简介：无

简介：摘要目的探讨微小RNA-205(miR-205)在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法采用实验研究方法。收集于2019年10月—2020年1月在北部战区总医院就诊的符合入选标准的6例增生性瘢痕患者[男1例、女5例，年龄(36±7)岁]的增生性瘢痕组织及同时期于同单位就诊的6例符合入选标准的外伤患者[男2例、女4例，年龄(38±9)岁]行皮瓣移植手术后剩余的正常皮肤组织，采用实时荧光定量反转录PCR法检测miR-205和血小板反应蛋白1(TSP-1)的mRNA表达情况。取增生性瘢痕组织，培养第3～5代成纤维细胞(Fb)，用于后续实验。取2批增生性瘢痕Fb，分成TSP-1＋miR-205对照组、TSP-1＋miR-205模拟物组和TSP-1突变＋miR-205对照组、TSP-1突变＋miR-205模拟物组，分别转染相应的序列。转染后48 h，采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测荧光素酶和肾荧光素酶的表达，并计算两者比值，以此表示TSP-1的活性。取2批增生性瘢痕Fb，分为miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205抑制物组及miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205模拟物＋TSP-1组，分别转染相应的序列，转染后0(即刻)、12、24、36、48 h，用酶标仪检测细胞活力。取2批增生性瘢痕Fb，同细胞活力检测实验进行分组及处理，转染后24 h，行Hoechst 33258染色，观察细胞核皱缩情况，以此反映细胞凋亡情况。细胞实验中样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、t检验及χ2检验。结果增生性瘢痕组织中miR-205的mRNA表达量为0.54±0.05，明显低于正常皮肤组织中的1.26±0.07(t＝8.213, P<0.01)。增生性瘢痕组织中TSP-1的mRNA表达量为1.46±0.07，明显高于正常皮肤组织中的0.68±0.11(t＝6.031，P<0.01)。转染后48 h，TSP-1＋miR-205模拟物组细胞表示TSP-1活性的荧光素酶/肾荧光素酶比值为0.532±0.028，明显低于TSP-1＋miR-205对照组的0.998±0.012(t＝26.500，P<0.01)；TSP-1突变＋miR-205模拟物组细胞荧光素酶/肾荧光素酶比值为0.963±0.012，与TSP-1突变＋miR-205对照组的0.976±0.010相近(t＝0.816，P>0.05)。转染后12、24、36、48 h，miR-205模拟物组细胞活力明显低于miR-205对照组(t＝6.169、12.670、27.130、12.670，P<0.05或P<0.01)；转染后0、12、24、36、48 h，miR-205抑制物组细胞活力明显高于miR-205对照组(t＝6.169、7.221、7.787、7.835、13.030，P<0.05或P<0.01)。转染后12、24、36、48 h，miR-205模拟物组细胞活力明显低于miR-205对照组和miR-205模拟物＋TSP-1组(t＝8.118、26.970、39.550、42.490，14.570、12.240、36.830、45.220，P<0.05或P<0.01)。转染后24 h，与miR-205对照组相比，miR-205模拟物组细胞凋亡增加，miR-205抑制物组细胞凋亡减少。转染后24 h，与miR-205模拟物组相比，miR-205对照组和miR-205模拟物＋TSP-1组细胞凋亡减少。结论miR-205可以通过抑制TSP-1的表达，抑制人增生性瘢痕Fb的增殖，促进Fb的凋亡，可能成为增生性瘢痕潜在的治疗靶点。

