简介：从仅仅关注产品转为关注包括客户在内的更多问题，重视客户忠诚度，即使对B2B企业来说，也能使销售额和利润双双得到高回报。许多企业会认为B2B客户行事理性，对价格也很敏感，“建立客户忠诚度”似乎毫无用武之地。真的如此吗？

简介：

简介：

简介：应用数据库营销的方法，协助销售部门在锁定圈子找对人上多下功夫，以增加销售漏斗中意向客户的数量。

简介：中国的中小企业具有数量大、行业分布广、历史短、相对离散、动态交易等特点，如单独开展电子商务，往往受到人才、资金等方面的限制，与大型企业相比有一定差距。而第三方电子商务服务平台却使得中小企业开展电子商务变得简便可行。然而，随着企业上网数量的增多，从上市公司到政府，都开始试水第三方企业网上平台，B2B行业网站下一步的发展显得尤为重要。

简介：

简介：大环内酯类抗生素基因工程是近年来生物工程领域研究的一个热点,利用基因工程改造大环内酯类抗生素合成基因,已经合成了100多种"非天然”的天然化合物,为筛选新抗生素开辟了新的途径.本研究以糖多孢红霉菌A226基因组DNA为模板,先用PCR扩增出红霉素合成基因eryKR6两侧片段,再用重叠PCR将其拼接成去除KR6的约3.2kbDNA片段,并克隆于pWHM3载体,构建了同源重组质粒pWHM2201.用PEG介导将pWHM2201转入糖多孢红霉菌A226原生质体.PCR鉴定和生物活性检测均显示pWHM2201已重组到红霉素合成基因位点.在无抗性R3M斜面上生长两代后,制备重组体原生质体,并涂R3M平皿.利用PCR筛选出KR6敲除的突变体糖多孢红霉菌M.

简介：摘要：根据近期某平台动车组普查结果，共查出5起转向架横向止挡橡胶体开裂松脱故障，故障原因为极个别产品在运行过程中出现橡胶与金属粘接失效问题，因此有必要在现有横向止挡结构基础上进行防脱结构设计以保证橡胶与金属粘接失效情况下产品能够正常工作不受影响。本文基于现有横向止挡结构通过将橡胶与铁件连为整体，完整包覆外扩铁件，增设过胶孔硫化橡胶钉，增大粘接面积等方法优化设计了一种多角度防脱止挡结构。通过有限元理论校核防脱结构技术方案刚度性能、金属橡胶应力与脱胶状态、脱胶状态不同工况等，结果均满足产品使用要求。且试验验证证明，防脱结构产品在接口尺寸及性能参数与原型产品一致可对等替换的基础上，可实现有效的防脱功能。本文一方面，成功设计出带有防脱功能的横向止挡产品。另一方面，积累了金属橡胶件产品防脱结构设计经验，为同类型产品橡胶体防脱设计提供有力的参考。

简介：“３·３·３”制衡管理模式的核心内容是把场务会作为最高经营决策管理机构，场务会由人教委员、场务委员、财务委员三人组成。人教委员在人教方面具有５０％否决权，场务委员在场务方面具有５０％否决权，财务委员在财务方面具有５０％否决权，三个委员均在三个方面的另外两个方面具有２５％的表决权

简介：本文根据忠武输气管道第六B标段线路工程中对P3项目管理软件的实际应用论述了在长输管道施工过程中使用P3进行计划编制和进度控制体会,他们认为P3的使用并没有什么固定模式每家单位可根据自己单位的实际情况创出一套属于自己的P3应用管理模式最大限度地让P3计划在实际的施工工程中发挥它应有的作用,在招标文件中明确要求各施工单位在投标文件的进度计划用p3来进行进度分析

