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  • 简介:摘要目的构建乳头病毒(HPV)16 E6/E7基因稳定表达的人永生化角质形成细胞(KC),为研究HPV16 E6/E7诱导的细胞永生化及恶性转化机制提供细胞模型。方法两步消化法分离培养原代人包皮角质形成细胞(HFK),利用慢病毒感染技术对细胞稳定转染HPV16 E6/E7基因,连续培养30代以上,筛选出永生化KC,分为3组:①空白对照组:传代2次的原代HFK;②实验组:传代2次的原代HFK感染LV5-HPV16 E6/E7,感染细胞记录为A0代,感染后以传代次数记录(A1、A2……);③阳性对照组:HPV16阳性宫颈癌细胞SiHa。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western印迹实验分别检测空白对照组、实验组、阳性对照组HPV16 E6/E7 mRNA、蛋白及CK14蛋白的表达,CCK-8及Transwell Insert方法检测细胞的增殖及侵袭能力。裸鼠致实验检测实验组A30、阳性对照组SiHa细胞的致能力。结果成功分离原代HFK。LV5-HPV16 E6/E7重组质粒感染原代HFK后,空白对照组细胞无荧光表达,连续传代后出现衰老表现,实验组A30细胞体积、形态较原代HFK无明显变化,且荧光表达率为100%。与空白对照组相比,实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E6 mRNA表达水平显著升高(t值分别为7.12、8.07、6.53、5.66;P值分别< 0.001、< 0.001、= 0.001、= 0.005);与空白对照组相比,实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E7 mRNA表达水平也显著升高(t值分别为3.20、4.29、3.75、4.22;P值分别为0.024、0.008、0.013、0.014)。空白对照组未见HPV16 E6/E7蛋白的表达,而A30及SiHa细胞可见HPV16 E6/E7蛋白的表达。CCK-8实验显示,实验组A10、A20、A30细胞增殖水平显著高于空白对照组(t值分别为6.49、7.55、9.43;P值分别为0.003、0.002、0.001),而A1的增殖水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(t = 2.40,P = 0.074)。Transwell Insert侵袭实验显示,A30不能穿过基底膜,SiHa细胞可穿过基底膜被染成蓝色。裸鼠接种A30细胞2个月后无肉眼可见肿瘤,组织学亦显示无肿瘤形成,裸鼠接种SiHa细胞后可于皮下形成肿瘤。结论通过采用慢病毒技术转染HPV16 E6/E7基因成功建立人永生化角质形成细胞,可作为HPV相关研究中的理想细胞模型。

  • 标签: 人乳头瘤病毒16 角蛋白细胞 慢病毒感染 细胞系,转化 HPV16 E6/E7
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  • 简介:摘要导致新型冠状病毒肺炎的2019新型冠状病毒属于冠状病毒(human coronavirus,HCoV)。为了应对新型冠状病毒肺炎疫情,目前紧急启用了多种检测手段。其中核酸检测为实验室诊断的金标准,而血清学检测在现阶段的意义主要在于疾病监测和流行病学调查。面对新发传染病,试剂盒开发初期的诊断性能尚不尽如人意。现围绕国内外已有的HCoV相关核酸检测和血清学检测方法的性能参数、应用实例等进行综述,望能为2019新型冠状病毒的实验室方法学选择及优化提供参考。

