简介：

简介：声纳信号处理技术的进步极大地提高了海测声纳的性能指标。分析了传统海测声纳采用PCW等幅波脉冲信号的特点及其局限性，以及采用Chirp信号的特点及其优越性，并结合DatasonicsSIS-1000侧扫伐剖海测声纳给出其距离分辨率、信噪比改善的理论解释。

简介：摘要随着时代的不断发展，科学技术水平的日益提高，铁路列车运行控制技术也逐渐趋于完善。伴随着高铁等项目的实施及铁路的大提速，铁路运输日益成为我国一种举足轻重的运输方式，对于铁路运行中起着至关重要的作用，对铁道信号技术的要求越来越高，本文主要阐述了铁道信号技术发展历程、发展现状及铁道信号技术的发展前景。

简介：主要论述模拟信号的计算机检测系统前置通道干扰产生的机理和抑制的主要方法．对于小信号检测系统来说，前置通道的最主要功能是放大，故相同的干扰信号作用于前置通道的比作用于后向通道产生的影响要大得多，因此了解前置通道的干扰信号的产生机理和找到最佳抑制干扰的方法是保证设备正常工作的关键，这样对小信号检测系统前置通道的抗干扰方法的研究显得尤为重要．

简介：摘要：城市化的发展让我国的交通压力进一步增加，而地铁工程的建设对于交通压力问题进行了有效的缓解，在其中展现出了独特的成效。地铁信号系统的发展有助于实现地铁的自动运行、控制以及防护的任务与要求。本文针对地铁信号系统中的智能信号的功能做进一步的分析，希望可以在其中获得更多的收获，让地铁信号系统的运行更加顺畅，防止在其中产生安全事故而造成严重损失。

简介：摘要：近年来，随着铁道信号工程与信号技术的不断发展，我们面临着日益复杂的挑战。在这一背景下，加强管理与监管、强化人员培训与素质提升以及探索合作与共享模式成为了迫切需要的对策。这些举措不仅能够提升铁路运输的安全稳定性，还能够推动技术创新与发展。因此，我们迫切需要在这些方面进行深入探索与行动。

简介：细胞凋亡和上皮细胞间质转化（EMT）对于正常发育和机体自稳非常重要。凋亡和上皮细胞间质转化这些事件的改变常与一些病理过程相关，比如肿瘤形成和转移、肝脏与肾脏的纤维化疾病、胚胎发育异常等。TGF-β1诱导凋亡和EMT同时发生的机制尚未完全明了。作者研究了TGF—G1诱导细胞凋亡和EMT的潜在机制。TGF—β1诱导细胞凋亡和EMT与蛋白激酶A、信号转导分子、转录激活子3（STAT3）的活化相关。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)PEBP1P2在肾细胞癌组织中的表达及对肾细胞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测51例肾细胞癌组织及肾细胞癌细胞株中PEBP1P2的表达。以PEBP1P2表达最低的A498细胞为转染对象，设转染PEBP1P2质粒的细胞为PEBP1P2组，转染阴性对照质粒的细胞为NC组。qPCR检测两组细胞PEBP1P2的表达。MTT法和Transwell迁移实验检测肾细胞癌细胞的增殖能力和迁移能力。qPCR和Western blotting法分别检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶招募域家族分子10(CARD10)基因及NF-κB通路蛋白的表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用LSD-t检验。结果肾细胞癌组织中PEBP1P2的表达低于癌旁组织(t＝4.89，P<0.01)。肾细胞癌细胞中PEBP1P2的表达低于正常肾小管上皮细胞(P<0.01)。PEBP1P2组和NC组A498细胞中PEBP1P2表达分别为(11.01±1.26)和(1.06±0.19)，PEBP1P2组明显高于NC组(t＝7.81，P<0.01)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌细胞的增殖能力(P<0.05)和迁移能力(t＝3.65，P<0.05)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞中CARD10基因的表达(t＝6.83，P<0.01)，抑制NF-κB信号通路蛋白的转导。结论PEBP1P2在肾细胞癌组织表达明显降低，过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞的增殖和迁移能力，其分子机制可能是PEBP1P2通过下调CARD10基因表达抑制NF-κB信号通路转导。

