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  • 简介:目的:观察白及多糖对酪氨酸(TYR)活性及黑色素形成相关蛋白TYR、小眼畸形相关转录因子(MITF)表达的影响。方法:超声提取白及多糖粗品。用不同浓度的白及多糖(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8g/L)和曲酸(阳性对照,0.1、0.2、0.4g/L)作用于小鼠B16黑色素瘤细胞,用于检测细胞活性、TYR活性;各组细胞分别加入α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)及不同浓度药物共培养后检测黑色素含量;将细胞分为空白组、模型组(α-MSH)、曲酸组及白及多糖低、中、高剂量组,予相应干预48h后,应用Westernblot检测B16细胞TYR和小眼畸形相关转录因子(MITF)的蛋白表达情况。结果:不同浓度曲酸组、白及多糖(0.05~0.8g/L)组、空白组间的细胞活性差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,白及多糖在浓度0.1~0.8g/L对TYR的活性有显著抑制作用(P<0.05,P<0.01),其作用与阳性对照曲酸相当;白及多糖在浓度0.1~0.8g/L有较高的抑制黑色素生成作用(P<0.05,P<0.01);白及多糖浓度0.2~0.4g/L对TYR、MITF蛋白表达水平有明显抑制作用(P<0.05)。结论:白及多糖可能通过抑制TYR的活性和蛋白表达及MITF的蛋白表达,起到抑制黑色素生成的作用。

  • 标签: 白及多糖 黑色素 小鼠B16黑色素瘤细胞 酪氨酸酶 小眼畸形相关转录因子
  • 简介:目的:克隆并表达caspase-8/10相关RING结构域蛋白1(CARP1)基因,检测其泛素连接活性。方法:提取结肠癌HCT116细胞总RNA,RT-PCR扩增CARP1基因,将其克隆到真核表达载体pcDNA3-Flag中,序列正确的阳性克隆进行扩增,提取质粒转染至293T细胞中进行瞬时表达,通过体内泛素化检测其泛素化活性,通过萤光素报告基因的方法检测其对NF-kB转录活性的影响,利用细胞生长曲线检测CARP1基因对结肠癌细胞生长的影响。结果:免疫印迹实验表明CARP1基因在293T细胞中获得有效表达;免疫共沉淀实验表明,当CARP1存在时,受体相互作用蛋白1(RIP1)被泛素化;萤光素实验结果表明CARP1抑制肿瘤坏死因子a(TNFa)引起的NF-kB报道基因的激活;通过生长曲线发现CARP1能促进结肠癌细胞系HCT116生长,并能部分抵抗顺铂抑制细胞生长的作用。结论:构建的人CARP1基因真核表达载体在293T细胞中获得表达,表达产物具有RIP1泛素连接活性,可抑制TNFa引起的NF-kB报告基因的激活,并且促进结肠癌细胞的生长,为进一步的基因功能研究奠定了基础。

  • 标签: CASPASE 8 10相关RING结构域蛋白1 真核表达 泛素连接酶 细胞生长
  • 简介:以菠萝皮渣为原料,研究纳米TiO2吸附结合超滤、冷冻干燥技术制备菠萝蛋白粉的方法。结果表明:在温度15℃条件下,以粗液质量3.5%的纳米TiO2吸附30min,吸附率达99.1%;采用0.4mol/L、pH6.0的柠檬酸缓冲液洗脱,将洗脱液用截留分子质量50kD的超滤膜超滤,流出液用截留分子质量10kD的超滤膜超滤,浓缩液经冷冻干燥得到比活力为2.8×10^6U/g的菠萝蛋白粉。

  • 标签: 吸附 超滤 菠萝蛋白酶
  • 简介:摘要:黄芪是豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,主要分布在山西、甘肃、陕西、黑龙江、山东省等地。药理研究表明,黄酮、皂苷和多糖是黄芪的主要药效成分,具有抗炎、免疫刺激、抗氧化、抗衰老、保护心脏等作用。随着人们健康保健意识的提高,特别是中医药在抗击非典、新冠疫情中发挥的独特作用,中药材生产迎来了难得的发展机遇。目前,市场所售商品黄芪主要通过人工种植进行生产。然而,黄芪在种植过程中缺乏科学施肥指导,盲目施用化肥以追求产量,导致氮肥流失、土壤酸化、有机质含量下降、病虫害频发;同时,黄芪产量和品质也明显降低。因此,施用生物有机肥是实现土地用养结合,推进黄芪生态种植的必经之路。