  • 标签: 冠状病毒感染 肺炎 新型冠状病毒肺炎 核酸检测
  • 简介:摘要目的构建裸鼠皮肤鳞状细胞癌(CSCC)移植模型,探讨紫外线(UV)损伤及人乳头病毒(HPV)感染诱导、促进CSCC的协同作用机制。方法将CSCC细胞A431分成3组,即用HPV16 E6腺病毒转染的HPV16 E6过表达组,空白腺病毒转染的空白载体组(简称空载组),未进行腺病毒转染的空白对照组。使用无血清DMEM培养基将空载组及HPV16 E6过表达组(LV-OE-HPV16 E6组)A431细胞制成单细胞悬液,分别接种于SKH-1裸鼠左侧臀部皮下作为空载组(n = 16)和LV-OE-HPV16 E6组(n = 16)。每3天观察并记录小鼠肿瘤生长情况,当体达到150 mm3时,视为建模成功。建模成功后,每组取8只小鼠进行UV照射,分为4组,即空载组、空载+ UV组、LV-OE-HPV16 E6组、LV-OE-HPV16 E6 + UV组,UV照射剂量为1 440 mJ/(cm2·d),每次12 min,持续4周后处死裸鼠,测量重及体积,绘制肿瘤生长曲线,免疫组化、Western印迹和qRT-PCR检测验证Wnt1、β联蛋白mRNA及蛋白在裸鼠CSCC中的表达。数据若符合正态分布,多组间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验;数据若不符合正态分布,采用秩和检验对数据进行统计分析。结果空载+ UV组重为(2.90 ± 0.36)g,LV-OE-HPV16 E6组(3.19 ± 0.32)g,LV-OE-HPV16 E6 + UV组(4.41 ± 0.18)g,与空载组(2.20 ± 0.24)g比较,差异均有统计学意义(t值分别为4.39、6.77、20.11,均P<0.001);空载+ UV组体积为(1 033.12 ± 400.15)mm3,LV-OE-HPV16 E6组(1 119.21 ± 447.57)mm3,LV-OE-HPV16 E6 + UV组(1 464.29 ± 409.98)mm3,与空载组(688.94 ± 319.31)mm3比较差异均有统计学意义(t值分别为1.90、2.21、4.22,均P<0.001)。免疫组化显示,4组间Wnt1、β联蛋白表达水平差异无统计学意义(F值分别为0.76、0.71,均P > 0.05);Western印迹显示,4组间Wnt1、β联蛋白水平差异有统计学意义(F值分别为16.74、49.90,均P<0.05),且LV-OE-HPV16 E6 + UV组Wnt1、β联蛋白水平高于空载组、空载+ UV组和LV-OE-HPV16 E6组(均P<0.05)。mRNA水平分析显示,4组间组织中Wnt1、β联蛋白mRNA水平差异均有统计学意义(F值分别为7.77、8.38,均P<0.05),且LV-OE-HPV16 E6 + UV组Wnt1 mRNA水平高于空载组、空载+ UV组和LV-OE-HPV16 E6组(均P<0.05)。结论UV和HPV感染在诱导、促进CSCC中具有协同作用。

  • 标签: 肿瘤,鳞状细胞 疾病模型,动物 紫外线 人乳头瘤病毒16 HPV16 E6 协同作用
  • 简介:摘要miR-203是近来研究发现的上皮特异性miRNA,通过调控靶mRNA转录后的表达,抑制角质形成细胞增殖潜能,诱导细胞周期退出和细胞分化,在上皮相关疾病中发挥重要作用。HPV通过抑制miR-203,调控下游靶基因以调节病毒生命周期。本文就miR-203的生物学特性,调控靶基因p63、survivin、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)在HPV感染中的作用以及与宫颈癌、尖锐湿疣和口咽癌等相关疾病的研究进展作一综述。

