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  • 简介:目的:检测人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA表达状况及构建pcDNA3.1-FHIT真核表达载体。方法:RT-PCR法检测三种不同类型人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA表达,构建真核表达质粒pcDNA3.1-FHIT,通过酶切法、PCR扩增法和DNA序列分析鉴定重组质粒,用脂质体转染至FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选RT-PCR鉴定。结果:FHIT基因在人胃癌细胞系BGC-823中呈阳性表达,MGC-803、MKN-45细胞系中呈阴性表达。FHIT基因cDNA正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并成功转染FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45。结论:FHIT基因在不同类型人胃癌细胞系中表达各异。成功构建pcDNA3.1-FHIT,并转染到FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,使其FHIT基因阳性表达。

  • 标签: FHIT基因 胃癌 基因表达 构建 转染
  • 简介:目的:探讨喀什地区维吾尔族和汉族丙肝患者实验室检查特征,为临床诊断治疗提供依据。方法:对424丙肝患者血清采用酶联免疫吸附法检测抗-HCV,荧光定量聚合酶链反应法检测丙肝RNA,采用电化学发光法检测FER、CA125、CA199,采用酶法检测GGT,ALT,AST。结果:维吾尔族丙肝患者HCVRNA阳性率65.25%明显高于汉族患者54.26%,且维吾尔族丙肝患者血清FER(476.35±120.50)和GGT(71.22±21.84)水平均高于汉族患者FER(333.44±105.71)、GGT(55.63±15.16),差异均有统计学意义(P〈0.05)。但两民族患者间抗-HCV阳性率、CA125、CA199、ALT、AST水平无统计学差异(P〉0.05)。结论:喀什地区维吾尔族和汉族丙肝患者不同,维吾尔族丙肝患者HCVRNA阳性率、FER、GGT水平均高于汉族患者,本研究提示维吾尔族丙肝患者可能肝细胞损害较重,更易发展为肝癌,临床应加以重视。

  • 标签: 抗-HCV 丙肝RNA 铁蛋白 γ-谷氨酰胺转肽酶
  • 简介:目的:探讨高分辨率熔解曲线分析(Highresolutionmelting,HRM)技术检测结核分枝杆菌耐药突变位点可行。方法:对218株结核分枝杆菌进行利福平(RFP)和异烟肼(INH)药物敏感性测定,并进行耐药基因位点PCR扩增和测序,同时采用HRM方法检测RFP和INH耐药基因位点情况,分析HRM敏感性和特异性。结果:218株结核分枝杆菌药敏试验结果显示,有106株(48.6%)对RFP耐药,100株(45.9%)对INH耐药,81株(37.4%)对RFP和INH均耐药。测序发现,101株(46.3%)存在RFP耐药基因突变,107株(49.1%)存在INH耐药基因突变。HRM检测结果显示,100株(45.9%)存在RFP耐药基因突变,103株(47.2%)存在INH耐药基因突变。分别以药敏试验和测序结果为标准,HRM检测RFP耐药敏感性为94.3%(100/106)和99.0%(100/101);特异性为97.3%(109/112)和100%(117/117);INH耐药敏感性为97.0%(97/100)和98.1%(103/105);特异性为97.3%(109/112)和100%(113/113)。结论:HRM快速检测结核分枝杆菌耐药具有较高特异性和灵敏度,能够满足临床需求。

  • 标签: 高分辨率熔解曲线 结核 耐药 特异性 灵敏度
  • 简介:目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)和其受体c—Met鼻咽癌(NPC)中表达及其意义。方法:采用免疫组织化学S-P法检测55NPC,15慢性鼻咽炎症中HGF/c—Met蛋白表达,并结合临床病理进行分析。结果:HGF、C—Met慢性鼻咽粘膜炎症中,主要表达于柱状上皮细胞胞膜或细胞浆;NPC中HGF主要表达于肿瘤间质、癌细胞有少量表达;c-Met表达于癌细胞,间质不袁达。HGF、C—Met蛋白NPC中阳性表达率分别为90.9%(39/55)、70.9%(5055),对照组相比,差异有显著(P〈0.05);HGF,c-Met阳性表达临床分期呈正相关(P〈0.05),而与年龄、性别、组织分型无相关;有淋巴结转移c-Met蛋白阳性表达率分别显著高于无淋巴结转移,差异有显著(P〈0.01)。结论:HGF/c—Met过度表达可能在鼻咽癌癌细胞侵袭转移过程中起调节作用,c-Met基因异常表达NPC侵袭转移生物学行为密切相关,c-Met对于判断NPC预后具有一定价值。

