简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) MT1JP靶向微小RNA(miR)-18a-5p对非小细胞肺癌恶性细胞生物学的影响。方法选择2018年6月到2021年6月河南省人民医院收治的71例非小细胞肺癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织lncRNA MT1JP和miR-18a-5p表达水平。采用对照慢病毒和lncRNA MT1JP慢病毒感染A549细胞，建立lncRNA组和MT1JP组细胞，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞增殖；采用Transwell分析两组细胞侵袭；采用划痕实验分析两组细胞迁移能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA MT1JP的靶基因。组间比较采用t检验。结果癌旁组织lncRNA MT1JP表达水平(1.00±0.17)明显高于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(0.37±0.18)，差异有统计学意义(t＝21.330，P<0.05)。癌旁组织miR-18a-5p表达水平 (1.08±0.18)明显低于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(2.23±0.20)，差异有统计学意义(t＝36.040，P<0.05)。lncRNA组细胞活力(1.67±0.09)和细胞EdU染色阳性率[(61.83±4.88)%]明显高于MT1JP组细胞活力(1.10±0.05)和细胞EdU染色阳性率[(33.17±3.31)%]，差异有统计学意义(t＝12.940、10.760，P<0.05)。miR-NC组细胞活力(1.63±0.06)和EdU染色阳性率[(61.33±4.46)%]明显高于miR-18a-5p沉默组细胞活力(1.14±0.09)和和EdU染色阳性率[(33.00±4.73)%]，差异有统计学意义(t＝10.760、10.680，P<0.05)。lncRNA组细胞划痕愈合率[(70.22±3.41)%]和侵袭数量[(111.83±10.09)个]明显高于MT1JP组[(35.42±3.82)%]和侵袭数量[(64.17±7.81)个]，差异有统计学意义(t＝16.620、9.153，P<0.05)。miR-NC组划痕愈合率[(73.72±3.82)%]和侵袭数量[(117.33±7.79)个]明显高于miR-18a-5p沉默组[(43.40±4.70)%]和侵袭数量[(56.67±10.29)个]，差异有统计学意义(t＝10.540、11.520，P<0.05)。结论lncRNA MT1JP在非小细胞肺癌中低表达，通过靶向miR-18a-5p，进而参与非小细胞肺癌的增殖、迁移和侵袭等过程。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) LINC01234对前列腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及其分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测收集2017年5月至2018年7月郑州大学第一附属医院收治的20例前列腺癌患者的前列腺癌组织及癌旁组织中LINC01234、微小RNA(miRNA，miR)-940的表达水平。分别将LINC01234小干扰RNA(si-LINC01234)、乱序无意义阴性序列(si-NC)、微小RNA-940模拟物(miR-940 mimics)、阴性对照基因(miR-NC)、si-LINC01234＋阴性对照(anti-miR-NC)、si-LINC01234＋微小RNA 940特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-940)转染至DU145细胞。分别记作si-NC、si-LINC01234、miR-NC、miR-940、si-LINC01234＋anti-miR-NC、si-LINC01234＋anti-miR-940组。噻唑蓝(MTT)检测各组细胞的活性；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Transwell法检测各组细胞的迁移及侵袭；双荧光素酶报告实验验证LINC01234与miR-940的靶向关系。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果LINC01234在前列腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织(1.00±0.08比2.61±0.25，t＝27.430，P<0.05)，miR-940在前列腺癌组织中的表达水平低于癌旁组织(1.00±0.09比0.56±0.05，t＝19.112，P<0.05)，差异有统计学意义；转染si-LINC01234、miR-940 mimics后细胞活力显著降低(1.29±0.11比0.71±0.06；1.24±0.09比0.79±0.07，t＝13.886，P<0.05)，迁移细胞数[(84.36±8.12)个比(39.41±4.22)个；(86.25±8.14)个比(44.37±4.48)个]与侵袭细胞数[(67.25±6.74)个比(28.44±3.58)个；(69.48±6.25)个比(33.47±4.18)个]显著减少(t＝14.735、15.309，P<0.05)，细胞凋亡率[(6.58±0.61)%比(20.36±2.14)%；(7.11±0.71)%比(18.26±1.36)%]显著升高(t＝18.577，P<0.05)，差异均有统计学意义；双荧光素酶报告实验证实miR-940过表达可抑制野生型(WT)-LINC01234细胞的荧光活性，LINC01234可负向调控miR-940的表达(t＝328.298，P<0.05)，差异有统计学意义；干扰miR-940表达可逆转抑制LINC01234表达对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其对凋亡的促进作用。