  • 标签: 微RNAs 靶基因 HPV 宫颈癌 尖锐湿疣
  • 简介:摘要目的探讨洛铂联合多西他赛在Ⅱb~Ⅲb期高危型乳头病毒(high-risk human papilloma virus,HR-HPV)阳性宫颈癌患者中的应用效果。方法选取本院2014年4月至2016年11月收治的Ⅱb~Ⅲb期HR-HPV阳性宫颈癌患者136例,依据随机数字表法分为对照组和观察组,各68例。对照组采用顺铂联合多西他赛治疗,观察组采用洛铂联合多西他赛治疗。比较两组疾病控制率、随访3年生存周期,治疗前、治疗4个疗程后血清细胞因子(bFGF、CD105、VEGF)水平、肿瘤标志物(CA125、SCCA、CEA)水平,不良反应发生率。结果两组疾病控制率比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组生存周期长于对照组(P<0.05);治疗4个疗程后,观察组血清bFGF、CD105、VEGF、CA125、SCCA、CEA水平低于对照组(均P<0.05);两组骨髓抑制、胃肠道反应、肾毒性等不良反应发生率比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论洛铂联合多西他赛治疗Ⅱb~Ⅲb期HR-HPV阳性宫颈癌患者,疾病控制率高,可降低血清细胞因子与肿瘤标志物水平,延长生存周期,且安全性高。

  • 标签: 洛铂 多西他赛 Ⅱb~Ⅲb期 高危型人乳头状瘤病毒阳性 宫颈癌 疾病控制 血清bFGF水平
  • 简介:摘要目的了解北京部分地区女性宫颈液基细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)病理诊断为未发现上皮内病变及癌变、宫颈低级别鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)及宫颈高级别鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)3组人群高危型乳头病毒(human papillomavirus,HPV)亚型感染以及年龄分层的感染情况。方法收集2019年1月至2019年12月就诊于首都医科大学附属北京安贞医院妇产科的女性宫颈脱落细胞标本,利用高危型HPV分型核酸测定试剂盒[荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法]进行基因分型检测,对结果进行回顾性分析,筛选其中同时行TCT检测患者结果,按TCT病理学诊断分为3组,将诊断为未发现上皮内病变及癌变患者纳入对照组(以下简称对照组),以及宫颈TCT-LSIL组和宫颈TCT-HSIL组,采用χ2检验分析其分布特征。结果对照组(561例)中,至少有一个亚型感染的例数为68例,总阳性率为12.12%;TCT-LSIL组(385例)中,至少有一个亚型感染的例数为288例,总阳性率为74.81%;宫颈TCT-HSIL组(170例)中,至少有一个亚型感染的例数为128例,总阳性率为75.29%。对照组阳性率最高的是52型,宫颈TCT-LSIL组和宫颈TCT-HSIL组阳性率最高的是16型。16、18、31、33、39、45、51、52、56、58、68型的感染率在3组之间差异均有统计学意义(P均<0.05)。所有型别中只有16型在宫颈TCT-HSIL组的感染率与对照组和宫颈TCT-LSIL组两两比较差异有统计学意义(P′<0.017)。对所有纳入对象进行年龄分层后,仅16型在不同年龄段之间感染率差异均有统计学意义(P均<0.05);对3组进行年龄分层后在<31岁年龄段内,16、18、31、33、39、45、51、52、56、58型的感染率在3组间差异均有统计学意义(P均<0.05);在≥31~<41岁年龄段内,16、18、39、51、52、56、58型的感染率在3组间差异有统计学意义(P均<0.05);在≥41~<51岁年龄段内,16、18、35、52、56、58型的感染率在3组间差异均有统计学意义(P均<0.05);在≥51岁年龄段内,16、18、31、33、51、52、58型的感染率在3组间差异有统计学意义(P均<0.05)。TCT-LSIL组进行年龄分层后16型、45型在<31岁、≥31~<41岁、≥41~<51岁和≥51岁4个年龄段感染率差异均有统计学意义(P均<0.05),而对照组和宫颈TCT-HSIL组各个年龄段之间各个亚型的感染率差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论HPV分型中的16、18、51、52、58型在HSIL患者中感染率高,是引起宫颈病变的主要HPV类型,且在HSIL患者不同年龄段内HPV各个型别的感染率相当。