  • 标签: 固氮菌剂 黄芪生长 土壤养分 酶活性 影响
  • 简介:摘要:在日常教学中,生物课时较少,教学任务较重,对于实验板块,我们往往是“顺水推舟”并“浅尝辄止”。导致学生错误认为生物探究实验的过程,现象等总是在“顺风顺水”,不利于学生理性思维的建立以及科学探究能力的培养。不时拿一次实验,带领学生深入挖掘实验内容,提升生物学核心素养是必要的。本文就是一次尝试。

  • 标签: 影响酶活性的条件 核心素养 实验探究 实验挖掘
  • 简介:摘要目的研究MeJA、ABA和Ca2+处理对甘草(Glycyrrhizaspp.)幼苗活性氧代谢及保护活性的影。方法以甘草幼苗为材料,分别用10-4mol/LMeJA和ABA及8mmol/LCaCl2溶液处理甘草幼苗24h,测定其体内超氧阴离子自由基(O2-)、过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)含量及保护(SOD、POD、CAT)的活性。结果甘草幼苗在上述三种处理下H2O2含量均较对照显著下降,而O2-含量除在MeJA处理下较对照上升外,在其他两种处理下的变化则相同于H2O2含量的变化;脯氨酸的含量除在Ca2+处理下较对照上升外,在其他两种处理的变化则相同于H2O2含量的变化;MDA含量除在MeJA和Ca2+处理下较对照上升外,ABA处理下低于对照;SOD活性在Ca2+处理下显著高于对照,在其他两种处理下显著低于对照;POD活性在ABA和Ca2+处理下显著高于对照,在MeJA处理下显著低于对照;CAT活性则表现出在MeJA和ABA处理下活性显著高于对照而在Ca2+处理下显著低于对照。三种处理下甘草幼苗SOD,POD,CAT三种保护相互协调,有效地清除了三种处理条件下产生的少量活性氧,使活性氧维持在一个较低水平上,有效降低膜脂过氧化水平,防止其他伤害过程的发生,使甘草植株维持较正常的生长发育。

  • 标签: 甘草幼苗 MeJA ABA和Ca处理 活性氧 丙二醛 保护酶
  • 简介:端粒的生物学功能主要是保护染色体末端,避免核酸对染色体末端的降解,防止染色体之间发生融合和重排。大多数人类肿瘤细胞通常通过端粒活性的重新激活来延长端粒,从而稳定染色体端粒DNA的长度。端粒是由端粒逆转录端粒RNA模板组成的具有特殊逆转录活性的核糖核蛋白复合物。抑制端粒阳性细胞中的端粒活性会导致细胞凋亡或衰老。目前有多种以端粒端粒为靶点来进行肿瘤治疗的策略。

  • 标签: 端粒 端粒酶 肿瘤治疗
  • 简介:目的:构建含解耦联蛋白2(UCP2)-3’非翻译区(UTR)序列的野生型和突变型质粒的双荧光素报告基因载体.探讨微小RNA(miR)-15b对UCP2基因表达的调控作用。方法:应用生物信息软件预测miR-15b的靶基因,分别将预测靶基因UCP2的3’UTR及其突变体克隆到荧光素载体DsiCHECK-2骨架中,构建UCP2野生型和突变型质粒。并采用测序方法鉴定DsiCHECK-2-UCP2载体是否构建成功。将UCP2野生型和突变型质粒分别与miR-15b模拟物、miR-15b模拟物正常对照、miR-15b抑制剂、miR-15b抑制剂正常对照在293T细胞中共转染。通过双荧光素报告基因检测分析miR-15b对UCP2基因表达的调控作用。结果:测序鉴定证实psiCHECK-2-UCP2双荧光素报告基因载体构建成功。双荧光素报告基因检测显示转染UCP2野生型和UCP2突变型报告基因的293T细胞过表达miR-15b后,UCP2野生型报告基因的荧光素活性明显下降.下调31%(P=0.003),过表达miR-15b抑制剂后,UCP2野生型报告基因的荧光素活性明显增加,上调46%(P=0.01)。而miR-15b模拟物、miR-15b模拟物正常对照、miR-15b抑制剂、miR-15b抑制剂正常对照对UCP2突变型的表达均无明显影响(P〉0.05)。结论:UCP2是miR-15b直接作用的靶基因,且miR-15b结合于UCP2基因3’UTR区域.转录后水平对UCP2有直接的抑制作用。