简介：摘要研究发现Wnt/β-catenin信号通路在骨髓间充质干细胞的增殖、分化过程中具有重要。因此，骨髓间充质干细胞移植、分化过程中遇到的问题，如骨髓间充质干细胞的定向诱导分化，可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路来找到解决方案，让骨髓间充质干细胞定向分化及成功移植成为治疗迟发性腺功能减退症(LOH)的新方法。本文对Wnt/β-catenin信号通路调控骨髓间充质干细胞向睾丸间质细胞分化的机制及治疗LOH的研究进展进行综述。

简介：摘要目的探讨高迁移率族蛋白1（HMGB1）-核因子κB（NF-κB）信号通路对人肝癌细胞自噬和化疗敏感性的影响及可能机制。方法体外培养肝癌细胞BEL-7402，分为对照组（不作任何处理的BEL-7402细胞）、多柔比星组、重组人HMGB1+多柔比星组、抗HMGB1中和抗体+多柔比星组、吡咯烷二硫氨基甲酸酯+多柔比星组以及3-甲基腺嘌呤+多柔比星组。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖抑制率；蛋白质印迹法检测HMGB1及NF-κB亚单位p-p65蛋白表达，同时检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和凋亡相关蛋白bcl-2蛋白的表达；酶标法检测Caspase-9、Caspase-3活性。结果对照组、多柔比星组、重组人HMGB1+多柔比星组、抗HMGB1中和抗体+多柔比星组、吡咯烷二硫氨基甲酸酯+多柔比星组及3-甲基腺嘌呤+多柔比星组细胞增殖抑制率分别为（1.31±0.16）%、（47.80±6.30）%、（31.60±5.68）%、（67.20±6.83）%、（66.60±6.27）%、（68.60±11.19）%，差异有统计学意义（F=75.91，P<0.01），提示多柔比星对BEL-7402细胞有增殖抑制作用，重组人HMGB1预处理后，多柔比星对BEL-7402细胞的增殖抑制作用出现减弱；HMGB1表达水平分别为1.17±0.11、1.37±0.15、1.43±0.15、0.70±0.09、1.27±0.12、1.29±0.18，差异有统计学意义（F=18.70，P<0.01），提示多柔比星作用BEL-7402细胞可使HMGB1高表达，抗HMGB1中和抗体能阻断或减弱这一作用；采用抗HMGB1中和抗体、吡咯烷二硫氨基甲酸酯及3-甲基腺嘌呤预处理细胞后，多柔比星对BEL-7402细胞的增殖抑制作用增强。与对照组相比，多柔比星组、重组人HMGB1+多柔比星组、3-甲基腺嘌呤+多柔比星组p-p65蛋白表达均增加（均P<0.05）；重组人HMGB1+多柔比星组、抗HMGB1中和抗体+多柔比星组、吡咯烷二硫氨基甲酸酯+多柔比星组p-p65蛋白表达均低于多柔比星组（均P<0.05）。与对照组相比，多柔比星组、抗HMGB1中和抗体+多柔比星组、吡咯烷二硫氨基甲酸酯+多柔比星组及3-甲基腺嘌呤+多柔比星组bcl-2蛋白表达减少（均P<0.05），Caspase-9、Caspase-3活性增强（均P<0.05）；加入重组人HMGB1预处理后，细胞中bcl-2蛋白表达较单用多柔比星作用时增加（P<0.05），Caspase-9、Caspase-3活性减弱（均P<0.05）。对照组、多柔比星组、重组人HMGB1+多柔比星组、抗HMGB1中和抗体+多柔比星组、吡咯烷二硫氨基甲酸酯+多柔比星组及3-甲基腺嘌呤+多柔比星组自噬相关蛋白Beclin-1的表达水平分别为0.77±0.12、0.92±0.07、1.29±0.10、0.51±0.03、0.49±0.06、0.42±0.05，差异有统计学意义（F=97.01，P<0.01）。LC3Ⅱ表达水平分别为0.24±0.04、0.39±0.04、0.49±0.07、0.23±0.05、0.20±0.06、0.20±0.05，差异有统计学意义（F=26.98，P<0.01）。结论HMGB1-NF-κB信号通路活化可降低肝癌BEL-7402细胞对多柔比星的化疗敏感性，其机制可能与调控自噬进而下调多柔比星对肝癌细胞的凋亡诱导作用有关。