简介：摘要目的探讨微小RNA-627（miR-627）在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法采用实验研究方法。收集2019年10月—2020年1月于北部战区总医院就诊的符合入选标准的6例增生性瘢痕患者［男2例、女4例，年龄（34±11）岁］的增生性瘢痕组织、同期于同单位就诊的6例符合入选标准的外伤患者［男3例、女3例，年龄（35±13）岁］行皮瓣移植手术后剩余的正常皮肤组织，采用实时荧光定量反转录PCR法检测miR-627的mRNA表达。取增生性瘢痕组织，培养第3~5代成纤维细胞（Fb），经鉴定后用于后续实验。取增生性瘢痕Fb，分为miR-627阴性对照组、miR-627模拟物组和miR-627抑制物组，分别转染对应的序列，转染后0（即刻）、12、24、36、48 h，用噻唑蓝法检测细胞活力；转染后24 h，用流式细胞术检测细胞凋亡情况；转染后24 h，用蛋白质印迹法检测胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）、Ⅰ型胶原和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达水平。取2批增生性瘢痕Fb，一批分为IGF-Ⅰ野生型+miR-627阴性对照组、IGF-Ⅰ野生型+miR-627模拟物组，另一批分为IGF-Ⅰ突变型+miR-627阴性对照组、IGF-Ⅰ突变型+miR-627模拟物组，分别转染对应的序列，转染后48 h，采用荧光素酶报告基因检测试剂盒分别检测荧光素酶和肾荧光素酶的表达，并计算两者比值，反映IGF-Ⅰ的活性。取增生性瘢痕Fb，分为miR-627阴性对照组、单纯miR-627模拟物组和miR-627模拟物+IGF-Ⅰ组，分别转染对应的序列，转染后24 h，采用蛋白质印迹法检测IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA蛋白表达水平。细胞实验中样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、独立样本t检验及χ2检验。结果增生性瘢痕组织中miR-627的mRNA表达量为0.47±0.06，显著低于正常皮肤组织中的1.12±0.23（t=15.090，P<0.01）。转染后12、24、36、48 h，miR-627模拟物组细胞活力明显低于miR-627阴性对照组（t=9.918、34.370、13.580、61.550，P<0.05或P<0.01），miR-627抑制物组细胞活力明显高于miR-627阴性对照组（t=4.722、8.616、13.330、14.000，P<0.05或P<0.01）。转染后24 h，与miR-627阴性对照组的细胞凋亡率（8.42±0.47）%相比，miR-627模拟物组的（10.89±0.35）%显著升高（t=7.301，P<0.01），miR-627抑制物组的（5.00±0.22）%显著下降（t=11.510，P<0.01）。转染后24 h，与miR-627阴性对照组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA的蛋白表达相比，miR-627模拟物组明显下降（t=25.470、5.282、7.415，P<0.01），miR-627抑制物组明显升高（t=15.930、8.857、9.763，P<0.01）。转染后48 h，IGF-Ⅰ野生型+miR-627模拟物组细胞IGF-Ⅰ的荧光素酶/肾荧光素酶比值为0.463±0.061，明显低于IGF-Ⅰ野生型+miR-627阴性对照组的0.999±0.011（t=16.852， P<0.01）；IGF-Ⅰ突变型+miR-627模拟物组细胞IGF-Ⅰ的荧光素酶/肾荧光素酶比值为0.934±0.021，与IGF-Ⅰ突变型+miR-627阴性对照组的0.930±0.023相近（t=1.959，P>0.05）。转染后24 h，单纯miR-627模拟物组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA的蛋白表达量1.623±0.070、1.363±0.042、1.617±0.025均较miR-627阴性对照组的2.723±0.045、2.147±0.067、2.533±0.055明显降低（t=22.831、7.280、26.220，P<0.01），miR-627模拟物+IGF-Ⅰ组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原、α-SMA的蛋白表达量2.477±0.102、1.760±0.046、2.387±0.049均较单纯miR-627模拟物组明显升高（t=3.830、8.286、3.436，P<0.05或P<0.01）。结论人增生性瘢痕中miR-627表达下调；miR-627可通过靶向抑制IGF-Ⅰ的表达从而抑制人增生性瘢痕Fb的增殖，促进Fb的凋亡。

