简介:目的:阐明黄连素即盐酸小檗碱(berberinehydrochloride,BBR)对人肝癌细胞HepG2中细胞色素P4503A4(CYP3A4)、多药耐药基因(MDR1)在mRNA和蛋白水平表达的影响,初步探讨黄连素对CYP3A4和P-糖蛋白(P-gp)的影响及其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度的BBR(1~100μg/mL)对HepG2细胞活力的影响;并在BBR对HepG2细胞毒性较小的浓度范围进行实验,实验分为空白对照组、不同浓度BBR组、诱导剂利福平(Rif)组以及不同浓度BBR和Rif共同给药组,与对数期HepG2细胞孵育48h后,提取细胞RNA和总蛋白,分别采用荧光定量PCR法(QRT-PCR)、Westernblot法检测HepG2细胞中CYP3A4、MDR1、孕烷X受体(pregnaneXreceptor,PXR)、视黄醛X受体(retinoidXreceptor,RXR)在mRNA水平的表达和CYP3A4、P-gp在蛋白水平的表达。结果:BBR在1~40μg/mL浓度范围内对HepG2细胞毒性小,细胞活力大于80%,超过40μg/mL时对细胞毒性大,细胞存活率低。Westernblot结果表明,与空白对照组比较,0.1、0.5和2μg/mLBBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有诱导作用(P〈0.05),但10、40μg/mLBBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有显著性抑制作用(P〈0.01)。QRT-PCR结果表明,与空白对照组比较,10、20和40μg/mLBBR均对HepG2细胞PXR、CYP3A4、MDR1mRNA的表达有显著抑制作用(P〈0.05);但10μg/mLBBR对RXRmRNA无显著性影响(P〉0.05),20、40μg/mLBBR对RXRmRNA有显著的抑制作用(P〈0.05)。结论:黄连素对CYP3A4和P-gp有双向作用,低剂量时诱导,高剂量时抑制,并且其作用很有可能通过PXR信号通路实现。
简介:【摘要】 目的 本研究对比PBL及LBL教学模式在心内科实习教学中的应用 方法 选取 2017年9月-2019年06月我院心内科实习的临床专业学生78名,随机分为2组。对照组(n=39)行LBL教学模式教学,研究组(n=39)行PBL教学模式,对比2组学生实习后理论成绩及实践成绩。结果 研究组学生理论、实践成绩明显优于对照组(P
简介:摘要目的探讨不同病因和机制类型的缺血性脑卒中使用阿替普酶(rt-PA)治疗的效果及安全性。方法选择我院发病4.5小时内的急性缺血性脑卒中患者200例,分为rt-PA静脉溶栓治疗组及非溶栓对照组。将治疗组与对照组按照病因及发病机制进行分组,就治疗组(n=100例)与对照组(n=100例)治疗效果进行对比。结果治疗组在治疗后NIHSS评分改善优于对照组,特别是大动脉粥样硬化(LAA型)组,其中rtPA对动脉-动脉栓塞、载体动脉堵塞穿支机制所致急诊缺血性脑梗塞效果显著(P<0.05),不良反应发生率与对照组无显著差异。结论发病4.5小时内的急性缺血性脑卒中患者采取静脉溶栓治疗可提高患者疗效,减少残障,特别是LAA型脑卒中,且具有较好的疗效(P<0.05)。
简介:摘要目的探讨前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)对足细胞脂质稳态和细胞损伤的影响及其作用机制。方法选取12周龄C57BL/6野生型小鼠(对照组,n=10)和系统性敲除PCSK9基因型小鼠(PCSK9 KO组,n=10)为动物模型,经心脏全身灌注后取肾组织。体外培养小鼠足细胞,用干扰小RNA(siRNA)敲低足细胞PCSK9的表达。用荧光染料BODIPY 493/503染色法观察小鼠肾组织肾小球及体外培养足细胞内的脂质蓄积程度;透射电子显微镜观察足细胞的足突、线粒体结构和脂滴大小及其分布;TUNEL染色法评估肾小球内的细胞凋亡;实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹法检测线粒体功能相关关键酶过氧化物酶体增殖物激活受体C辅激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor-C coactivator 1α,PGC-1α)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(carnitine palmitoyltransferase 1,CPT-1)、乙酰辅酶A氧化酶1(acetyl CoA oxidase 1,Acox-1),以及凋亡相关指标的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,PCSK9 KO组小鼠肾小球内脂质蓄积更显著;肾组织内线粒体功能相关关键酶PGC-1α蛋白和mRNA相对表达量均显著降低,CPT-1和Acox-1的mRNA相对表达量也均显著降低(均P<0.05);肾小球足细胞内线粒体肿胀、嵴消失,足细胞的足突部分融合、消失;肾小球内细胞凋亡指数增加(P<0.05)。与对照组比较,体外培养的PCSK9 siRNA组足细胞内脂质蓄积显著,线粒体功能相关关键酶PGC-1α、CPT-1和Acox-1的mRNA相对表达量下降,线粒体结构受损,细胞凋亡指数增加(均P<0.05)。结论PCSK9参与足细胞的脂代谢平衡,PCSK9表达减少增加足细胞内脂质沉积,诱导线粒体结构及功能受损,导致细胞凋亡。