结论lncRNA LINC01234可能通过靶向miR-940促进前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭，抑制细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨ST8SIA6-AS1靶向结合微小RNA(microRNA，miR)-142-3p，影响肝细胞癌的增殖和侵袭能力。方法用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)验证ST8SIA6-AS1在肝细胞肝癌(HCC)和邻近正常组织中的差异表达。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ST8SIA6-AS1和miR-142-3p在组织水平和细胞水平的表达量。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验检测人肝癌细胞Hep3B的增殖情况；采用迁移侵袭实验(Transwell法)检测肝癌Hep3B细胞迁移和侵袭情况。生物信息学、双荧光素酶报告实验验证ST8SIA6-AS1与miR-142-3P的靶向关系。组间采用t检验，多组间采用单因素方差分析进行比较，相关性分析采用Spearman秩检验。结果GEPIA结果显示ST8SIA6-AS1在肝癌组织中的表达明显高于正常组织。RT-qPCR结果显示ST8SIA6-AS1在HCC中的表达明显高于癌旁组织(0.778±0.363比1.951±0.575，t＝11.370，P<0.05)，差异有统计学意义。miR-142-3p在肝癌组织的表达量显著低于癌旁组织(0.881±0.374比0.371±0.164，t＝9.395，P<0.05)，差异有统计学意义。ST8SIA6-AS1在4种人HCC细胞株(HepG2、SMMC-7721、HCCLM3和Hep3B)的表达(3.84±0.27、5.81±0.60、4.47±0.55、5.94±0.69)明显高于正常肝细胞株L02(1.00±0.09，t＝17.280，t＝13.730，t＝10.780，t＝12.300，P<0.05)，差异有统计学意义，ST8SIA6-AS1在敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞中的相对表达量低于对照组(0.26±0.04比1.00±0.01，t＝9.423，P<0.05)，差异有统计学意义。集落形成实验结果显示，敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞集落个数显著低于对照组[(32.60±6.70)个比(100.00±10.00)个，t＝10.040，P<0.05]，差异有统计学意义；CCK-8实验中敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞72 h吸光度(A)值低于对照组[(0.71±0.06)%比(1.14±0.09)%，t＝6.886，P<0.05]，差异有统计学意义。Transwell实验结果显示敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞垂直迁移率明显低于对照组[(53.38±6.49)%比(100.00±13.00)%，t＝5.641，P<0.05]，差异有统计学意义。敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞的侵袭率低于对照组[(44.98±8.42)%比(100.00±10.00)%，t＝7.485，P<0.05]，差异有统计学意义。双荧光素酶报告实验证实miR-142-3p过表达组明显低于对照组ST8SIA6-AS1-野生型(WT)细胞的荧光活性，ST8SIA6-AS1负向调控miR-142-3p的表达(0.42±0.05比1.00±0.09，t＝9.757，P<0.05)。干扰ST8SIA6-AS1的表达可对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭产生抑制作用，这种作用可通过沉默miR-142-3p发生逆转。结论ST8SIA6-AS1可通过竞争性结合miR-142-3p在肝癌中发挥致癌作用。

简介：无

简介：摘要目的探讨circEIF4G2对婴幼儿血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法收集2015年8月至2019至11月于山西医科大学第二医院行手术治疗的27例婴幼儿血管瘤患者的瘤组织和瘤旁正常皮肤组织，HemECs购自上海钦诚生物科技有限公司，实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测组织和细胞中circEIF4G2和微小RNA-379-5p(miR-379-5p)表达。将HemECs分为si-NC、si-circEIF4G2、miR-379-5p、miR-NC、si-circEIF4G2+anti-miR-379-5p、si-circEIF4G2+anti-miR-NC组，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖，Transwell检测各组细胞迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验验证circEIF4G2和miR-379-5p调控关系。两组间比较采用独立样本t检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两组间比较采用LSD-t检验。结果婴幼儿血管瘤组织中circEIF4G2表达高于正常皮肤组织(3.76±0.42比1.00±0.13，t＝ 32.619，P<0.05)，而miR-379-5p表达低于正常皮肤组织(0.46±0.07比1.00±0.12，t＝20.197，P<0.05)。