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-193b-3p在新生脓毒症大鼠海马组织中的表达情况，以及其在脓毒症神经炎症反应中的作用及可能机制。方法将24只2 d龄SD大鼠按随机数字表法分为对照组与脂多糖组及阴性对照组与miR-193b-3p组，每组6只。脂多糖组、阴性对照组及miR-193b-3p组通过腹腔注射脂多糖(2.5 mg/kg)制备脓毒症模型，miR-193b-3p组和阴性对照组分别于脂多糖注射前3 d将5 µL miR-193b-3p模拟物或阴性对照物(20 nmol/L)注入大鼠侧脑室。将PC12细胞分为对照组、脂多糖组、miR-193b-3p组和脂多糖+miR-193b-3p组，其中miR-193b-3p组和脂多糖+miR-193b-3p组将miR-193b-3p模拟物转染入细胞内，脂多糖组和脂多糖+miR-193b-3p组细胞暴露于100 ng/mL脂多糖中孵育。采用基因芯片检测及双荧光素酶报告分析方法明确miR-193b-3p的靶基因。采用神经行为学评分评估各组大鼠特定时间点的神经功能，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组大鼠海马组织或各组PC12细胞中miR-193b-3p及炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA的表达，采用免疫荧光双标染色检测各组大鼠海马组织中视黄酸受体相关孤儿受体α(RORα)与神经元特异性核蛋白(NeuN)、离子钙接头蛋白-1(IBA-1)或胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的共表达情况，采用免疫荧光染色检测各组PC12细胞中RORα的荧光强度。结果(1)基因芯片检测及双荧光素酶报告分析确定RORα为miR-193b-3p的靶基因。(2)与对照组相比，脂多糖组大鼠的神经行为学评分自脂多糖注射后6 h开始明显降低，24 h时达最低，差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，脂多糖组大鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显升高，miR-193b-3p的表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与阴性对照组[(3.23±0.92)分]相比，miR-193b-3p组大鼠脂多糖注射后48 h的神经行为学评分[(7.51±0.84)分]明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组相比，miR-193b-3p组大鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显降低，miR-193b-3p的表达明显增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)与对照组相比，脂多糖组大鼠海马组织中NeuN(+)RORα(+)细胞数量明显减少，差异有统计学意义(P<0.05)；与阴性对照组相比，miR-193b-3p组大鼠海马组织中NeuN(+)RORα(+)细胞数量明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)。(5)与对照组相比，脂多糖组PC12细胞中RORα的荧光强度明显降低，IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；与脂多糖组相比，脂多糖+miR-193b-3p组PC12细胞中RORα的荧光强度明显增加，IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达均明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-193b-3p通过调控其靶基因RORα在海马神经细胞中的表达，抑制新生脓毒症大鼠的神经炎症反应。

简介：无

简介：

简介：Objective:TheaimofthepresentstudywastoinvestigateantioxidantandtheanticancerigenactivityofamethanolextractfromArtemisiaprincepsvar.orientalis(APME),awell-knowntraditionalherbalmedicineinAsia,inhepatocellularcancercells.Methods:ToevaluatetheantioxidantactivityofAPME,reactiveoxygenspecies(ROS)andtheantioxidantenzymes,superoxidedismutase(SOD)andcatalasewereinvestigatedinHepG2cellsexposedtoAPME(5,100,and200μg/mL)for72h.Then,toevaluatetheanticanceractivityofAPME,weinvestigatedtheproliferationandapoptosisinductionofHepG2andHep3BcellsexposedtoAPME(1-200μg/mL)for24,48,and72h.Results:APMEdose-dependentlyreducedthegenerationofROSinthepresenceofH2O2comparedwithcontrolcells.Furthermore,itincreasedcatalaseandSODactivity.Moreover,APMEinhibitedcellproliferationinadose-andtime-dependentmanner,butatconcentrationslowerthan100μg/mL,theinhibitionwaslessdose-dependentthantime-dependent.HepG2andHep3Bcellsexposedto5,100,and200μg/mLAPMEfor72hunderwentcellcyclearrestandapoptosis.ExposuretoAPMEresultedinasignificantincreaseinthenumberofcellsinG1phaseandadecreaseintheG2/Mphasecellpopulation.Inaddition,APMEinducedP53expressionofHepG2cellsinadose-dependentmanner,andplayedaroleinthedownregulationofBcl-2andupregulationofBaxinbothHepG2andHep3Bcells.Conclusions:TheseresultsindicatethepotentialroleofAPMEasanantioxidantandanticancerigenagentinhepatocarcinomacelllines.

