简介:摘要目的探讨Beclin1对肺癌细胞紫杉醇耐药的影响及其分子机制。方法人非小细胞肺癌A549和小鼠LLC Lewis肺癌细胞采用梯度递增法建立紫杉醇耐药细胞株A549/DOX和LLC/DOX。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析耐药和非耐药细胞株Beclin1蛋白表达水平。采用对照慢病毒和Beclin1慢病毒感染A549/DOX和LLC/DOX,建立A549/DOX组、A549/DOX/Beclin1组、LLC/DOX和LLC/DOX Beclin1组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色、克隆形成实验和体外移植瘤分析紫杉醇对4组细胞增殖的影响。采用流式细胞仪分析紫杉醇对4组细胞凋亡的影响;Western blot分析4组细胞凋亡和自噬相关蛋白表达水平。计量资料比较采用t检验。结果A549/DOX组和LLC/DOX组细胞48 h吸光度(A)值(1.63±0.05、1.72±0.13)明显高于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组(1.09±0.13、1.21±0.06),差异有统计学意义(t=9.895、9.624,P<0.05)。EdU染色结果显示,A549/DOX组和LLC/DOX组细胞EdU染色阳性率[(93.71±2.81)%、(95.29±3.54)%]明显高于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组[(62.14±7.52)%、(70.14±6.09)%],差异有统计学意义(t=10.410、9.435,P<0.05)。克隆形成实验结果显示,A549/DOX组和LLC/DOX组细胞克隆形成数量[(115.43±10.75)、(142.57±23.71)个]明显高于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组[(71.57±7.98)、(86.14±3.13)个],差异有统计学意义(t=8.667、6.224,P<0.05)。A549/DOX组和LLC/DOX组细胞肿瘤体积[(823.71±44.89)、(1 144.86±106.45) mm3]明显高于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组[(585.57±41.80)、(774.14±48.95) mm3],差异有统计学意义(t=8.667、6.224,P<0.05)。A549/DOX组和LLC/DOX组肿瘤重量[(2.53±0.27)、(2.87±0.41) g]明显高于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组[(1.15±0.09) g、(1.46±0.13) g],差异有统计学意义(t=12.660、8.730,P<0.05)。A549/DOX组和LLC/DOX组细胞凋亡水平[(33.16±3.31)%、(29.32±3.62)%]明显低于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin组细胞[(56.00±3.87)%、(62.05±4.15)%],差异有统计学意义(t=12.660、8.730,P<0.05)。A549/DOX和LLC/DOX细胞p62蛋白表达水平(2.82±0.19、2.59±0.33)明显高于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组p62蛋白表达水平(1.01±0.10、1.21±0.10),差异有统计学意义(t=22.400、10.500,P<0.05)。A549/DOX组和LLC/DOX组细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达水平(0.65±0.12、0.78±0.06)明显低于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组(1.49±0.14、1.56±0.12),差异有统计学意义(t=11.470、15.280,P<0.05)。结论Beclin1通过调节细胞凋亡和自噬,介导肺癌细胞对紫杉醇的耐药性。
简介:摘要目的探讨手足口病(HFMD)患儿Beclin-1、细胞色素C(CytC)表达水平及其临床意义。方法将60例HFMD患儿分为普通型组和重症组,每组30例;选取泌尿外科收治的行包皮环切术且无基础疾病的30例患儿作为对照组。检测患儿治疗前后血清Beclin-1、CytC、S100B蛋白水平;检测重症HFMD患儿治疗前后脑脊液Beclin-1、CytC水平。采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)评价Beclin-1和CytC对重症HFMD的预测效能。结果重症HFMD患儿血清Beclin-1、CytC水平较其他2组显著升高(P<0.01);普通型组患儿血清Beclin-1、CytC水平较对照组明显升高(P<0.01)。与治疗前相比较,重症及普通型组HFMD患儿血清Beclin-1、CytC水平显著下降(P<0.05)。重症HFMD患儿脑脊液Beclin-1、CytC水平较普通型组显著升高(P<0.01),治疗进入恢复期后脑脊液Beclin-1、CytC水平较治疗前显著降低(P<0.01)。血清Beclin-1、CytC水平与S100B蛋白水平呈正相关。当血清CytC在38.785 ng/ml时其Youden值最大,为0.533,其对重症HFMD预测的灵敏度为56.67%,特异度为96.67%。血清Beclin-1在6.560 ng/ml时其Youden值最大,为0.467,其对重症HFMD预测的灵敏度为46.67%,特异度为100.00%。两个指标并联检测的灵敏度为76.67%,特异度为96.67%,对预测重症HFMD的价值最高。结论血清Beclin-1、CytC有助于判断HFMD病情轻重及治疗效果;二者并联检测对重症HFMD的预测价值更高。
简介:摘要:近日,经市人民政府同意,东莞市自然资源局印发了《关于加强和改进控制性详细规划编制和审批工作的通知》,该通知从践行规划新理念、改进编制方法、提高编审效率、加强控规维护等四个方面提出了十五条措施及要求,对我市的控制性详细规划(后简称“控规”)编制、审批、动态维护等工作提出了新要求、新方法和新标准,为我市做好过渡期的控规编制及审批工作提供了根本遵循。本文详细介绍了控规在我国和东莞诞生、发展、演变过程、剖析控规运行存在问题,东莞是结合国土空间规划体系重构时期,提出控规改革思路,并践行规划新理念、改进编制方法、提高编审效率、加强控规维护等四个方面去实施控规改革与创新,保证东莞项目建设顺利实施,保证自然资源部门行政许可的合法性。
简介:摘要:本文研究了一种基于生物启发的在线自主避障四维航迹规划算法以满足无人机智能化、协同化的发展需求。本文首先建立了无人机的三自由度运动模型。其次,基于改进tau-G理论和改进粒子群优化(Improved Particle Swarm Optimization,IPSO)算法提出了无人机四维航迹规划算法。最后,为了提高无人机在战场的生存能力并满足无人机在线轨迹规划需求,设计了基于生物启发的在线自主避障四维航迹规划算法,仿真结果表明,基于生物启发的在线自主避障四维航迹规划算法优化时间较短,生成轨迹满足实际飞行需求,证明了算法的有效性和可靠性。
简介:摘要老年男性右肺上叶3.5 cm×2.5 cm大小肿块,显微镜下示肿瘤由2种成分构成,主要以小到中等、蓝圆细胞片巢状分布为主,胞质较少,核呈泡状,核仁明显,另一部分肿瘤细胞透亮,2部分可见过渡,均异型性显著,核分裂象易见。免疫组织化学显示INI1(SMARCB1)缺失,BRG1(SMARCA4)未缺失,广谱细胞角蛋白(CKpan)、p40、细胞角蛋白(CK)5/6、p63、突触素均阳性,甲状腺转录因子1灶区阳性,CK7少量阳性,生长抑素受体2个别细胞阳性,CD56个别细胞阳性,Ki-67阳性指数50%。基因检测示INI1(SMARCB1)拷贝数异常以及EGFR、DIS3、BRIP1、HMCN1、PLCG2、RAD21、TSC2基因突变,病理诊断为INI1(SMARCB1)缺失低分化癌伴有鳞、腺及神经内分泌免疫表型。INI1(SMARCB1)蛋白是染色体重塑相关多聚体蛋白SWI/SNF的一个亚单位,SWI/SNF复合体缺失的未分化癌对传统化疗药物不敏感、预后差,但组蛋白甲基转移酶抑制剂治疗可能有效,而本例极易与低分化鳞癌、腺鳞癌混淆,故将INI1(SMARCB1)缺失的肿瘤识别出来十分必要。