  • 标签: 解耦联蛋白2 微小RNA-15b 双荧光素酶报告基因
  • 简介:摘要目的探讨不同能量Q开关Nd:YAG 1 064 nm激光对糠秕马拉色菌的细胞活性、蛋白活性及菌体结构的影响。方法选用糠秕马拉色菌标准株,分别予以Q开关Nd:YAG 1 064 nm激光0(对照组)、500、600、700、800、900 mJ能量照射,培养7 d后测量各组菌落直径及菌落数,评估菌体细胞活性,采用全脂牛奶平板法测定蛋白活性,透射电镜观察各组菌体超微结构。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,激光能量与菌落直径、菌落数及蛋白活性的相关性采用Pearson相关分析。结果对照组及500、600、700、800、900 mJ组菌落直径[(4.05 ± 0.69)、(3.76 ± 0.51)、(3.28 ± 0.41)、(3.09 ± 0.72)、(2.54 ± 0.64)、(2.43 ± 0.41)mm]、菌落数(4 787 ± 597、4 287 ± 761、1 879 ± 275、1 082 ± 248、209 ± 42、72 ± 31)差异均有统计学意义(F值分别为14.83、231.85,P < 0.05),600、700、800、900 mJ组菌落直径、菌落数均小于对照组(均P < 0.05)。激光能量与菌落直径和菌落数均呈负相关(r值分别为-0.67、-0.91,P < 0.05)。对照组、500 mJ组、700 mJ组、900 mJ组蛋白活性差异有统计学意义(F = 346.60,P < 0.05),700 mJ、900 mJ组蛋白活性均低于对照组(P < 0.05)。激光能量与蛋白活性呈负相关(r = -0.94,P < 0.05)。透射电镜下观察到对照组菌体结构完整,500 mJ组菌体结构较完整,600 ~ 900 mJ组结构明显受破坏,且激光能量越大菌体结构破坏越严重。结论Q开关Nd:YAG 1 064 nm激光可影响糠秕马拉色菌细胞及蛋白活性,破坏菌体结构。

  • 标签: 马拉色霉菌属 激光,固体 Nd-YAG激光 细胞结构 细胞活性 蛋白酶活性
  • 简介:本实验主要进行无出血活性纤溶(NHFLE)的急性毒性研究,小鼠一次静脉给药后NHFLE的LD50为28.84mg/kg,我们进行了NHFLE的急性毒性实验

  • 标签: 出血纤 吻蝮蛇 尖吻
  • 简介:甜菜夜蛾取食不同食料作物以后,对灭多威、辛硫磷和溴氰菊酯的敏感性均有不同程度的变化.解毒活性测定表明,不同食料对甜菜夜蛾3龄幼虫的多功能氧化(MFO)的脱甲基作用和羧酸酯(CarE)的活性有一定的诱导作用,和人工饲料相比,具有显著性差异.而羧酸酯动力学研究表明,几种食料作物对甜菜夜蛾羧酸酯底物亲和力(Km)的影响差异不显著.