简介：摘要目的探讨百草枯(PQ)诱导人肺上皮细胞HPAEpiC发生上皮间质转化(EMT)的作用及其分子机制。方法MTT法计算PQ对HPAEpiC细胞的半数抑制浓度(IC50)值，计算最适合诱导HPAEpiC细胞发生EMT的浓度。应用不同活性的Rac1质粒pExRed-NLSFlag（空载体组）、pExRed-NLSFlagRac1（野生型Rac1组）、pExRed-NLSFlagRac1T17N（显性负调控Rac1组）、pExRed-NLSFlagRac1G12V（持续活化型Rac1组）瞬时转染HPAEpiC细胞，经PQ处理细胞。采用免疫印迹法检测上皮标志物Ck8、E-cadherin和间质标志物Vimentin、α-SMA表达，Transwell法检测细胞迁移能力，同时采用流式细胞仪检测细胞的ROS水平。结果PQ对HPAEpiC细胞的IC50值为91.3μmol/L;体外PQ诱导HPAEpiC细胞上皮间质转化的发生，并伴随着细胞迁移能力的增强，同时促进HPAEpiC细胞ROS的表达。与PQ组、空载体组和野生型Rac1组比，持续活化型Rac1转染细胞后，PQ诱导的上皮间质转化过程明显增强，同时迁移能力增强，ROS表达增高；而显性负调控Rac1转染细胞后，则得出相反的结论。结论PQ在促进人肺上皮HPAEpiC细胞死亡的同时促进其向EMT转化，且通过Rac1-ROS来诱导HPAEpiC细胞上皮间质转化的发生。

简介：目的：探讨葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2）凋亡的信号传导途径。方法：利用葡萄糖诱导细胞凋亡：将不同浓度葡萄糖作用于HK-2细胞不同时间，并经透射电镜观察、流式细胞仪（FCM）检测凋亡细胞。采用抑制剂拮抗葡萄糖诱导凋亡：分别将不同浓度的蛋白激酶C抑制剂（hypericin）、半胱氨酸蛋白酶（caspase-3）抑制剂（apopain）、蛋白酪氨酸激酶抑制剂（genistein）、一氧化氮合酶抑制剂（NAME）作用于HK-2细胞30min，再加50mmol／L葡萄糖作用48h，后行FCM检测HK-2细胞凋亡情况。结果：50mmol／L葡萄糖作用48h可诱导HK-2细胞发生凋亡，并可通过透射电镜观察到凋亡小体，而FCM检测发现10^-4mmol／Lhypericin、10^-4mmol／L和10^-6mmol／Lapopain、10^-7mmol／Lgenistein、10^-2mmol／LNAME可明显抑制葡萄糖诱导的HK-2细胞凋亡。结论：蛋白激酶C、caspase-3、蛋白酪氨酸激酶、一氧化氮（NO）都参与了葡萄糖诱导HK-2细胞凋亡的信号传导过程。

