简介：摘要目的探讨2010—2017年中国胆囊癌临床流行病学特征、诊断、治疗与预后情况。方法采用单病种回顾性登记队列研究方法。基于“真实世界研究”理念，收集2010年1月至2017年12月中国胆囊癌研究小组（CRGGC）建立的中国胆囊癌多中心回顾性临床资料数据库中42家医院收治的6 159例胆囊癌患者的临床病理资料。观察指标：（1）病例来源情况。（2）年龄与性别分布情况。（3）诊断情况。（4）外科治疗与预后情况。（5）综合治疗与预后情况。随访数据由CRGGC对各协作中心的临床随访数据进行收集整理，主要结局指标为手术治疗患者手术之日或未手术患者确诊之日起，至结局事件发生或随访截至时间的总体生存时间。正态分布的计量资料以x±s表示，组间比较采用t检验；偏态分布的计量资料以M（Q1，Q3）或M（范围）表示，组间比较采用U检验。计数资料以绝对数和（或）百分比表示，组间比较采用χ²检验。单因素分析采用强迫引入Logistic回归模型，将P<0.1的因素引入多因素分析。多因素分析采用逐步后退Logistic回归模型。采用寿命表法计算生存率，采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，采用Log-rank检验进行生存分析。结果（1）病例来源情况：42家医院中，三级甲等医院35家，三级乙等医院7家；胆囊癌收治高流量医院16家，非高流量医院26家。42家医院地域分布：中部地区9家，东北地区5家，东部地区22家，西部地区6家。6 159例患者地域分布：2 154例（34.973%）来自中部地区，705例（11.447%）来自东北地区，1 969例（31.969%）来自东部地区，1 331例（21.611%）来自西部地区。6 159例患者总体院均诊断与治疗数为（18.3±4.5）例/年；其中4 974例（80.760%）来源于高流量医院，院均诊断与治疗患者数为（38.8±8.9）例/年；1 185例（19.240%）来源于非高流量医院，院均诊断与治疗患者数为（5.7±1.9）例/年。（2）年龄与性别分布情况：6 159例患者确诊年龄为64（56，71）岁；其中男性2 247例（36.483%），确诊年龄为64（58，71）岁；女性3 912例（63.517%），确诊年龄为63（55，71）岁。性别比例为女性：男性=1.74∶1。3 886例（63.095%）患者确诊年龄为56~75岁。不同性别患者确诊年龄比较，差异有统计学意义（Z=-3.99，P<0.001）。（3）诊断情况：6 159例患者中，初步诊断为胆囊癌2 503例（40.640%），初步诊断非胆囊癌3 656例（59.360%）。未手术患者2 110例（34.259%），其中初步诊断为胆囊癌200例（9.479%），初步诊断为非胆囊癌1 910例（90.521%）。手术患者4 049例（65.741%），其中初步诊断为胆囊癌2 303例（56.878%），初步诊断为非胆囊癌1 746例（43.122%）［术中诊断为胆囊癌774例（19.116%）、术后诊断为胆囊癌972例（24.006%）］。6 159例患者中，初步诊断前行超声、CT、磁共振成像（MRI）检查分别为2 521例（40.932%）、2 335例（37.912%）、1 114例（18.087%），行血清癌胚抗原（CEA）、CA19-9、CA125检测分别为3 259例（52.914%）、3 172例（51.502%）、4 016例（65.205%）。同一例患者可行多种检查。单因素分析结果显示：来源医院地区（东部地区、西部地区），年龄（≥72岁），收治医院胆囊癌患者流量，初步诊断前超声检查，初步诊断前CT检查，初步诊断前MRI检查，初步诊断前CEA检测，初步诊断前血清CA19-9检测，初步诊断前血清CA125检测均是影响胆囊癌患者初步诊断为胆囊癌的相关因素（优势比=1.45、1.98，0.69，0.68，2.43，0.41，1.63，0.41，0.39，0.42，95%可信区间为1.21~1.74、1.64~2.40，0.59~0.80，0.60~0.78，2.19~2.70，0.37~0.45，1.43~1.86，0.37~0.45，0.35~0.43，0.38~0.47，P<0.05）。多因素分析结果显示：来源医院地区（东部地区、西部地区），性别，年龄（≥72岁），收治医院胆囊癌患者流量，初步诊断前超声检查，初步诊断前CT检查，初步诊断前血清CA19-9检测是影响胆囊癌患者初步诊断为胆囊癌的独立影响因素（优势比=1.36、1.42，0.89，0.67，1.85，1.56，1.57，0.39，95%可信区间为1.13~1.64、1.16~1.73，0.79~0.99，0.57~0.78，1.60~2.14，1.38~1.77，1.38~1.79，0.35~0.43，P<0.05）。