简介：摘要目的研究高脂饮食小鼠腹脂微小RNA(miRNA)的差异表达，探讨高表达miR-335在脂类代谢过程中作用。方法对高脂饮食的小鼠腹脂进行miRNA芯片分析，检测小鼠腹脂miRNA的差异表达；采用生物信息学方法预测miR-335靶基因，双荧光素酶报告系统及点突变实验验证靶基因外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶4(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphordiester-ase4, ENPP4)和脂肪酸去饱和酶1(fatty acid desaturase1, FADS1)；3T3L1细胞中转染miR-335模拟体，检测靶基因mRNA和蛋白表达量；实时荧光定量PCR检测miR-335和靶基因在高脂饮食小鼠不同组织中的表达量。结果高脂饮食后，模型组小鼠体型明显大于对照组，小鼠血清总胆固醇(P＝0.016)和三酰甘油(P＝0.014)水平显著上升。高脂饮食的小鼠脂肪组织中多种miRNA发生差异表达，其中miR-335表达上升尤为明显(P＝0.024)。通过Targetscan预测miR-335靶基因，结合其功能，筛选出ENPP4和FADS1。报告基因试验显示miR-335通过"种子区"与ENPP4和FADS1预测靶位点结合从而抑制ENPP4和FADS1基因的表达，点突变实验证实了结合的靶位点；设计合成miR-335模拟体转染3T3L1细胞，培养48 h后，FADS1 mRNA表达水平显著下降(P＝0.038)，ENPP4和FADS1蛋白水平均显著下降(P＝0.033, P＝0.007)。与对照组相比，高脂饮食后miR-335在肝脏、白棕脂肪组织和脑中显著性高表达(P＝0.017, P＝0.002, P＝0.003, P＝0.031)；而ENPP4和FADS1在脑(P＝0.006, P＝0.034)和棕色脂肪组织(P＝0.014, P＝0.037)中表达量显著下降，同时ENPP4在肝脏中的表达量也极显著下降(P<0.001)。结论miR-335是与脂类代谢和脂肪沉积相关的miRNA，ENPP4和FADS1基因是miR-335的靶基因。

简介：摘要目的探讨miR-146b在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma, PTC）细胞增殖、转移和凋亡中的作用及相关机制。方法qRT-PCR检测miR-146b在PTC细胞（NPA、GLAG-66、ONCNO-DG1和B-CPAP）和正常人甲状腺细胞系HTori3中的表达水平。miR-146b抑制剂转染B-CPAP细胞后，通过qRT-PCR检测其抑制效率，利用MTT实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测miR-146b对PTC细胞增殖、侵袭能力及凋亡率的影响。SiRNA-IRAK1转染B-CPAP细胞后，利用MTT实验、细胞划痕实验和流式细胞术分别检测IRAK1对PTC细胞增殖率、转移及凋亡率的影响。利用生物信息学软件预测miR-146b的靶基因白介素1关联受体激酶1（interleukin-1 receptor-associated kinases, IRAK1），并通过双荧光素报告基因实验验证miR-146b对IRAK1的调控作用。应用SPSS 20.0软件进行分析，组间对比采用两独立样本t检验。结果qRT-PCR结果表明，与正常细胞HTori3相比，miR-146b在NPA87、KAT-5、FTC-133和B-CPAP细胞系中表达显著升高，尤以B-CPAP较高[相对表达量1 vs（1.61±0.11）、（1.92±0.21）、（1.93±0.22）、（2.43±0.31），P<0.05]。miR-146b抑制剂转染后可显著降低B-CPAP细胞中miR-146b的表达水平[相对表达量1 vs（0.41±0.12，P<0.01]。MTT结果发现，miR-146b抑制剂可抑制B-CPAP细胞的增殖能力[相对增殖率值1.00 vs（0.52±0.12）、（0.56±0.11）、（0.62±0.12），P<0.05]。流式细胞仪检测发现，miR-146b抑制剂可促进B-CPAP细胞的凋亡能力[（3.74%±0.12%）vs（7.62%±0.21%），P<0.05]。Transwell结果表明，miR-146b抑制剂可减弱B-CPAP细胞的侵袭能力[侵袭细胞数目（280.00±67.00）vs（82.00±32.00），P<0.05]。转染入siRNA-IRAK1后，B-CPAP细胞增殖率显著升高[MTT实验，相对增殖率1 vs（2.11±0.21）、（2.33±0.18）、（2.21±0.16）]、转移能力增强[细胞划痕实验，24 h相对迁移率（0.58%±0.11%）vs（0.81%±0.21%）]且细胞凋亡率显著降低[流式细胞术，相对凋亡率（6.96%±1.12%）vs（24.30±1.52%），P<0.05]。双荧光素酶报告基因结果显示，IRAK1是miR-146b的靶基因[相对荧光素酶活性（0.85±0.11）vs（1.19±0.17），P<0.05]，miR-146b抑制剂可显著上调B-CPAP细胞中IRAK1蛋白的表达水平[相对灰度值1.00 vs（2.76±0.99），P<0.05）]。结论miR-146b可能通过抑制下游靶蛋白IRAK1的表达来促进PTC细胞增殖、转移和抑制细胞凋亡的作用。