简介：摘要目的观察微小RNA(miRNA，miR)-193a-5p靶向调控Ras相关结构域家族蛋白2(RASSF2)表达抑制炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素(IL)-1β水平及其对心力衰竭模型大鼠心脏功能的影响。方法取60只12～16周龄的清洁级Wistar大鼠(30只雄鼠，30只雌鼠)。2.5%戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉大鼠，暴露大鼠心脏后，随机选择15只大鼠进行缝合(对照组)，15只注射磷酸盐缓冲液(PBS)为PBS组，15只注射空白AAV质粒载体为AAV组，15只注射AAV-miR-193a-5p为miR-193a-5p组。PBS组、AAV组和miR-193a-5p组的大鼠冠状动脉左前降支行冠状动脉结扎构建心力衰竭模型。术后4周，彩色多普勒超声心动图检测舒张期和收缩期左心室后壁厚度(LVPWT)、室间隔厚度(IVST)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVESd)和左心室射血分数(LVEF)。应用双荧光素酶报告基因实验探索miR-193a-5p是否与RASSF2的3’非翻译区相互作用。结果术后4周，与对照组比较(4.79±0.33)，PBS组(1.57±0.16)和AAV组(1.66±0.18) miR-193a-5p表达降低，而miR-193a-5p组(9.02±0.76) miR-193a-5p表达增高(P<0.05)。与对照组[IVST：(1.88±0.15) mm；LVPWT：(1.93±0.22) mm；LVEDd：(5.44±0.79) mm；LVEF：(52.72±4.98)%]和miR-193a-5p组[IVST：(1.97±0.16) mm；LVPWT：(2.09±0.21) mm；LVEDd：(5.98±0.81) mm；LVEF：(48.83±4.17)%]比较，PBS组[IVST：(2.69±0.28) mm；LVPWT：(2.74±0.36) mm；LVEDd：(6.87±0.84) mm；LVEF：(37.45±3.55)%]和AAV组[IVST：(2.63±0.25) mm；LVPWT：(2.68±0.34) mm；LVEDd：(6.93±0.90) mm；LVEF：(36.10±3.42)%]左心室IVST、LVPWT和LVEDd显著增高，LVEF显著降低(P<0.05)，对照组与miR-193a-5p组间差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组[TNF-α：(2.01±0.18) μg/L；IL-1β：(8.76±1.48) ng/L；RASSF2：(1.23±0.21)]和miR-193a-5p组[TNF-α：(2.23±0.21) μg/L；IL-1β：(8.90±1.54) ng/L；RASSF2：(1.30±0.25)]比较，PBS组[TNF-α：(5.67±0.52) μg/L；IL-1β：(11.34±2.55) ng/L；RASSF2：(7.44±0.89)]和AAV组[TNF-α：(5.88±0.58) μg/L；IL-1β：(10.99±2.49) ng/L；RASSF2：(7.89±0.97)]血清TNF-α、IL-1β和RASSF2显著增高(P<0.05)，而对照组与miR-193a-5p组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过上调心力衰竭模型大鼠miR-193a-5p表达可抑制RASSF2蛋白表达，并显著抑制炎性因子TNF-α与IL-1β水平，进而提高心力衰竭模型大鼠心脏功能。

简介：摘要目的探讨食管癌患者血清微小RNA（miR）-195表达及临床意义。方法回顾性分析2015年4月至2019年4月在北京怀柔医院105例食管癌患者的临床资料。采用实时定量荧光聚合酶链反应法检测血清miR-195相对表达量，并与同期90例健康体检者比较。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，分析血清miR-195相对表达量诊断食管癌的效能；生存分析采用Kaplan-Meier法，比较采用log-rank检验；采用多因素Cox分析影响食管癌患者预后的独立危险因素。结果食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康体检者（4.39 ± 1.86比7.17 ± 2.37），差异有统计学意义（t = 9.155，P<0.05）。以食管癌患者血清miR-195相对表达量平均值作为阈值，>4.39为高表达，50例；≤ 4.39为低表达，55例。血清miR-195相对表达量与肿瘤直径、TNM分期、浸润程度和淋巴结转移有关（P<0.05），而与性别、年龄、病理类型和分化程度无关（P>0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-195相对表达量诊断食管癌的曲线下面积为0.819（95% CI 0.758~0.879，Z = 10.265，P<0.05），约登指数0.539，截断值取6.03时灵敏度为82.86%，特异度为71.11%。血清miR-195低表达患者中位生存时间明显短于高表达患者（25.7个月比36.6个月），5年总生存率明显低于高表达患者（18.2%比38.0%），差异有统计学意义（P<0.05）。多因素Cox分析结果显示，miR-195和肿瘤直径是影响食管癌患者预后的独立危险因素（HR = 0.377和0.418，95% CI 1.276~5.599和1.478~7.608，P<0.01）。结论食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康人群，且miR-195表达越低，患者预后越差，miR-195可以作为食管癌患者早期诊断和预后评估的指标之一。

简介：与其他品牌手机相比CECT手机总是给人一种比较低调和深沉的感觉，在默默无闻中为我们带来一个又一个惊喜。CECTT590是CECT公司的最新力作，虽然它没有华丽的外表，没有令人称奇的高端摄像头。但它简单而实用的功能却给我们带来一种别样之美。