（4）外科治疗与预后情况：4 049例手术治疗患者中，2 447例（60.435%）分期资料和随访资料完整，0期、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲa期、Ⅲb期、Ⅳa期、Ⅳb期分别为85例（3.474%）、201例（8.214%）、71例（2.902%）、890例（36.371%）、382例（15.611%）、33例（1.348%）、785例（32.080%）。2 447例患者中位随访时间为55.75个月（95%可信区间为52.78~58.35），术后总体中位生存时间为23.46个月（95%可信区间为21.23~25.71）。0期、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲa期、Ⅲb期、Ⅳa期、Ⅳb期患者总体生存情况比较，差异有统计学意义（χ²=512.47，P<0.001）。4 049例手术治疗患者中，可切除性肿瘤2 988例（73.796%），不可切除性肿瘤177例（4.371%），可切除性无法评估884例（21.833%）。2 988例可切除性肿瘤患者中，根治性切除2 036例（68.139%），非根治性切除504例（16.867%），手术根治性无法评估448例（14.994%）。2 447例分期和随访资料完整的手术治疗患者中，不可切除性肿瘤53例（2.166%），可切除性肿瘤非根治性切除300例（12.260%），可切除性肿瘤根治性切除1 441例（58.888%），无法评估653例（26.686%）。733例未手术患者随访资料完整。未手术、不可切除性肿瘤手术治疗、可切除性肿瘤非根治性切除、可切除性肿瘤根治性切除患者总体生存情况比较，差异有统计学意义（χ²=121.04，P<0.001）。（5）综合治疗与预后情况：6 159例患者中，541例（8.784%）行术后辅助化疗和晚期化疗，76例（1.234%）行放疗。1 170例进展期（Ⅲa期及以上）行根治性切除手术患者中，联合术后辅助化疗126例（10.769%），未联合术后辅助化疗1 044例（89.231%），两者总体生存情况比较，差异无统计学意义（χ²=0.23，P=0.629）。658例Ⅲa期行根治性切除手术患者中，联合术后辅助化疗66例（10.030%），未联合术后辅助化疗592例（89.970%），两者总体生存情况比较，差异无统计学意义（χ²=0.05，P=0.817）。512例≥Ⅲb期行根治性切除手术患者中，联合术后辅助化疗60例（11.719%），未联合术后辅助化疗452例（88.281%），两者总体生存情况比较，差异无统计学意义（χ²=1.50，P=0.220）。结论我国胆囊癌患者女性多于男性，超过半数确诊年龄为56~75岁。初步诊断前行超声和CT检查、血清CA19-9检测是初步诊断胆囊癌的独立影响因素，基于术前可切除性评估可改进治疗决策、改善患者预后。我国胆囊癌辅助化疗尚不规范且比例较低。

简介：摘要目的探讨四跨膜蛋白CO-029和整合素αv在肝内胆管细胞癌中的表达与临床意义。方法组织芯片（TMA）检测254例肝内胆管癌病理标本中CO-029和αv的表达，并分析两者与肿瘤的临床病理特征及复发转移预后的关系。Spearman法分析两者表达相关性。免疫共沉淀Western-blot检测两者是否共存形成复合物。结果组织芯片检测显示CO-029阳性表达率51.6％ （131/254），αv阳性表达率61.4％（156/254）。CO-029与αv表达与肿瘤包膜、肿瘤大小、肿瘤数目（包括肝内播散）、TNM分期密切相关（P<0.05）。按复发时间（TTR）分组，术后早期复发组（TTR <1年） CO-029、αv的表达均明显高于未复发组（TTR≥1年）。CO-029高表达者术后更易复发（HR=2.01，95% CI=1.45～2.79；P<0.001），且术后生存期短（HR=2.03，95% CI=1.46～2.81；P<0.001）。αv高表达者术后复发时间短（HR=1.85，95% CI=1.38～2.47；P<0.001），术后生存期短（HR=1.95，95% CI=1.40～2.71；P<0.001）。免疫共沉淀Western blot证实αv与CO-029形成复合物。CO-029与αv在肝内胆管癌中表达正相关（r=0.401，P<0.01）。结论CO-029与αv差异表达与肝内胆管癌的复发转移及预后密切相关，且CO-029可能偶联αv形成复合物促进肝内胆管癌侵袭转移。