HemECs中circEIF4G2表达高于正常血管内皮细胞(2.61±0.20比1.00±0.07，t＝22.794，P<0.05)，而miR-379-5p表达低于正常血管内皮细胞(0.41±0.03比1.00±0.09，t＝18.657，P<0.05)。si-circEIF4G2、si-NC组HemECs的吸光度(A)值分别为0.57±0.04、1.01±0.07，迁移数分别为(82.00±3.17)、(191.00±8.26)个，侵袭数分别为(61.00±3.11)、(132.00±7.73)个，si-circEIF4G2组各检测指标均低于si-NC组(t＝16.187、36.960、25.564，P均<0.05)。miR-379-5p组和miR-NC组HemECs的A值分别为0.61±0.05、1.11±0.09，迁移数分别为(94.00±5.10)、(187.00±6.10)个，侵袭数分别为(71.00±4.27)、(138.00±8.10)个，miR-379-5p组各检测指标均低于miR-NC组(t＝13.768、35.089、21.951，P均<0.05)。circEIF4G2靶向结合并负调控miR-379-5p表达。si-circEIF4G2+anti-miR-379-5p组和si-circEIF4G2+anti-miR-NC组HemECs的A值分别为1.04±0.09、0.58±0.05，迁移数分别为(184.00±10.02)、(86.00±4.10)个，侵袭数分别为(143.00±8.06)、(65.00±2.16)个，si-circEIF4G2+anti-miR-379-5p组各检测指标均高于si-circEIF4G2+anti-miR-NC组(t＝13.462、27.156、28.043，P均<0.05)。结论circEIF4G2在血管瘤组织和HemECs中呈高表达，下调其表达可能通过靶向负调控miR-379-5p抑制HemECs增殖、迁移和侵袭，其可能成为婴幼儿血管瘤治疗的分子靶点。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-598-3p靶向调控RNA聚合酶Ⅱ第五亚基调节蛋白(RMP)基因对人胃癌细胞SGC-7901恶性增殖和侵袭迁移的影响及其作用机制。方法筛选SGC-7901细胞株行后续实验，分别建立稳定过表达或敲减RMP和miR-598-3p的SGC-7901细胞株。采用溴脱氧尿苷(BrdU)、细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活力，平板克隆形成实验检测细胞集落形成能力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，双荧光素酶报告基因法分析miR-598-3p的结合靶点，蛋白质印迹法(Western blot)检测相关通路相关蛋白表达水平，两样本间比较使用t检验。结果稳定过表达和敲减RMP或miR-598-3p的SGC-7901细胞株建立成功。敲减RMP能显著降低SGC-7901的增殖能力，BrdU(8.867±1.159比26.030±3.630，t＝7.704，P<0.01)，CCK-8(0.560±0.052比1.020±0.107，t＝6.708，P<0.01)，迁移能力(336.000±21.070比252.700±36.120，t＝3.452，P<0.05)，侵袭能力(36.330±7.371比127.300±10.690，t＝12.140，P<0.01)。过表达RMP能显著提高SGC-7901细胞的增殖能力，BrdU(56.400±6.560比24.800±4.423，t＝6.918，P<0.01)，CCK-8(2.105±0.142比1.028±0.110，t＝10.350，P<0.01)，迁移能力(131.300±20.110比257.000±29.140，t＝6.148，P<0.01)，侵袭能力(347.700±41.140比135.000±17.690，t＝8.226，P<0.01)。生物信息学预测miR-598-3p与RMP的3’端非编码区(3’UTR)位点结合，并通过双荧光素报告系统验证。过表达或敲减miR-598-3p能分别降低和提高SGC-7901细胞株的增殖、迁移及侵袭能力，而RMP的回复表达能挽救miR-598-3p引起的细胞增殖、侵袭及迁移的抑制。miR-598-3p通过靶向RMP抑制p70核糖体蛋白S6激酶(p70s6k1)/凋亡蛋白(Bad)和核因子-κB(NF-κB)通路发挥功能。结论miR-598-3p靶向RMP基因抑制p70s6k1/Bad和NF-κB通路降低SGC-7901细胞的增殖、集落形成、迁移及侵袭能力。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) GSTM3TV2对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响，并探讨其与微小RNA(miR)-597的相互作用。方法选取郑州大学附属南阳市中心医院、南阳市宛城区第一人民医院和郑州大学第一附属医院2016年5月到2018年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁和肝癌组织中GSTM3TV2和miR-597表达水平；在肝癌细胞系HepG2建立lncRNA对照组和GSTM3TV2 KD组细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell和体内异体移植瘤实验检测GSTM3TV2的体内外功能；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析GSTM3TV2与miR-597的关系；将miRNA抑制剂转染HepG2细胞，分析其作用机制。计量数据比较采用t检验。