简介：

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胸腺生成素反义RNA 1(TMPO-AS1)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法2016年6月至2019年12月，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测20例食管癌组织和癌旁组织中lncRNA TMPO-AS1和微小RNA(miR)-501-3p的水平，食管癌Eca109细胞分为lncRNA TMPO-AS1干扰组(转染si-NC和si-TMPO-AS1)；miR-501-3p过表达组(转染miR-NC和miR-501-3p)；lncRNA TMPO-AS1过表达组(转染pcDNA和pcDNA-TMPO-AS1)；lncRNA TMPO-AS1和miR-501-3p共抑制组(转染si-TMPO-AS1＋anti-miR-NC和si-TMPO-AS1＋anti-miR-501-3p)。噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和Transwell实验分别检测食管癌Eca109细胞增殖、凋亡率、细胞迁移和侵袭能力，蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白水平，双荧光素酶报告系统验证lncRNA TMPO-AS1与miR-501-3p的调控关系。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差进行分析。结果食管癌组织组中的lncRNA TMPO-AS1水平(2.64±0.26)高于癌旁组织(1.00±0.09，t＝26.657，P<0.05)，miR-501-3p水平(0.44±0.04)低于癌旁组织(1.00±0.07，t＝31.063，P<0.05)；干扰lncRNA TMPO-AS1的Eca109细胞24 h增殖(0.36±0.03)低于si-NC组(0.39±0.03，t＝2.121，P<0.05)，48 h增殖(0.45±0.04)低于si-NC组(0.75±0.07，t＝11.163，P<0.05)，72 h增殖(0.57±0.05)低于si-NC组(1.16±0.09，t＝17.191，P<0.05)，迁移细胞数[(54.14±5.65)个]低于si-NC组[(113.02±9.87)个，t＝15.531，P<0.05]，侵袭细胞数[(47.69±5.01)个]低于si-NC组[(96.32±9.88)个，t＝13.169，P<0.05]，细胞凋亡率[(22.15±2.22)%高于si-NC组[(6.98±0.69)%，t＝19.576，P<0.05]；过表达miR-501-3p的Eca109细胞48 h增殖(0.51±0.05)低于miR-NC组(0.77±0.07，t＝9.067，P<0.05)，72 h增殖(0.65±0.06)低于miR-NC组(1.15±0.09，t＝13.867，P<0.05)，迁移细胞数[(61.23±6.33)个]低于miR-NC组[(115.25±9.25)个，t＝14.458，P<0.05]，侵袭细胞数[(53.14±5.33)]低于miR-NC组[(98.32±8.47)个，t＝13.543，P<0.05]，细胞凋亡[(19.58±1.74)%]高于miR-NC组[(7.23±0.77)%，t＝19.471，P<0.05]，差异均有统计学意义。结论lncRNA TMPO-AS1通过靶向miR-501-3p促进食管癌细胞的恶性生物学行为，可被视为食管癌患者的潜在治疗靶标。

简介：摘要目的探索晚期膀胱癌发展过程中与差预后相关的RNA，构建一个长链非编码RNA-微小RNA-mRNA(lncRNA-miRNA-mRNA)网络并加以实验验证，以研究其在晚期膀胱癌发展中的分子调控作用。方法收集肿瘤基因组图谱(TCGA)和NCBI-GEO数据库431例和492例膀胱癌患者组织样本，Ⅲ、Ⅳ期、高级别、高级别≥病理亚分期2期(pT2期)为晚期膀胱癌，Ⅱ、Ⅰ期、低级别为早期膀胱癌；进行差异表达分析、权重基因共表达网络分析、功能富集分析、生存分析、miRNA靶向预测和Pearson相关分析。利用可视化软件构建网络。统计学方法使用t检验、Fisher精确检验、Pearson相关分析、Log-Rank检验比较组间差异，BH法计算错误发现率校正P值，以FDR<0.05、P<0.05为差异统计学意义。随后，收集22例膀胱癌患者组织样本，高级别肌层浸润性≥T2期、高级别或浸润性TaT1期为晚期膀胱癌，低级别非浸润性TaT1为早期膀胱癌；进行实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、免疫印迹法和免疫组织化学实验。组间比较采用t检验。结果获得相似表达模式的8个长链非编码RNA、28个mRNA和8个微小RNA，并以此构建出核心lncRNA-miRNA-mRNA调控网络，该网络与晚期膀胱癌的侵袭、进展、转移及差预后相关。晚期膀胱癌组织Ⅵ型胶原α1(COL6A1)、Ⅱ型钙粘附蛋白(CDH11)、金属蛋白酶和血小板反应蛋白模体Ⅰ型(ADAMTS12)、长链非编码RNA-01705(LINC01705)、长链非编码RNA-01929(LINC01929 RNA)相对内参表达倍数值高于早期膀胱癌组织(-1.213比-4.212，t＝4.170，P<0.01；-10.75比-14.64，t＝4.602，P<0.01；-7.594比-11.93，t＝5.152，P<0.01；-10.18比16.55，t＝4.493，P<0.01；-11.62比-15.08，t＝2.869，P<0.05)，差异均有统计学意义。晚期膀胱癌组织COL6A1、CDH11、ADAMTS12蛋白平均吸光度值高于早期膀胱癌组织(0.213 8比0.090 9，t＝2.302，P<0.05；0.183 9比0.078 9，t＝5.992，P<0.01；0.279 1比0.147 8，t＝4.527，P<0.01)，差异均有统计学意义。膀胱癌组织人-微小RNA-6875-5p(hsa-miR-6875-5p)、人-微小RNA-6784-5p(hsa-miR-6784-5p)、人-微小RNA-128-2(hsa-miR-128-2) RNA相对内参表达倍数值低于正常组织(-15.78比-12.41，t＝4.995，P<0.01；-15.53比-12.68，t＝3.226，P<0.05；-13.79比-11.43，t＝3.400，P<0.01)，差异均有统计学意义。膀胱癌细胞系T24中COL6A1蛋白相对内参灰度比值低于正常膀胱上皮细胞系SV-HUV-1(0.677比1.000，t＝7.584，P<0.01)，差异有统计学意义；膀胱癌细胞系T24、EJ CDH11蛋白相对内参灰度比值低于正常膀胱上皮细胞系SV-HUV-1(0.656比1.000，t＝6.056，P<0.01)，差异有统计学意义。结论LncRNA-miRNA-mRNA网络在晚期膀胱癌的发展中起关键作用。