简介：摘要目的探讨miR-485-5p对顺铂耐药卵巢癌细胞的影响及其机制。方法RT-qPCR检测人正常卵巢上皮细胞株（IOSE-80）及卵巢癌细胞株（A2780、SKOV3、OVCAR3、OVCA433）中miR-485-5p的表达。构建顺铂（DDP）耐药卵巢癌细胞并检测miR-485-5p与EGFR的表达。CCK8法检测各组细胞增殖能力，流式细胞术测定细胞凋亡。结果相对于IOSE-80细胞，各卵巢癌细胞株中miR-485-5p的表达显著下降，EGFR表达上升（均P<0.05）。SKOV3/DDP细胞株（0.17±0.02）中miR-485-5p表达较SKOV3细胞（0.32±0.04）进一步下降（t=5.81, P=0.004）。而SKOV3/DDP细胞中EGFR表达则较SKVO3进一步上升（P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染miR-485-5p mimic能抑制细胞增殖活力、诱导细胞凋亡，转染miR-485-5p inhibitor则相反（均P<0.05）。SKOV3/DDP细胞转染EGFR能促进细胞增殖并抑制细胞凋亡，该作用被miR-485-5p mimic部分抵消。结论miR-485-5p参与调控卵巢癌细胞的顺铂耐药，过表达miR-485-5p能提高卵巢癌化疗敏感性，该作用可能是通过负调控EGFR实现的。

简介：摘要目的检测微小RNA-128-3p（miR-128-3p）在重症胰腺炎（severe pancreatitis，SAP）患者血浆中的表达情况及临床意义。方法选择2017年6月至2020年12月在上海市宝山区中西医结合医院就诊的SAP患者175例为观察对象，根据患者严重程度分级，将患者分为轻症急性胰腺炎（mild acute pancreatitis，MAP）组78例，中重症急性胰腺炎（moderate to severe acute pancreatitis，MSAP）组50例和SAP组47例。根据患者预后情况，将SAP组分为存活组28例和死亡组19例。qRT-PCR法检测miR-128-3p水平，对患者进行急性生理健康与慢性疾病（APACHEⅡ）评分、Ranson评分，pearson分析血浆miR-128-3p水平与APACHEⅡ、Ranson评分相关性，ROC曲线分析血浆miR-128-3p对SAP患者预后不良的预测价值。结果MAP组、MSAP组、SAP组3组间APACHEⅡ[（3.41±1.56）、（5.63±1.78）、（6.57±1.83）分]、Ranson[（2.58±1.34）、（4.95±1.47）、（6.06±1.92）分]评分及血浆CRP[（39.73±12.31）、（70.25±24.38）、（142.51±40.55）mg/L]、血钙[（1.95±0.31）、（13.26±5.24）、（14.21±6.32）mmol/L]水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）；与MAP组（1.05±0.12）比较，MSAP组（0.83±0.08）与SAP组（0.57±0.05）患者血浆miR-128-3p表达水平显著降低（P<0.05）；与MSAP组（0.83±0.08）比较，SAP组（0.57±0.05）患者血浆miR-128-3p表达水平显著降低（P<0.05）；与存活组[（0.65±0.08）、（5.91±1.64）分、（5.45±1.25）分、（120.43±30.56）mg/L]比较，死亡组SAP患者血浆miR-128-3p（0.43±0.05）表达水平显著降低，APACHEⅡ[（7.43±2.21）分]、Ranson评分[（7.22±1.59）分]及血浆CRP水平[（171.52±42.38）mg/L]显著升高（P<0.05）。相关性分析结果显示，血浆miR-128-3p水平与APACHEⅡ、Ranson评分呈负相关性（r=-0.531，-0.609，P<0.05）；血浆miR-128-3p预测SAP患者预后不良诊断效能优于APACHEⅡ、Ranson评分、CRP。结论SAP患者血浆miR-128-3p水平降低，对SAP的诊断与预后评估具有一定价值。

简介：摘要目的探讨miR-122-5p对创伤性脑外伤后小胶质细胞凋亡、极化和炎症反应的影响。方法建立创伤性脑外伤（traumatic brain injury，TBI）小鼠模型和细胞模型。使用TBI小鼠脑匀浆刺激星型胶质细胞产生外泌体，microRNA微阵列分析外泌体中显著改变的microRNA。实时荧光定量PCR检测TBI小鼠模型和TBI细胞模型中miR-122-5p表达。使用TUNEL凋亡染色、免疫荧光共聚焦、蛋白质印迹研究miR-122-5p抑制剂在TBI神经炎症中对小胶质细胞凋亡、小胶质细胞M1/M2表型转化、NLRP3通路及NFκB磷酸化的作用。结果通过microRNA微阵列分析发现有83个下调miRNA（改变2倍以上，P <0.05）,其中miR-122-5p显著下调（P<0.01），miR-122-5p在TBI小鼠及细胞模型中表达显著下降[(1.0±0.00）vs.(0.41±0.15)，P <0.001；[(1.0±0.00）vs.(0.34±0.07)，P<0.001]。TUNEL凋亡检测、免疫荧光染色结果表明抑制miR-122-5p表达，可以显著减轻LPS诱导的小胶质细胞凋亡[(8.03±1.30）vs. (3.17±0.34)，P<0.001]，促进小胶质细胞M1向M2表型转化，即M1表型极化减少[(56.96±13.70）vs. (34.70±3.47)，P =0.002]，M2表型极化增加[(30.46±3.67）vs. (40.74±2.49)，P =0.005]。蛋白质印迹结果表明miR-122-5p抑制剂降低NLRP3炎症小体活化[(0.77±0.10）vs. (0.51±0.11)，P =0.02]，降低NFκB的磷酸化[(0.73±0.08）vs. (0.50±0.07)，P =0.003]。结论miR-122-5p在TBI星形胶质细胞分泌的外泌体及小胶质细胞中表达下调,miR-122-5p抑制剂可以通过抑制TBI后NLRP3炎症小体通路的活化及NFκB的磷酸化，促进小胶质细胞M1向M2表型转化，减少小胶质细胞凋亡，从而减轻TBI后小胶质细胞炎症损伤。