  • 标签: 高危型人乳头瘤病毒 宫颈低级别鳞状上皮内病变 宫颈高级别鳞状上皮内病变
  • 简介:摘要目的探讨宫颈活检病灶组织中P16和Ki-67蛋白在高危乳头病毒(HPV)感染同时液基薄层细胞学(TCT)检测异常的患者中阳性表达情况,以及预测早期宫颈癌发生的应用价值。方法回顾性总结2016年1月至2017年7月于临海市中医院行HPV-DNA检测和TCT检查患者,选择高危HPV(16和18亚型阳性)和TCT异常患者共120例,经阴道镜宫颈活检病灶组织进行病理诊断,同时进行P16和Ki-67蛋白免疫组化染色。结果120例患者中HPV-16阳性66例,18阳性34例,16和18均阳性20例;TCT报告未明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞(ASC)6例,低级别鳞状上皮内病变(LSIL)46例,高级别SIL(HSIL)60例,宫颈鳞状细胞癌(SCC)8例;病理诊断炎症5例,上皮内样病变(CIN)105例,SCC 10例。P16和Ki-67蛋白阳性表达率在炎症、CIN和SCC患者中逐渐升高[0.0%(0/5)、36.2%(38/105)、70.0%(7/10),χ2=4.382,P=0.036;0.0%(0/5)、40.0%(42/105)、80.0%(8/10),χ2=5.945,P=0.015]。对CIN患者共随访21~36个月,中位时间29.5个月,共26例进展至SCC,进展至SCC患者随访截止时P16和Ki-67蛋白阳性表达率显著高于未进展患者[61.5%(16/26)比39.2%(31/79),χ2=3.934,P=0.047;69.2%(18/26)比41.8%(33/79),χ2=5.905,P=0.015]。结论宫颈活检组织中P16和Ki-67蛋白在高危HPV感染同时TCT异常患者中具有差异性表达,病理诊断SCC中P16和Ki-67蛋白阳性表达率显著高于CIN患者,并且随访进展至SCC的CIN患者P16和Ki-67蛋白阳性表达率也明显高于未进展者,提示P16和Ki-67蛋白对预测早期宫颈癌发生具有重要价值。

  • 标签: 宫颈肿瘤 活组织检查,针吸 人乳头瘤病毒6 宫颈上皮内瘤样病变 宫颈粘液 基因,p16 Ki-67抗原 阴道镜检查
  • 简介:摘要目的探讨鼻嗜酸细胞性乳头(sinonasal oncocytic papilloma,SNOP)与人乳头病毒感染(human papillomavirus,HPV)的相关性,并分析其临床病理特点。方法收集2017年3月至2020年11月经北京同仁医院病理科确诊的24例鼻嗜酸细胞性乳头标本,观察其组织形态学特点,采用RNAscope技术检测体组织中的HPV mRNA,免疫组织化学法检测标本组织中Ki-67、P16、P53和P63的表达。结果20例为初诊病例,4例为复发病例。镜下肿瘤组织呈乳头状,可呈外生性和内翻性生长。体细胞呈高柱状,细胞内含大量红染的嗜酸性物质。细胞呈多层排列,在细胞间可见许多充满粘液的微囊。所有患者HPV16/18、HR-HPV18和LR-HPV 6检测HPV mRNA均为阴性。免疫组织化学结果显示Ki67表达均在1%~5%之间;P16有11例阳性;P53有8例阳性,4例弱阳性;P63有13例阳性。结论鼻嗜酸细胞性乳头的发病可能与黏膜炎症关系密切,与HPV感染关系不明确。Ki-67、P16、P53和P63的异常表达可能参与了SNOP发病过程。