简介：摘要骨关节炎是一种以关节软骨退变为主的退行性疾病，但其具体发病机制目前尚不清楚。微小RNA-140(miR-140)是一种在软骨细胞中特异性高表达的microRNA，为软骨细胞调控信号网络中重要的一员，参与了软骨细胞形成、增殖、分化、衰老及凋亡的调控作用。然而，由于miR-140作用的复杂性，其参与骨关节炎(OA)软骨退变的具体分子机制目前仍不明确。本文针对miR-140在软骨形成与稳态维持、软骨退变及OA早期诊断方面的作用进行综述。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-451在胆管癌组织中表达水平及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取福建医科大学附属闽东医院2016年1月至2020年7月收集的179例胆管癌及其癌旁组织作为研究对象，采用转录组学分析食管癌和癌旁组织中差异表达miRNA，选择差异最为显著miR-451作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术分析癌旁组织和胆管癌组织中miR-451表达水平。回顾患者临床病理特征并分组，分析不同病理特征患者胆管癌组织miR-451表达水平。以miR-451平均数作为阈值，将胆管癌患者分为低表达组和高表达组，分析两组患者中位生存时间和生存率。采用免疫组织化学分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平，并分析miR-451与PCNA表达水平的关系。计量数据比较采用t检验，相关性采用Pearson法。结果转录组学和荧光定量PCR分析显示癌旁组织中miR-451表达水平(4.18±0.21)明显低于胆管癌组织中miR-451表达水平(1.32±0.16)，差异有统计学意义(t＝3.011，P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ期患者胆囊组织miR-451表达水平(1.37±0.20)明显高于Ⅲ~Ⅳ期患者(0.73±0.15)，差异有统计学意义(t＝2.801，P<0.05)。中高分化患者胆管癌组织miR-451表达水平(1.57±0.18)明显高于低分化患者(0.85±0.19)，差异有统计学意义(t＝2.981，P<0.05)。淋巴结未转移患者胆管癌组织miR-451表达水平(1.38±0.22)明显高于淋巴结转移患者(0.71±0.20)，差异有统计学意义(t＝4.006，P<0.05)。miR-451高表达患者生存时间(35个月)明显高于miR-451高表达患者(14个月)，差异有统计学意义(Log-Rank＝4.409，P<0.05)。miR-451高表达患者术后3年生存率[59.21%(45/76)]高于低表达组患者术后3年生存率[24.27%(25/103)]，差异有统计学意义(Log-Rank＝5.619，P<0.05)。miR-451高表达患者胆管癌组织中PCNA阳性率[(61.48±7.18)%]明显低于miR-451低表达患者[(89.43±10.21)%]，差异有统计学意义(t＝4.019，P<0.05)。Logistic回归分析显示，miR-451是影响胆管癌患者预后的独立因素[比值比(OR)＝1.309，P<0.05]。结论miR-451在胆管癌组织中呈低表达，与患者临床病理特征和预后明显相关。

简介：摘要骨折合并创伤性脑损伤(TBI)是常见的创伤疾病，微小RNA(miRNA，miR)在创伤性脑损伤对骨折愈合影响过程中发挥重要的作用。大量研究表明，脑损伤会加速骨折愈合，并且miRNA在这过程中扮演着重要角色。miRNA通过各种机制来影响成骨细胞和破骨细胞的生成，来调节骨折的愈合。目前，以miRNA作为靶向药物用来骨折愈合的治疗正处于发展的初级阶段，是一种很有前景的骨折愈合治疗方法。