简介：摘要目的探索环状RNA(circRNA)circ_0000517是否通过miR-1258/高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1，HMGB1)调节胃癌细胞的增殖、周期和迁移。方法选取2018年1月至2019年10月于中国人民解放军总医院接受手术的胃癌患者37例，收集37对胃癌组织标本和相邻的正常组织标本(癌旁组织)。实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)和Western blot法分别检测胃癌组织中circ_0000517、miR-1258和HMGB1蛋白表达。在胃癌HGC-27细胞中转染si-NC(si-NC组)、si-circ_0000517(si-circ_0000517组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-1258模拟物(miR-1258组)、anti-miR-NC(anti-miR-NC组)、anti-miR-1258(anti-miR-1258组)、si-circ_0000517+anti-miR-1258(si-circ_0000517+anti-miR-1258组)，另将未转染的HGC-27细胞设为对照组(Con组)。应用细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8，CCK-8)法、集落形成实验和流式细胞术测定HGC-27细胞增殖、周期变化，划痕实验和Transwell实验测定HGC-27细胞迁移变化。荧光素酶活性检测分析circ_0000517和miR-1258、miR-1258和HMGB1的靶向结合。结果胃癌组织中circ_0000517和HMGB1蛋白的表达水平高于癌旁组织，miR-1258表达水平低于癌旁组织，差异有统计学意义[(4.33±0.16)比(0.98±0.12)，(0.67±0.05)比(0.12±0.01)，(0.25±0.05)比(0.97±0.15)，t值分别为101.89、65.61和27.70，P值均<0.05]。在胃癌HGC-27细胞中沉默circ_0000517后，与Con组或si-NC组相比较，si-circ_0000517组circ_0000517和HMGB1蛋白表达水平明显降低，miR-1258表达水平及G0-G1期细胞比例明显升高，差异具有统计学意义(F值分别为2370.38，141.50，2497.63和26.32，P值均<0.05)；si-circ_0000517组S期细胞比例、细胞活性和集落形成数均低于Con组或si-NC组，差异有统计学意义(F值分别为123.72、92.75和600.68，P值均<0.05)。沉默circ_0000517后，si-circ_0000517组HGC-27细胞的划痕愈合率比Con组或si-NC组减少了约51.69%或53.36%，迁移细胞数比Con组或si-NC组降低了约58.29%或57.89%。circ_0000517、miR-1258和HMGB1互补序列及荧光素酶活性检测显示，miR-1258组WT-circ_0000517及WT-HMGB1的荧光素酶活性均明显低于miR-NC组[(0.35±0.02)比(0.99±0.09)，(0.16±0.01)比(1.01±0.09)，t值分别为20.83和28.16, P值均<0.05]。miR-1258过表达后，miR-1258组miR-1258的表达及G0-G1期细胞比例高于Con组或miR-NC组，差异有统计学意义(F值分别为2221.87和15.61，P值均<0.05)；HGC-27细胞的HMGB1蛋白表达、S期细胞比例、细胞活性、集落形成数、划痕愈合率和迁移细胞数低于Con组或miR-NC组，差异具有统计学意义(F值分别为42.56、73.32、28.50、229.72、88.34和407.64，P值均<0.05)。在胃癌HGC-27细胞中抑制miR-1258后，anti-miR-1258组miR-1258的表达水平低于Con组或anti-miR-NC组(F＝757.24，P<0.05); si-circ_0000517+anti-miR-1258组HMGB1蛋白表达、S期细胞比例、细胞活性、集落形成数、划痕愈合率和迁移细胞数均高于si-circ_0000517组，G0-G1期细胞比例低于si-circ_0000517组，差异有统计学意义(F值分别为145.04、343.39、145.74、892.23、151.58、430.73和66.58，P值均<0.05)。结论沉默circ_0000517通过靶向miR-1258下调HMGB1，抑制胃癌细胞增殖和迁移，并阻滞细胞周期。

简介：摘要目的验证过表达小RNA(micro RNA, miR)-23b的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)回输对治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠具有更好的协同治疗效果。方法体外实验将EAE小鼠新鲜外周T淋巴细胞与miR23b-BMSCs (miR23b-BMSC-LN组)，未处理BMSCs(BMSC-LN组)，或未加入BMSCs的空白对照(Control-LN组)共培养48 h，应用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测其中白细胞介素(interleukin, IL)-17、转化生长因子-β(transforming growth factor, TGF-β)的表达水平。用CD4 Percp、CD25 PE、IL-17 APC、Foxp3 APC抗体对细胞进行染色，流式细胞仪分析MOG35-55刺激后的CD4＋ IL-17 ＋ Th17细胞和CD4 ＋ CD25 ＋ Foxp3 ＋ Treg细胞的百分比；体内实验应用HE染色分析回输miR23b-BMSCs组(miR23b-BMSC-EAE组)，回输未处理BMSCs组(BMSCs-EAE组)，假手术组(ctrl-EAE组)的脊髓白质的炎性浸润情况。结果过表达miR-23b可增强BMSCs可抑制Th17细胞的分化能力[(4.34±0.32)%比(8.21±0.16)%，χ2＝10.03, P<0.05]，并促进调节性T(T regular, Treg)细胞亚群的分化[(1.05±0.27)%比(0.24±0.06)%，χ2＝12.67，P<0.05)]。在病理表现上，miR23b-BMSCs移植能够通过降低Th17/Treg细胞比率以及抑制炎症细胞浸润血脑屏障，从而减轻脊髓脱髓鞘，延缓EAE病程的进展。结论过表达miR23b-BMSCs回输治疗具有更高效更持久的治疗效果，为BMSCs治疗自身免疫疾病的应用奠定了基础。