简介：摘要目的观察AG490对膀胱癌细胞侵袭转移的影响，探讨通过药物阻断STAT3信号转导通路在抑制膀胱癌细胞侵袭转移中的作用。方法应用AG490处理膀胱癌细胞系BIU-87，以肿瘤侵袭模型检测膀胱癌细胞侵袭转移能力，以免疫组织化学SP法检测肿瘤微血管密度(MVD)，Westernblot检测p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平，反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP-2）及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达。结果AG490抑制STAT3单体活化为p-STAT3，明显抑制膀胱癌细胞侵袭能力，裸鼠皮下移植瘤MVD值在AG490组(34.8+2.5)显著低于对照组(46.2+6.6)，P<0.01，抑瘤率达74.49%；并抑制MMP-2、VEGFmRNA的表达，同时上调TIMP-2mRNA的表达。结论AG490通过阻断STAT3通路，抑制膀胱癌细胞的侵袭和转移。病理性肿瘤血管生成减少及MMP-2、TIMP-2、VEGF表达改变与AG490抗肿瘤侵袭转移作用密切相关。

简介：摘要目的评价瑞芬太尼对肠缺血再灌注大鼠肠上皮细胞凋亡时丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠36只，体重200～250 g，2月龄，采用随机数字表法分为3组(n＝12)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)和瑞芬太尼组(R组)。采用夹闭大鼠肠系膜上动脉1 h恢复灌注的方法制备大鼠肠缺血再灌注损伤模型。R组缺血前30 min静脉输注瑞芬太尼0.2 μg·kg-1·min-1 5 min，静脉输注生理盐水5 min，重复循环3次。于再灌注2 h时采集大鼠右心室血样测定血清二胺氧化酶(DAO)浓度，随后处死大鼠取小肠组织，观察病理学结果并进行Chiu评分；TUNEL法计数凋亡肠上皮细胞，采用Western blot法检测肠组织磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、p-p38 MAPK的表达，活化型半胱氨酸蛋白酶(cleaved caspase-3)和核蛋白NF-κB p65的表达，计算p-ERK/ERK比值、p-JNK/JNK比值和p-p38 MAPK/p38 MAPK比值。结果与Sham组比较，I/R组大鼠肠黏膜Chiu评分、血清DAO浓度、肠上皮细胞凋亡率、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK和p-p38 MAPK/p38 MAPK比值、cleaved caspase-3、NF-κB p65表达水平升高、R组大鼠肠黏膜Chiu评分升高(P<0.05)，血清DAO、肠上皮细胞凋亡率、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值、cleaved caspase-3和NF-κB p65表达水平差异无统计学意义(P>0.05)；与I/R组比较，R组大鼠肠黏膜Chiu评分、肠上皮细胞凋亡率、血清DAO浓度下降，p-ERK/ERK比值、cleaved caspase-3、NF-κB p65表达水平降低(P<0.05)。结论瑞芬太尼抑制肠缺血再灌注大鼠肠上皮细胞凋亡的机制与促进ERK活化有关。