简介：摘要目的检测微小RNA(miR)-296在三阴性乳腺癌(TNBC)组织及细胞株中的表达，探讨miR-296对TNBC细胞增殖，凋亡的影响及其机制。方法TNBC细胞株人乳腺癌细胞-231(MDA-MB-231)，人乳腺癌细胞-453(MDA-MB-453)及人正常乳腺上皮细胞(MCF10A)购自中国科学院上海细胞生物学研究所，miR-296的过表达及干扰质粒分别转染至细胞株中，细胞分组为MDA-MB-231、MDA-MB-231-mimics、MDA-MB-231-anti-sh296及MDA-MB-453、MDA-MB-453-mimics、MDA-MB-453-anti-sh296；实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-296在各组细胞中的相对表达量；使用LipofectamineTM 2000脂质体转染miR-296至细胞中，Real-time PCR证实转染成功后；通过细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测对细胞生存率的影响；通过集落形成实验检测细胞的增殖能力；流式细胞实验检测miR-296对细胞凋亡的影响。应用SPSS 16.0统计软件分析。结果与癌旁组织比较，miR-296在TNBC组织中的含量明显降低(0.48±0.23比1.00±0.25，t＝10.89，P<0.01)。miR-296在TNBC细胞株MDA-MB-231，MDA-MB-453中的表达明显低于正常乳腺上皮细胞MCF10A(0.19±0.08比1.00±0.26，t＝8.36，P<0.01；0.46±0.19比1.00±0.26，t＝4.68, P<0.01)；与对照组比较，过表达miR-296后MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-mimics细胞生存率低于转染前[(65.81±10.49)%比(99.39±22.58)%，t＝3.82，P<0.01]，[(73.17±11.81)%比(100.13±19.35)%，t＝3.36，P<0.01]；而给予干扰miR-296后细胞生存率较转染前升高；过表达miR-296后，细胞MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-mimics的克隆相对值明显低于对照组(0.23±0.10比0.99±0.23，t＝8.12, P<0.01)，(0.43±0.16比1.01±0.20，t＝6.44, P<0.01)；而干扰miR-296后的克隆相对值明显高于对照组；过表达miR-296后，MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-mimics细胞的凋亡百分数高于对照组[(25.76±2.83)%比(6.73±1.09)%，t＝17.72，P<0.01]，[(21.16±2.92)%比(5.56±0.87)%，t＝14.47，P<0.01]，干扰miR-296后细胞的凋亡百分数下降。过表达miR-296后，细胞MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-的CX3趋化因子受体1(CX3CR1)的表达量低于对照组(0.36±0.14比1.00±0.20，t＝7.45，P<0.01)，0.43±0.10比1.00±0.16，t＝8.48, P<0.01)；而干扰miR-296后，细胞MDA-MB-231-sh-296和MDA-MB-453-sh-296的CX3CR1的表达量高于对照组(5.91±1.57比1.00±0.20，t＝8.79，P<0.01)，(4.89±1.08比1.00±0.16，t＝10.03，P<0.01)。结论抑制miR-296的表达，可以通过靶向作用提高TNBC细胞的生存率，降低凋亡百分数，提示miR-296可能通过CX3CR1在TNBC中发挥抑癌作用。

简介：摘要目的探讨肝癌患者血清微小RNA（miR）-92的表达及与不良预后的关系。方法回顾性分析2015年5月至2018年5月浙江省湖州市第一人民医院和浙江省湖州市中心医院收治的70例肝癌患者的临床资料，采用实时定量聚合酶链反应法检测miR-92表达水平，并与80例健康体检者比较。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，评价血清miR-92诊断肝癌和早期（Ⅰ~Ⅱ期）肝癌的效能；分析血清miR-92表达水平与临床病理特征的关系；多因素Cox回归模型分析影响肝癌患者预后的独立危险因素。结果肝癌患者血清miR-92表达水平明显高于健康体检者（4.10 ± 1.74比1.88 ± 0.78），差异有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-92诊断肝癌的曲线下面积（AUC）为0.874，最佳截断值为2.43，灵敏度为82.86%，特异度为86.25%；血清miR-92诊断早期肝癌的AUC为0.755，最佳截断值为2.38，灵敏度为68.57%，特异度为84.42%。血清miR-92表达水平与TNM分期和淋巴结转移相关（P<0.01），而与性别、年龄、肿瘤直径、肝炎病史、肝硬化、分化程度及门静脉癌栓无关（P>0.05）。血清miR-92高表达肝癌患者5年总生存率明显低于血清miR-92低表达肝癌患者（17.1%比31.5%），差异有统计学意义（χ2 = 5.561，P<0.05）。多因素Cox回归分析结果显示，miR-92是影响肝癌患者预后的独立危险因素（HR = 0.282，95% CI 1.179~3.562，P<0.05）。结论肝癌患者血清miR-92表达水平明显升高，在病情进展中发挥重要作用；血清miR-92可作为肝癌早期诊断、预后评估的指标。