简介：摘要目的探讨四跨膜蛋白CO-029表达与胆管癌上皮-间质转变(EMT)及肿瘤转移的关系和作用机理。方法利用已构建的vshRNA-CO-029 (LV/GFP/CO-029)慢病毒质粒转染并筛选沉默CO-029基因表达的稳转胆管癌细胞株HCCC-9810-vshRNA-CO-029作为沉默组，以模拟质粒转染的HCCC-9810细胞作为模拟组，以未转染细胞作为对照组。分别以细胞划痕、Transwell和裸鼠体内种植实验检测三组细胞的迁移和侵袭转移能力变化。应用免疫共沉淀和肿瘤坏死因子(TNF)-α刺激实验检测CO-029对EMT相关基因表达的影响。结果沉默组细胞划痕愈合率低于模拟组细胞[(27.11±4.58)%比(92.84±6.24)%]，沉默组细胞穿过Matrigel胶的数量为(57.15±6.10)个，低于模拟组(108.20±9.21)个及对照组(112.00±10.45)个，差异均具有统计学意义(均P<0.01)。裸鼠肝脏移植沉默组细胞的肝脏瘤体积为(2.17±0.54)cm3，而移植模拟组细胞的肝脏瘤体积为(0.74±0.15)cm3，差异有统计学意义(P<0.05)。模拟组肺转移的发生率和肺转移瘤灶数目分别为100%(6/6)、(214.17 ± 35.64)个，沉默组分别为16.7% (1/6)、(41.56±14.15)个，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。免疫共沉淀显示CO-029可与TNF-αR1形成复合物，TNF-α可诱导模拟组细胞的E-钙黏蛋白表达下调，波形蛋白和N-钙黏蛋白表达上调，而沉默组细胞中则无明显变化。结论CO-029表达与胆管癌侵袭转移能力正相关，并可能与TNF-α协同诱导胆管癌细胞发生EMT，是胆管癌复发转移及预后干预的潜在靶点和分子靶向治疗指标。

简介：摘要目的探讨环指蛋白187(RNF187)表达与肝癌侵袭转移和上皮间变的关系。方法2019年4月至2019年10月，利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测高转移潜能肝癌细胞株(MHCC97-H)和低转移潜能的肝癌细胞株(PLC/PRF/5、HepG2，中国科学院上海生物所)中RNF187的表达。通过慢病毒转染技术沉默RNF187后，RT-qPCR和Western blot法分别检测RNF187 mRNA及蛋白的表达水平及上皮-间充质转化(EMT)分子标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、黏结合蛋白多糖-1(Syndecan-1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形纤维蛋白(Vimentin)的表达情况，噻唑蓝(MTT)法和Transwell法分别检测MHCC97-H细胞增殖和侵袭能力的影响。计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用t检验。结果高转移潜能组MHCC97-H的RNF187的mRNA表达(0.082±0.006)明显高于低转移潜能组PLC/PRF/5(0.014±0.003)、HepG2(0.017±0.002，t＝41.755、36.248，P均<0.05)，MHCC97-H的RNF187蛋白表达(2.8±0.3)明显高于PLC/PRF/5(1.8±0.2)、HepG2(1.7±0.2，t＝11.030、11.667，P均<0.05)。MHCC97-H-Mock和MHCC97-H-短发卡RNA(shRNA)-RNF187的EMT分子标志物的表达分别为，上皮标志物E-cadherin(0.81±0.08，0.31±0.06)、Syndecan-1(0.70±0.08，0.22±0.07)；间皮标志物N-cadherin(0.28±0.04，0.73±0.09)和Vimentin(0.26±0.03，0.68±0.08)。两组细胞株EMT各分子标志物的表达比较差异有统计学意义(t＝22.312、24.634、19.424、17.854，P均<0.05)，提示MHCC97-H-shRNA-RNF187细胞株EMT过程显著下调。MTT法示，72 h后，MHCC97-H-shRNA-RNF187的增殖能力(2.2±0.4)明显低于MHCC97-H-Mock(4.5±0.6，t＝2.428，P<0.05)。Transwell小室法示，MHCC97-H-shRNA-RNF187组细胞穿过微孔滤膜的细胞数量[(178±67)个]明显少于MHCC97-H-Mock组[(482±73)个，t＝14.563，P<0.05]。结论RNF187表达可诱导EMT并参与肝癌细胞的侵袭与转移过程。