  • 标签: 鼻咽癌 肝细胞生长因子 c—Met癌基因 免疫组化
  • 简介:生物大分子及纳米药物,比如,亚单位疫苗、DNA疫苗、以及针对真皮层治疗药物,作为近年来新兴治疗药物,在有些治疗领域有着透皮给药需求。由于具有靶向性高,疗效显著等特点,生物大分子及纳米药物逐渐成为新研究热点。微针作为一种新型给药技术,不仅具有无痛、给药方便等优点,而且运用物理手段可大幅提高大分子甚至纳米药物透皮吸收及皮层靶向,能够避过胃肠道消化作用以及肝脏首过效用。将微针技术生物大分子药物相结合,能够同时发挥两者优势,实现高靶向生物药物无痛给药。本文简述微针透皮给药技术、以及生物大分子给药研究进展,对微针技术用于生物大分子及纳米药物透皮给药尝试研究做了介绍和总结,对存在技术挑战进行了分析和展望。

  • 标签: 微针 生物大分子药物 纳米药物 透皮给药技术
  • 简介:目的:明确血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)变化能否预测婴幼儿先心病术后急性肺损伤(ALI)发生。方法:纳入201310至20145≤36先心病合并肺动脉高压婴幼儿患者相关资料,检测体外循环(CPB)术后2h、12h、24h、48h和72h血浆NGAL水平,分析NGAL术后发生ALI之间关系。结果:本研究共纳入患者61,术后发生ALI患者9(14.8%)。所有患者CPB术后5个时间点变化趋势为:CPB术后2hNGAL浓度开始升高,均值为27.28μg/L,至12h达到高峰,均值为30.61μg/L,24h开始下降;其中12h、24h和72h前一时间点比较均具有显著差异(P〈0.05)。进一步分组显示,NGAL浓度变化趋势主要在ALI组:ALI组患者12h、24h、48h和72hNGAL浓度前一个时间点比较,变化均具有显著差异(P〈0.05),NGAL峰值浓度出现在12h,其均值为40.82μg/L;而无ALI组患者NGAL浓度只24h和12h之间比较有显著差异(P〈0.05);ALI组患者5个时间点NGAL浓度均比无ALI组患者高,具有显著差异(P〈0.05)。结论:血浆NGAL早期预测婴幼儿体外循环术后发生ALI可能具有重要作用。

  • 标签: 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 肺损伤、婴幼儿
  • 简介:近日,我国科学家利用经颅磁刺激技术。对吸毒平均十多年海洛因成瘾者进行研究,成功降低了患者机体对药物渴求靡。这是世界上首次把经颅磁刺激技术应用到海洛因成瘾者上,该研究发表耶鲁大学主办精神病学领域顶尖期刊BiologicalPsychiatry上(IF:10.225)。

  • 标签: 经颅磁刺激 科学家 技术 利用 侵入性 除毒
  • 简介:目的:探讨长链非编码RNA(longnoncodingRNA,lncRNA)氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlow-densitylipoprotein,ox-LDL)诱导损伤人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)正常HUVEC中表达谱差异。方法:采用lncRNA芯片检测ox-LDL诱导损伤HUVEC正常HUVEC中lncRNA及mRNA表达差异,筛选出HUVEC损伤相关lncRNA。结果:相对于正常HUVEC,ox-LDL诱导损伤HUVEC中表达上调和下调超过2lncRNAs和mRNAs分别有139种和113种,上调和下调超过4倍lncRNAs和mRNAs分别有35种和28种。结论:正常HUVEC比较,ox-LDL诱导损伤HUVEC中lncRNA表达谱显著变化,lncRNA可能在血管内皮细胞损伤过程中发挥一定作用。

  • 标签: 长链非编码RNA 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 芯片
  • 简介:目的:探究喜树碱-氟尿苷(CPT-FUDR)纳米颗粒对口腔鳞癌Tca-8113细胞增殖迁移影响。方法:制备喜树碱-氟尿苷纳米颗粒,通过丁达尔现象证明已组装完毕。将制备好纳米颗粒组和喜树碱(CPT)单药组、氟尿苷(FUDR)单药组以及两种单药混合组(CPT/FUDR)作对比,采用MTT实验检测药物对口腔鳞癌细胞Tca-8113增殖抑制作用,通过划痕实验探究CPT-FUDR纳米颗粒和CPT/FUDR混合药物对细胞迁移能力影响。结果:MTT结果显示:药物浓度大于0.1μM时,随着浓度增加,四组细胞存活率均明显下降(P〈0.05),CPT-FUDR纳米颗粒组Tca-8113细胞存活率明显低于单药CPT、FUDR和CPT/FUDR混合物组(P〈0.05)。划痕实验中,培养48h,CPT/FUDR混合物组和CPT-FUDR纳米颗粒组均显著低于空白组(P〈0.05),且CPT-FUDR纳米颗粒组显著低于CPT/FUDR混合物组(P〈0.05)。结论:体外,CPT-FUDR纳米颗粒对口腔鳞癌Tca-8113细胞增殖迁移有较好抑制作用,且抑制效果优于CPT/FUDR两种单药混合。