简介：摘要目的探讨大黄素甲醚通过调节miR-380-3p表达影响前列腺癌DU145细胞株的细胞周期和增殖的作用机制。方法采用50 μg/mL的大黄素甲醚处理前列腺癌DU145细胞，将其作为大黄素甲醚组；以不做任何处理的正常培养的DU145细胞作为对照组。流式细胞术检测DU145细胞的周期变化，MTT法检测DU145细胞的增殖变化，实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测DU145细胞中miR-380-3p的表达情况。生物信息学软件RNAhybrid预测miR-380-3p的靶基因。qRT-PCR和Western blotting法检测miR-380-3p靶基因的表达。计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验。结果与对照组相比，大黄素甲醚组DU145细胞在G0/G1期出现阻滞(P<0.01)，DU145细胞增殖能力被明显抑制(P<0.05)。对照组和大黄素甲醚组DU145细胞中的miR-380-3p相对表达量分别为8.36±1.42和1.08±0.39，大黄素甲醚可促进miR-380-3p的表达(t＝4.96，P<0.01)。miR-380-3p的功能性靶基因可能是UHRF1。大黄素甲醚组和对照组DU145细胞UHRF1 mRNA的相对表达量分别为0.23±0.06和1.04±0.15，与对照组相比，大黄素甲醚组DU145细胞中UHRF1基因表达降低(t＝4.55，P<0.01)。结论大黄素甲醚能抑制前列腺癌DU145细胞的增殖效应，诱导DU145细胞发生G0/G1期阻滞，这可能与其对miR-380-3p的调控密切相关。

简介：摘要目的分析血清α-突触核蛋白(α-syn)、微小核糖核酸-214(miR-214)联合检测在帕金森病(PD)患者认知功能障碍评估中的应用价值。方法抽取2019年1月至2020年1月在焦作市第二人民医院就诊的114例PD患者，依据患者有无发生认知功能障碍分为发生组(50例)和未发生组(64例)。比较两组就诊当天血清α-syn、miR-214水平，分析就诊当天血清α-syn、miR-214联合检测对PD患者认知功能障碍的评估价值。结果发生组α-syn水平为26.16(22.31，29.61)ng/ml，高于未发生组的20.04(14.98，25.22) ng/ml，miR-214 mRNA相对表达量为28.39(27.44，29.98)，低于未发生组的30.99(28.78，32.12)，差异有统计学意义(P<0.05)；绘制受试者工作特征曲线，PD患者就诊当天血清α-syn水平、miR-214 mRNA相对表达量单独及联合评估认知功能障碍发生风险的曲线下面积均>0.70，预测价值较理想，且联合预测的价值最高。结论血清α-syn、miR-214联合检测评估PD患者发生认知功能障碍的价值较高，可用于早期判断PD患者认知功能障碍的发生。

简介：摘要目的探究miR-21对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭以及放射敏感性的影响和潜在作用机制。方法利用RT-qPCR方法检测宫颈癌组织和相邻非肿瘤组织、正常宫颈上皮细胞(H8)以及宫颈癌细胞系(HeLa、SiHa、ME180)中miR-21表达水平。通过CCK-8检测、Caspase3/7活细胞凋亡检测、伤口愈合试验、Transwell侵袭、克隆形成试验、蛋白印迹和间接免疫荧光方法分别检测miR-21降低或RECK低表达对HeLa细胞活力、凋亡、迁移、侵袭、放射敏感性以及相关蛋白影响；双荧光素酶报告基因试验验证miR-21是否直接靶向RECK发挥调控作用。结果miR-21在宫颈癌组织中表达明显高于相邻非肿瘤组织(P<0.05)。与H8细胞相比，HeLa、SiHa、ME180细胞中miR-21表达水平显著增加(均P<0.05)。下调miR-21表达可显著性抑制HeLa细胞活力、促进细胞凋亡、降低其放射耐受性，并且抑制Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白的表达、促进p21和Bax蛋白表达(均P<0.05)。miR-21可直接靶向结合RECK mRNA的3’-UTR，从而负向调控RECK表达；沉默RECK逆转了miR-21降低对HeLa细胞凋亡、迁移、侵袭、放射敏感性的影响。结论抑制miR-21表达能明显抑制HeLa细胞活力、诱导细胞凋亡、降低细胞迁移和侵袭能力、增强细胞放射敏感性，其作用机制与靶向促进RECK基因的表达密切相关。