简介:摘要卵圆孔未闭(patent foramen ovale, PFO)是一种先天性心脏病,见于约25%的健康成年人。近年来,越来越多的研究表明PFO与隐源性卒中(cryptogenic stroke, CS)关系密切。尽管目前认为反常性栓塞是CS发病的主要机制之一,但确切机制仍存在着争议。此外,PFO患者CS的治疗也是争论的焦点。近期临床试验表明,PFO封堵术在预防卒中复发方面明显优于单纯药物治疗,尤其是对于右向左分流量较大以及合并房间隔瘤的患者。文章对PFO患者CS的潜在机制和预防策略进行了综述。
简介:摘要目的探讨circ LARP4在肝癌组织中表达水平及其对肝癌细胞增殖、周期和侵袭的影响及其分子机制。方法选取2019年1月到2022年1月我院手术切除的71例肝癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肝癌组织和癌旁组织circ LARP4表达水平。分别采用circ LARP4短发卡RNA(shRNA)和circ LARP4过表达慢病毒感染Huh7细胞,构建对照组和circ LARP4组细胞系。分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和异体移植瘤检测细胞增殖能力;采用流式细胞术测定细胞的周期变化;采用Transwell测定细胞的侵袭能力;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞增殖、周期和侵袭相关的蛋白表达水平。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析circ LARP4的靶基因,采用荧光定量PCR分析circ LARP4对其靶基因表达水平的影响。结果癌旁组织中circ LARP4表达水平(1.37±0.16)明显高于肝癌组织(0.41±0.16),差异有统计学意义(t=35.110,P<0.05)。对照组细胞48 h和72 h吸光度值(1.37±0.16;2.02±0.06)明显高于circ LARP4组(0.81±0.10;1.48±0.09,差异有统计学意义(t=7.520、12.371,P<0.05)。对照组细胞在裸鼠中生长速度明显高于circ LARP4组细胞,差异有统计学意义(F=11.710,P<0.05)。对照组细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)蛋白表达水平(1.72±0.18)明显高于circ LARP4组细胞(0.85±0.09),差异有统计学意义(t=11.920,P<0.05)。对照组细胞G0/G1期细胞比例(49.24±3.12)明显低于circ LARP4组细胞(63.07±2.26),差异有统计学意义(t=9.486,P<0.05)。对照组细胞S期细胞比例(16.35±1.59)明显低于circ LARP4组细胞(27.07±4.48),差异有统计学意义(t=5.959,P<0.05)。对照组细胞细胞周期D1(Cyclin D1)表达水平(1.35±0.09)明显高于circ LARP4组细胞(0.77±0.11),差异有统计学意义(t=11.130,P<0.05)。对照组细胞侵袭数量(142.71±23.91)明显高于circ LARP4组细胞(75.86±8.99),差异有统计学意义(t=6.927,P<0.05)。对照组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-3表达水平(1.08±0.16)明显高于circ LARP4组细胞(0.49±0.14),差异有统计学意义(t=7.269,P<0.05)。circ LARP4与miR-367存在潜在结合能力。对照组细胞miR-367表达水平(1.28±0.15)明显高于肝癌组织(0.54±0.10),差异有统计学意义(t=35.110,P<0.05)。结论circ LARP4通过靶向miR-367,进而调节着肝癌细胞的增殖、周期和侵袭等恶性细胞生物学行为。
简介:摘要细胞焦亡是一种继细胞凋亡、细胞坏死及自噬之后新发现的炎性体介导的程序性促炎性反应造成细胞死亡方式,其主要信号通路包括依赖半胱天冬酶1(caspase-1)的经典焦亡途径和依赖caspase-4、caspase-5、caspase-11的非经典焦亡途径,参与机体正常生理功能,在许多疾病的发病过程起重要作用,尤其在神经退行性疾病,如阿尔茨海默病、青光眼等。青光眼是一组威胁和损伤视神经及其视觉通路最终导致视觉功能损伤、主要与病理性眼压升高有关的临床疾病。随着越来越多的研究关注于细胞焦亡及其在眼部疾病中的作用机制,细胞焦亡在青光眼发病机制及治疗方面的研究也取得较大的进展,最新研究发现细胞焦亡参与青光眼的发病;尤其是视网膜神经节细胞的焦亡和小胶质细胞介导的细胞焦亡在青光眼的发生发展中可能具有关键地位,随着对细胞焦亡与青光眼关系的深入研究,通过靶向干预视网膜神经节细胞的焦亡途径和小胶质细胞相关的焦亡有望为青光眼治疗带来新的曙光,细胞焦亡介导的作用机制有可能为青光眼发病机制和治疗提供新的思路。(中华眼科杂志,2021,57:702-706)