结果肝癌组织中GSTM3TV2表达水平(2.96±0.34)明显高于癌旁组织(2.96±0.34)，差异有统计学意义(t＝4.819，P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度(A)值(2.17±0.22)明显高于GSTM3TV2 KD组(1.09±0.20)，差异有统计学意义(t＝3.429，P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(154.82±13.83)个]明显高于GSTM3TV2 KD组[(87.29±10.43)个]，差异有统计学意义(t＝5.018，P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内成瘤体积[(1 048.45±251.30) mm3]明显大于GSTM3TV2 KD组[(759.49±142.09) mm3]，差异有统计学意义(t＝4.719，P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内肿瘤重量[(1.09±0.21) g]明显高于GSTM3TV2 KD组[(0.61±0.15) g]，差异有统计学意义(t＝3.185，P<0.05)。lncRNA对照组细胞淋巴结转移数量[(15.29±3.39)个]明显多于GSTM3TV2 KD组[(8.22±2.09)个]，差异有统计学意义(t＝3.103，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶活性结果显示miR-597是GSTM3TV2的靶基因。lncRNA对照组细胞miR-597表达水平(1.09±0.21)明显低于GSTM3TV2 KD组(2.80±0.26)，差异有统计学意义(t＝3.529，P<0.05)。结论lncRNA GSTM3TV2通过调节miR-597促进肝癌细胞增殖、侵袭和转移等恶性细胞生物学行为。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)靶向调控微小RNA(miRNA，miR)-106a-5p对肾癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人肾癌ACHN、Caki-1、Caki-2和786-O细胞和正常肾脏上皮细胞HK-2中XIST的表达水平。将体外培养的Caki-2细胞分为Empty组(转染空白载体)和XIST组(转染XIST过表达载体)，采用RT-qPCR检测各组细胞中XIST和miR-106a-5p的表达水平，噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测各实验组细胞增殖和凋亡。采用双荧光素酶报告基因实验检测XIST和miR-106a-5p的靶向结合关系。将miR-106a-5p激动剂与XIST过表达质粒共转染后观察上调miR-106a-5p表达对XIST过表达的Caki-2细胞增殖和凋亡的影响。多组间比较使用单因素方差分析，组间多重比较采用学生纽曼·基尔斯(Student-Newman-Keuls，SNK)-q，两组间比较采用独立样本t检验。结果与HK2细胞比较，ACHN、Caki-1、Caki-2和786-O细胞中XIST的表达水平明显降低(相对表达量分别为0.516±0.031、0.605±0.021、0.241±0.024、0.355±0.042，t＝11.666、11.321、20.321、12.992，P均<0.05)。与Empty组比较，过表达XIST组细胞中XIST的表达水平升高(相对表达量为175.829±1.021，t＝20.471，P<0.05)、细胞增殖能力降低(为对照组0.759倍，t＝6.388，P<0.05)、细胞凋亡增加(为对照组1.304倍，t＝11.371，P<0.05)，而细胞中miR-106a-5p的表达水平明显降低(相对表达量为0.415±0.035，t＝13.717，P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-106a-5p可与XIST靶向结合。转染miR-106a-5p激动剂成功上调miR-106a-5p表达后，过表达XIST对Caki-2细胞增殖的抑制作用及促凋亡作用明显逆转。结论过表达XIST可通过靶向调控miR-106a-5p抑制肾癌Caki-2细胞增殖并促进其凋亡。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)靶向微小RNA(miR)-130a-3p基因对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖及炎性因子分泌的影响。方法将中南大学湘雅医学院附属海口医院从2018年1月至2020年1月收治的OA患者30例纳入研究。分别采集OA以及正常软骨细胞，通过实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同软骨细胞中的lncRNA同源基因转录反义RNA(HOTAIR)以及miR-130a-3p表达水平。此外，于OA软骨细胞中转染siRNA-lncRNA HOTAIR或LV-lncRNA HOTAIR，采用细胞增殖实验(CCK-8)法完成细胞增殖情况的检测，并以RT-PCR法检测炎性因子分泌情况。计数资料以%表示，采用χ2检验。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示，采用t检验。结果OA软骨细胞中的lncRNA HOTAIR mRNA相对表达量为3.01±0.42，明显高于正常软骨细胞(1.08±0.23)，而miR-130a-3p mRNA相对表达量为0.48±0.11，明显低于正常软骨细胞(1.00±0.01)，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。转染si-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的增殖能力相较于转染si-NC组明显增加，而转染LV-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的增殖能力相较于转染LV-NC组显著下降，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。