简介：摘要目的探究微小核糖核酸-34a（microRNA-34A，miR-34a）基于蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路对骨关节炎大鼠的影响及作用机制。方法研究时间为2020年2月至2021年5月，选取43只6～9周龄健康雄性SD大鼠作前瞻性研究，其中随机选取10只分为空白组，剩余33只建立骨关节炎模型。成功建模30只，随机分为模型组、上调miR-34a组、沉默miR-34a组，各10只。观察病理组织，实时荧光定量PCR（real-time PCR，RT-PCR）法检测miR-34a表达，酶联免疫吸附实验法检测白细胞介素（interleukin，IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-4、IL-10，蛋白免疫印迹法检测磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B，pAKT）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mammalian target of rapamycin，pmTOR）表达。其中多组间比较行F检验，两组间比较行独立样本t检验。结果空白组、模型组、上调miR-34a组、沉默miR-34a组的miR-34a表达分别为（0.94±0.08）、（2.39±0.26）、（2.12±0.23）、（1.54±0.17），Makin评分分别为（0.35±0.05）、（4.13±0.19）、（3.02±0.16）、（1.15±0.09）分，IL-1β分别为（3.68±0.37）、（7.51±1.23）、（5.72±0.95）、（4.63±0.72）ng/L，TNF-α分别为（37.45±4.85）、（62.05±7.49）、（56.26±6.25）、（43.85±5.10）ng/L，IL-4分别为（115.75±16.81）、（50.43±9.42）、（75.82±11.94）、（93.85±13.86）pg/ml，IL-10分别为（106.49±17.51）、（60.85±10.23）、（76.81±13.07）、（91.05±15.02）pg/ml，pAKT分别为（1.00±0.01）、（1.95±0.29）、（1.71±0.26）、（1.71±0.26），pmTOR分别为（1.00±0.01）、（1.89±0.24）、（1.56±0.25）、（1.25±0.15）。与空白组相比，模型组、上调miR-34a组、沉默miR-34a组的miR-34a表达、Makin评分、IL-1β、TNF-α、pAKT、pmTOR较高，IL-4、IL-10较低，差异均有统计学意义（F/P值分别为25.290/0.001、91.260/0.001、14.144/0.001、13.077/0.001、15.525/0.001、17.580/0.001、16.080/0.001、10.676/0.001）；与模型组相比，上调miR-34a组、沉默miR-34a组miR-34a表达、Makin评分、IL-1β、TNF-α、pAKT、pmTOR较低，IL-4、IL-10较高，差异均有统计学意义（均P<0.05）；沉默miR-34a组与上调miR-34a组相比，沉默miR-34a组miR-34a表达、Makin评分、IL-1β、TNF-α、pAKT、pmTOR较低，IL-4、IL-10较高，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论沉默miR-34a对骨关节炎大鼠有干预作用，减少大鼠出现炎性反应，降低Makin评分，其作用机制与AKT/mTOR信号通路有关。

简介：摘要目的探讨微小RNA-92a-3p （micro RNA-92a-3p, miR-92a-3p）靶向调控PTEN对神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用miR-92a-3p mimics及其抑制基因（inhibitor）分别转染至SH-SY5Y细胞，根据实验需要分为miR-92a-3p过表达组、NC过表达组、miR-92a-3p抑制组、NC抑制组，采用实时荧光定量聚合酶链反应（real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测转染后细胞内miR-92a-3p的表达水平；采用CCK-8检测实验、细胞克隆形成实验、细胞划痕实验、细胞侵袭实验检测miR-92a-3p对细胞增殖、侵袭和迁移能力的变化；采用基因软件预测miR-92a-3p的靶基因并用双荧光素酶报告体系进行验证；最后采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测过表达miR-92a-3p和抑制miR-92a-3p后对PTEN/PI3K/AKT信号通路相关分子的表达情况。结果qRT-PCR结果显示miR-92a-3p过表达组的表达含量（65.73±20.07）比miR-92a-3p抑制组的表达含量（0.33±0.02）显著增高，且差异有统计学意义（t=5.64，P=0.005）。CCK-8检测实验显示，miR-92a-3p过表达组能促进SH-SY5Y细胞的增殖活性（P均<0.001 ），miR- 92a-3p抑制组则能有效抑制SH-SY5Y细胞的增殖活性（P=0.031，P=0.012，P<0.001，P<0.001）。细胞克隆形成实验结果显示，miR-92a-3p过表达组的细胞克隆数为（210±19）个，高于NC过表达组的细胞克隆数（144±5）个，组间比较差异有统计学意义（P=0.005）；miR-92a-3p抑制组的细胞克隆数为（83±6）个，低于NC抑制组的细胞克隆数（137±13）个，组间比较差异有统计学意义（P＝0.003）。细胞划痕实验及细胞侵袭实验结果显示，miR-92a-3p过表达组细胞迁移愈合率为（90.37±0.67）%，高于miR-92a-3p抑制组（41.03±0.56）%，组间比较差异有统计学意义（P<0.001）；miR-92a-3p过表达组细胞穿膜数量为（106.80±9.28）个，高于miR-92a-3p抑制组（33.40±7.56）个，组间比较差异有统计学意义（P<0.001）。qRT-PCR和蛋白质印迹法结果显示，与NC过表达组相比，miR-92a-3p过表达组PTEN的mRNA表达量（0.43±0.02）和蛋白水平明显降低，而PI3K mRNA表达量（2.00±0.10）、AKT mRNA表达量（1.41±0.19）和各自蛋白水平明显升高，且差异均有统计学意义（P<0.001、P< 0.001和P=0.028）；miRNA-92a-3p抑制组可逆转上述作用，且差异均有统计学意义（P＝0.043、P= 0.046和P<0.001）。结论PTEN基因是miR-92a-3p的靶基因，miR-92a-3p可能通过促进NB细胞增殖、促进NB细胞侵袭、促进NB细胞迁移和抑制PTEN mRNA表达引发PTEN蛋白水平的降低。