  • 标签: 口腔癌 联合化疗 口腔鳞癌 TCA-8113
  • 简介:一项新研究中,来自美国哥伦比亚大学、纽约大学、新泽西州立大学和西班牙巴斯克地区大学研究人员鉴定出一种非编码RNA中一种常见性基因变异体可能导致乳糜泻(celiacdisease)病人体内发生肠道炎症。这一发现指出携带乳糜泻风险基因的人们患上乳糜泻一种可能新风险因子。相关研究结果发表Science期刊上。

  • 标签: 乳糜 哥伦比亚大学 关联 风险因子 研究人员 州立大学
  • 简介:目的:构建人snail基因真核表达载体并鉴定。方法:使用RT-PCR法获取人snail基因全长cDNA,经BamHI、EcoRI双酶切、连接,插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,转化TOP10感受态细胞,用含氨苄青霉素LB培养基筛选阳性克隆,提取质粒双酶切电泳及测序鉴定,瞬时转染siha细胞Western-blot从蛋白水平鉴定重组质粒真核细胞内表达。结果:pcDNA3.1-snail重组质粒经酶切电泳符合预期片段,测序鉴定插入片段NCBIGenBank文库中人snail序列一致,重组质粒瞬时转染snail蛋白表达量明显增高。结论:成功构建pcDNA3.1-snail重组质粒载体,为进一步探讨snail基因生物学功能奠定了基础。

  • 标签: SNAIL 重组质粒 载体构建
  • 简介:目的:探讨肺炎克雷伯菌院内感染分布特点和耐药情况,并指导临床合理选择抗菌药物。方法:对128肺炎克雷伯菌感染者临床资料及药敏试验结果进行分析。结果:肺炎克雷伯菌院内感染者平均年龄68.5,其中〉6092(71.9%);临床送检标本中痰液(54.69%)、尿液(24.22%)、血液(9.38%)标本分离菌株数多,发生肺炎克雷伯菌感染科室主要分布于ICU(28.91%)、呼吸消化科(19.53%)、血液内分泌科(14.06%)、干部病房(11.72%);产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株40.62%;除亚胺培南和美罗培南外,所有受试菌株对其余抗菌药物均有不同程度耐药,产ESBLs菌株对测试抗菌药物耐药率明显高于非产ESBLs株;49.72%产ESBLs菌株呈多重耐药性。结论:初步了解了肺炎克雷伯菌院内感染特点,其耐药现象较严重,ESBLs检出率较高,多重耐药现象突出。临床应重视监测肺炎克雷伯菌流行情况,合理使用抗菌药物。

  • 标签: 肺炎克雷伯菌 抗菌药物 耐药性 院内感染
  • 简介:目的:为提高实验教学和科研工作质量和效果,结合国家重点实验室有利条件,从行为学实验培训角度以培养实验技术人员基本实验技能为重点。方法:安排学生学习行为医学发展史、熟练行为学动物生命观、基本实验仪器操作以及鼓励实验技术人员自行研制行为检测制仪器等课程。结果:实验技术人员了解了现代行为学发展,掌握常规实验方法,培养了科学思维方式,同时也激发了实验技术人员发挥主观能动,实现理论和技术结合。结论:多途径带教培训有利于实验技术人员行为学实验工作打下牢固基础。

  • 标签: 医学实验带教 行为学 培养
  • 简介:近日,来自中科院生化和复旦大学研究人员国际学术期刊cancercell在线发表了一项最新研究进展。LKB1基因能够编码丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶LKB1,研究发现该激酶可以调节细胞能量代谢、抑制生长增殖和维持细胞极性,而这些都是该基因抑制肿瘤重要机制。虽然LKB1能够调节细胞生长和能量代谢,但在非小细胞肺癌中,LKB1失活如何协调肿瘤进展代谢之间关系仍未可知。该项研究中,研究人员利用KrasG12D;Lkb1lox/lox小鼠模型进行了相关研究,发现在肺部恶性腺瘤和鳞状细胞癌中,活性氧(ROS)水平存在差异。

  • 标签: 非小细胞肺癌 CELL 华人科学家 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 氧化还原 国际学术期刊
  • 简介:新一期英国《自然一遗传学》杂志刊登报告说,研究人员通过大规模基因对比研究,新确定了两个强直性脊柱炎相关基因。英国牛津大学等机构研究人员报告说,他们和国际同行一起对比了2000名强直性脊柱炎患者和5000名正常人基因组图谱,发现基因ERAP1和IL23R这种疾病之间存在着较强关联.