  • 标签: 嗜酸细胞乳头瘤 发病机制 人乳头瘤病毒 原位杂交 免疫组织化学
  • 简介:摘要目的探讨免疫细胞化学P16/Ki-67双染、P16INK4α单染及高危型乳头病毒(HR-HPV)检测对高级别子宫颈病变的筛查价值。方法回顾性分析2019年3月至2021年7月于太原钢铁(集团)有限公司总医院同时行子宫颈薄层液基细胞学(TCT)及HR-HPV检测的622例患者临床资料,对患者剩余细胞学标本进行P16/Ki-67双染和P16INK4α单染检测。其中334例TCT结果提示为意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)以上病变及HPV阳性患者行阴道镜病理活组织检查。以病理结果为参照,比较P16/Ki-67双染、P16INK4α单染及HR-HPV检测筛查高级别鳞状上皮内变(HSIL)及子宫颈癌的阳性预测值、灵敏度、特异度及准确度。结果以组织病理学结果为参照,结合TCT检测结果,622例患者中31例为HSIL,其中P16/Ki-67双染阳性22例(71.0%),P16INK4α单染阳性23例(74.2%),HR-HPV检测阳性25例(80.6%);4例为子宫颈癌,3种检测方法阳性率均为100.0%(4/4)。622例患者中,P16/Ki-67双染、P16INK4α单染及HR-HPV检测筛查出HSIL及子宫颈癌的阳性率分别为13.99%(87/622)、25.40%(158/622)、21.38%(133/622);阳性预测值分别为29.89%、17.09%、21.08%;准确度分别为91.19%、78.94%、83.28%;特异度分别为89.77%、77.98%、82.46%;灵敏度分别为74.29%、77.14%、82.86%。P16/Ki-67双染的阳性率、阳性预测值、特异度、准确度均高于P16INK4α单染及HR-HPV检测,差异均有统计学意义(z值分别为-5.062和-3.418、2.328和2.450、5.436和3.570、6.043和4.161,均P<0.05);HR-HPV检测的灵敏度高于P16/Ki-67双染及P16INK4α单染,但差异均无统计学意义(z值分别为-0.890、1.017,均P>0.05)。结论HR-HPV检测更适用于初次子宫颈病变筛查;P16/Ki-67双染可作为一种潜在的细胞联合筛查工具或有效的患者分流工具;P16INK4α单染具有一定的局限性。

  • 标签: 宫颈肿瘤 高级别鳞状上皮内瘤变 P16/Ki-67双染 P16INK4α单染 高危型人乳头瘤病毒
  • 简介:摘要喉乳头是儿童最常见的呼吸道良性肿瘤,主要临床表现为声嘶、喘鸣和呼吸困难,严重者可出现完全性喉梗阻导致窒息。儿童喉乳头的病原体主要为人乳头病毒(human papilloma virus,HPV),且主要为低危型HPV6、11型,HPV11型感染和发病年龄早更容易导致不良预后。目前认为幼儿HPV感染途径主要为宫内感染、经阴道接触感染,但母体感染HPV并不是终止妊娠和剖宫产指征。手术是目前主要的治疗方式,疫苗接种等辅助治疗日益发挥作用。

  • 标签: 儿童 乳头状瘤 乳头状瘤疫苗 围产期传播
  • 作者: 韦晓宁 龙玉 徐馨宇 陆庆华 王少为
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华老年医学杂志》 2022年第01期
  • 机构:中国医学科学院北京协和医学院研究生院 100730 广西医科大学第一附属医院妇产科,南宁 530021,广西医科大学第一附属医院妇产科,南宁 530021,北京医院妇产科 国家老年医学中心 中国医学科学院老年医学研究院 100730,广西医科大学第一附属医院检验科,南宁 530021,中国医学科学院北京协和医学院研究生院 100730 北京医院妇产科 国家老年医学中心 中国医学科学院老年医学研
  • 简介:摘要目的研究广西汉族和壮族女性宫颈乳头病毒(HPV)感染的构成分布。方法回顾性分析2012年8月至2020年10月在广西医科大学第一附属医院妇产科门诊及住院的女性患者20 736例,分为汉族组16 390例和壮族组4 346例,应用聚合酶链反应(PCR)技术进行HPV 21分型检测,分析该地区不同民族女性宫颈HPV的流行病学特征。结果20 736例中,HPV阳性占27.0%(5 591例),其中汉族组HPV阳性占27.7%(4 536例),壮族组阳性占24.3%(1 055例),二者比较差异有统计学意义(χ2=20.17,P<0.01),且壮族女性感染高峰年龄大于65岁。该地区女性最常见的5种HPV基因型均为HPV 16、52、58、18及53。HPV16、52在阳性女性中的构成比随增龄而升高,HPV6和HPV11的构成比随增龄降低。结论广西地区壮族女性HPV、高危型HPV阳性构成比较汉族女性低;女性中阳性构成比最高的HPV分型为HPV 16、52、58、18及53;基因分型呈增龄性变化。