简介：摘要目的探讨分析0～3月龄B族链球菌( GBS)败血症的临床特点及药敏情况。方法抽取2015年1月1日至2019年12月31日郑州大学附属儿童医院新生儿诊疗中心收治的20例0～3月龄GBS败血症患儿为研究对象(GBS组)，根据患儿起病年龄分为早发型(EOD，0～6 d)和晚发型(LOD，7～90 d)，回顾性分析其一般临床资料、首发症状、血液指标、住院时间、药敏等情况，并与同期同病区55例0～3月龄大肠埃希菌败血症(大肠埃希菌组)进行对比分析。结果20例0～3月龄GBS败血症患儿，首发症状以发热为主，其次为呻吟、拒乳；LOD发生率高于EOD。GBS组白细胞数计数<5×109 、血清C-反应蛋白(CRP)50～100 mg/L、血清降钙素原(PCT)>100 ng/ml及>10 ng/ml的患儿占比均大于大肠埃希菌组，两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。GBS组并发化脓性脑膜炎(PM)及难治性化脓性脑膜炎(RPM)，住院天数>21 d、>40 d及>50 d的患儿占比均大于大肠埃希菌组，两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。GBS组PM患儿腰椎穿刺次数≥5次的患儿占比大于大肠埃希菌组，差异有统计学意义(P<0.05)。20例患儿GBS菌种对青霉素、万古霉素、利奈唑胺、美罗培南、头孢吡肟、头孢噻肟、氯霉素、阿莫西林、氨苄西林耐药率均为0，对左氧氟沙星、四环素、克林霉素和红霉素的耐药率分别为45%、75%、85%、85%。结论0～3月龄GBS败血症患儿感染症状重，常合并RPM，且并发症多，住院时间长。GBS菌株对克林霉素和红霉素耐药严重。早期诊断及有效治疗非常重要，同时应做好GBS产前筛查防治工作。

简介：TiB2ceramicspowderwassynthesizedfromB2O3-TiO2-Mgsystem.TheeffectsofTiB2additionasdiluentonthecombustionsynthesisprocesswereinvestigated.TheresultsofthermodynamiccalculationandexperimentsshowthattheincreaseofTiB2contentrangingfrom0to20wt%canreducetheadiabatictemperatureTadfrom3100Kto2896KandcombustiontemperatureTcfrom2139Kto1621Krespectively.TheparticlesizeandhalfwidthoftheparticledistributionarealsoincreasedwiththeadditionofTiB2increasingfrom0to20wt%.ThecombustionproductisamixtureofTiB2,MgO,andotherintermediatephases.TheleachedproductcontainsmainlyTiB2,TiO2andTiN,anditsoxygencontentis7.77wt%.

简介：摘要目的研究齐墩果酸联合5-Fu对人肝癌细胞Hep3B增殖的影响。方法观察组细胞予以150μg/ml5-FU及不同浓度的齐墩果酸，对照组予等量培养液，以MTT法检测观察组细胞增殖的抑制情况。结果齐墩果酸的给药浓度与细胞增殖抑制率大体呈正相关；在5～100μg/ml范围内，随着齐墩果酸的给药浓度的增加,对Hep3B细胞生长的抑制率也增加;而当药物浓度为100～400μg/ml时，细胞生长抑制率呈稳定状态(P<0.05)。结论齐墩果酸联合5-Fu能够抑制肝癌Hep3B细胞株增殖。

简介：摘要：当前，我国机车电力产业伴随社会的开展，也越来越注重创新。在运输功能中铁路交通发挥着重要作用，在铁路系统的运行中机车发挥着重要作用。铁路机车在长期运行中，故障是不可避免的，要及时采取纠正措施，了解故障原因，将故障的影响降到最低。在机车的日常运行中，要做好维护保养工作，以发挥早期发现问题和预防故障的作用。本文对车载数据采集装置的数据记录功能、测量功能、数据的系统结构、无线数据传输功能及其功能进行说明，结合机车电气设备数据检测分析系统的需求分析，检测数据的地面分析功能和转储功能，将该系统应用于HXN3型内燃机车控制电路及牵引风机的状态检测，对HXN3B型内燃机车电气设备的故障判定和准确维修进行了有益的考察，取得了良好的效果。