  • 标签: 甜菜夜蛾 食料 药剂敏感性 解毒酶
  • 简介:本实验主要进行无出血活性纤溶(NHFLE)的急性毒性研究,小鼠一次静脉给药后NHFLE的LD50为28.84mg/kg,我们进行了NHFLE的急性毒性实验

  • 标签: 出血纤 吻蝮蛇 尖吻
  • 简介:以阳山水蜜桃为试材,研究聚乙烯薄膜套袋、l%壳聚糖涂膜后聚乙烯薄膜套袋和0.5%CaCl2+l%壳聚糖涂膜聚乙烯薄膜套袋处理对桃果实多酚氧化(PPO)、过氧化物氧化(PPD)和抗坏血酸氧化活性的影响。研究结果表明l%壳聚糖涂膜处理和0.5%CaCl2+l%壳聚糖涂膜处理在贮藏后期对三种活性具有明显的抑制效果,且延缓果实衰老。

  • 标签: 涂膜处理 钙处理 冷藏 阳山水蜜桃 酶活性 影响因素
  • 简介:通过建立大鼠过度训练模型,探讨了过度训练对大鼠心肌线粒体膜上功能活性的影响。经过6周递增负荷训练后。运动组大鼠呈过度训练状态,心肌线粒体自由基生成增多,抗氧化活性下降,导致线粒体膜发生脂质过氧化,Na^+,K^+,ATP和Ca^2+,Mg^2+,ATP活性下降。

  • 标签: 过度训练 心肌线粒体 Na^+ K^+ ATP酶 Ca^2+ Mg^2+ ATP酶
  • 简介:选择南阳市5个不同地点的5种代表性绿化植物为研究对象,对植物抗氧化酶系统中的CAT、POD、SOD活性进行测定。数据用SPSS17.0进行分析,结果表明:同一地点不同树种的3种活性不同,具有显著的差异,不同地点同一树种的3种活性也具有显著的差异;5种绿化树种的抗污染能力为香樟>冬青卫矛>小叶女贞>毛竹>珊瑚树;5个地点的污染程度为:伏牛山水泥厂>宛西制药厂>十二里河>白河>南阳师院。研究结果可以为南阳市的污染治理以及绿化树种的选择提供理论和实践依据。

  • 标签: 南阳市 抗氧化酶系统 环境污染 绿化树种 酶活性
  • 简介:实验选取与抗炎免疫密切相关的磷酸二酯4为靶点,应用超滤液质联用技术和体外活性抑制实验筛选并鉴定了葛根中抑制磷酸二酯4活性成分.实验结果表明葛根提取物具有抑制磷酸二酯4的作用,IC50值为0.04g/L.葛根素抑制磷酸二酯4作用最强,其次为大豆苷和大豆苷元,IC50值分别为52.79,71.54和122.17μmol/L.超滤液质联用实验筛选结果与体外活性实验一致.3′-羟基葛根素和3′-甲氧基葛根素在2个实验中均没有抑制磷酸二酯4的作用.

  • 标签: 葛根 异黄酮 磷酸二酯酶4 超滤液质联用
  • 简介:摘要目的综述大鼠肝微粒体中细胞色素CYP450活性研究方法。方法查阅国内外文献,对肝微粒体CYP450进行介绍,并总结和归纳中药在CYP450活性研究方法的应用。结果CYP450研究方法主要包括体外实验CO吹泡法,化学显色法,体外温孵和体内cocktail探针实验。该方法的应用从中药单体成分逐渐发展到中药提取物、中药复方。结论随着科研水平的提高,体外方法对CYP450研究越来越深入,合体内cocktail探针法,提高药物体内代谢清除预测的准确性。

  • 标签: 中药 P450 肝微粒体 温孵 cocktail探针
  • 简介:5α-还原滇藏荨麻双氢睾酮前列腺肥大联免疫,  从图2可以看出滇藏荨麻根95%乙醇提取物的正丁醇萃取物有明显的抑制5α-还原活性,滇藏荨麻根95%乙醇提取物的正丁醇萃取物有明显的抑制5α-还原活性

  • 标签: 抑制研究 提取物还原酶 荨麻提取物
  • 简介:摘要目的探讨自体回收血与库血红细胞活性以及ATP含量的差异。方法对60例预估术中出血量600ml以上的择期手术患者在术中通过自体血液回收机进行洗涤血液回收(观察组),另选择库存血60份(对照组),检测两组血液红细胞ATP活性及其含量,进行对比并分析。结果两组红细胞ATP活性、红细胞ATP含量与G-6PD活性均无显著差异(P<0.05)。结论自体回收血与库血红细胞活性及ATP含量基本一致。

  • 标签: 自体回收血 库存血 红细胞ATP酶