  • 标签: 人乳头瘤状病毒 人种群 年龄分布
  • 简介:摘要呼吸道乳头(RPS)是一种良性肿瘤,其发病机制尚未明确,临床症状呈多样性,与其发生部位、临床表现、病理学行为关系密切。RPS诊治困难,主要的治疗方法包括手术治疗、药物治疗、免疫治疗等。本文通过对RPS的发生机制、临床表现、治疗及预后进行综述,以提高临床医师对该病的诊治水平。

  • 标签: 呼吸道 乳头状瘤 治疗
  • 简介:摘要目的初步探讨高危型乳头病毒16(human papillomavirus 16,HPV16)E6蛋白促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的潜在免疫调控分子机制。方法构建HPV16 E6蛋白过表达慢病毒并感染C33A细胞,获得C33A-E6稳定细胞系,采用qRT-PCR和Western blot法检测C33A和C33A-E6组细胞内HSP70的表达。放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)处理细胞后不同时间采用qRT-PCR和Western blot法分别检测HSP70 mRNA和蛋白质降解速率。超速离心法提取两组细胞外泌体,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外泌体中HSP70含量。提取C33A和C33A-E6细胞干扰HSP70表达后的外泌体,ELISA检测经外泌体处理的THP-1细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达水平。将外泌体处理的THP-1细胞与C33A细胞共培养,CCK-8法检测C33A细胞增殖。Transwell小室评估C33A细胞侵袭和迁移状态。结果与C33A细胞相比,C33A-E6细胞HSP70 mRNA水平显著增高(P<0.05),但蛋白质水平没有明显变化(P>0.05)。经ActD/CHX处理不同时间的两组细胞中HSP70 mRNA和蛋白质降解速率差异无统计学意义(P>0.05),但C33A-E6组分泌的外泌体中HSP70含量明显增高(P<0.001)。C33A-E6细胞分泌的外泌体可增强THP-1细胞分泌IL-6、TNF-α和IL-10的水平(P<0.001),并且外泌体处理后的THP-1细胞可促进C33A细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001);而干扰C33A-E6细胞中HSP70的表达可显著降低外泌体诱导的THP-1细胞分泌IL-6和IL-10及THP-1细胞对C33A细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用(P<0.001)。结论高危型HPV16 E6蛋白可上调宫颈癌细胞外泌体中HSP70的表达,进而促进巨噬细胞分泌IL-6和IL-10,并介导宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。

  • 标签: HPV16 E6蛋白 HSP70 宫颈癌 巨噬细胞 增殖 侵袭 迁移
  • 简介:摘要目的探讨高危型乳头病毒(HPV)感染类型及载量与子宫颈癌前病变严重程度及病变范围的相关性。方法回顾性分析2016年1月至2018年12月在我院行宫颈锥切及宫颈LEEP手术105例患者临床资料。根据HPV感染亚型分组,比较不同组别低级别鳞状上皮内病变(LSIL)及高级别鳞状上皮内病变(HSIL)点数即子宫颈病变的范围差异,并对HPV载量与子宫颈病变范围的相关性进行分析。结果单一HPV亚型感染患者间,感染HPV16/18型者HSIL、LSIL范围与非HPV16/18型感染者差异有统计学意义(P<0.05)。复合型HPV亚型感染者与单一HPV亚型感染者HSIL、LSIL范围差异无统计学意义(P>0.05)。HSIL的HPV载量与范围呈正相关(r=0.65,P<0.05),LSIL的HPV载量与病变范围呈负相关(r=-0.63,P<0.05)。结论HPV16/18在子宫颈病变发生中起重要作用,HPV载量与子宫颈病变范围有相关性。