简介：摘要目的探讨一种BMX可变剪切体BMXΔN参与肺癌表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼耐药的作用机制。方法利用慢病毒感染携带EGFR突变的人肺癌细胞株PC9和HCC827构建BMXΔN稳转细胞株。实验分为PC9-Vec组(阴性对照转染空载体PC9细胞)、PC9-BMX组(稳定表达BMX的PC9细胞)、PC9-BMXΔN组(稳定表达BMXΔN的PC9细胞)以及HCC827-Vec组(阴性对照转染空载体HCC827细胞)、HCC827-BMXΔN组(稳定表达BMXΔN的HCC827细胞)。采用实时定量PCR检测细胞中mRNA表达水平；采用蛋白质印迹法检测细胞中蛋白表达水平；0 nmol/L、0.01 nmol/L、2.00 nmol/L、50.00 nmol/L、100.00 nmol/L、200.00 nmol/L、2.00 μmol/L、4.00 μmol/L吉非替尼处理PC9-Vec组和PC9-BMXΔN组细胞，0 nmol/L、0.01 nmol/L、1.00 nmol/L、10.00 nmol/L、100.00 nmol/L、1.00 μmol/L吉非替尼处理HCC827-Vec组和HCC827-BMXΔN组细胞，采用MTT法检测细胞活力。结果PC9-BMXΔN组细胞散落并呈现成纤维样形态。与PC9-Vec组细胞相比，PC9-BMXΔN组细胞中纤连蛋白、神经钙黏素、波形蛋白、Snail、Slug和TWIST 2的mRNA表达均上调。与PC9-Vec组和PC9-BMX组细胞相比，PC9-BMXΔN组细胞中纤连蛋白和波形蛋白表达均上调，上皮钙黏素的表达下调。与PC9-Vec组细胞相比，经0.01 nmol/L[(99.11±2.16)% vs. (91.29±1.91)%，t＝-4.701，P＝0.011]、2.00 nmol/L[(80.41±1.48 )% vs. (63.36±2.14)%，t＝-11.324，P<0.001]、50.00 nmol/L[(80.83±5.38)% vs. (60.22±3.61)%，t＝-5.507，P＝0.005]、100.00 nmol/L[(75.54±3.46)% vs. (59.93±1.91)%，t＝-6.836，P＝0.002]、200.00 nmol/L[(77.57±6.53)% vs. (56.70±2.88)%，t＝-5.064，P＝0.007]、2.00 μmol/L[(70.22±3.45)% vs. (53.14±0.89)%，t＝-8.309，P＝0.001]、4.00 μmol/L[(68.66±4.67)% vs. (52.30±2.59)%，t＝-4.882，P＝0.008]浓度吉非替尼处理的PC9-BMXΔN组细胞活力均显著升高，差异均有统计学意义；与HCC827-Vec组相比，经1.00 nmol/L[(64.36±2.49 )% vs. (47.13±4.21 )%，t＝-7.067，P＝0.019]、10.00 nmol/L[(63.25±5.87 )% vs. (43.28±2.95)%，t＝-5.267，P＝0.006]、100.00 nmol/L[(49.47±5.74)% vs. (37.12±4.92)%，t＝-2.830，P＝0.047]、1.00 μmol/L[(49.05±3.34)% vs. (32.06±4.73)%，t＝-5.073，P＝0.007]吉非替尼处理的HCC827-BMXΔN组细胞活力均显著升高，差异均具有统计学意义。吉非替尼处理明显抑制了PC9-Vec组、PC9-BXM组和PC9-BMXΔN组细胞中p-EGFR和p-ERK1/2的表达；与PC9-Vec组(0.81±0.04)和PC9-BXM组(0.80±0.05)相比，PC9-BMXΔN组细胞p-EGFR的表达水平经吉非替尼处理8 h后(0.91±0.04)显著升高(均P<0.05)；p-ERK1/2的表达经吉非替尼处理2 h后(0.64±0.06 vs. 0.38±0.12 vs. 0.37±0.14)、4 h(1.28±0.06 vs. 1.08±0.06 vs. 1.11±0.07)、8 h(0.75±0.04 vs. 0.55±0.05 vs. 0.60±0.07)均显著升高，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论BMXΔN参与了肺癌EGFR-TKI吉非替尼耐药，可能是通过诱导细胞发生上皮间质转化和激活ERK/MAPK通路实现的。

