顺应新时期电力工业总体发展趋势,国家能源局委托中国电力企业联合会修编完成《电力建设工程定额与费用计算规定(2018版)》(以下简称“本套定额”),其所涉及内容包含建筑工程、热力设备安装工程、电气设备安装工程、架空输电线路工程、电缆输电线路工程、调试工程、通信工程和加工配制品,其中,《电力建设工程预算定额 第一册 建筑工程(上册 下册)》所涉及预算定额内容颇多。基于此,本文以某省建筑拆除工程预算定额为例展开研究,从砖砌墙体结构、钢筋混凝土结构、金属结构和余物清理费规定等层面入手,深入分析建筑工程预算拆除定额存在必要性,希望能为建设拆除工程提供一些具有参考价值意见与建议。

  • 标签: 建筑工程 预算定额 拆除工程 必要性
  • 简介:

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  • 简介:摘要:在现代科技快速发展前提之下,我们生活在充满数字化时代,而数学就存在于生活之中,幼儿刚认识这个世界,对数学认知还处于迷惑阶段,而早期数学启蒙教育不仅有助于幼儿认知发展,还对幼儿思维逻辑性起到提升作用。幼儿年龄尚小,幼儿园数学教育应该从最基础内容开始,教学活动与日常生活联系在一起,帮助幼儿建立起对于数学知识潜在认知,本文主要从幼儿数学教育出发,旨在教学活动融生活帮助幼儿更好理解数学。

  • 标签: 幼儿数学 生活化 教育策略
  • 简介:摘要1例肥胖扩张型心肌病患者,体重指数(BMI)高达48 kg/m2,建议其植入全皮下植入型心律转复除颤器(S-ICD)进行心脏性猝死一级预防。经过筛选等步骤完善之后,患者植入S-ICD,手术成功,术后患者恢复良好。

  • 标签: 扩张型心肌病 全皮下植入型心律转复除颤器 肥胖 体重指数
  • 简介:摘要:为了有效缓解我国未来在木材供需方面的矛盾,同时也为了能够更好保护我们林业资源。我国在近些年根据各地区实际情况,采用人工栽培、园林改造等方式来提升国家储备林建设水平。但是,目前我国在相关建立工作中依旧存在很多问题没有被有效解决,比如林业政策方面的指导力度不足、建设所需资金投入不够以及营林技术不完善等等。这些问题都是限制我国储备林建设质量核心因素,因此需要国家通过加强政策指导力度、拓宽建设融资渠道以及加强技术创新等方面提升森林建设整体质量。

  • 标签: 国家储备林 林业政策 问题 对策