  • 标签: 相关基因 遗传学 脊柱 自然 英国牛津大学 研究人员
  • 简介:最近科学家首次发现了基底细胞癌细胞起源,并揭示了导致这种侵袭肿瘤生长系列事件。基底细胞癌是最常见一种皮肤癌症。我们皮肤通过不断更新来保持健康,死细胞会脱落并新细胞替代。该过程靠干细胞形成祖细胞维持,祖细胞能够分裂并分化形成具有完整功能皮肤细胞。祖细胞还需要一小群干细胞来支持,通常情况下干细胞会保持静默,当皮肤受到损伤时候就会活跃起来促进皮肤修复。

  • 标签: 干细胞 皮肤癌 正元 黑化 祖细胞 细胞起源
  • 简介:最近报道称某些肉类蛋白质对你来说并不好,德州农工大学生态农业研究学院科学家发现,食用充足优质蛋白质对人类生长、发育和健康是至关重要

  • 标签: 优质蛋白 FOOD 生长 人类 健康 发育
  • 简介:目的:探索蔗糖酯类超声造影剂制备方法,并研究其造影效果。方法:采用声振法制备蔗糖酯类造影剂,将F68和SE-5按一定质量比称取配置微泡包膜材料,以微泡浓度为指标进行制备优化,将F68和SE-5按11质量比称取,将其配置成乳状液置入声振仪,以不同超声功率(200W、400W、600W及800W),不同声振时间(30s、60s、90s、120s、150s、180s、210s、240s、270s及300s)进行声振处理。将F68和SE-5分别按6:1、5:1、4:1、3:1211121、3:1及4:1质量比称取制成乳状液,选择最佳声振功率声振时间,筛选最佳溶液配比。选用优化条件下制备微泡,观察兔肝脏造影效果。结果:蔗糖酯类造影剂最佳制备条件为:泊洛沙姆188(PluronicF68)和蔗糖酯-5(SE-5)配比为21,声振仪功率为600W,声振持续时间为240s。注射造影剂兔肝脏超声造影图像清晰,回声强度明显增强。结论:通过优化制备工艺,制备出蔗糖酯类微泡浓度及直径均符合超声造影要求,具有良好显影效果

  • 标签: 蔗糖酯 泊洛沙姆 六氟化硫 微泡 超声造影剂
  • 简介:目的:制备壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒。方法:首先利用课题组发表专利合成帕米膦酸修饰Brij78新型非离子表面活性剂(Pa-Brij78),然后以壳聚糖(CS)溶液为水相,Pa-Brij78为乳化剂,E-Wax为油相,采用微法,利用修饰帕米膦酸基团壳聚糖分子链中质子化氨基交联反应原理,通过一系列实验条件探索,确定了最佳实验工艺条件,成功制备了壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒。通过动态光散射(DLS)粒径仪测定了纳米粒粒径大小和Zeta电位;透射电子显微镜(TEM)对CS-Pa-Brij78-SLNs形貌结构进行了表征。结果:实验结果显示,制备壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒最佳条件为:pH=6.0,壳聚糖浓度分别为0.1%,0.2%;反应温度65℃,反应时间40min,该条件下,制备壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒(CS-Pa-Brij78-SLNs)粒径分别为97.9±6.6nm和182.4±62.2nm,表面电位分别为(+5.21±1.4mV);(+7.94±0.80mV),装载姜黄素时,载药量为10%,包封率90%以上,透射电镜下观察其形态圆整,清晰可见壳聚糖包裹电晕。结论:本文以壳聚糖(CS)溶液为水相,合成新型非离子表面活性剂Pa-Brij78为乳化剂,E-Wax为油相,采用微乳化法,经过最佳实验条件探索,通过一步法成功制备了稳定壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒(CS-Pa-Brij78-SLNs)。

  • 标签: 壳聚糖 微乳化 固体脂质纳米粒 药物载体