  • 标签: 人乳头瘤病毒 病毒载量 子宫颈病变
  • 简介:摘要目的建立一种星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR(real-time reverse transcription-polymerase chain reaction)快速检测方法。方法根据星状病毒ORF1b基因的保守序列设计扩增引物和特异性荧光探针,建立星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR快速检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和稳定性进行评价,同时应用该方法对实际临床样本中的星状病毒进行检测。结果所建立的人星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性和稳定性,灵敏度可达102拷贝/μl,对星状病毒临床样本检测后,检出率达100%。结论本文所建立的人星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR法具有简单快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好的特点,可应用于临床星状病毒的病原检测和流行病学调查。

  • 标签: 人星状病毒 实时荧光定量RT-PCR TaqMan探针
  • 简介:摘要目的分析台州市男男性行为者(MSM)中HIV阴性者和HIV感染者中新型毒品使用与肛管人乳头病毒(HPV)感染的相关性。方法采用横断面调查方法,分别于2016年8月至2017年10月在台州市4个区(县)CDC自愿咨询检测门诊采用方便抽样招募HIV阴性MSM、2016年8月至2019年6月招募台州市随访管理的HIV感染MSM。采用问卷调查收集研究对象社会人口学、性取向和性行为以及新型毒品使用等信息,采集研究对象肛管拭子样本进行HPV检测。采用χ2检验和logistic回归模型分析HIV感染和新型毒品使用与肛管HPV感染的相关性。结果在MSM中,共69例HIV阴性者和345例HIV感染者。HIV阴性者的肛管HPV感染率(27.5%,19/69)低于HIV感染者(66.4%,229/345)(χ2=36.114,P<0.001)。HIV阴性者新型毒品使用率(17.4%,12/69)高于HIV感染者(7.0%,24/345)(χ2=7.886,P=0.005)。在HIV阴性者中,新型毒品使用率与发生同性群交性行为呈正相关(P=0.036);新型毒品使用者和未使用者的肛管HPV感染率分别为50.0%(6/12)和22.8%(13/57)(χ2=3.674,P=0.055);在HIV感染者中,新型毒品使用者和未使用者的肛管HPV感染率分别为70.8%(17/24)和66.0%(212/321)(χ2=0.230,P=0.632)。多因素logistic回归分析结果显示,MSM的HIV感染是肛管HPV感染的正相关因素(OR=5.42,95%CI:2.92~10.06),新型毒品使用与肛管HPV感染无相关性(OR=1.66,95%CI:0.75~3.71)。结论台州市MSM的HIV感染与肛管HPV感染呈正相关。新型毒品使用与高危性行为呈正相关,而与HPV感染关联有待进一步研究。

  • 标签: 人乳头瘤病毒 艾滋病病毒 新型毒品 男男性行为者
  • 简介:摘要目的探讨乳腺导管内乳头(IP)的诊治方法。方法回顾性分析2003年6月至2020年6月间在西北妇女儿童医院行手术治疗并经病理学诊断的1 679例IP患者的临床病理资料。结果乳头溢液是IP最常见的临床症状。根据术后病理结果,将IP患者分为单发组和多发组进行比较,乳头溢液在单发组多见,两组差异有统计学意义(P<0.05)。两组的血性溢液、单孔、单侧乳头溢液差异均无统计学意义(均P>0.05)。与术后病理结果对比,纤维乳管内视镜(FDS)诊断符合率为88.66%。对FDS下病变位置进行了比较,发现单发组在总乳管及Ⅰ~Ⅱ级导管更多见,两组差异有统计学意义(P<0.05)。术后随访单发组未见癌变,多发性组4例癌变。多发组同侧复发率、对侧发生率均高于单发组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血性溢液、单孔溢液、单乳溢液以及病变主要位于总乳管及Ⅰ~Ⅱ级乳管均为IP的常见临床特征;FDS在诊断伴有乳头溢液的IP中具有优势。因为IP有复发和癌变的可能,术后应积极随访。