转染si-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的miR-130a-3p表达水平显著升高，而转染LV-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的miR-130a-3p表达水平显著下降，且经Pearson相关分析显示，在OA软骨细胞中，lncRNA HOTAIR和miR-130a-3p表达水平呈明显负相关关系，差异有统计学意义(r＝-0.912，P<0.05)。转染si-lncRNA HOTAIR后的OA软骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ) mRNA相对表达量分别为0.47±0.10、0.52±0.13，均明显低于转染LV-lncRNA HOTAIR后(0.88±0.19、0.93±0.15)，差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论lncRNA HOTAIR通过靶向调控miR-130a-3p基因，继而影响OA软骨细胞的增殖，并具有一定的炎性反应调控作用。

简介：

简介：从任天堂到次时代，从Voodoo（巫毒）到GTX590，我们面前的屏幕从一个墨绿色小窗发展成了今天的LED显示器，显示的画面也从一个个像素游戏慢慢演变成了几乎可以以假乱真的拟真画面，而带动这些科技进步的，正是图形芯片一日千里的发展。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-96通过靶向叉头框转录因子O1(FOXO1)促进肺癌细胞增殖和迁移的作用。方法应用茎环反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-96在肺癌细胞株中的表达；干扰慢病毒感染抑制miR-96表达后，分别利用细胞增殖试验(CCK-8)和划痕试验检测其对肺癌细胞增殖和迁移的影响；蛋白质印迹法(Western blot)和双荧光素酶活性试验验证miR-96靶基因FOXO1。应用GraphPad Prism 5统计学软件进行分析，计量资料比较采用t检验。结果CCK-8实验显示抑制H1299细胞miR-96表达后，实验组24、48、72 h吸光度值分别为1.293±0.019、1.684±0.038、2.180±0.034，明显低于对照组的1.655±0.056、1.880±0.020、2.493±0.060，差异有统计学意义(t＝5.646、4.426、14.670，P<0.01)；划痕试验显示对照组4 h和10 h细胞迁移率为(29.21±3.96)%、(47.49±3.33)%，明显高于实验组[(5.80±2.94)%、(13.63±3.18)%]，差异有统计学意义(t＝4.748、7.352，P<0.01)；筛选miR-96靶基因FOXO1，将miR-96过表达后，肺癌细胞FOXO1表达明显降低；反之，抑制miR-96表达后，FOXO1表达明显增高。荧光素酶活性试验显示miR-96和FOXO1 3’非翻译区(3’UTR)野生型质粒共转染后，野生型为(22.5±7.6)%，与对照组的(97.2±13.2)%及突变型的(115.6±13.5)%比较，荧火虫/海肾荧光素酶比值明显降低(t＝14.750、12.040，P值均<0.01)。结论miR-96通过靶向调控FOXO1促进肺癌细胞增殖和迁移。

简介：摘要目的观察微小RNA(miRNA，miR)-29a-5p在心肌梗死后心室重塑心肌纤维化中的作用，探讨miR-29a-5p通过靶基因Endoglin调控心肌梗死后心肌纤维化的作用机制。方法选取2019年1月至2019年10月在郑州大学第二附属医院收治的30例心肌梗死患者和20例非急性冠脉综合征的患者，取血液标本，分别进行血清miR-29a-5p和NTPRO-脑钠肽(BNP)的检测。体内实验，建立小鼠心肌梗死模型，尾静脉分别注射miR-29a-5p mimics和阴性对照试剂。4周后处死小鼠，取部分心肌组织用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别对miR-29a-5p、Endoglin、BNP进行检测。体外实验，处死1日龄小鼠，分离获得心肌成纤维细胞并进行培养。将培养的细胞用脂质体2000对细胞进行转染miR-29a-5p mimics和阴性对照试剂，转染后加入50 μmol/L血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)或等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)持续48 h。用图像J软件检测各组成纤维细胞的表面积。另取细胞用miR-29a-5p mimics或antagomir，pRL-TK-endoglin-3’端非编码区(3’UTR)载体，pGL3-basic质粒进行共转染。转染48 h，获得细胞，用双荧光素酶报告试验系统检测细胞相对荧光素酶活性，并用Real-time PCR和Western blot分别检测Endoglin在各组的表达。采用单因素方差分析和LSD检验。结果急性心肌梗死(AMI)患者血清中miR-29a-5p含量[(3.57±0.53) ng/ml]明显降低(F＝935.899，P<0.01)，NTPRO-BNP含量明显升高[(9.47±5.06) ng/ml，F＝65.440，P<0.01]。小鼠MI组miR-29a-5p表达水平明显降低(0.51±0.12，t＝4.315，P<0.01)，在AngⅡ诱导的心肌纤维化模型中同样发现miR-29a-5p的表达水平明显降低(0.65±0.26，t＝4.511，P<0.01)。miR-29a-5p mimics处理心肌成纤维细胞中Endoglin蛋白含量和mRNA表达水平降低(0.49±0.09，t＝352.312，P<0.01)，在miR-29a-5p antagomir处理心肌成纤维细胞中Endoglin蛋白含量和mRNA表达水平升高(2.15±0.14，t＝7.814，P<0.05)。结论miR-29a-5p是心肌纤维化的重要调节因子。