简介：摘要目的探究微小RNA(miR)-937在肝细胞癌组织及癌旁组织的表达，及其表达水平与肝癌患者生存期、临床病理特征与预后的关系。方法选取2017年3月至2019年3月间146例肝癌及其癌旁组织(定义为距离癌灶边缘>2 cm)作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测肝癌组织及癌旁组织中微小miR-937的表达水平；并探究和分析miR-937表达水平与肝癌患者的生存时间、性别、年龄(≥55岁或≤55岁)、甲胎蛋白(AFP，>50 ng/ml或≤50 ng/ml)、组织分化程度、临床分期(Ⅰ~Ⅱ期或Ⅲ~Ⅳ期)的相关性；采用多因素COX分析探究miR-937表达水平与肝癌患者的预后关系。组间比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-937表达水平低于肝癌组织中miR-937表达水平(1.04±0.13比2.65±0.49)，差异有统计学意义(t＝3.159，P<0.05)。临床分期Ⅰ~Ⅱ期患者miR-937表达水平低于Ⅲ~Ⅳ期患者miR-937表达水平(2.43±0.45比2.79±0.34)，差异有统计学意义(t＝2.873，P<0.05)。miR-937高表达人群的生存时间低于miR-937低表达人群的生存时间(18.7个月比28.6个月)，差异有统计学意义(log-rank＝4.385，P<0.05)。同时，采用COX回归分析表明肝癌组织中miR-937表达水平能够预测肝癌患者的3年OS率(HR＝2.856，P<0.05)。多因素COX分析表明肝癌患者的临床分期(Ⅰ~Ⅱ期比Ⅲ~Ⅳ期)是影响肝癌组织中miR-937表达水平危险因素(P<0.05)，miR-937表达水平变化是影响肝癌患者预后的独立影响因素。结论miR-937表达水平在肝癌组织中显著上调，且与患者的临床分期和生存时间明显相关。

简介：摘要目的探讨结肠癌组织中以及癌细胞株中的微小RNA(miR)-146a的表达并分析与病理特征之间的关系。方法收集整理2017年10月至2018年11月广东医科大学附属医院42例结肠癌组织与正常结肠组织(距癌组织边缘>5 cm)，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-146a在结肠癌组织及正常组织中的表达，同时分析其与病理特征之间的关系，总结抑制miR-146a表达对结肠癌细胞凋亡、增殖等影响。采用方差齐性检验和χ2检验进行统计学分析。结果通过检测发现42例结肠癌组织miR-146a相对表达量显著高于正常癌旁组织，低分化癌细胞lovo中miR-146a表达量均高于中、高分化癌细胞(F＝11.80，P<0.01)；miR-146a的高表达与患者结肠癌分化程度差、肿瘤过大、淋巴结远处转移等有关(t＝10.23、6.78、8.55，P<0.01)。通过抑制miR-146a表达可以有效预防癌细胞增殖及克隆形成。结论检测miR-146a在结肠癌组织的高度表达可有助于预测淋巴转移、肿瘤病变程度。

简介：摘要微小RNA(microRNA，miRNA)是一类大小在21~25个核苷酸的单链内源性非编码RNA，通过转录后的抑制广泛参与不同细胞生物学过程。MiR-146a是miRNA家族中成员之一，参与细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程，同时也在恶性肿瘤和炎症疾病的进展中发挥调节作用。进一步研究发现，miR-146a在不同类型的免疫细胞及自身免疫性疾病(autoimmune disease，AID)中存在显著的表达差异，上调或下调miR-146a的表达量对于免疫细胞功能有着极为重要的影响，提示miR-146a很可能成为AID治疗的潜在靶点。文章就miR-146a在免疫细胞中的表达、调控及相关机制进行总结和概述，以期为探索AID的相关诊治提供思路。