简介：[摘要]目的：探究miR-377-3p在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC) 中的表达和作用机制。方法:qRT-PCR检测ESCC组织和细胞中miR-377-3p的表达。分析miR-377-3p与临床病理特征之间相关性。构建miR-377-3p高低表达的食管癌细胞株，通过western blot验证miR-377-3p对下游的靶基因LASP1的调控关系，并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-377-3p与LASP1之间的相互作用。结果:miR-377-3p在ESCC组织和细胞中明显低表达。miR-377-3p与ESCC患者的肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移呈负相关。在ESCC中miR-377-3p通过调控LASP1表达抑制食管癌增殖、迁移和侵袭。结论：miR-377-3p通过调控LASP1抑制食管癌的增殖、迁移和侵袭，它可以作为ESCC的预后分析及潜在的治疗靶点。

简介：摘要目的探讨miR-3189-3p在肾癌组织和癌旁组织中的表达差异及其对肾癌细胞生物学功能的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-3189-3p在肾癌组织及癌旁组织、肾癌细胞株(Caki-1、ACHN、A498、OS-RC-2)和正常肾小管上皮细胞HK-2中的表达。分别转染miR-NC或miR-3189-3p mimics至miR-3189-3p表达最低的肾癌细胞，分别为miR-NC组和miR-3189-3p组。通过CCK-8法和Transwell迁移实验分别检测miR-3189-3p对肾癌细胞增殖和侵袭的影响。miRanda和miRTarBase软件预测miR-3189-3p的下游基因。双荧光素酶报告基因实验验证miR-3189-3p的下游基因。qRT-PCR和Western blotting法检测miR-3189-3p下游基因的表达。计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验。结果miR-3189-3p在肾癌组织和癌旁组织中的相对表达量分别为1.97±0.61和6.19±0.73，miR-3189-3p在肾癌组织的相对表达量低于癌旁组织(P<0.01)。miR-3189-3p在肾癌细胞株的相对表达量均低于HK-2细胞(P<0.05)，OS-RC-2细胞中相对表达量最低(P<0.01)。miR-NC组和miR-3189-3p组OS-RC-2细胞中miR-3189-3p的相对表达量分别为1.01±0.11和9.27±1.43，miR-NC组miR-3189-3p的相对表达量明显低于miR-3189-3p组(P<0.01)。与miR-NC组相比，高表达miR-3189-3p的OS-RC-2细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。miR-NC组和miR-3189-3p组穿膜细胞数分别为(165.40±17.02)个和(41.07±6.36)个，miR-3189-3p组OS-RC-2细胞侵袭能力明显降低(P<0.01)。miR-3189-3p的靶基因是水通道蛋白3(AQP3)，miR-3189-3p可靶向结合AQP3 mRNA(P<0.01)。与miR-NC组相比，高表达miR-3189-3p细胞中AQP3基因在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显降低(P<0.01)。结论miR-3189-3p在肾癌中表达下调，高表达miR-3189-3p可显著抑制肾癌OS-RC-2细胞的增殖和侵袭，其分子机制是miR-3189-3p靶向抑制AQP3基因的表达。

简介：摘要目的探究天麻素对脑卒中大鼠神经的保护作用及其机制。方法2020年1月至2021年3月，将体质量为（250±10）g的清洁级健康雄性SD大鼠94只分为假手术组、模型组、天麻素低剂量组（50 mg/kg）、天麻素中剂量组（100 mg/kg）、天麻素高剂量组（150 mg/kg）。对大鼠神经功能进行Longa评分；称量计算大鼠脑含水量；2，3，5三苯基氯化四氮唑（TTC）染色观察大鼠脑梗死情况；取脑组织，苏木素伊红（HE）染色观察海马组织神经元形态；比色法测定半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（cysteinyl aspartate-specific protease，Caspase）-3、Caspase-9活性；实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测微小RNA155（microRNA-155，miR-155）表达；蛋白质免疫印迹检测Notch1及其配体Jagged1的表达。符合正态分布的计量资料以（x¯±s）表示，多组间比较行单因素方差分析，进一步两组间比较行SNK-q检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果相较于假手术组，模型组大鼠神经功能受损严重，脑含水量、脑梗死率以及Caspase-3、Caspase-9活性显著上升，脑内miR-155表达显著升高，Notch1及其配体Jagged1、下游靶基因Hes1的表达差异无统计学意义（均P>0.05）；相较于模型组，天麻素低、中、高剂量组大鼠神经功能受损程度减轻，脑含水量［（81.52±2.19）%、（80.39±2.24）%、（79.33±2.05）%比（87.44±2.56）%］、脑梗死率［（24.66±2.35）%、（20.87±2.06）%、（15.65±1.54）%比（32.15±3.59）%］以及Caspase-3［（2.48±0.31）、（2.12±0.27）、（1.43±0.21）比（3.27±0.42）］、Caspase-9活性［（2.05±0.25）、（1.76±0.20）、（1.23±0.16）比（2.79±0.36）］显著下降，脑内miR-155表达［（2.15±0.18）、（1.97±0.16）、（1.63±0.15）比（2.64±0.27）］显著下降，Notch1［（0.77±0.13）、（0.84±0.16）、（0.95±0.18）比（0.42±0.09）］、Jagged1［（0.68±0.10）、（0.73±0.15）、（0.87±0.16）比（0.38±0.06）］、Hes1的表达［（0.81±0.12）、（0.93±0.15）、（1.07±0.17）比（0.43±0.07）］显著升高。结论天麻素可下调miR-155的表达，激活Notch通路，从而对脑卒中大鼠神经起到保护作用。