简介：摘要目的探讨LINC00261靶向调控微小RNA(miR)-219a-5p对脊髓损伤细胞模型凋亡和氧化应激的实验研究。方法体外培养PC12细胞，缺氧诱导PC12细胞模拟建立脊髓损伤模型，细胞分为NC组、模型组、pcDNA+模型组、pcDNA-LINC00261+模型组、anti-miR-NC+模型组、anti-miR-219a-5p+模型组、miR-NC+pcDNA-LINC00261+模型组、miR-219a-5p+pcDNA-LINC00261+模型组。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LINC00261和miR-219a-5p的表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达；酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性。双荧光素酶实验验证LINC00261和miR-219a-5p的靶向关系。两组间比较采用t检验，多组间比较用单因素方差分析。结果与NC组比较，模型组内LINC00261表达水平(1.00±0.10比0.38±0.04)、SOD活性[(14.86±0.71) U/mg比(6.04±0.37) U/mg]、CAT活性高于NC组[(11.24±0.84) U/mg比(4.31±0.36) U/mg]，miR-219a-5p表达水平(1.00±0.11比2.43±0.17)、凋亡率[(8.24±0.61)%比(25.16±1.96)%]、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达(0.38±0.03比0.86±0.07)、MDA含量[(12.36±1.01) μmol/g比(32.75±2.38) μmol/g]、p-p65(0.41±0.03比0.83±0.08)、p-IκBα(0.35±0.03比0.69±0.06)蛋白表达显著增加，差异有统计学意义(t＝18.958，P<0.05)。过表达LINC00261或抑制miR-219a-5p能抑制脊髓损伤细胞模型细胞凋亡和氧化应激。LINC00261靶向负调控miR-219a-5p表达，过表达miR-219a-5p可以逆转过表达LINC00261对脊髓损伤细胞模型细胞凋亡、氧化应激的作用。与pcDNA+模型组比较，pcDNA-LINC00261+模型组内p-p65(0.85±0.07比0.43±0.04)、p-IκBα(0.71±0.07比0.38±0.03)蛋白表达低于pcDNA+模型组；与miR-NC+pcDNA-LINC00261+模型组比较，miR-219a-5p+pcDNA-LINC00261+模型组内p-p65(0.45±0.04比0.91±0.08)、p-IκBα(0.37±0.04比0.75±0.07)蛋白表达高于miR-NC+pcDNA-LINC00261+模型组，差异有统计学意义(t＝26.302，P<0.05)。结论LINC00261靶向调控miR-219a-5p/核因子-κB(NF-κB)轴减轻脊髓损伤细胞模型凋亡和氧化应激。

简介：摘要目的观察心肌梗死(MI)大鼠心肌微小RNA(miR)-130a-3p的表达及其对心肌炎症的影响。方法使用随机数字法将雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、MI组、miR-130a-3p组(心肌注射miR-130a-3p mimics)和阴性对照组(心肌注射miR-130a-3p mimics阴性对照)，每组15只。心脏彩超测定左心室收缩末期内径(LVDs)、左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室长轴缩短分数(FS)、左心室射血分数(LVEF)；原位缺口末端标记法(TUNEL)法测定心肌凋亡指数；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β水平；反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定心肌组织miR-130a-3p、NOD样受体家族3炎症小体(NLRP3)的表达；蛋白质印迹法(Western blot)测定心肌组织B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和NLRP3的表达水平。各组间比较采用方差分析。结果MI组miR-130a-3p水平明显低于Sham组(t＝4.365，P<0.05)。miR-130a-3p组大鼠LVDs和LVDd低于MI组(t＝4.475、5.172、P<0.05)，FS和LVEF高于MI组(t＝3.679、5.442，P<0.05)。miR-130a-3p组血清TnT、TnI、CK-MB、NT-proBNP、TNF-α、IL-1β水平明显低于MI组(t＝4.265、5.382、3.976、4.436、7.246、4.854，P<0.05)。Sham、MI、阴性对照组和miR-130a-3p组凋亡指数依次为(5.14±0.62)%、(34.54±4.37)%、(35.27±4.55)%和(18.76±2.48)%，miR-130a-3p组凋亡指数低于MI组(t＝4.356，P<0.05)。miR-130a-3p组NLRP3 mRNA和bax蛋白、NLRP3蛋白相对表达量均低于MI组(t＝6.296、11.356、8.235，P<0.05)，bcl-2蛋白水平相对表达量高于MI组(t＝8.876，P<0.05)。结论miR-130a-3p在MI大鼠心肌组织中呈低表达，上调miR-130a-3p表达可以减轻MI大鼠心肌炎症和细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-203靶向RGS17蛋白对食管癌细胞增殖、周期和迁移的影响。