简介：摘要目的探索白头翁皂苷B4对卵巢癌SKOV3细胞株细胞增殖、凋亡及迁移的影响及其机制。方法体外培养卵巢癌SKOV3细胞，利用CCK-8法检测不同浓度白头翁皂苷B4处理SKOV3细胞后其增殖情况，并计算IC50值；流式细胞术检测IC50值浓度下不同时间白头翁皂苷B4处理细胞后的凋亡情况；Transwell法检测IC50值浓度白头翁皂苷B4处理细胞不同时间后细胞迁移和侵袭情况；Western blot检测细胞内相关蛋白表达量变化。结果白头翁皂苷B4能有效抑制SKOV3细胞的增殖，呈现出浓度依赖性，IC50值为（6.08±0.56）μM，且抑制效果强于阳性对照药物顺铂，差异具有统计学意义（P<0.05）；流式细胞术显示白头翁皂苷B4处理24 h后SKOV3细胞的凋亡比例为52.3%，且降低了Bcl-xl表达，上调了Bax，cleaved-caspase-3和PARP表达，且与0 h组相比差异具有统计学意义（P<0.05）；白头翁皂苷B4能下调N-cadherin的表达，上调E-cadherin表达，进而抑制SKOV3细胞的迁移；白头翁皂苷B4能抑制JAK/STAT3信号通路蛋白的表达。结论白头翁皂苷B4能有效抑制卵巢癌细胞的增殖，并通过调控JAK/STAT3信号通路影响SKOV3细胞凋亡并抑制其发生迁移，白头翁皂苷B4在卵巢癌的治疗及新药开发中具有研究潜力。

简介：摘要目的观察非长链编码RNA垂体瘤转化基因3假基因(PTTG3P)对宫颈癌(CC)细胞增殖、侵袭转移及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法选取2018年5月至2019年5月新乡市中心医院手术切除并经病理诊断确诊的宫颈癌原发灶组织(CC)10例及其配对生物癌旁组织(NCT，癌周2 cm)。采用实时荧光定量PCR检测CC和NCT中PTTG3P mRNA的表达。检测TTG3P shPRNA对CC细胞增殖能力、侵袭能力、上皮-间充质转化(EMT)及PI3K/Akt信号通路的影响。检测PTTG3P与其亲本基因PTTG1在CC组织中的相关性及对PTTG1表达的影响。采用Pearson相关性分析研究CC组织中PTTG1与PTTG3P的相关性。结果PTTG3P mRNA在CC中的相对表达量为(4.930±1.724)，在NCT中为(1.270±0.629)，比较差异有统计学意义(t＝6.125，P<0.01)。PTTG3P shRNA可显著抑制CC细胞的增殖能力及侵袭能力(增殖48 h：1.895±0.302比1.442±0.261, t＝5.190;增殖72 h: 2.615±0.338比1.825±0.293, t＝5.657;侵袭：穿膜细胞数194±59比133±48，t＝5.387，P<0.05)，降低Snail、Slug、p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(Snail：1.16±0.22比0.53±0.17，t＝4.532；Slug：1.02±0.19比0.74±0.13，t＝2.432；p-Akt：0.35±0.12比0.16±0.07，t＝2.735；p-PI3K：0.19±0.08比0.07±0.02，t＝2.910)，增加E-cadherin蛋白的表达(0.76±0.15比1.35±0.30，t＝3.518，P<0.05)。PTTG1 mRNA的相对表达量在CC中为(5.810±2.206)，在NCT中为(1.970±0.693)，比较差异有统计学意义(t＝6.043，P<0.01)。在CC中PTTG1 mRNA与PTTG3P mRNA相对表达量显著正相关(r2＝0.745，P<0.01)。PTTG3P shRNA可显著降低PTTG1 mRNA的相对表达量(P<0.05)。结论PTTG3P在CC患者原发灶中上调，可促进CC细胞的增殖及侵袭。其机制可能与上调PTTG1、激活PI3K/Akt信号通路，进而促进EMT过程有关。