简介：摘要目的探讨微小RNA-101a(miRNA-101a)是否通过调控肌醇需要酶1α蛋白(IRE1α)信号通路介导肝星状细胞活化以及对肝纤维化的影响。方法建立CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型，实时定量PCR检测肝组织中miRNA-101a的表达，Western印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、I型胶原、IRE1α的蛋白表达。肝星状细胞(HSC)-T6处理分为HSC组、转化生长因子(TGF)β1活化组、TGFβ1+miRNA-NC组(转染miRNA-101a空白对照质粒)和TGFβ1+miRNA-M组(转染miRNA-101a模拟质粒)。给予对应干预后，检测各组间miRNA-101a、αSMA、I型胶原和IRE1α的表达差异。结果与对照组小鼠相比，实验组小鼠肝组织中纤维沉积明显[(0.17±0.06)%比(2.09±0.39)%]，miRNA-101a相对表达水平下调[(1.00±0.05)比(0.43±0.05)]，差异有统计学意义(均P<0.001)；而且实验组小鼠肝组织αSMA、I型胶原及IRE1α蛋白相对表达水平上调[(1.00±0.23)比(4.09±0.80)、(1.00±0.21)比(4.98±1.19)、(1.00±0.24)比(3.27±0.65)]，差异有统计学意义(均P<0.001)。TGFβ1处理抑制HSC-T6细胞miRNA-101a表达，诱导HSC-T6活化，导致αSMA、I型胶原以及IRE1α蛋白表达上调；TGFβ1+miRNA-M组中miRNA-101a表达水平(1.89±0.20)明显高于TGFβ1+miRNA-NC组(0.59±0.19)，差异有统计学意义(P<0.001)。过表达miRNA-101a后，αSMA、I型胶原蛋白表达明显降低[(2.65±0.69)比(0.84±0.13)、(3.15±0.59)比(1.31±0.25)]，差异有统计学意义(均P<0.05)；IRE1α蛋白表达亦下调[(2.63±0.47)比(1.03±0.15)]，差异有统计学意义(P<0.001)。结论miRNA-101a可能通过抑制IRE1α信号通路抑制肝星状细胞活化和肝纤维化形成。

简介：摘要目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ，PPARγ)/CD36通路在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)感染巨噬细胞脂质代谢中的作用。方法以THP-1源性巨噬细胞建立感染模型，将实验分为对照组、Mtb组、Mtb+罗格列酮(rosiglitazone，ROZ)组和Mtb+GW9662组。分别采用Western blot和RT-PCR检测巨噬细胞中PPARγ蛋白和基因表达水平；油红O染色法检测细胞内脂质情况；全自动生化分析仪检测细胞培养上清中总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglycerides，TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL-C)和高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL-C)浓度；免疫组织化学法检测细胞中CD36表达；CCK-8检测巨噬细胞增殖率。结果Mtb感染显著升高巨噬细胞中PPARγ表达(P<0.001)、促进细胞内脂质聚集及CD36表达，降低细胞培养上清中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量(P<0.001)和细胞增殖率(P<0.001)。PPARγ激动剂ROZ可显著增强Mtb感染所致的细胞内脂质聚集及CD36表达、进一步下调细胞培养上清中脂质水平及各细胞增殖率，而PPARγ拮抗剂GW9662则逆转上述作用。结论PPARγ通过影响CD36表达在Mtb感染巨噬细胞脂质代谢中发挥一定作用。

简介：摘要阿尔茨海默病(AD)患者或AD动物模型大脑中β-淀粉样蛋白(Aβ)、tau蛋白、早老素(PS)1、PS2和载脂蛋白E4(ApoE4)等会影响神经元细胞膜、内质网膜和线粒体膜上的钙通道，最终导致神经元的钙稳态失衡。Aβ还可以作用于星形胶质细胞(AS)内质网引起AS内钙信号异常。而大脑异常的钙信号反过来会作用于神经元和AS，促进Aβ的产生、tau蛋白磷酸化，从而加重AD病情。本研究围绕AD中神经元和AS内钙信号的变化进行综述，以期阐明神经元和AS内钙稳态失衡与AD病理学特征之间的联系，为AD的预防和治疗提供新思路。