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常食管上皮细胞HEEC、食管癌细胞TE-8、EC9706和EC-11中miR-203表达水平。将对数生长期食管癌细胞EC9706分为对照组和miR-203组，分别采用对照组和miR-203过表达慢病毒感染，筛选稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析两组细胞增殖能力；采用流式细胞术分析两组细胞凋亡和周期变化；采用Transwell实验分析两组细胞迁移能力；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-203靶基因；采用蛋白免疫印迹分析靶基因及相关蛋白表达水平。计量资料比较采用t检验。结果正常食管上皮HEEC细胞miR-203表达水平(1.19±0.17)明显高于食管癌TE-8、EC9706和EC-11细胞miR-203表达水平(0.56±0.11、0.39±0.09、0.47±0.10)，差异有统计学意义(t＝3.719、4.498、3.909，P<0.05)。对照组细胞miR-203表达水平(1.07±0.12)明显低于miR-203组细胞miR-203表达水平(3.41±0.19)，差异有统计学意义(t＝5.576，P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(1.95±0.19)明显高于miR-203细胞A值(1.36±0.16)，差异有统计学意义(t＝3.274，P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(69.94±6.51)%]明显高于miR-203组细胞克隆形成率[(39.55±4.91)%]，差异有统计学意义(t＝5.901，P<0.05)。对照组细胞G0/G1期比例[(40.27±5.71)%]明显低于miR-203组细胞G0/G1期比例[(54.90±5.98)%]，差异有统计学意义(t＝3.821，P<0.05)。对照组细胞S期比例[(30.16±4.20)%]明显高于miR-203组细胞S期比例[(21.85±4.09)%]，差异有统计学意义(t＝3.019，P<0.05)。对照组细胞G2/M期比例[(28.86±3.57)%]明显高于miR-203组细胞G2/M期细胞比例[(24.66±4.01)%]，差异有统计学意义(t＝2.621，P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(146.38±16.10)个]明显高于miR-203组细胞迁移数量[(85.32±10.57)个]，差异有统计学意义(t＝6.926，P<0.05)。RGS17是miR-203的靶基因。对照组细胞RGS17表达水平(3.09±0.31)明显高于miR-203组细胞RGS17表达水平(1.74±0.20)，差异有统计学意义(t＝5.194，P<0.05)。结论miR-203通过靶向RGS17蛋白调控食管癌细胞增殖、凋亡、周期和迁移。

简介：摘要目的探讨微小RNA-101a(miRNA-101a)是否通过调控肌醇需要酶1α蛋白(IRE1α)信号通路介导肝星状细胞活化以及对肝纤维化的影响。方法建立CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型，实时定量PCR检测肝组织中miRNA-101a的表达，Western印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、I型胶原、IRE1α的蛋白表达。肝星状细胞(HSC)-T6处理分为HSC组、转化生长因子(TGF)β1活化组、TGFβ1+miRNA-NC组(转染miRNA-101a空白对照质粒)和TGFβ1+miRNA-M组(转染miRNA-101a模拟质粒)。给予对应干预后，检测各组间miRNA-101a、αSMA、I型胶原和IRE1α的表达差异。结果与对照组小鼠相比，实验组小鼠肝组织中纤维沉积明显[(0.17±0.06)%比(2.09±0.39)%]，miRNA-101a相对表达水平下调[(1.00±0.05)比(0.43±0.05)]，差异有统计学意义(均P<0.001)；而且实验组小鼠肝组织αSMA、I型胶原及IRE1α蛋白相对表达水平上调[(1.00±0.23)比(4.09±0.80)、(1.00±0.21)比(4.98±1.19)、(1.00±0.24)比(3.27±0.65)]，差异有统计学意义(均P<0.001)。TGFβ1处理抑制HSC-T6细胞miRNA-101a表达，诱导HSC-T6活化，导致αSMA、I型胶原以及IRE1α蛋白表达上调；TGFβ1+miRNA-M组中miRNA-101a表达水平(1.89±0.20)明显高于TGFβ1+miRNA-NC组(0.59±0.19)，差异有统计学意义(P<0.001)。过表达miRNA-101a后，αSMA、I型胶原蛋白表达明显降低[(2.65±0.69)比(0.84±0.13)、(3.15±0.59)比(1.31±0.25)]，差异有统计学意义(均P<0.05)；IRE1α蛋白表达亦下调[(2.63±0.47)比(1.03±0.15)]，差异有统计学意义(P<0.001)。结论miRNA-101a可能通过抑制IRE1α信号通路抑制肝星状细胞活化和肝纤维化形成。