简介：摘要目的探讨脑源性神经营养因子反义RNA(brain-derived neurotrophic factor-antisense，BDNF-AS)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响和可能机制。方法体外培养肾小管上皮细胞HK-2，分别转染BDNF-AS小干扰RNA、miR-145-5p模拟物或共转染BDNF-AS小干扰RNA和miR-145-5p抑制剂，之后采用30 mmol/L葡萄糖干预转染后的细胞24 h，用RT-qPCR法检测细胞中BDNF-AS和miR-145-5p的表达，用CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western印迹法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达，酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中IL-1β和IL-6的水平。用双荧光素酶报告基因实验验证BDNF-AS和miR-145-5p的调控关系。结果高糖处理促进了HK-2细胞中BDNF-AS的表达(P<0.05)，而抑制了miR-145-5p的表达(P<0.05)。干扰BDNF-AS或过表达miR-145-5p降低了高糖诱导的HK-2细胞抑制率、凋亡率及Bax蛋白、IL-1β和IL-6的表达(P<0.05)，促进了Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。干扰miR-145-5p逆转了干扰BDNF-AS对高糖诱导的HK-2细胞增殖、凋亡及IL-1β和IL-6表达的影响。BDNF-AS可靶向结合并负调控miR-145-5p。结论干扰BDNF-AS可能通过靶向负调控miR-145-5p促进高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖，并抑制细胞凋亡及炎症因子表达。

简介：摘要目的探讨miR-92a-3p在老年骨质疏松症（osteoporosis，OP）中的表达情况及其在髋部脆性骨折中的诊断价值。方法借助美国国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）网站检索与OP、miRNA相关的数据集并进行分析与筛选获得目标miRNA。收集2020年1月至2020年6月期间，从山西医科大学第二医院骨科纳入53例OP患者与24例健康人的血清标本，将OP患者分为发生髋部脆性骨折组（OP_F组，30例）和未发生髋部脆性骨折组（OP_WF组，23例），分析受试者的骨密度与血清中的骨代谢标志物测量：钙、磷、甲状旁腺激素、25-羟基维生素D、骨碱性磷酸酶、血清c末端肽。利用qRT-PCR检测血清标本中目标miRNA的表达水平。χ2检验、t检验、斯皮尔曼等级相关、接收者操作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC曲线）分析miR-92a-3p表达水平与患者临床特征的潜在关系。结果从NCBI网站中分析得出miR-92a-3p在OP患者中表达较健康人水平升高（t=3.41，P=0.007），miR-1304-5p表达水平降低（t=5.13，P<0.001）。qRT-PCR实验证实以上结果，并进一步发现较OP_WF组，OP_F组中miR-92a-3p表达明显升高（t=3.01，P=0.004），但miR-1304-5p在两组间无明显差异（t=0.71，P=0.480）。OP患者组与健康对照组相比，BMI（t=2.71，P=0.008）、骨密度评分（t=29.02，P<0.001）、钙（t=61.20，P<0.001）、磷（t=2.54，P=0.013）、25-羟基维生素D（t=3.01，P=0.004）、骨碱性磷酸酶（t=12.56，P<0.001）、血清c末端肽（t=7.52，P<0.001）水平差异有统计学意义。OP_F组与OP_WF组相比，骨密度评分（t=2.08，P=0.042）、钙（t=15.75，P<0.001）、骨碱性磷酸酶（t=2.02，P=0.049）、血清c末端肽（t=3.39，P=0.001）的水平差异有统计学意义。骨密度评分、骨碱性磷酸酶浓度与miR-92a-3p的表达有关且分别呈负相关（r=-0.403，P=0.027）与正相关（r=0.416，P=0.022）。ROC曲线下面积为0.723，miR-92a-3p水平对诊断髋部脆性骨折具有潜在意义（P=0.006）。结论miR-92a-3p在OP中高表达，对诊断髋部脆性骨折具有生物学意义。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) SNHG12靶向微小RNA(miRNA，miR)-199a对肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法选取新乡医学院第一附属医院2017年9月到2021年9月手术摘除的123例宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象。荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析宫颈癌组织和癌旁组织lncRNA SNHG12和miR-199a表达水平；宫颈癌Hela细胞随机分为lncRNA对照组、SNHG12 KD组，miRNA对照组和miR-199a。细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析两组细胞增殖能力；Transwell分析细胞侵袭能力；体内实验分析细胞淋巴结转移数量；荧光素酶基因报告实验检测lncRNA SNHG12和miR-199a的关系。计量资料比较采用t检验。结果癌旁组织lncRNA SNHG12表达水平(1.25±0.19)明显低于宫颈癌组织lncRNA SNHG12表达水平(2.98±0.23)，癌旁组织miR-199a表达水平(1.49±021)明显高于宫颈癌组织miR-199a表达水平(0.46±0.14)，差异有统计学意义(t＝4.001、3.891，P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度(A)值(1.95±0.24)明显高于SNHG12 KD组细胞48 h A值(1.33±0.17)，miRNA对照组细胞48 h A值(2.18±0.25)明显高于miR-199a组细胞A值(1.44±0.27)，差异有统计学意义(t＝3.891、4.019，P<0.05)。lncRNA对照组细胞成瘤体积[(794.54±88.09) mm3]明显高于SNHG12 KD组细胞成瘤体积[(372.43±34.76) mm3]，差异有统计学意义(t＝5.309，P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(109.43±16.98)个]明显高于SNHG12 KD组细胞侵袭数量[(69.44±7.09)个]，差异有统计学意义(t＝8.129，P<0.05)。lncRNA对照组细胞淋巴结转移数量[(12.43±3.09)个]明显高于SNHG12 KD组细胞成瘤体积[(5.09±2.98)个]，差异有统计学意义(t＝2.891，P<0.05)。miR-199a是lncRNA SNHG12是靶点。lncRNA对照组细胞miR-199a表达水平(1.67±0.23)明显低于SNHG12 KD组细胞miR-199a表达水平(3.91±0.31)，差异有统计学意义(t＝4.190，P<0.05)。结论lncRNA SNHG12在宫颈癌组织中呈高表达，通过与miR-199a吸附结合，参与宫颈癌细胞的增殖、侵袭和转移等过程。