简介：摘要目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)在防治大鼠激素性骨质疏松(GIOP)方面的疗效及其潜在的分子生物学机制。方法采用光学显微镜、流式细胞技术对HUC-MSCs进行表征和鉴定。成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、地塞米松(DEX)组、DEX+不同比例HUC-MSCs组。对照组加入正常培养基，DEX组加入10 μmol/L DEX处理，DEX+不同比例HUC-MSCs组加入10 μmol/L DEX处理细胞，然后将HUC-MSCs按照1∶1、10∶1、100∶1的比例在共培养小室中与MC3T3-E1非接触式共培养48 h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力。24只SD大鼠随机分成3组(n＝8)：对照组、模型组、治疗组(HUC-MSCs组)。模型组使用DEX构建GIOP模型，对照组给予等量磷酸盐缓冲液(PBS)，治疗组在构建GIOP模型的同时通过尾静脉注射约106个HUC-MSCs进行治疗。8周后取股骨组织样本，采用苏木精-伊红(HE)染色观察空骨陷窝率，脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色评价细胞凋亡。进行Micro CT扫描，测量骨密度(BMD)、单位组织体积的骨量(Bv/Tv)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)、骨小梁数量(Tb.N)等骨质疏松相关指标。提取组织蛋白后，用蛋白印迹法(Western blot)检测通路蛋白表达。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果流式细胞鉴定结果显示，HUC-MSCs高表达CD44(99.9%)、CD73(98.0%)、CD90(100.0%)、CD105(99.6%)、CD166(99.9%)，低表达CD14(0.43%)、CD19(1.11%)、CD34(0.89%)、CD45(1.06%)、HLA-DR(0.38%)，符合HUC-MSCs表面特异性抗原表达规律。CCK-8显示，模型组较对照组细胞活力明显下降，与HUC-MSCs共培养后可部分恢复MC3T3-E1活力。HE染色对照组、模型组、HUC-MSCs组空骨陷窝率分别为(2.546±1.049)%、(28.720±1.546)%、(13.600±1.012)%。TUNEL染色结果对照组、模型组、HUC-MSCs组TUNEL阳性细胞的比例分别为(2.334±0.789)%、(24.140±4.646)%、(11.610±2.974)%。Micro CT显示模型组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均降低，Tb.Sp增加，HUC-MSCs治疗可以一定程度上逆转上述改变。Western blot结果表明，与对照组比较，模型组β-连环蛋白(β-catenin)、Runt相关基因2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)蛋白表达均明显下降，硬化素(SOST)蛋白表达增加，HUC-MSCs治疗组β-catenin、Runx2、BMP-2表达较模型组增加，SOST表达相应减少。结论HUC-MSCs能够通过Wnt/β-catenin信号通路改善地塞米松所致的骨丢失。

简介：摘要目的探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)-维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)-白细胞介素17(IL-17)信号通路在中性粒细胞哮喘小鼠气道炎症中的作用机制。方法本研究为实验研究。按随机数字表法将36只雌性BALB/C小鼠分为3组：正常对照组、嗜酸粒细胞哮喘组、中性粒细胞哮喘组，每组12只。腹腔注射卵清蛋白(OVA)致敏、雾化OVA激发制备嗜酸粒细胞哮喘模型；OVA腹腔注射联合脂多糖经鼻滴入、OVA雾化激发制备中性粒细胞哮喘模型；正常对照组以生理盐水代替OVA致敏及激发。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计算细胞总数及HE染色行分类计数。肺组织HE染色观察病理改变，免疫组织化学法检测STAT3、RORγt蛋白表达，流式细胞术检测肺组织Th17细胞比例。酶联免疫吸附试验法检测血清及BALF中IL-17、IL-6水平。结果与正常对照组比较，嗜酸粒细胞哮喘组气道炎性细胞浸润显著，BALF细胞总数及中性粒细胞比例增高(P值均<0.01)，血清和BALF中IL-17、IL-6含量增加(P值均<0.05)，肺组织Th17细胞比例增多(P<0.01)；与嗜酸粒细胞哮喘组比较，中性粒细胞哮喘组气道炎性细胞增多，BALF细胞总数及中性粒细胞比例增高，嗜酸粒细胞比例减低(P值均<0.05)，血清和BALF中IL-17、IL-6含量及肺组织Th17细胞比例增多(P值均<0.05)，与正常对照组和嗜酸粒细胞哮喘组比较，中性粒细胞哮喘组肺组织STAT3、RORγt蛋白表达均增强(P值均<0.05)。结论STAT3-RORγt-IL-17信号通路参与哮喘不同炎症表型发病机制，但在中性粒细胞型哮喘的气道炎症中发挥更为重要的作用。