简介：摘要目的探讨骨保护素(OPG)/细胞核因子-κB受体活化因子(RANK)/细胞核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路介导的自噬及微小RNA(miRNA，miR)-217的靶向调控在骨巨细胞瘤(GCT)中作用。方法在建立肿瘤异种移植模型和体外培养GCT0404细胞的基础上，分为空白对照组，神经钙黏蛋白(N-cadherin)组(miR-217类似物组)，转染miR-217组。评估各组骨巨细胞瘤的活性、增殖及迁移水平；检测miR-217、OPG、RANK、RANKL、自噬相关蛋白5(ATG5)、自噬相关蛋白7(ATG7)、Beclin-1和微管相关蛋白轻链3(LC3)在骨巨细胞瘤细胞中的mRNA和蛋白表达变化；多组间均数比较采用单因素方差分析(ANOVA)，组间比较采用多重极差最小显著性差异(LSD)。结果(1)miR-217在肿瘤异种移植模型和体外培养GCT0404细胞的调控都显著抑制GCT细胞的增殖和肿瘤细胞的发生[对照组吸光度(A)值为0.620±0.019，inhibitor NC组为0.640±0.019，miR-217 inhibitor组为0.950±0.030，inhibitorNC组和对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，而miR-217 inhibitor组与inhibitor NC组比较，差异有统计学意义(F＝128.600，P<0.01)]。(2)miR-217抑制GCT细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性，并抑制OPG/RANKL/RANK信号通路相关因子及自噬相关蛋白表达(OCN 1.41±0.06，OPG 1.41±0.04，RANKL 0.54±0.01，ATG 50.65±0.12，ATG 70.67±0.03，Beclin-1 0.56±0.10，LC3 0.83±0.04，F＝265.100，P<0.01)。结论miR-217可能通过抑制OPG/RANKL/RANK信号通路相关因子表达来抑制GCT自噬，从而抑制GCT的发生。

简介：目的观察微小RNA(microRNA,miR)-142-3p对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌肥厚中线粒体功能的影响。方法我们使用Sprague-Dawley(SD)大鼠的乳鼠心肌细胞,细胞培养后分成4组:空白组;AngII组;miRnc+AngII组;miR-142-3pmimic+AngII组。分别往细胞中转染相同浓度的miR-142-3p和miRnc质粒6h,实时定量聚合酶链反应(real-timepolymerasechainreaction,rt-PCR)检测实验组miR-142-3pmRNA表达增多,提示细胞质粒转染成功,再用10-6mol/L浓度的AngII诱导细胞48h,使用线粒体Mito-RedTracker处理细胞30min,共聚焦显微镜观察细胞中线粒体密度的变化;使用流式细胞仪检测线粒体膜电位变化。结果与空白组相比,AngII组的线粒体膜电位减低(n=3,P<0.01);与AngⅡ+miRnc组相比,AngⅡ+miR-142-3p组的线粒体膜电位增加(n=3,P<0.01)。与空白组相比,AngⅡ组的线粒体荧光数量减低(n=3,P<0.01);与AngⅡ+miRnc组相比,AngⅡ+miR-142-3p组的线粒体荧光数量增加(n=3,P<0.01)。结论在AngⅡ诱导心肌肥大过程中miR-142-3p对心肌线粒体具有保护作用。

简介：摘要目的探讨微小RNA-128(miR-128)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响和机制。方法生物信息学结合双荧光素酶报告基因分析miR-128下游靶基因。肝癌细胞MHCC97H分为miR-128过表达组和阴性对照组，分别感染miR-128和阴性对照序列慢病毒。miR-128过表达稳定细胞系再次分为miR-128＋空质粒组和miR-128＋高尔基体蛋白73(GP73)组，感染包装对照和GP73基因的腺相关病毒。活细胞计数检测试剂盒检测各组细胞增殖，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡并计算凋亡指数。6～8周Balb/c裸鼠30只随机分为过表达组和对照组，各15只，分别接种miR-128过表达组和阴性对照组肝癌细胞，随后测量肿瘤体积。结果生物信息学和双荧光素酶报告基因显示GP73是miR-128靶基因。与阴性对照组比较，miR-128过表达组增殖能力明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-128＋空质粒组比较，miR-128＋GP73组增殖能力提高，差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较，miR-128过表达组凋亡指数增加，差异有统计学意义(P<0.05。与miR-128＋空质粒组比较，miR-128＋ GP73组凋亡指数降低，差异有统计学意义(P<0.05)。裸鼠接种肿瘤细胞第5周时，过表达组肿瘤体积为(1 209±108)mm3，低于对照组(1 985±298)mm3，差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-128抑制肝癌细胞增殖，促进凋亡。miR-128通过靶向调节GP73基因影响肝癌细胞增殖和凋亡。miR-128/GP73为临床肝癌治疗靶点提供新参考。