简介：摘要目的探讨miR-424对脓毒症并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)风险的预测价值及其与ARDS预后的相关性。方法前瞻性研究。收集2020年2月至2021年2月河南省人民医院(郑州大学人民医院)收治的脓毒症患儿(含ARDS)资料，记录患儿ARDS发生情况和ARDS患儿病死率，ARDS患儿根据是否死亡分为存活组和死亡组。采用定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测患儿外周血单个核细胞miR-424的表达。采用Pearson相关分析探讨ARDS患儿miR-424表达与儿童危重症评分(PCIS)、序贯器官衰竭(SOFA)评分、氧合指数(P/F值)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、炎症因子白细胞介素(IL)-6和IL-8等之间的关系。采用多因素Logistic回归分析影响ARDS患儿预后的因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估miR-424对脓毒症并ARDS早期诊断的准确性，评估miR-424对脓毒症并ARDS组患儿死亡的风险。结果共纳入脓毒症患儿121例，其中并ARDS组36例。脓毒症并ARDS组患儿miR-424表达(0.56±0.17)明显低于脓毒症不并ARDS组(0.98±0.26)(t＝8.776，P<0.001)。脓毒症并ARDS组患儿miR-424表达与IL-6(r＝－0.627，P<0.01)、IL-8(r＝－0.651，P<0.01)及CRP(r＝－0.472，P<0.05)水平均呈负相关；与PCIS评分(r＝0.330，P<0.05)、P/F值(r＝0.592，P<0.001)、白蛋白(r＝0.496，P<0.05)均呈正相关。ROC显示，miR-424[曲线下面积(AUC)＝0.908，95%CI：0.856~0.960]能够区分脓毒症并ARDS患儿和脓毒症不并ARDS患儿。与ARDS存活组相比，ARDS死亡组miR-424明显下降(0.42±0.14比0.63±0.15)(t＝3.890，P<0.05)；miR-424(AUC＝0.845，95%CI：0.696~0.995)降低预示ARDS患儿死亡风险增加。多因素Logistic回归分析显示，miR-424表达(OR＝0.001，P＝0.033 )、白蛋白(OR＝0.553，P＝0.040)为ARDS患儿死亡的独立危险因素。结论miR-424对脓毒症并ARDS患儿的早期诊断和ARDS预后判定有预测价值。

简介：摘要目的观察miR-217对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的肝星状细胞（HSC）活化的影响，观察四氯化碳（CCl4）诱导小鼠中miR-217过表达产生的效果，阐明miR-217在肝纤维化中的作用。方法使用AngⅡ刺激HSC并检测miR-217表达水平的变化情况。将HSC分为对照组、AngⅡ处理组和AngⅡ+miR-217处理组，检测各组中α-平滑肌肌动蛋白，成纤维细胞特异蛋白1和Ⅰ型胶原蛋白（Collagen I）的表达水平。采用TargetScan和双荧光素酶报告基因实验对miR-217的靶基因进行筛选及验证。荧光实时定量PCR和Western blot检测miR-217对转化生长因子β受体Ⅱ（TGFBR2）表达水平的影响。构建CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型，Masson染色和天狼星红染色检测过表达miR-217对CCl4小鼠肝纤维化进程的影响。2组数据间的比较采用t检验，多组数据比较采用One-Way ANOVA进行统计分析。结果AngⅡ刺激HSC细胞能下调miR-217的表达水平，转染miR-217 mimics能抑制AngⅡ诱导的α-平滑肌肌动蛋白，成纤维细胞特异蛋白1和Collagen I的表达水平。miR-217能特异性结合TGFBR2的3’-UTR，转染miR-217 mimic能抑制HSC中TGFBR2的mRNA和蛋白表达水平。CCl4小鼠中过表达miR-217能抑制Collagen I和Collagen Ⅲ的表达水平，缓解肝纤维化进程。结论miR-217通过靶向调控TGFBR2调节肝纤维化，抑制AngⅡ诱导的HSC活化，减缓CCl4小鼠的肝纤维化进程，表明miR-217可能具有抑制肝纤维化的功能。