简介：摘要目的探讨微小RNA132（microRNA132，miRNA-132）调控阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease，AD）模型鼠（AD模型鼠）神经元凋亡的分子机制。方法本研究起止时间为2016年1月至2021年3月，动物分组为AD转基因模型鼠组（AD模型鼠组）和同窝阴性对照鼠组（同窝阴性鼠组），后续实验中的每组动物数量均为3只；采用定量多聚酶链反应（quantitative polymerase chain reaction，qPCR）方法检测2组小鼠皮质和海马组织中的miRNA-132表达水平，采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNNEL）检测2组小鼠脑组织皮质神经细胞凋亡情况，采用免疫印迹法检测2组小鼠全脑组织中的凋亡相关蛋白的表达水平，采用双荧光酶报告系统确认miRNA-132直接调控的下游靶点蛋白。2组实验数据比较采用独立样本t检验，以 P<0.05 为差异有统计学意义。结果与同窝阴性鼠组相比，AD模型鼠组皮质和海马的miRNA-132表达水平均明显下调（P<0.01），脑皮质神经元凋亡显著增加（P<0.01），全脑组织凋亡相关蛋白BAX、Caspase-3、FOXO3a均明显上升（P<0.05或P<0.01）；双荧光酶报告系统显示miRNA-132可以和下游蛋白FOXO3a直接相互作用，AD模型组的荧光素酶活性明显降低（P<0.01）。结论miRNA-132表达下降诱导了AD鼠神经元凋亡，机制可能是通过上调FOXO3a的表达，激活凋亡相关蛋白BAX和Caspase-3实现的。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-151-5p在骨折愈合方面的作用。方法建立标准的大鼠股骨干骨折愈合模型(郑州大学动物中心)，基因芯片分析血浆miRNA的表达。应用生物信息学方法模拟miRNA与靶基因配对，并寻找相关的靶通路。细胞实验验证miR-151-5p对成骨细胞(大鼠颅骨提取)的影响。最后，再次建立骨折愈合模型，给予miR-151-5p模仿物和抑制物，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转化生长因子-β(TGF-β)通路主要蛋白的表达。正态分布数据应用student-t检验，miRNA数据应用Benjamini & Hochberg方法进行比对。结果在大鼠骨折模型血浆结果显示miR-151-5p在骨折愈合7 d时显著高于对照组(对照比7 d为58.16±8.17比201.40±7.23，F＝25.09，P<0.01)，GSE93083数据集中骨折患者miRNA-151-5p表达量较健康组明显升高(骨折患者比健康人为12.25±0.17比12.00±0.19，t＝2.446，P<0.01)。通过生物信息学分析，miR-151-5p的靶基因参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路，胰岛素信号通路，上皮细胞间质转型(EMT)信号通路，Ras信号通路以及TGF-β信号通路的调控。文献分析富集结果提示，miR-151-5p的靶基因主要参与TGF-β信号通路的调控。细胞实验提示miR-151-5p可以抑制成骨细胞增值活性，并抑制成骨细胞TGF-β通路表达。骨折愈合模型中，miR-151-5p模仿物PLCG1(miR-151-5p模仿物比抑制物组为3.99±2.06比10.36±2.87，q＝4.596，P<0.05)和MAPK8(miR-151-5p模仿物比抑制物组为4.93±1.543比17.49±5.328，q＝4.533，P<0.01)较抑制物组显著增高。结论miR-151-5p是通过TGF-β参与骨折愈合的早期调控过程。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-143靶向己糖激酶对胆囊癌细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法选取2018年6月到2020年6月我院行胆囊癌手术切除的94例胆囊癌组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析组织中miR-143表达水平；采用荧光定量PCR分析正常胆囊上皮细胞株、胆囊癌细胞SGC-996和GBC-SD细胞miR-143表达水平；将体外培养的GBC-SD细胞分为对照组(以携带空载的慢病毒感染)和miR-143组(以携带miR-143的慢病毒感染)，采用荧光定量PCR分析miR-143表达水平；采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖；将两组细胞尾静脉注射建立胆囊癌血行转移模型，检测两组细胞在小鼠肺内形成肿瘤的能力；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-143的靶基因；采用试剂盒检测两组细胞胞内乳酸水平；采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析靶蛋白及肿瘤转移蛋白表达水平；计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-143表达水平(1.04±0.13)明显高于胆囊癌组织(0.51±0.11)，差异有统计学意义(t＝3.891，P<0.05)。正常胆囊细胞株HGBEC miR-143表达水平(1.25±0.14)明显高于胆囊癌细胞SGC-996和GBC-SD(0.60±0.11、0.67±0.13)，差异有统计学意义(t＝3.317、3.157，P<0.05)。对照组吸光度(A)值(1.93±0.17)明显高于miR-143组(1.27±0.14)，差异有统计学意义(t＝3.193，P<0.05)。对照组细胞肺内成瘤数量[(16.39±3.18)个]明显高于miR-143组[(8.84±2.16)个]，差异有统计学意义(t＝4.107，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶显示HK-Ⅱ是miR-143的靶基因。对照组细胞HK-Ⅱ表达水平(1.29±0.11)明显高于miR-143组(0.87±0.10)，差异有统计学意义(t＝3.108，P<0.05)。对照组细胞HK-Ⅱ表达水平(2.09±0.16)明显高于miR-143组(1.48±0.12)，差异有统计学意义(t＝2.816，P<0.05)。对照组细胞胞内乳酸水平[(1.95±0.17) mmol/L]明显高于miR-143组[(1.03±0.21) mmol/L]，差异有统计学意义(t＝4.996，P<0.05)。结论miR-143通过靶向调控胆囊癌细胞HK-Ⅱ表达水平，影响肿瘤细胞糖酵解水平，进而调节胆囊癌细胞增殖和转移等过程。