  • 标签: 乳腺肿瘤 乳头溢液 乳头状瘤 纤维乳管内视镜
  • 简介:摘要目的构建跨膜蛋白(transmembrane protein,TMEM)240慢病毒载体,并在神经母细胞细胞中表达。方法提取神经母细胞细胞SH-SY5Y的RNA,逆转录成cDNA并作为模板,聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)扩增TMEM240的CDS序列,与pLVX-EGFP-N1载体连接,转化、验菌送公司测序,pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒与慢病毒包装质粒共转染293Ta细胞,收取上清,感染SH-SY5Y,嘌呤霉素筛选,获得表达TMEM240的SH-SY5Y细胞,将感染pLVX-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞作为对照组,感染pLVX-TMEM240-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞为实验组。通过共聚焦显微镜、实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,Real-time PCR)和Western blot检测细胞中TMEM240表达。结果测序结果显示pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒构建成功;共聚焦显微镜下,表达TMEM240的细胞内出现点状绿色荧光;Real-time PCR及Western blot结果表明细胞内TMEM240表达。结论成功构建TMEM240慢病毒载体,慢病毒在基因和蛋白水平均引起TMEM240表达升高。

  • 标签: 跨膜蛋白240 慢病毒载体 人神经母细胞瘤细胞
  • 简介:摘要目的了解广州市天河区妇女的人乳头病毒(HPV)感染和宫颈癌前病变分布情况以及两者间的联系。方法对5 618例广州市天河区妇女宫颈脱落细胞进行HPV DNA分型和薄层液基细胞学(TCT)联合检查,年龄(44.42±8.64)岁。结果HPV总体感染率为10.15%(570/5 618),其中高危型HPV(Hr-HPV)、高危合并低危型HPV(Hr-Lr-HPV)、低危型HPV(Lr-HPV)感染率分别为7.58%(426/5 618)、0.84%(47/5 618)、1.73%(97/5 618)。HPV52、58、16、81型感染率相对较高。TCT总体异常率为6.19%(348/5 618),其中意义不明的不典型鳞状细胞(ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)异常率分别为5.09%(286/5 618)、1.09%(61/5 618)、0.02%(1/5 618)。TCT异常者中,HPV感染与未感染占比分别为99.14%(345/348)和0.86%(3/348)(P<0.05)。其中,Hr-HPV、Hr-Lr-HPV、Lr-HPV感染率分别为84.48%(294/348)、12.93%(45/348)、1.73%(6/348)(P<0.05)。ASCUS组中,HPV16/18型感染率低于非HPV16/18感染率,LSIL/HSIL组中HPV16/18感染率高于非HPV16/18感染率(P<0.05)。TCT正常组、ASCUS组、LSIL/HSIL组中,高危复合高危型HPV感染率依次升高(P<0.05)。不同年龄组HPV感染率以及TCT异常率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论广州市天河区户籍妇女HPV感染率及优势型别与省内外地区基本一致。TCT异常主要与HPV感染有关,其中以Hr-HPV感染为主。从ASCUS异常到LSIL/HSIL异常,HPV16/18型感染率显著性上升。此外,高危复合高危型HPV感染与宫颈鳞状上皮细胞病变阶段有关。60岁以上年龄组HPV感染率及TCT异常率最高。

  • 标签: HPV-DNA分型 薄层液基细胞学 HPV混合感染